Анализ крови рск что это
Что такое серологическое исследование крови?
Объект серологии — антигены и антитела
Серологическое исследование (СИ) основано на способности антигенов и антител связываться друг с другом. СИ позволяет с точностью выявить наличие у пациента определённого вируса либо бактерии, группу крови и резус, реактивность организма к антибиотикам, аутоиммунные заболевания, гормональные нарушения, индивидуальную специфичность белков, определить эффективность терапии.
Система иммунитета борется с проникающими в организм болезнетворными микробами (антигенами) при помощи антител, при этом создавая к каждому из вирусов, паразитов либо бактерий свой определённый тип защиты.
Антиген и антитело подходят друг другу как замочная скважина и ключ, при встрече они непременно связываются. Эта серологическая реакция позволяет выявлять различные виды антител либо антигенов.
Способность иммунитета вырабатывать особые вещества, нейтрализующие вредоносные частицы, была известна учёным давно. Но увидеть реакцию антиген-антитело в лабораторных условиях удалось только в конце XIX века. Было обнаружено, что в результате образования связки, комплексы выпадают в осадок, образуя хлопья либо помутнение. Такие реакции получили названия агглютинации и преципитации. В XX веке серология — наука о свойствах сыворотки, стремительно развивалась, обнаруживались новые методы диагностирования на основе реакций антиген-антитело. На сегодняшний день существует множество способов выявления иммунных комплексов, а СИ являются незаменимым звеном в диагностике, лечении, создании новых медицинских препаратов и вакцин.
Показания к проведению анализа.
Серологические исследования широко применяется в акушерстве
Серологические исследования сопровождают современного человека на протяжении всей жизни. Первые анализы на выявление определённых антител проводятся, когда малыш находится ещё в утробе. Беременная женщина сдаёт кровь на различные СИ для определения возможного резус-конфликта либо инфекций, способных навредить вынашиваемому плоду. Когда ребёнок появляется на свет, его ожидают серологические исследования, позволяющие диагностировать врождённые заболевания. Впоследствии анализы сдаются по следующим причинам:
- вирусные, бактериальные, паразитарные инфекции;
- выявление активности, стадии развития болезни;
- гормональные патологии;
- бесплодие;
- аутоиммунные заболевания;
- нарушение обмена веществ;
- аллергии;
- онкологические заболевания;
- планирование беременности, период вынашивания, патологии беременных;
- выявление ревматоидного фактора;
- определение группы крови и резус-фактора;
- эффективность терапии при различных болезнях;
- эффективность вакцинации;
- предоперационный и постоперационный период при необходимости оценки уровня некоторых антител;
- изучение иммунного состояния организма.
Подготовка к исследованию.
Прием препаратов желательно отменить накануне теста
Так как серологические исследования охватывают широкий спектр анализов, в каждом конкретном случае может понадобиться определённая подготовка, но существуют общие правила сдачи серологического теста:
- За сутки до исследования следует ограничить в рационе жирное и жареное, исключить алкоголь.
- Последний приём пищи должен завершиться за 10 — 12 часов до анализа.
- В день сдачи крови не следует употреблять кофе, чай либо иные напитки. Можно в небольшом количестве пить чистую воду.
- Лекарственные средства перед анализом исключаются. Если приём отменить невозможно, необходимо предоставить врачу полный перечень препаратов, в том числе витаминов, пероральных контрацептивов.
- Все другие исследования либо медицинские манипуляции проводятся после СИ.
- Курение рекомендуется прекратить за 12 часов до взятия образца крови.
- В предыдущий день следует избегать физических и эмоциональных нагрузок, а перед исследованием желательно 15 минут посидеть в полном покое.
- СИ назначаются на утреннее время и сдаются натощак.
Методы проведения серологического исследования.
В серологии может применяться большое число методов
Все методики определения комплексов антиген-антитело (Аг-Ат) основываются на использовании известного Аг либо Ат в поиске неизвестного. Если необходимо обнаружить Аг, необходимы диагностические иммунные сыворотки с содержанием специфических Ат. Если целью СИ является выявление Ат, используются диагностикумы — взвеси, содержащие определённые Аг.
