Анализ определение резус принадлежности плода по крови матери
Метод определения
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) в режиме реального времени.
Исследуемый материал
Плазма крови (ЭДТА)
Обнаружение гена RHD плода в крови беременной женщины с отрицательным резус-фактором применяют с целью прогнозирования риска развития резус-конфликта и гемолитической болезни плода и новорожденного.
Резус (Rh) – одна из важнейших систем эритроцитарных антигенов (наряду с системой АВ0), клинически значимая при оценке возможности возникновения резус-конфликта и риска развития гемолитической болезни плода и новорожденного.
В системе резус различают пять антигенов. Наиболее иммуногенным является антиген D, аминокислотная последовательность которого кодируется геном RHD. Присутствие антигена D на поверхности эритроцитов определяет положительный резус-фактор (Rh+). Доля резус-положительных лиц, носителей антигена D, в популяции составляет около 86%, а резус-отрицательных лиц (Rh-), не имеющих антигена D – около 14%.
Течение беременности резус-положительным плодом у резус-отрицательных женщин* часто осложняется развитием гемолитической болезни плода, связанной с трансплацентарным переносом эритроцитов плода в кровоток матери. 98% случаев гемолитической болезни новорожденных связаны с D-резус-антигеном. Попадая в кровь резус-отрицательной матери, он вызывает образование специфических антител, которые проникают через плаценту и разрушают эритроциты плода. Это влечет за собой развитие гемолитической болезни плода и новорожденного. При раннем проявлении резус-конфликт может послужить причиной самопроизвольного прерывания беременности или преждевременных родов. Сенсибилизация матери к D-антигену и риск развития резус-конфликта возрастают с каждой последующей беременностью резус-положительным плодом независимо от того, прервалась ли беременность или завершилась родоразрешением.
В настоящее время при выявлении резус-конфликта назначают следующий комплекс исследований:
- измерение уровня специфичных антител матери к D-антигену плода;
- получение плодного материала при хорион- и плацентобиопсии в ходе амнио- и кордоцентеза, что относится к инвазивным методам;
- допплерометрическое исследование скорости кровотока в аорте и средней мозговой артерии плода.
Риск самопроизвольного прерывания беременности при применении инвазивных методов исследования составляет 2-3%, а отсутствие антител не гарантирует, что плод резус-отрицательный, т. к. даже при положительном резусе у плода антитела у матери могут не вырабатываться по причине целостности плаценты в момент обследования или слабого иммунного ответа. Ситуация осложняется тем, что резус-конфликт может возникнуть на любом сроке беременности. Кроме того, возможна сенсибилизация матери. Выявление ДНК плода (фетальной фракции, свободно циркулирующей ДНК, фетДНК) в крови матери обладает рядом преимуществ:
- относится к неинвазивным для плода процедурам, не несет угрозы течению беременности, не вызывает осложнений;
- исследование фетДНК возможно, начиная со срока 10 акушерских недель беременности;
- точность результата 96 – 100%**
- позволяет оценить целесообразность назначения терапии иммуноглобулином при отсутствии в крови беременной женщины анти-резусных антител на сроке 20 недель.
Аналитические показатели метода
Определяемые участки ДНК: 7-й и 10-й экзоны гена RHD. Диагностическая чувствительность: 92-100%. Диагностическая специфичность: 90-100%. Чувствительность метода составляет 150 копий геномной ДНК (суммарной ДНК матери и плода), что соответствует 400 копиям гена RHD плода в 1,0 мл исследуемого образца плазмы.
Ограничения метода
У 1% серологически резус-отрицательных женщин определяется наличие гена RHD. Это происходит в следующих случаях:
- Ген RHD присутствует и генотипически резус-фактор будет положительным, но в результате мутаций D-антиген не синтезируется и серологическим методом определяется как отрицательный;
- Ген RHD присутствует полностью или частично, и генотипически резус-фактор будет положительным; из-за мутаций синтезируется измененный D-антиген. Серологически это определяется или как слабый резус-фактор, или как нестабильно положительный.
