Анализ резус плода по крови матери опарина

Обнаружение гена RHD плода в крови беременной женщины с отрицательным резус-фактором применяют с целью прогнозирования риска развития резус-конфликта и гемолитической болезни плода и новорожденного. 

Резус (Rh) – одна из важнейших систем эритроцитарных антигенов (наряду с системой АВ0), клинически значимая при оценке возможности возникновения резус-конфликта и риска развития гемолитической болезни плода и новорожденного.  

В системе резус различают пять антигенов. Наиболее иммуногенным является антиген D, аминокислотная последовательность которого кодируется геном RHD. Присутствие антигена D на поверхности эритроцитов определяет положительный резус-фактор (Rh+). Доля резус-положительных лиц, носителей антигена D, в популяции составляет около 86%, а резус-отрицательных лиц (Rh-), не имеющих антигена D – около 14%.  

Течение беременности резус-положительным плодом у резус-отрицательных женщин* часто осложняется развитием гемолитической болезни плода, связанной с трансплацентарным переносом эритроцитов плода в кровоток матери. 98% случаев гемолитической болезни новорожденных связаны с D-резус-антигеном. Попадая в кровь резус-отрицательной матери, он вызывает образование специфических антител, которые проникают через плаценту и разрушают эритроциты плода. Это влечет за собой развитие гемолитической болезни плода и новорожденного. При раннем проявлении резус-конфликт может послужить причиной самопроизвольного прерывания беременности или преждевременных родов. Сенсибилизация матери к D-антигену и риск развития резус-конфликта возрастают с каждой последующей беременностью резус-положительным плодом независимо от того, прервалась ли беременность или завершилась родоразрешением.

В настоящее время при выявлении резус-конфликта назначают следующий комплекс исследований:

• измерение уровня специфичных антител матери к D-антигену плода;  
• получение плодного материала при хорион- и плацентобиопсии в ходе амнио- и кордоцентеза, что относится к инвазивным методам; 
• допплерометрическое исследование скорости кровотока в аорте и средней мозговой артерии плода.

Риск самопроизвольного прерывания беременности при применении инвазивных методов исследования составляет 2-3%, а отсутствие антител не гарантирует, что плод резус-отрицательный, т. к. даже при положительном резусе у плода антитела у матери могут не вырабатываться по причине целостности плаценты в момент обследования или слабого иммунного ответа. Ситуация осложняется тем, что резус-конфликт может возникнуть на любом сроке беременности. Кроме того, возможна сенсибилизация матери. Выявление ДНК плода (фетальной фракции, свободно циркулирующей ДНК, фетДНК) в крови матери обладает рядом преимуществ:

1. относится к неинвазивным для плода процедурам, не несет угрозы течению беременности, не вызывает осложнений; 
2. исследование фетДНК возможно, начиная со срока 10 акушерских недель беременности; 
3. точность результата 96 – 100%** 
4. позволяет оценить целесообразность назначения терапии иммуноглобулином при отсутствии в крови беременной женщины анти-резусных антител на сроке 20 недель.

Аналитические показатели метода

Определяемые участки ДНК: 7-й и 10-й экзоны гена RHD. Диагностическая чувствительность: 92-100%. Диагностическая специфичность: 90-100%. Чувствительность метода составляет 150 копий геномной ДНК (суммарной ДНК матери и плода), что соответствует 400 копиям гена RHD плода в 1,0 мл исследуемого образца плазмы.

По крови таких пациенток определить резус-фактор плода методом ПЦР невозможно. Чаще всего отрицательный резус-фактор обусловлен полным отсутствием гена RHD. В таких случаях применяют серологический метод вместе с ПЦР. Резус-фактор определяется как отрицательный при совпадении отрицательных результатов тестов.

* У беременных женщин, имеющих резус-положительную принадлежность, проблем совместимости по резус-фактору с плодом не возникает. 

** Величина обусловлена состоянием плаценты, особенностью течения беременности и возрастает с увеличением срока беременности.

Литература

1. Costa J.M., Giovangrandi Y., Ernault P., Lohmann L., Nataf V., El Halali N., Gautier E. Fetal RHD genotyping in maternal serum during the first trimester of pregnancy. British journal of haematology. 2002;119:255-260. 
2. Finning K.M., Martin P.G., Soothill P.W., Avent N.D. Prediction of fetal D status from maternal plasma: introduction of a new noninvasive fetal RHD genotyping service. Transfusion. 2002;42:1079-1085. 
3. Freeman K., Osipenko L., Clay D., Hyde J., Szczepura A. A Review of Evidence on Non-invasive Prenatal Diagnosis (NIPD): Tests for Fetal RHD Genotype. Workpackage 6, SAFE Network of Excellence Warwick Medical School, UK. 2006. 
4. Wagner F.F., Frohmajer A., Flegel W.A. RHD positive haplotypes in D negative Europeans. BioMed Central genetics. 2001;15:10. 
5. Минеева П.В. Группы крови человека. Основы иммуногематологии. – СПб. 2004:188.  
6. Инструкция по применению набора реагентов для выявления гена RHD плода в крови матери методом ПЦР в режиме реального времени Резус-фактор плода ООО «ДНК-технология». Регистрационное удостоверение № ФСР 2017/5310.

