Анализ на группу крови у ребенка в утробе
Метод определения
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) в режиме реального времени.
Исследуемый материал
Плазма крови (ЭДТА)
Обнаружение гена RHD плода в крови беременной женщины с отрицательным резус-фактором применяют с целью прогнозирования риска развития резус-конфликта и гемолитической болезни плода и новорожденного.
Резус (Rh) – одна из важнейших систем эритроцитарных антигенов (наряду с системой АВ0), клинически значимая при оценке возможности возникновения резус-конфликта и риска развития гемолитической болезни плода и новорожденного.
В системе резус различают пять антигенов. Наиболее иммуногенным является антиген D, аминокислотная последовательность которого кодируется геном RHD. Присутствие антигена D на поверхности эритроцитов определяет положительный резус-фактор (Rh+). Доля резус-положительных лиц, носителей антигена D, в популяции составляет около 86%, а резус-отрицательных лиц (Rh-), не имеющих антигена D – около 14%.
Течение беременности резус-положительным плодом у резус-отрицательных женщин* часто осложняется развитием гемолитической болезни плода, связанной с трансплацентарным переносом эритроцитов плода в кровоток матери. 98% случаев гемолитической болезни новорожденных связаны с D-резус-антигеном. Попадая в кровь резус-отрицательной матери, он вызывает образование специфических антител, которые проникают через плаценту и разрушают эритроциты плода. Это влечет за собой развитие гемолитической болезни плода и новорожденного. При раннем проявлении резус-конфликт может послужить причиной самопроизвольного прерывания беременности или преждевременных родов. Сенсибилизация матери к D-антигену и риск развития резус-конфликта возрастают с каждой последующей беременностью резус-положительным плодом независимо от того, прервалась ли беременность или завершилась родоразрешением.
В настоящее время при выявлении резус-конфликта назначают следующий комплекс исследований:
- измерение уровня специфичных антител матери к D-антигену плода;
- получение плодного материала при хорион- и плацентобиопсии в ходе амнио- и кордоцентеза, что относится к инвазивным методам;
- допплерометрическое исследование скорости кровотока в аорте и средней мозговой артерии плода.
Риск самопроизвольного прерывания беременности при применении инвазивных методов исследования составляет 2-3%, а отсутствие антител не гарантирует, что плод резус-отрицательный, т. к. даже при положительном резусе у плода антитела у матери могут не вырабатываться по причине целостности плаценты в момент обследования или слабого иммунного ответа. Ситуация осложняется тем, что резус-конфликт может возникнуть на любом сроке беременности. Кроме того, возможна сенсибилизация матери. Выявление ДНК плода (фетальной фракции, свободно циркулирующей ДНК, фетДНК) в крови матери обладает рядом преимуществ:
- относится к неинвазивным для плода процедурам, не несет угрозы течению беременности, не вызывает осложнений;
- исследование фетДНК возможно, начиная со срока 10 акушерских недель беременности;
- точность результата 96 – 100%**
- позволяет оценить целесообразность назначения терапии иммуноглобулином при отсутствии в крови беременной женщины анти-резусных антител на сроке 20 недель.
Аналитические показатели метода
Определяемые участки ДНК: 7-й и 10-й экзоны гена RHD. Диагностическая чувствительность: 92-100%. Диагностическая специфичность: 90-100%. Чувствительность метода составляет 150 копий геномной ДНК (суммарной ДНК матери и плода), что соответствует 400 копиям гена RHD плода в 1,0 мл исследуемого образца плазмы.
Ограничения метода
У 1% серологически резус-отрицательных женщин определяется наличие гена RHD. Это происходит в следующих случаях:
- Ген RHD присутствует и генотипически резус-фактор будет положительным, но в результате мутаций D-антиген не синтезируется и серологическим методом определяется как отрицательный;
- Ген RHD присутствует полностью или частично, и генотипически резус-фактор будет положительным; из-за мутаций синтезируется измененный D-антиген. Серологически это определяется или как слабый резус-фактор, или как нестабильно положительный.
По крови таких пациенток определить резус-фактор плода методом ПЦР невозможно. Чаще всего отрицательный резус-фактор обусловлен полным отсутствием гена RHD. В таких случаях применяют серологический метод вместе с ПЦР. Резус-фактор определяется как отрицательный при совпадении отрицательных результатов тестов.
* У беременных женщин, имеющих резус-положительную принадлежность, проблем совместимости по резус-фактору с плодом не возникает.