Серологические анализы могут отражать качественный либо количественный результат. При качественном исследовании итог может быть отрицательный или положительный, то есть искомый элемент либо обнаружен, либо нет. Количественный итог выражается в виде числового значения либо знаками «+» (обычно от одного до четырёх).
Непрямая гемагглютинация — один из методов диагностики
Методы серологических исследований:
- Агглютинация. Связывание Ат с Аг с последующим формированием хлопьев либо осадка. Применяются прямые, непрямые, развёрнутые, ориентировочные реакции, позволяющие выявить антитела в сыворотке.
- Гемагглютинация. Используются эритроциты с адсорбированными на них Аг либо Ат, которые склеиваются с соответствующими Ат и Аг. Образуемые комплексы выпадают в виде фестонного осадка.
- Преципитация. Образование комплекса Аг-Ат с последующим осаждением в виде помутнения, именуемого преципитатом.
- Коагглютинация. Выявление Аг при помощи Ат, адсорбированных на белке клеток стафилококка.
- Торможение гемагглютинации. Ат иммунной сыворотки подавляют вирусные Аг, в итоге вирусы теряют способность склеиваться с эритроцитами.
- Непрямая реакция Кумбса. Определяются Ат к поверхностным Аг эритроцитов.
- Кольцепреципитация. Проводится на основе иммунной сыворотки с наслоением растворимого Аг.
- Двойная радиальная иммунодиффузия. Реакция основана на диффундировании компонентов антисыворотки и Аг в лунках агара либо агарозы.
- Реакция связывания комплемента. Связь Аг и Ат сопровождается адсорбцией комплемента, в качестве индикатора используются эритроциты барана и Ат к ним в составе гемолитической сыворотки.
- Нейтрализация. Основана на нейтрализации вирусного агента антителами.
- Реакции, основанные на маркировании Ат и Аг флуоресцентным либо ферментным составом — иммунофлюорисцентный (РИФ) и иммуноферментный (ИФА) методы.
Иммунофлюорисцентный метод.
«Свечение» в темнопольном микроскопе
Данный метод основан на использовании Ат, меченных флуоресцентным веществом. Чаще всего в качестве метки используется флуоресцеинизотиоционат, обладающий зелёным свечением в лучах ультрафиолета. Результат анализа оценивается по степени яркости свечения. Может быть использован ручной метод определения при помощи люминесцентного микроскопа, оптического микроскопа с люминесцентной насадкой, а также автоматический способ с применением микрочипового цитомера, проточного цитомера либо роботизированного флуоресцентного микроскопа.
РИФ проводится прямым и непрямым методом. Прямой способ означает непосредственное связывание сорбированного Аг с меченым Ат. Непрямой метод подразумевает использование немаркированных Ат для связки с Аг, а затем добавление меченых Ат, что позволяет избежать неспецифических реакций.
Иммуноферментный анализ.
Иммуноферментный анализ как метод серологической диагностики
ИФА основан на выявлении комплексов Аг-Ат при помощи маркирования одного из компонентов. В качестве метки используются различные ферменты, которые в результате ферментативной реакции образуют окрашивание. Существуют разнообразные методы ИФА, их можно классифицировать как гомогенные и гетерогенные методы.
Гомогенные означают, что все этапы реакции происходят в растворе.
Гетерогенные методы включают разделение на фазы с использованием твёрдого носителя.
Гомогенно-гетерогенные способы основываются на том, что комплексы Аг-Ат формируются в растворе, а затем для разделения используется твёрдая фаза.
Принцип «сэндвич»-метода
Существует множество вариаций методов ИФА, некоторые из них представлены ниже.
- Сэндвич-метод. К иммобилизованным Ат добавляется раствор с Аг, после образования комплексов носитель отмывают от лишних компонентов и добавляют маркированные Ат. В результате, Аг оказываются зажатыми иммобилизованными и мечеными Ат, откуда и произошло название метода.
- Неконкурентный непрямой ИФА. К иммобилизованным Аг присоединяют исследуемую сыворотку с Ат. Когда образуются комплексы, лишние Ат смывают и добавляют маркированные Ат, способные связаться с прикреплёнными к поверхностям лунок иммунными комплексами.