Ведение беременности у пациенток с отрицательным резус фактором

Около 15% женщин являются обладательницами крови с отрицательным резус-фактором, большинство из них планируют рождение детей с резус-положительным мужчиной. Так ли опасна и драматична эта ситуация? Как проводится наблюдение беременности в данной ситуации?

Центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова обладает обширным опытом в оказании помощи резус-отрицательным женщинам в реализации репродуктивного потенциала. Наши специалисты досконально владеют методиками предупреждения возможных рисков, а также компетентной помощи пациенткам, для которых резус-конфликт становится неожиданностью. К сожалению, такие случаи — не редкость, особенно при незапланированных беременностях, а также при недостаточном внимании обоих будущих родителей к своему собственному здоровью и подготовке к рождению ребенка.

РЕЗУС-КОНФЛИКТ: ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ

Сенсибилизация резус-отрицательной женщины резус-положительными эритроцитами эмбриона происходит при поступлении плодовой крови матери, как при вынашивании, так и сразу после родоразрешения. Поступление фетальной ДНК происходит, начиная с I триместра, однако возможность сенсибилизации реально появляется не ранее 28 недель, при благоприятном течении беременности, в отсутствие травм и медицинских манипуляций. Резус-иммунизация в период вынашивания — появление у будущей матери резус-антител в ответ на проникновение в кровь фетальных эритроцитарных резус-антигенов.

Первичная иммунная ответная реакция при попадании D-антигена в женский организм проявляется через определенный период времени — от 6 недель до 12 месяцев. Именно поэтому многие впервые зачавшие резус-отрицательные женщины, как правило, благополучно вынашивают беременность. При повторном попадании резус-антигенов в сенсибилизированный материнский организм осуществляется быстрая и массивная продукция IgG, что приводит к гемолитической анемии. Билирубин, образующийся при распаде эритроцитов плода, вызывает желтуху. Также возникает патология печени и комплекс заболеваний, называемый эритробластозом — гемолитической болезнью плода. Это состояние требует лечения плода внутриутробно, либо родоразрешения и лечебной помощи новорожденному, если срок беременности и возможности неонатальной службы позволяют подобное лечение провести. В Центре есть все условия для помощи новорожденным в данном случае.

РЕЗУС-КОНФЛИКТ: ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ РАЗВИТИЯ

Около 1–1,5% резус-отрицательных женщин в течение первого вынашивания сенсибилизируются, в крови появляются резус-антитела, после родоразрешения этот процент увеличивается до 10%. Данная частота ощутимо снижается при применении анти-Rh0(D) иммуноглобулина, поэтому введение иммуноглобулина проводят всем резус-отрицательным женщинам, зачавшим от резус-положительного мужчины в сроках от 28 до 32 недели, в отсутствие резус-антител, что позволяет минимизировать риск иммунизации на 80%.

КРОМЕ ТОГО, ПРОФИЛАКТИКА РЕЗУС-СЕНСИБИЛИЗАЦИИ ПРОВОДИТСЯ:

• в ходе проведения инвазивных процедур с целью пренатальной диагностики — хориоцентеза, амниоцентеза;
• при зашивании шейки матки;
• после кровотечений в период беременности;
• при закрытой травме живота в период беременности;
• при неудачах беременности в первом триместре: аборт, выкидыш, внематочная, неразвивающаяся беременность.

После введения антирезус-иммуноглобулина определение титра резус-антител не выполняется.

ВЕДЕНИЕ БЕРЕМЕННОСТИ У ПАЦИЕНТОК С ОТРИЦАТЕЛЬНЫМ РЕЗУС-ФАКТОРОМ: СТАНДАРТЫ БЕЗОПАСНОСТИ

Если оба родителя являются обладателями резус-отрицательной крови, потребность в последующем динамическом определении уровней антител отпадает. Если пациентка обладает резус-отрицательной кровью, а папа малыша — резус-положителен, следующим шагом должен стать динамический контроль титра антител — ежемесячно. Данные о предыдущих титрах антител необходимы, чтобы решить вопрос, была ли иммунизация до настоящего момента, или она получила развитие в течение текущей беременности.