** Величина обусловлена состоянием плаценты, особенностью течения беременности и возрастает с увеличением срока беременности.
Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.
Противопоказания к проведению исследования:
- Трансплантации органов и тканей в анамнезе у пациентки
Литература
- Costa J.M., Giovangrandi Y., Ernault P., Lohmann L., Nataf V., El Halali N., Gautier E. Fetal RHD genotyping in maternal serum during the first trimester of pregnancy. British journal of haematology. 2002;119:255-260.
- Finning K.M., Martin P.G., Soothill P.W., Avent N.D. Prediction of fetal D status from maternal plasma: introduction of a new noninvasive fetal RHD genotyping service. Transfusion. 2002;42:1079-1085.
- Freeman K., Osipenko L., Clay D., Hyde J., Szczepura A. A Review of Evidence on Non-invasive Prenatal Diagnosis (NIPD): Tests for Fetal RHD Genotype. Workpackage 6, SAFE Network of Excellence Warwick Medical School, UK. 2006.
- Wagner F.F., Frohmajer A., Flegel W.A. RHD positive haplotypes in D negative Europeans. BioMed Central genetics. 2001;15:10.
- Минеева П.В. Группы крови человека. Основы иммуногематологии. – СПб. 2004:188.
- Инструкция по применению набора реагентов для выявления гена RHD плода в крови матери методом ПЦР в режиме реального времени Резус-фактор плода ООО «ДНК-технология». Регистрационное удостоверение № ФСР 2017/5310.
Источник
Определение резус-фактора (Rh) плода по крови матери является важной процедурой, которая укажет на течение беременности и возможные риски для плода. В случае несовпадения данного параметра у будущего малыша и родителя может возникнуть реакция отторжения со стороны материнского организма, что вызовет самопроизвольный аборт или замирание беременности.
Зачем определять
Резус-конфликт ставит под угрозу развитие и вынашивание плода, причем особенно резко негативные признаки проявляются в тех случаях, когда мать имеет отрицательный резус-фактор, а ребенок — положительный. В 80% случаев без приема средств, подавляющих работу иммунной системы, беременность прервется естественным путем. На оставшиеся 20% приходятся ситуации, когда ребенок рождался с патологиями, часто несовместимыми с дальнейшей жизнедеятельностью.
Анализ на определение резус-фактора плода является основным, поэтому его назначают сразу после постановки женщины на клинический учет.
Как проходит исследование
По современным методикам анализ резус-фактора плода производится неинвазивным путем на 12 неделе беременности. Исследование основано на ПЦР — полимеразной цепной реакции, которая позволяет сделать выводы об интересующем параметре плода с помощью взятия биоматериала из тела матери. В качестве последнего выступает венозная кровь, содержащая частицы ДНК ребенка, что никоим образом не вредит протеканию беременности.
Такой вариант исследования позволяет определить резус плода и вероятную группу крови, а также выявить эффективность назначения иммуноглобулинов при отсутствии выработки ответных антител, призванных уничтожить инородный объект в организме.
Результаты предоставляются через 3-5 дней после сдачи материала, и на их основе врач составляет дальнейший прогноз.
В редких случаях никаких препаратов не назначается и контроль осуществляется только посредством УЗИ.
Резус-конфликта
Статус резус-фактора определяется наличием белка, покрывающего поверхность эритроцита. Его отсутствие означает отрицательный Rh и наоборот. Несовместимость данных параметров приводит к развитию гемолитической болезни у плода, связанной с транспортом эритроцитов ребенка в кровь матери через плаценту. Это вызывает образование антител со стороны иммунной системы, которые способствуют распаду эритроцитов плода, попадая в его кровеносную систему, т. к. определяют эмбрион инородным объектом.
Диагностика состояния будущего ребенка проводится посредством УЗИ. Внешняя симптоматика развития отклонений заключается в следующем:
- скопление жидкости в мягких тканях плода и, как следствие, видимый на ультразвуковом исследовании отек;
- изменение стандартной позы зародыша.
Из-за отечности живота ноги плода оказываются разведены в стороны, а толщина пуповины незначительно превышает норму, из-за чего также происходит небольшое изменение положения. При обнаружении подобных признаков следует пройти анализ на определение резус-фактора ребенка.
Если иммунологическая несовместимость подтверждается, беременная женщина должна проходить периодические обследования на протяжении всего срока.
Для снижения вероятности развития осложнений пациентке назначают внутривенное введение иммуноглобулина с целью ликвидации антител, провоцирующих гемолитическую болезнь у зародыша.