По крови таких пациенток определить резус-фактор плода методом ПЦР невозможно. Чаще всего отрицательный резус-фактор обусловлен полным отсутствием гена RHD. В таких случаях применяют серологический метод вместе с ПЦР. Резус-фактор определяется как отрицательный при совпадении отрицательных результатов тестов.
* У беременных женщин, имеющих резус-положительную принадлежность, проблем совместимости по резус-фактору с плодом не возникает.
** Величина обусловлена состоянием плаценты, особенностью течения беременности и возрастает с увеличением срока беременности.
Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.
Противопоказания к проведению исследования:
- Трансплантации органов и тканей в анамнезе у пациентки
Литература
- Costa J.M., Giovangrandi Y., Ernault P., Lohmann L., Nataf V., El Halali N., Gautier E. Fetal RHD genotyping in maternal serum during the first trimester of pregnancy. British journal of haematology. 2002;119:255-260.
- Finning K.M., Martin P.G., Soothill P.W., Avent N.D. Prediction of fetal D status from maternal plasma: introduction of a new noninvasive fetal RHD genotyping service. Transfusion. 2002;42:1079-1085.
- Freeman K., Osipenko L., Clay D., Hyde J., Szczepura A. A Review of Evidence on Non-invasive Prenatal Diagnosis (NIPD): Tests for Fetal RHD Genotype. Workpackage 6, SAFE Network of Excellence Warwick Medical School, UK. 2006.
- Wagner F.F., Frohmajer A., Flegel W.A. RHD positive haplotypes in D negative Europeans. BioMed Central genetics. 2001;15:10.
- Минеева П.В. Группы крови человека. Основы иммуногематологии. – СПб. 2004:188.
- Инструкция по применению набора реагентов для выявления гена RHD плода в крови матери методом ПЦР в режиме реального времени Резус-фактор плода ООО «ДНК-технология». Регистрационное удостоверение № ФСР 2017/5310.
Источник
Доброго времени суток)
Начну с того, в каких случаях данное обследование имеет место быть:
Если резус матери отрицательный, а отца- положительный. Но ни в коем случае не наоборот)) Эритроциты, содержащие положительный резус-фактор плода (от отца),проникают через плаценту в кровь матери и вырабатывают в ее организме антитела, которые, попадая в кровь ребёнка, разрушают его эритроциты.
Нужно ли это обследование проходить обязательно??
Нет!! Вовсе нет!!!
Но оно заметно упрощает жизнь. Если вы с мужем имеете резус конфликт, то ваш врач гинеколог вам об этом обязательно сообщит, и каждый месяц будет давать направление на титр антител. Впринципе, ничего сложного — придти и раз в месяц сдать кровь из вены.. А если посмотреть на ситуацию с другой стороны? — У вас сильнейший токсикоз, вам плохо, вам хочется спать..Женская консультация уже надоела и ходить туда совсем не хочется.. А приходится рано утром встать, и пойти.. отсидеть очередь на кровь, и снова и снова прокалывать свои вены, ради этого анализа((
Исследование на определение резус — фактора плода возможно провести уже с 10 недель беременности с момента зачатия (или с 12 недель акушерского срока).
Тогда зачем это нужно?
А тут всё так просто — один раз сдал кровь, и если у малыша ваш резус фактор, то больше вам кровь сдавать не придётся..
Из минусов, я бы отметила:
Данное обследование сейчас ещё не так популярно и лишь набирает обороты.. И пока не появилось во всех городах.. В Самаре например лишь в 2-3 местах можно его пройти. И лишь в одном — бесплатно! А во многих городах вообще ещё не слышали о данной процедуре. Да и сама я о ней узнала лишь в третью свою беременность. 3 года назад я о подобном не слышала )
П.с
Там же, и тем же способом могут с точностью 99% определить пол малыша с 11 недели беременности.