Полный диагностический план включает тщательный сбор и анализ анамнеза, определение группы, резус-фактора крови супругов, резус-антител, оценку риска резус-иммунизации, исходя из анамнеза: факторов, имеющих связь с предыдущими беременностями: внематочная беременность; прерывание беременности (самопроизвольное/медицинское); инвазивная диагностика в предыдущих беременностях; кровотечения в предыдущих беременностях; особенности ведения родов;

проведение профилактики резус-иммунизации в предыдущих беременностях или послеродовом периоде (препарат, дозы); а также факторов, не имеющих связи с беременностью: гемотрансфузии без учета резус-фактора; использования единых игл с наркоманами.

ВЕДЕНИЕ НЕИММУНИЗИРОВАННЫХ БЕРЕМЕННЫХ

Ежемесячная диагностика титра антител в обязательном порядке. При выявлении в любой этап беременности резус-анти-D-антител женщину необходимо наблюдать как пациентку с резус-иммунизацией. В отсутствие изоиммунизации следует ввести анти-Rh0(D)-иммуноглобулин с 28 по 32 неделю вынашивания. Если в 28 недель было проведено профилактическое введение анти-D-иммуноглобулина, выявление антител в крови будущей матери не несет клинического значения.

ВАЖНО: каждой женщине следует знать свою группу и резус-фактор крови, а также данные партнера при планировании продолжения рода. Те, у кого резус-отрицательная кровь, должны осознавать важность профилактического применения в первые 72 часа после родоразрешения, выкидышей, оперативных прерываний беременности, внематочной беременности от резус-положительного партнера антирезус-иммуноглобулина. Несмотря на положительный эффект профилактического введения препарата, в случае, когда женщина резус-отрицательна, а партнер — резус-положителен, искусственное прерывание беременности является нежелательным ввиду риска иммунизации женщины.

В ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России Вы получаете уникальную возможность получить БЕСПЛАТНО оперативное стационарное лечение по квотам на высоко-технологическую медицинскую помощь (ВМП по ОМС).

источник

4902. Определение резус-фактора плода по крови матери

Номенклатура МЗРФ (Приказ №804н): B03.032.006 «Исследование для пренатальной диагностики определение резус-фактора плода по крови матери»

Биоматериал: венозная кровь на сроке с 10 недель беременности

Срок выполнения (в лаборатории): 6 р.д. *

Описание

При беременности несовместимость резус-отрицательной крови матери и резус-положительной крови плода может приводить к резус-конфликту. Как следствие развивается гемолитическая болезнь плода, которая может закончиться внутриутробной гибелью плода. Беременные, чья кровь резус-отрицательна подвержены риску резус-конфликта: материнская иммунная система атакует эритроциты плода, воспринимая их как чужеродные. Поэтому женщины вынуждены постоянно сдавать анализы для выявления антирезусных антител в крови. Гемолитическая болезнь плода сопровождается анемией, нарушением функционирования внутренних органов, повреждением мозга будущего ребенка.

Но избавиться от волнений по поводу здоровья малыша возможно. Уже с 10-й недели, можно узнать резус-фактор плода по крови матери и, если требуется, подготовиться к профилактике резус-конфликта.

Исследование основано на определении резус-фактора плода по фетальной ДНК, циркулирующей в крови матери. Чтобы определить резус-фактор плода, обнаруживаются 3 экзона гена RHD в ДНК плода. Их наличие свидетельствует о положительном резус-факторе, отсутствие — об отрицательном. Проводится с 10-ти недель беременности. Не проводится при многоплодной беременности. Безопасен для матери и плода.

Показания к назначению

• определение резус-фактора плода у женщин с резус-отрицательным фактором;
• профилактика резус-конфликта;
• наличие у женщины антирезусных антител после предыдущей беременности;
• ранняя оценка риска развития гемолитической болезни плода, необходимая для своевременной диагностики и лечения.

Подготовка к исследованию

Специальной подготовки не требуется. Кровь сдается с 10 недель беременности (к исследованию приложить копию протокола УЗИ).

Интерпретация результатов/Информация для специалистов

Исследование основано на определении резус-фактора плода по фетальной ДНК, циркулирующей в крови матери. Чтобы определить резус-фактор плода, обнаруживаются 3 экзона гена RHD в ДНК плода. Их наличие свидетельствует о положительном резус-факторе, отсутствие — об отрицательном резус-факторе.

Кровь берут из периферической вены. Допустимо взятие крови после приема пищи.

Если пациентка использует гепарин, то взятие крови должно быть проведено перед очередной инъекцией, когда концентрация гепарина после предыдущей инъекции является минимальной;

Кровь берется в срок не менее 10 недель беременности (по УЗИ).

Где сдать анализ?

