Анализ на группу крови пример

Определение группы крови и резус-фактора делятся на два способа:

первичное определение группы крови и резус фактора (цоликлоны Анти-А, Анти-B и Анти-D)
вторичная диагностика группы крови и резус-фактора (стандартные сыворотки и перекрестный способ, определение фенотипа, т.е. антигенов C, c, E, e, Cw, K, k)

Экспресс-диагностика (первичное определение группы крови и Rh-фактора) не учитывает антигены Келл, не говоря уже про другие системы верификации. Поэтому цоликлоны применяют только для первичного определения группы крови и резус-фактора и при экстренных показаниях трансфузии компонентов крови.

Подробнее о самой редкой группе крови в Мире можно найти здесь.

Определение группы крови и резус-фактора цоликлонами анти-А, анти-В и Анти-D по системе AB0 и системе Резус

Определение группы крови и резус-фактора цоликлонами анти-А, анти-В и Анти-D супер является наиболее современным и относительно простым методом. Для определения группы крови используются цоликлоны, т.е. моноклональные антитела.

Что требуется для определения группы крови и резус-фактора?

цоликлоны – цоликлон анти-А;

– цоликлон анти-В;

– цоликлон анти-D;

– раствор натрия хлорида 0,9 %; специальный планшет; стерильные палочки.

Алгоритм и порядок определения группы крови

Анализ на группу крови пример Нанести цоликлоны анти-А, анти-В на специальный планшет по одной большой капле (0,1 мл), под соответствующими надписями.

Рядом с ними капнуть исследуемую кровь (0,01–0,03 мл) по одной маленькой капле. Перемешать их и наблюдать за наступлением или отсутствием реакции агглютинации в течение 3 мин. При сомнительном результате добавить 1 каплю 0,9% физиологического раствора.

Расшифровка результатов определения группы крови

если реакция агглютинации наступила с анти-А цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе А (II);
если реакция агглютинации наступила с анти-B цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе B (III);
если реакция агглютинации не наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе 0 (I);
если реакция агглютинации наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе AB (IV), как показано на рисунке.

AB (IV)

Определение резус-фактора цоликлоном Анти-D

На планшете смешивают большую каплю (0,1 мл) анти-D цоликлона и маленькую каплю (0,01 мл) исследуемой крови пациента. За наступлением реакции агглютинации или её отсутствием наблюдают в течение 3 мин.

если реакция агглютинации наступила с цоликлоном анти-D , то исследуемая кровь относится к резус-положительной (Rh+)
если реакция агглютинации не наступила с цоликлоном анти-D, то исследуемая кровь относится к резус-отрицательной (Rh—)

AB (IV)Rh-

Другими словами, при смешивании цоликлона Анти-D с резус-положительными эритроцитами наступает реакция агглютинации, а если кровь резус-отрицательная — агглютинация отсутствует (как показано на рисунке — четвертая группа крови резус-отрицательная).

Определение групп крови стандартными сыворотками

Определение групп крови стандартными изогемагглютинирующими сыворотками — поиск и обнаружение в крови антигенов А и В с помощью реакции агглютинации. Для достижения цели используют:

Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки групп крови О (I) — бесцветная, А (II) — синяя, В (III) — красная, АВ (IV) — жёлтая.
Белые тарелки, маркированные группами крови: 0 (I), А (II), В (III), AB (IV).
NaCl 0,9%
Стеклянные палочки

Методика определение группы крови стандартными сыворотками

Подписать тарелку (Ф.И.О. пациента);
Нанести обозначения двух серий стандартных сывороток I, II и III групп крови в объёме 0,1 мл, образующие два ряда по три капли слева направо: 0 (I), А (II), В (III);
Забрать кровь из вены. Шесть капель исследуемой крови пациента перенести стеклянной палочкой на пластину в шесть точек рядом с каплей стандартной сыворотки и перемешать.

Агглютинация начнется через 30 сек. В те капли, где произошла агглютинация, добавить по одной капле NaCl 0,9% и оценить результат.