Стоимость процедуры в 2015 году составляла: От 2000 рублей до 7000 (В зависимости от города)
Моя история:
Я проходила данную процедуру в 15 акушерских недель беременности. Записалась заранее, по направлению. Потом приехала к определённому времени, меня пригласили в кабинет, посадили в уютное мягкое кресло, и взяли пробирку крови (нужное количество мл, чтобы выявить в ней кровь малыша)
Нужно сказать что сотрудники оказались очень вежливы, обращались очень аккуратно, предложили посидеть минут 5 после взятия крови, и проводили до выхода..
А центре был бесплатный wi-fi. Через несколько дней мне позвонили и предложили подъехать за результатом. К сожалению в моём результате было написано что 99% резус фактор плода положительный..
А мой то был отрицательным..
Так что мне продолжили брать кровь в ЖК и контролировать состояние плода в течении всей беременности.
А после родов ввели иммуноглобулин!
Никаких проблем со здоровьем ни у меня ни у малыша не было. Хоть и резус конфликт негативно влиял на мою беременность и заставил меня «попотеть» с токсикозом,который длился ВСЮ беременность и с угрозами прерывания((((
Зато я точно знала причину этого и не пичкала себя зря всякими лекарствами)
Итог:
Если есть возможность, я считаю определённо делать эту процедуру стоит!!!
Проводитсяэтот анализ с целью предупреждения развития резус-конфликта, что может привести к печальным последствиям, в частности — самопроизвольному аборту. Если этого не происходит, то за беременной наблюдают весь период вынашивания. Главной процедурой при этом является анализ крови, в котором определяют, не присутствует ли антитела у матери, на резус ее маленького, еще не родившегося ребенка.
Источник
Определение резус-фактора (Rh) плода по крови матери является важной процедурой, которая укажет на течение беременности и возможные риски для плода. В случае несовпадения данного параметра у будущего малыша и родителя может возникнуть реакция отторжения со стороны материнского организма, что вызовет самопроизвольный аборт или замирание беременности.
Зачем определять
Резус-конфликт ставит под угрозу развитие и вынашивание плода, причем особенно резко негативные признаки проявляются в тех случаях, когда мать имеет отрицательный резус-фактор, а ребенок — положительный. В 80% случаев без приема средств, подавляющих работу иммунной системы, беременность прервется естественным путем. На оставшиеся 20% приходятся ситуации, когда ребенок рождался с патологиями, часто несовместимыми с дальнейшей жизнедеятельностью.
Анализ на определение резус-фактора плода является основным, поэтому его назначают сразу после постановки женщины на клинический учет.
Как проходит исследование
По современным методикам анализ резус-фактора плода производится неинвазивным путем на 12 неделе беременности. Исследование основано на ПЦР — полимеразной цепной реакции, которая позволяет сделать выводы об интересующем параметре плода с помощью взятия биоматериала из тела матери. В качестве последнего выступает венозная кровь, содержащая частицы ДНК ребенка, что никоим образом не вредит протеканию беременности.
Как часто Вы сдаете анализ крови?
Такой вариант исследования позволяет определить резус плода и вероятную группу крови, а также выявить эффективность назначения иммуноглобулинов при отсутствии выработки ответных антител, призванных уничтожить инородный объект в организме.
Результаты предоставляются через 3-5 дней после сдачи материала, и на их основе врач составляет дальнейший прогноз.
В редких случаях никаких препаратов не назначается и контроль осуществляется только посредством УЗИ.
Резус-конфликта
Статус резус-фактора определяется наличием белка, покрывающего поверхность эритроцита. Его отсутствие означает отрицательный Rh и наоборот. Несовместимость данных параметров приводит к развитию гемолитической болезни у плода, связанной с транспортом эритроцитов ребенка в кровь матери через плаценту. Это вызывает образование антител со стороны иммунной системы, которые способствуют распаду эритроцитов плода, попадая в его кровеносную систему, т. к. определяют эмбрион инородным объектом.
Диагностика состояния будущего ребенка проводится посредством УЗИ. Внешняя симптоматика развития отклонений заключается в следующем:
- скопление жидкости в мягких тканях плода и, как следствие, видимый на ультразвуковом исследовании отек;
- изменение стандартной позы зародыша.