Адреса медицинских центров, в которых можно заказать исследование, уточняйте по телефону 8-800-100-363-0
Все медицинские центры СИТИЛАБ в г. Белгород >>

* На сайте указан максимально возможный срок выполнения исследования. Он отражает время выполнения исследования в лаборатории и не включает время на доставку биоматериала до лаборатории.
Приведенная информация носит справочный характер и не является публичной офертой. Для получения актуальной информации обратитесь в медицинский центр Исполнителя или call-центр.

источник

Определение резус-фактора крови плода по анализу его матери: описание метода и цены

Резус-фактор плода – это параметр, который играет жизненно важную роль в успешном протекании беременности. Если он не совпадает с материнским, возникает резус-конфликт, несущий угрозу для здоровья ребенка. Раннее выявление проблемы позволяет врачам сохранить беременность и довести ее до благополучных родов.

Для чего нужно определять резус фактор плода?

Вот как получается резус-конфликт матери и ребенка:

• проблема возникает, если малыш унаследовал от отца положительный резус-фактор, а у матери он отрицательный;
• эритроциты плода, обладающие положительным резус-фактором, попадают через плаценту в кровь женщины;
• иммунные клетки женщины воспринимают их враждебно и начинают выработку антител;
• запускается обратная реакция, антитела проникают в кровь плода и убивают его эритроциты.

Образовавшийся резус-конфликт может привести к гибели плода в самом начале беременности или рождению малыша с водянкой, анемией, желтухой или отеком. Для предупреждения печальных последствий на 8-10-й неделе беременности проводится анализ на RhD. При одинаковых показателях у женщины и ребенка никакого конфликта не возникает, но ребенок становится носителем отрицательного антигена.

При первой беременности, как показывают многочисленные наблюдения, при резус-положительном статусе плода выработка антител в крови женщины происходит в минимальном количестве. Опасность настигает женщину при второй беременности: у ребенка повышается риск развития гемолитической болезни.

Суть методики

Исследование методом ПЦР (полимеразной цепной реакции) – это важнейшее открытие молекулярной биологии. Благодаря этому анализу, у репродуктологов появился абсолютно безопасный способ определения резус-фактора плода. Совсем недавно врачам приходилось добывать материал для изучения, проникая в утробу матери. Инвазивная процедура создавала определенные риски для здоровья ребенка. Новая методика позволяет вычислить резус-фактор малыша по крови его мамы.

Как проходит определение резус-фактора плода? Женщина приходит в лабораторию, где у нее берут кровь из вены. Полученный материал пропускают через специальный аппарат, который выделяет из крови матери фрагменты ДНК ребенка. Затем выделенную клетку исследуют на присутствие в ней гена RhD: если он обнаруживается, значит, у плода положительный резус. Соответственно, отсутствие гена говорит об отрицательной резус-принадлежности ребенка.

Медицинским сообществом такая методика признана лучшей на сегодняшний день, и по технике определения, и по срокам получения результата. Кровеносная система эмбриона начинает формироваться с 6-8 недели беременности, с этого же срока врачи могут определить его резус. Такая ранняя диагностика позволяет вовремя узнать о резус-конфликте и принять необходимые лечебные меры по снижению риска серьезных последствий.

Что делают при резус-конфликте?

Какая задача стоит перед врачами при обнаружении резус-конфликта? Прежде всего, это постоянный контроль за ходом беременности. С помощью УЗИ отслеживается состояние плода. Признаками иммунологической несовместимости считаются:

• избыток жидкости в теле плода;
• при исследовании ультразвуком отчетливо просматривается отечность ребенка;
• неестественное расположение плода в утробе (поза лотоса).

Для предупреждения возможных осложнений матери назначают внутривенные инъекции антирезус-иммуноглобулина. Препарат стимулирует вывод из крови матери антител, способных уничтожать эритроциты ребенка. Для повышения шансов на успешные беременность и роды рекомендуется проводить вакцинацию препаратом перед планированием беременности. Показанием к его введению служит наличие резус-конфликта между мужчиной и женщиной.

В сложной ситуации может быть принято решение о переливании крови плоду. Рискованная процедура, но она значительно повышает шансы ребенка на выживание. Наблюдая за развитием плода, гинеколог делает выводы о прерывании или продолжении беременности. Если состояние ребенка удовлетворительно, роды проводятся в срок и естественным путем. Часто ситуация требует преждевременного родоразрешения через кесарево сечение, чтобы сохранить здоровье плода.

Сухие цифры статистики говорят о том, что 15% забеременевших женщин находятся в группе риска по резус-конфликту. Появление новой методики, позволяющей на ранних сроках определять иммунобиологическую несовместимость матери и плода, подарило многим семейным парам надежду благополучно выносить и родить ребенка. Совершенствуются методы исправления ситуации, разрабатываются эффективные лекарства, улучшаются способы исследований. Возможно, скоро резус-конфликт перестанет восприниматься как угрожающий фактор, а станет лишь небольшим препятствием.