Оценка результатов определение группы крови стандартными сыворотками

Положительная реакция агглютинации может быть пескообразной или лепестковой. При отрицательной реакции капля остаётся равномерно окрашенной в красный цвет. Результаты реакций в каплях с сыворотками одной и той же группы (двух серий) должны совпадать. Принадлежность исследуемой крови к соответствующей группе определяют по наличию или отсутствию агглютинации при реакции с соответствующими сыворотками после наблюдения в течение 5 мин. При этом следует отметить, что если сыворотки всех трёх групп дали положительную реакцию, это указывает на то, что испытуемая кровь содержит оба агглютиногена (А и В) и принадлежит к группе AB (IV). Однако в таких случаях для исключения неспецифической реакции агглютинации необходимо провести дополнительное контрольное исследование испытуемой крови со стандартной изогемагглютинирующей сывороткой группы AB (IV), не содержащей агглютининов. Лишь отсутствие агглютинации в этой капле при наличии агглютинации в каплях, содержащих стандартные сыворотки групп 0 (I), А (II) и В (III), позволяет считать реакцию специфической и отнести исследуемую кровь к группе АВ (IV).

Определение группы крови перекрёстным способом

Определение группы крови перекрестным способом — обнаружение наличия или отсутствия в исследуемой крови антигенов А и В с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток, а также антител α и β с помощью стандартных эритроцитов. Реакцию со стандартными сыворотками проводят описанным выше способом.

Методика определения группы крови перекрестным способом

Реакция со стандартными эритроцитами

Для реакции со стандартными эритроцитами необходимы стандартные эритроциты трёх групп крови: 0 (I), А (II), B (III).

Методика проведения реакции со стандартными эритроцитами

Кровь для исследования берут из вены в пробирку, центрифугируют или оставляют на 30 мин для получения сыворотки.
На маркированную тарелку наносят три больших капли (0,1 мл) сыворотки крови из пробирки, а рядом с ними по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов групп.
Соответствующие капли смешивают стеклянными палочками, планшет покачивают, наблюдают в течение 5 мин, в капли с агглютинацией добавляют NaCl 0,9% и оценивают результат.

Оценка результатов проведения реакции со стандартными эритроцитами

Оценивают результаты, полученные со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и стандартными эритроцитами. Особенность результатов реакции со стандартными эритроцитами — эритроциты группы 0 (I) считают контрольными. Результат перекрёстного способа считают достоверным, если при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и со стандартными эритроцитами ответы о группе исследуемой крови совпадают. Если этого не происходит, обе реакции следует переделать.

Источник

Метод определения
Фильтрация проб крови сквозь гель, импрегнированный моноклональными реагентами — агглютинация + гель-фильтрация (карточки, перекрёстный метод).

При необходимости (обнаружение А2-подтипа) проводится дополнительное тестирование с использованием специфических реактивов.

Исследуемый материал
Цельная кровь (с ЭДТА)

Определяет принадлежность к определённой группе крови по системе АВО.

Группы крови — это генетически наследуемые признаки, не изменяющиеся в течение жизни при естественных условиях. Группа крови представляет собой определённое сочетание поверхностных антигенов эритроцитов (агглютиногенов) системы АВО.

Определение групповой принадлежности широко используется в клинической практике при переливании крови и её компонентов, в гинекологии и акушерстве при планировании и ведении беременности.

Система групп крови AB0 является основной системой, определяющей совместимость и несовместимость переливаемой крови, т. к. составляющие её антигены наиболее иммуногенны. Особенностью системы АВ0 является то, что в плазме у неиммунных людей имеются естественные антитела к отсутствующему на эритроцитах антигену. Систему группы крови АВ0 составляют два групповых эритроцитарных агглютиногена (А и В) и два соответствующих антитела — агглютинины плазмы альфа (анти-А) и бета (анти-В).

Различные сочетания антигенов и антител образуют 4 группы крови:

Группа 0 (I) — на эритроцитах отсутствуют групповые агглютиногены, в плазме присутствуют агглютинины альфа и бета;
Группа А (II) — эритроциты содержат только агглютиноген А, в плазме присутствует агглютинин бета;
Группа В (III) — эритроциты содержат только агглютиноген В, в плазме содержится агглютинин альфа;
Группа АВ (IV) — на эритроцитах присутствуют антигены А и В, плазма агглютининов не содержит.