Из-за отечности живота ноги плода оказываются разведены в стороны, а толщина пуповины незначительно превышает норму, из-за чего также происходит небольшое изменение положения. При обнаружении подобных признаков следует пройти анализ на определение резус-фактора ребенка.
Если иммунологическая несовместимость подтверждается, беременная женщина должна проходить периодические обследования на протяжении всего срока.
Для снижения вероятности развития осложнений пациентке назначают внутривенное введение иммуноглобулина с целью ликвидации антител, провоцирующих гемолитическую болезнь у зародыша.
Данное отклонение развивается только в том случае, когда материнская кровь является резус-положительной, т. к. при отрицательном значении ситуации конфликта возникнуть не может. Однако, если родители обладают различными резус-факторами, женщине следует пройти обследование на 12 неделе беременности, чтобы исключить вероятность патологии.
Кроме того, принято считать, что при первом зачатии антитела, провоцирующие гемолитическую болезнь, не вырабатываются, поэтому проблем с вынашиванием возникать не должно, но при каждой последующей беременности риск будет увеличиваться.
Источник
Для неинвазивного определения резус-фактора плода используется периферическая венозная кровь беременной женщины, из которой выделяется циркулирующая в ней плодная ДНК, которая анализируется на наличие последовательности ДНК экзонов 7 и 10 гена RHD, кодирующего выработку антигена D. Исследование проводится методом ПЦР в режиме реального времени.
Как известно, концентрация ДНК плода в кровотоке беременной становится достаточной для проведения анализа, начиная с 10 недель беременности (по УЗИ). Важно отметить, что данный способ исследования ДНК плода является неинвазивным, не несет угрозы течению беременности, т.е. абсолютно безопасен как для женщины, так и для плода. Точность используемой методики составляет 96-100% и зависит от количества плодной ДНК в кровотоке беременной.
С биологической точки зрения именно RHD определяет резус-принадлежность крови человека. Обычно для резус-отрицательных людей характерно полное отсутствие гена RHD. В таких случаях результаты генотипирования совпадают с результатами обычного серологического способа определения резус-фактора крови. Однако примерно у 1% людей с серологически резус-отрицательной кровью ген RHD может присутствовать, что, как правило, связано с наличием мутации в RHD, и приводит к отсутствию или неполной экспрессии (работы) гена. В таких случаях результаты генотипирования показывают резус-положительный вариант крови, а серологически выявляется отрицательный либо слабоположительный резус-фактор. Для таких пациенток определить резус-фактор плода невозможно. Однако наблюдение за течением беременности нужно проводить по схеме ведения резус-отрицательных женщин с учетом возможности развития резус-конфликта. В любом случае после родов рекомендуется уточнить резус-фактор ребёнка серологическим методом.
В случае выявления последовательности ДНК гена RHD в крови беременной женщины с резус-отрицательной группой крови делается вывод о положительном резус-факторе плода. В таких ситуациях вероятность развития резус-конфликта и гемолитической болезни реально существует, поэтому женщине и врачам необходимо принимать все меры предосторожности в отношении развития данного грозного осложнения беременности. В целом, положительный результат теста говорит о необходимости строгого динамического контроля за уровнем соответствующих антител в крови беременной и своевременного введения антирезусного иммуноглобулина для предотвращения развития гемолитической болезни плода/новорожденного. Однако вопрос о введении препарата должен решаться только акушером-гинекологом на основании, в том числе, и других методов обследования беременной. При отсутствии антител к Rh-фактору по результатам серологического метода (ИФА) и генетически положительном резус-факторе плода, женщине рекомендуется введедние антирезусного иммуноглобулина на сроке от 28 недель беременности (для профилактики гемолитической болени новорожденного) и не позднее 72 часов после родоразрешения (для профилактики резус-конфликта при следующей беременности).