Данное отклонение развивается только в том случае, когда материнская кровь является резус-положительной, т. к. при отрицательном значении ситуации конфликта возникнуть не может. Однако, если родители обладают различными резус-факторами, женщине следует пройти обследование на 12 неделе беременности, чтобы исключить вероятность патологии.
Кроме того, принято считать, что при первом зачатии антитела, провоцирующие гемолитическую болезнь, не вырабатываются, поэтому проблем с вынашиванием возникать не должно, но при каждой последующей беременности риск будет увеличиваться.
Источник
Вынашивание и рождение ребенка – очень волнующий и серьезный процесс. На протяжении всей беременности специалисты-медики (перинатологи, гинекологи) следят за целым перечнем показателей и оценивают факторы, характеризующие состояние здоровья матери и развивающегося малыша. Одним из таких показателей является резус-фактор плода.
Что такое резус-фактор
Под этим понятием скрывается особый белок, располагающийся на поверхности эритроцитов. У большинства людей (около 85%) этот белок есть, поэтому их называют резус-положительными. У остальных 15% населения планеты этого белка нет. Такие люди считаются резус-отрицательными. Если выражаться другими словами, то резус-фактор – это одна из многих иммунологических характеристик крови, которая не оказывает влияния на состояние здоровья человека.
Когда это важно?
Существуют ситуации, когда знать о своей резус-принадлежности надо обязательно. Во-первых, это важно при возникновении ситуации, когда требуется переливание крови. Во-вторых, подготовка к оперативному вмешательству также предполагает осведомленность в этом вопросе. В-третьих, важно знать резус-принадлежность плода при планировании беременности и рождении ребенка. В этом случае наиболее опасна ситуация, когда будущая мама резус-отрицательна, а развивающийся младенец имеет положительную кровь. Здесь уже имеет смысл говорить о резус-конфликте.
Суть «конфликтной ситуации»
Представим себе, что женщина имеет Rh-отрицательную кровь, а будущий отец резус-положителен. Вероятность развития конфликта в этом случае оценивается как 50 на 50. Это достаточно много, поэтому ситуация должна находиться под жестким контролем специалистов.
При таком варианте у будущих родителей ребенок может унаследовать положительный резус-фактор отца. Через плацентарный барьер эритроциты крови ребенка могут попасть в кровь матери и будут восприняты ее организмом как чужие, что даст толчок ее иммунной системе к выработке антител для уничтожения эритроцитов крови малыша. В тяжелых случаях возникает угроза жизни ребенка, поэтому провести анализ на резус-фактор плода – значит дать шанс малышу родиться здоровым.
Симптоматика
Для чего нужно знать резус-фактор своего будущего ребенка? Проведя все необходимые исследования, будущая мамочка либо полностью исключит возможность развития конфликта, успокоится и будет вынашивать здорового ребенка, либо узнает о существующей проблеме и предпримет все необходимые меры для того, чтобы родить здорового малыша.
Однако для организма взрослой женщины все процессы, связанные с такого рода конфликтом, не несут никакой угрозы или опасности и не имеют никаких симптомов. Тогда как для ребенка эта ситуация может иметь катастрофические последствия.
Грозные признаки наличия проблем с резус-принадлежностью дает возможность увидеть УЗИ плода. Здесь будут видны и скопления жидкости в тех местах, где ее не должно быть, и отечность, и поза ребеночка, которую нельзя назвать естественной (поза Будды).
Скопление больших объемов жидкости приводит к увеличению животика у ребенка, вынуждает его развести ножки в стороны. При проведении УЗИ с высокой долей вероятности будет виден сдвоенный контур детской головки, что свидетельствует о наличии отечности. Не соответствует норме размер плаценты и диаметр вены в пуповине.
Все эти признаки указывают на развитие конфликта между организмами матери и малыша и должны стать побудительным мотивов для того, чтобы выяснить резус-принадлежность развивающегося в утробе ребенка.
Определения резус-фактора ребенка по материнской крови
Современное медицинское оборудование дает возможность выяснить резус-фактор плода уже в первом триместре беременности, начиная с 10 недели.
Суть метода в следующем. У будущей матери производится забор венозной крови. Из нее выделяется ДНК развивающегося в утробе ребенка. Далее эта ДНК исследуется на предмет наличия в ней гена RhD (резус-фактора). Если в процессе изысканий фрагменты резус-фактора обнаруживаются, можно считать что будущий человек резус-положителен. Если таких фрагментов в ДНК ребенка нет – значит, малыш имеет отрицательную резус-принадлежность.