Определение групп крови проводят путём идентификации специфических антигенов и антител (двойной метод или перекрёстная реакция).

Несовместимость крови наблюдается, если эритроциты одной крови несут агглютиногены (А или В), а в плазме другой крови содержатся соответствующие агглютинины (альфа- или бета), при этом происходит реакция агглютинации. Переливать эритроциты, плазму и особенно цельную кровь от донора к реципиенту нужно строго соблюдая групповую совместимость. Чтобы избежать несовместимости крови донора и реципиента, необходимо лабораторными методами точно определить их группы крови. Лучше всего переливать кровь, эритроциты и плазму той же группы, которая определена у реципиента. В экстренных случаях эритроциты группы 0, но не цельную кровь!, можно переливать реципиентам с другими группами крови; эритроциты группы А можно переливать реципиентам с группой крови А и АВ, а эритроциты от донора группы В — реципиентам группы В и АВ.

Карты совместимости групп крови (агглютинация обозначена знаком «+»)

Кровь донора	Кровь реципиента
Кровь донора	0 (I)	A (II)	B (III)	AB (IV)
0 (I)	—	+	+	+
A (II)	+	—	+	+
B (III)	+	+	—	+
AB (IV)	+	+	+	—

Эритроциты донора	Кровь реципиента
Эритроциты донора	0 (I)	A (II)	B (III)	AB (IV)
0 (I)	—	—	—	—
A (II)	+	—	+	—
B (III)	+	+	—	—
AB (IV)	+	+	+	—

Групповые агглютиногены находятся в строме и оболочке эритроцитов. Антигены системы АВО выявляются не только на эритроцитах, но и на клетках других тканей или даже могут быть растворёнными в слюне и других жидкостях организма. Развиваются они на ранних стадиях внутриутробного развития, у новорожденного уже находятся в существенном количестве. Кровь новорожденных детей имеет возрастные особенности — в плазме могут ещё не присутствовать характерные групповые агглютинины, которые начинают вырабатываться позже (постоянно обнаруживаются после 10 месяцев) и определение группы крови у новорождённых в этом случае проводится только по наличию антигенов системы АВО.

Помимо ситуаций, связанных с необходимостью переливания крови, определение группы крови, резус-фактора, а также наличия аллоиммунных антиэритроцитарных антител должно проводиться при планировании или во время беременности для выявления вероятности иммунологического конфликта матери и ребёнка, который может приводить к гемолитической болезни новорожденных.

Гемолитическая болезнь новорождённых — гемолитическая желтуха новорожденных, обусловленная иммунологическим конфликтом между матерью и плодом из-за несовместимости по эритроцитарным антигенам. Болезнь обусловлена несовместимостью плода и матери по D-резус- или АВО-антигенам, реже имеет место несовместимость по другим резус- (С, Е, с, d, e) или М-, М-, Kell-, Duffy-, Kidd-антигенам. Любой из указанных антигенов (чаще D-резус-антиген), проникая в кровь резус-отрицательной матери, вызывает образование в её организме специфических антител. Последние через плаценту поступают в кровь плода, где разрушают соответствующие антигенсодержащие эритроциты.

Предрасполагают к развитию гемолитической болезни новорожденных нарушение проницаемости плаценты, повторные беременности и переливания крови женщине без учёта резус-фактора и др. При раннем проявлении заболевания иммунологический конфликт может быть причиной преждевременных родов или выкидышей. Существуют разновидности (слабые варианты) антигена А (в большей степени) и реже антигена В. Что касается антигена А, имеются варианты: сильный А1 (более 80%), слабый А2 (менее 20%), и еще более слабые (А3, А4, Ах — редко). Это теоретическое понятие имеет значение для переливания крови и может вызвать несчастные случаи при отнесении донора А2 (II) к группе 0 (I) или донора А2В (IV) — к группе В (III), поскольку слабая форма антигена А иногда обуславливает ошибки при определении группы крови системы АВO. Правильное определение слабых вариантов антигена А может требовать повторных исследований со специфическими реагентами.