В случае отсутствия ДНК гена RHD в крови беременной делается вывод о высокой вероятности резус-отрицательной крови плода (однако для подтверждения результата рекомендуется повторить тест на более поздних сроках, но не позднее 27 недель беременности). В такой ситуации вероятность развития резус-конфликта между материнским организмом и плодом практически отсутствует, что говорит об отсутствии необходимости постоянного определения титра анти-D-антител и введения антирезусного иммуноглобулина беременной. А также в случае необходимости проведения инвазивной диагностики плода не увеличивает риски развития гемолитической болезни.
Стоит отметить, что данный анализ актуален только для тех супружеских пар, в которых реально существует угроза развития резус-конфликта при беременности, т.е. женщина обладает резус-отрицательной кровью, а мужчина – резус-положительной. При этом мужчина должен быть гетерозиготен по наличию делеции гена RHD. Только в этом случае у супружеской пары возникает 50%-ная вероятность закладки эмбриона с резус-отрицательной группой крови. Генотип мужчины можно определить, предварительно проведя ему генетический анализ определения генотипа по гену RhD (тест №2008.4).
Купить
Получить консультацию
Источник
Поздравляю с рождением дочки! растите здоровыми на радость всем!)
мне сейчас предстоит тоже сделать тест такой. Скажите, дочка ваша с какием резусов в итоге родилась?
СчастливаяМамаспасибо большое! она родилась с + резусом, результат анализа оказался верным. в роддоме получила еще одну дозу иммуноглобулина. очень рада, что уберегла свою доченьку! всего вам доброго!
спасибо! Завтра иду сдавать этот анализ)
Я весь интернет им проштудировала и все клиники в городе обзванила… у нас не делают его(((Даже в Инвинтро…
Танечка
жаль. этот анализ — хоть какой-то ориентир
Так поэтому и искала… если б муж не настоял на бесплатном, не знаю делала бы или нет за 10тыс(
В-во… так что жду бесплатного, свои права надо отстаивать!(
а резус конфликт он когда может произойти… у меня у подружки отрицательная у нее 28 неделек, врачи особо и не говорят ничего
ОлесяБяка
в любой момент. на этом сроке его контролируют уже не раз в месяц, в раз в 2 недели. если антитела будут обнаружены, вакцину вводить поздно. ее вводят при отсутствии антител, отсутствии противопоказаний по узи и на сроке от 28 до 32 нед, идеально — в 28
ага, спасибо. Ей чет ничего не говорят
А почему врач сказал думать? Эта инъекция чем то опасна?
Анюта
нет, безопасна, она просто для меня платная, т.к. я не прописана в мск, и стОит не копейки.
Ааа, понятно! А то мне это предстоит… Первый ребенок «+», боюсь, чтобы не было проблем со вторым…
Анюта
после родов не кололи? как-то не понятно, где-то в обязательном порядке, где-то «думайте сами», где-то вообще об этом молчат. феномен.
После родов кололи. И у меня даже ничего не спрашивали)
Натальяа разве прописанным в москве бесплатно?
мне тоже сказали платно делать
а мне еще интересно как можно определить кровь плода если взять кровь у матери?
КаТёнА
метод у них называется ПЦР, какая-то цепная реакция. в материнской крови, якобы, находится днк ребенка, ее и исследуют
у меня тоже — у мужа +, дочь взяла его кровь, и как правило с первой беременностью никаких отклонений нет, укол мне делали тока после родов а так каждые два месяца на антитела сдавала ))
просто перед каждым приемом кровь сдавала из вены
Юлия
Слава Богу! обходится в большинстве случаев с первой Б, но раз уж информация получена — надо ее использовать) а то думаться будет…
ЮлияМне тоже сказали уколотьс. Я минус папа плюс. А что есть опасность в уколе именоглабулина?
Юлия
нет опасности, просто не факт, что нужен, может быть небольшая побочка (температура, рвота), проходит максимум через 24ч. и еще, не прописанным в мск — платно
Юлия
У меня муж у гл.врача выпросил, всем обязаны бесплатно давать по место прикрепления к больнице!