Своевременно произведенное определение резуса плода дает возможность вовремя начать профилактические мероприятия, отодвигающие возникновение резус-конфликтов на более поздние сроки и, как следствие, сводящие к минимуму нанесение вреда здоровью ребенка.
Эта методика считается неинвазивной и не несет никакой угрозы жизни и здоровью матери и ребенка. Однако до недавнего времени узнать резус-фактор плода можно было только с помощью проведения исследования ворсин плаценты или взятой внутриутробно крови у малыша. Эти виды методик (амниоцентез, кордоцентез) считают инвазивными и только строгие медицинские показания могут стать причиной их назначения.
Амниоцентез
Если возникает необходимость выяснить состояние ребенка как можно более точно, встает вопрос о том, как определить резус-фактор плода, специалисты могут предложить амниоцентез, который представляет собой прокол плодного пузыря с целью взятия околоплодных вод для проведения исследований о содержании в них билирубина. Этот показатель с высокой точностью характеризует состояние малыша.
Однако женщине стоит знать, что процедура эта является достаточно опасной. Всегда существует вероятность занесения инфекции в околоплодные воды. Также возможно подтекание жидкости за пределы плодного пузыря, появление кровотечения. Определение резус-фактора плода методом амниоцентеза может спровоцировать отслойку плаценты раньше времени.
Процедура может быть назначена в тех случаях, когда антитела к резус-фактору уже присутствуют в крови матери и их содержание (титр) составляет 1:16 или у этой женщины уже есть ребенок с гемолитической болезнью новорожденных (ГБН) в тяжелой форме.
Кордоцентез
Как узнать резус-фактор плода с помощью этой методики? Суть в том, что в пуповине делается прокол, оттуда производится взятие крови для проведения исследований. С применением этого метода уровень билирубина устанавливается точнее, чем при амниоцентезе. Переливание крови малышу также производится с применением этого способа.
Кордоцентез также является достаточно опасным и может вызвать все осложнения, характерные для амниоцентеза. Кроме того, возможно образование гематомы на пуповине, что в дальнейшем может нарушить нормальный обмен веществ между организмами матери и младенца.
Определение резус-фактора плода с применение кордоцентеза обычно назначается при содержании антител в пропорции 1:32, наличии детей, больных ГБН или умерших от последствий резус-конфликта.
Возможно ли лечение резус-конфликтов у беременных
Лечение, конечно же, возможно. Однако самым действенным методом, дающим наиболее эффективный результат, является переливание крови ребенку. Процедура среди специалистов считается очень рискованной, но значительно улучшает состояние будущего человека, и с высокой степенью вероятности дает возможность избежать преждевременного родоразрешения.
Ранее были популярными другие методики лечения, которые тем не менее не давали явного терапевтического эффекта и считались мало- или совсем неэффективными. К таким способам можно отнести пересадку кожи от мужа будущей матери, плазмоферез и т.п.
В любом случае, если резус-фактор плода и его матери дает возможность поставить диагноз резус-конфликта, самым действенным вариантом благополучного завершения беременности и рождения здорового малыша будет нахождение под контролем специалистов-медиков и выполнение всех их указаний и назначений.
Резус-конфликт и родоразрешение
Когда вопрос о том, как определить резус-фактор плода, решен, и наличие конфликта в организме матери установлено, большое значение при протекании беременности имеет временной фактор. Специалисты говорят, что чем раньше это произошло, тем с большими проблемами и осложнениями будет протекать беременность.
Причина этого явления в том, что эффект от резус-конфликта с течением времени накапливается. Поэтому в основной массе случаев такую беременность специалисты рекомендуют заканчивать плановыми преждевременными родами.
Медики всеми доступными способами следят за состоянием ребенка и на основании полученной информации принимают решение о том, необходимо ли сохранение беременности или малышу безопаснее родиться чуть раньше времени. Естественные роды в таких ситуациях возможны только в том случае, если ребенок находится в удовлетворительном состоянии и никаких других осложнений нет. В процессе развивающейся родовой деятельности врачи ведут мониторинг жизненно важных характеристик состояния малыша и если появляются какие-либо факторы, осложняющие роды, принимается решение о проведении операции кесарева сечения. Для данной конкретной проблемы такой вариант родоразрешения считается наиболее щадящим.
Источник