Снижение или полное отсутствие естественных агглютининов альфа и бета иногда отмечается при иммунодефицитных состояниях:

новообразования и болезни крови — болезнь Ходжкина, множественная миелома, хроническая лимфатическая лейкемия;
врождённые гипо- и агаммаглобулинемия;
у детей раннего возраста и у пожилых;
иммуносупрессивная терапия;
тяжёлые инфекции.

Трудности при определении группы крови вследствие подавления реакции гемагглютинации возникают также после введения плазмозаменителей, переливания крови, трансплатации, септицемии и пр.

Наследование групп крови. В основе закономерностей наследования групп крови лежат следующие понятия. В локусе гена АВО возможны три варианта (аллеля) — 0, A и B, которые экспрессируются по аутосомно-кодоминантному типу. Это означает, что у лиц, унаследовавших гены А и В, экспрессируются продукты обоих этих генов, что приводит к образованию фенотипа АВ (IV). Фенотип А (II) может быть у человека, унаследовавшего от родителей два гена А или гены А и 0. Соответственно фенотип В (III) — при наследовании двух генов В или В и 0. Фенотип 0 (I) проявляется при наследовании двух генов 0. Таким образом, если оба родителя имеют II группу крови (генотипы AА или А0), кто-то из их детей может иметь первую группу (генотип 00). Если у одного из родителей группа крови A (II) с возможным генотипом АА и А0, а у другого B (III) с возможным генотипом BB или В0 — дети могут иметь группы крови 0 (I), А (II), B (III) или АВ (IV).

Источник

Говоря о группе крови, доктор зачастую подразумевает два показателя: собственно группу крови, и резус-фактор.

Кровь состоит из антигенов, которые располагаются на поверхности красных кровяных телец. Антиген – это особая структура, находящаяся в крови. И если такая структура окажется чужеродной — запустятся защитные реакции организма. В связи с этим, очень важно точно знать группу крови человека и его Rh. Это поможет избежать неприятных последствий после переливания крови, а также даст ориентировки доктору на то, как правильно вести беременность.

Для чего необходимо знать группу крови и резус-фактор – значение исследования

Рассматриваемый вид обследования могут назначать при следующих ситуациях:

Перед процедурой переливания крови с целью определения совместимости. Переливание крови (гемотрансфузия) как лечебный метод и показания к его применению
Период вынашивания ребенка. Это дает возможность доктору наблюдать за течением беременности у женщин, имеющих отрицательный резус-фактор.
Подготовка перед хирургической манипуляцией. При больших потерях крови оперируемому нужно будет влить донорскую кровь. Поэтому важно заранее знать его группу и резус-фактор.
Гемолитическая патология новорожденных. Зачастую встречается, если у мамы отрицательный резус-фактор, а у ребенка положительный. Реже бывает при несовместимости по группе крови.

Видео: Методы определения групп крови

Как подготовиться к анализу на группу крови и резус-фактор?

Перед проведением указанного вида диагностики медики рекомендуют придерживаться следующих правил:

За сутки до анализа следует питаться адекватно: не переедать, пить побольше обычной негазированной воды.
Назначенные перед указанным анализом физиотерапевтические мероприятия, а также инструментальную диагностику лучше провести после тестирования. Либо же сдачу анализа на группу крови и резус-фактор переносят на несколько дней.
Сообщить доктору о приеме тех или иных лекарственных препаратов заранее. Доктор на свое усмотрение может посоветовать приостановить либо продолжать прием медикаментов.
Стараться избегать стрессовых ситуаций и физических нагрузок.
Не курить минимум за час до сдачи крови. То же самое касается алкогольных напитков.
После прихода в лабораторию следует «отдышаться» хотя бы 10 минут.
Обычно кровь сдают до 11 часов дня. За 8-12 часов до этого необходимо воздержаться от приема пищи.

Для точного подтверждения полученных результатов рекомендуется проводить подобную диагностику дважды.

Медицинское учреждение при этом менять не стоит.

Видео: Определение групп крови перекрёстным методом и резус-фактора

Как выполняется анализ на группу крови и резус-фактор – когда будут результаты?

Иммунологические лаборатории являются местом, где осуществляют проверку крови на резус-фактор и группу. Подобные лаборатории действуют при специальных медицинских центрах, а также в некоторых больницах.