интересно… спасибо. я сразу делала укола… не знала про такой анализ, но у меня все равно сын тоже папин+ взял)
я не делала укол этот. даже не предлагали. но все обошлось..
ох… ничего себе…))))) здорово что такое есть теперь)
у меня 4(-)… со второй были антитела и дочь с ГБН
Евгения
А с какой недели антитела появились? На какой недели роды прошли? Как малышка? Вы извините, просто столько вопросов от незнания и страх охватывает!(
антитела появились с 17 недель
Роды вызывали в 37 недель
Удочки сразу ГБН была… на 11 сутки сделали полное заменное переливание крови и перевели в больницу… кровь была плохая
потом выписали… но в 1,5 мес упал гемоглобин до 60-опять переливали кровь в больнице
до 6 мес следили за гемолглобином и кровью в целом
в 6 мес все диагнозы сняли
у нас все отлично
Евгения
О, Боже мой… вот за что нам такое?((((А после первых родов укол ставили?
Ну и хорошо что все хорошо! Здоровья Вам и малышке
есть девочка… теперь уже она подружка мне уже..
у нее сынок как моя Тася… один в один(но у нее первая Б была) и тоже антитела с 17 недель… у них правда 4 переливания крови
сейчас она уже второго сынишку родила… первого кесарили в 39 нед, второго(антитела с самого начала Б) кесарили в 34 нед
Евгения
Так если после первых родов ставят инъекцию, то риск же снова снижается, не?
У вас тоже обязательно будет хорошо!!! Спасибо)
как ее поставят если антитела с 17 нед?
у подружки в первую Б появились антитела в 17 нед
мне в первую да… не ставили
риск снижается на 3 года…
Евгения
Спасибо… надеюсь успею уколоться в 28 недель!
а вы уверены, что результат верен на 100 %?
МаМуШкА
чем больше срок, тем выше достоверность. проводят его начиная с 21 недели. конечно, бывают в лабораториях ошибки!
ну хороший %, тогда стоит сдавать, чтобы ГБН не было у ребенка!
МаМуШкАДа, вообще круто! только к сожалению еще не везде делают(вчера все клиники обзвонила(((
я сама акушерка, и об этом только сегодня узнала, у меня тоже 2 -, мне предлагали сделать иммуноглобулин, но я не стала его делать. Может уже и у нас сейчас есть такое!
МаМуШкАА я вот пожалуй соглашусь… а почему не стали? какие резусы и ребят? как проходила 2-я беременность?
у первого отрицательный, а у второго +, беременность и роды прекрасно прошли! потому что первый с отриц. фактором родился и антител по идее быть не должно было, хотя у нас были такие женщины у которых и в первую беременность был высокий титр, но я регулярно сдавала антител не было ни разу, Слава Богу!
МаМуШкА
Ну это здорово, а 3-го планируете?)))
МаМуШкА
Ну это дело такое
Просто вот не знаю, я наверно после каждых родов буду себе инъекцию требовать!
а у вас это бесплатно? у нас один укол около 7 тыс стоит и самим надо преобретать!
а вы много хотите рожать?))) я пока первого не родила хотела 4-5 деток, а как они появились, реально на жизнь взглянула!!!
МаМуШкА
Ну 2-х точно, а там как карты лягут
Вообще вакцина стоит 6 и 8 тыс., по законы положено бесплатно, но они не горят желанием давать ее направо и налево! муж пошел вчера к гл.врачу и та, немного приофигев, сказала что закажет!))
интересно. хотя мне это и не нужно, но все равно интересно 🙂
Источник
У меня тоже была дилемма — колоть в 28 недель или нет. Я 2-, муж 2+. Благодаря этому посту узнала про центр на Опарина. Съездила туда, предположительный резус плода — отрицательный как и у меня. Решила отказаться от укола. Отрицательный резус подтвердился после родов, у дочки 2-. Спасибо автору! А вообще большинство врачей говорят колоть, если сомневаешься, так как польза от укола гораздо больше, чем возможная побочка.
Еленаспасибо за положительный отзыв! здоровья вам и доченьке!