При необходимости проведения указанной диагностики, пациенту следует обратиться к своему доктору по месту жительства. Он выдаст направление, с которым, после надлежащей подготовки, человек приходит в манипуляционный кабинет больницы.

В этом случае, результаты будут готовы в течение 2-3 дней, а за сам анализ платить не нужно.

В частных поликлиниках никакого направления на указанное тестирование не требуется: забор крови осуществляется по предварительной записи, либо без нее. О сроках подготовки результатов следует уточнять у лаборанта — но, как правило, за ними можно прийти уже на следующий день.

В наши дни существует также услуга по экспресс-определению группы крови и резуса. Стоит она недешево, а бланк с готовыми результатами можно получить в течение пары часов после сдачи биоматериала.

Сам процесс сдачи крови – быстрый и безболезненный:

Стерильным шприцом из локтевой вены берут необходимое количество крови.
Предварительно накладывается жгут.
У новорожденных кровь берут из вены на голове в родильном доме, и только при необходимости. Родители могут отказаться от подобной процедуры, и пройти ее позже в платной клинике.

В лаборатории, в дальнейшем, осуществляют следующие манипуляции:

Кровь, после ее смешивания с раствором полиглюкина, выливают в мензурку.
В указанную емкость добавляют кровь по каплям.
Центрифугирование содержимого пробирки в специальном устройстве. В ходе данной процедуры компоненты крови, под влиянием агглютининов, выпадают в осадок.
Добавление в емкость с исследуемым материалом физиологического раствора (3-процентного). Если после взбалтывания образуются белые хлопья, диагностируют Rh+. Наличие розовой жидкости в пробирке свидетельствует об отрицательном резус-факторе.

Для определения группы крови требуется 2 порции крови. В одну из них добавляют специальный реагент анти-А, в другую – анти-В.

Расшифровка анализа на группу крови – какие могут быть результаты?

На сегодняшний день, медиками при определении групп крови применяется система АВ0. А и В – специальные липиды, которые именуют агглютиногенами.

В бланке, который получит пациент после сдачи крови могут содержаться следующие записи:

I (0). Это означает, что у человека первая группа крови. Агглютиногены отсутствуют в эритроцитах, но есть в плазме.
II (A). Подобная отметка будет присвоена пациентам со второй группой крови. Лабораторные исследования в подобном случае подтверждают наличие белка А в красных кровяных тельцах. В плазме же выявляют лишь антиген В.
III (В). Указанным способом обозначают третью группу крови. Проверка эритроцитов будет констатировать присутствие в них белка В, в плазме – антитела А.
IV (АВ). Является одной из самых редких на планете групп крови – четвертой. Она свидетельствует о наличии в эритроцитах агглютиногенов А и В. В плазме же указанных белков нет.

Анализ на группу крови и резус-фактор

Расшифровка анализа на резус-фактор крови

Рассматриваемый показатель, по своей сути, является особым белком (антиген D), который может присутствовать, либо отсутствовать, на поверхности эритроцитов.

В первом случае говорят о Rh+ положительном резус-факторе.
Если в бланке исследования пациент найдет отметку Rh-, это будет означать, что в его крови антигена D нет.

Анализ на резус-фактор

Может ли быть ложный результат анализа на группу крови и резус-фактор, что влияет на точность результатов исследования?

Изменить группу либо резус-фактор возможно лишь посредством введения чужеродного гена в ДНК человека. Подобную манипуляцию произвести невозможно, а это означает, что группа крови и резус-фактор, с которыми человек рождается, остаются неизменными на протяжении всей его жизни.

Хотя в медицинской практике крайне редко встречались случаи, когда после пересадки внутреннего органа у реципиента менялась группа крови на ту, что была у донора. Подобные ситуации – скорее, исключение, чем закономерность, поэтому их не берут в счет.

Если у человека при сдаче рассматриваемого анализа резко поменялись показатели, этому может быть лишь одно объяснение — ошибка лаборантов. Подобную диагностику проходят множество людей, и пробирки с образцами биоматериала могут случайно перепутать. Кроме того, подобную ошибку могли допустить еще в роддоме.

Поэтому в любом случае — любые возникшие недоразумения следует устранять повторным анализом крови.

Видео: Меняется ли группа крови?

Источник