- Конкурентный прямой ИФА. К иммобилизованным Аг вносят исследуемую сыворотку и конъюгат, содержащий маркированные Ат. Формируются комплексы Аг-Ат нескольких видов: с мечеными Ат и с немаркированными Ат, которые вступают между собой в конкуренцию за связь с Аг.
Какие инфекции помогает выявить серологическое исследование.
Серологическая диагностика позволяет выявить возбудителя
СИ позволяют выявить определённое заболевание при наличии на него подозрения, то есть в основе анализа лежит знание того, какой именно элемент необходимо искать.
Если у пациента присутствует определённая симптоматика либо иные исследования указывают на заболевание, назначается серологический анализ.
Серологические исследования используют для диагностики следующих инфекций:
- вирус гепатита А, В, С, D, Е;
- сифилис;
- ВИЧ;
- герпес;
- цитомегаловирус;
- краснуха;
- корь;
- паротит;
- Эпштейн-Барр;
- хеликобактер;
- хламидии;
- микоплазмы;
- токсоплазмы;
- лямблии;
- гельминты;
- уреаплазмы;
- парвовирус;
- вирус ветряной оспы;
- вирус клещевого энцефалита;
- вирус Денге;
- коклюш;
- боррелии;
- легионеллы.
Серологические исследования способны выявить любые инфекции в лабораторных условиях, если в наличии есть Аг возбудителя инфекции.
Преимущества серологического метода исследования в диагностике инфекций.
Серологическая диагностика — быстро и доступно
- Высокая чувствительность и специфичность.
- Широкий спектр определяемых инфекций.
- Ранняя диагностика инфицирования.
- Возможность мониторинга развития заболевания.
- Быстрота и удобство в исполнении.
- Возможность использования минимального объёма исследуемого материала.
- Безопасность исследования.
Источник
Текущая версия страницы пока не проверялась опытными участниками и может значительно отличаться от версии, проверенной 19 июня 2018;
проверки требуют 6 правок.
Реакция Вассермана (RW), или ЭДС (экспресс-диагностика сифилиса) — метод диагностики сифилиса.
Названа по имени немецкого иммунолога Августа Вассермана, предложившего методику проведения этой реакции. В клинической практике зачастую все методы диагностики сифилиса называют реакцией Вассермана, хотя в лабораторной диагностике данная методика не используется в России с 1980-х годов[1][2]. Преимуществом реакции является простота её выполнения, недостатком — низкая специфичность, приводящая к ложноположительным результатам.
В настоящее время метод устарел и заменён реакцией микропреципитации (антикардиолипиновый тест, MP, RPR (Rapid Plasma Reagin)).
История[править | править код]
История открытия реакции Вассермана подробно описана в книге Л.Флека (1896—1961) «Возникновение и развитие научного факта»[3] (первое оригинальное издание вышло в 1935 г.[4]).
Техника[править | править код]
В образец крови или ликвора вводится антиген — кардиолипин из бычьего сердца. Сифилис-неспецифические антитела образуют реакцию с липидом — реакцию Вассермана антител антифосфолипида. Интенсивность реакции (1, 2, 3, или 4) указывает на серьёзность поражения.
Диагностическая ценность[править | править код]
При первичном сифилисе реакция Вассермана становится положительной на 6—8 неделе течения заболевания (в 90 % случаев), при вторичном сифилисе она положительна в 98—100 % случаев. Вместе с другими серологическими реакциями (РПГА, ИФА, РИФ) позволяет не только выявить наличие возбудителя, но и выяснить приблизительный срок заражения.
По этой реакции (помимо осмотра пациента и других лабораторных исследований) оценивается эффективность проводимого лечения. Материалом для анализа является кровь пациента, которая берётся из вены. В процессе исследования крови происходит реакция связывания комплемента (РСК), позволяющая выявить наличие в крови антител к Treponema pallidum.
Реакция Вассермана также применяется в психиатрии для диагностирования прогрессивного паралича.
Специфичность[править | править код]
Возможны положительное проявление реакции Вассермана и у здоровых людей при некоторых других, отличных от сифилиса заболеваниях (туберкулёз, системная красная волчанка, заболевания крови) и физиологических состояниях (беременность) и после родов. При малярии, туберкулёзе, некоторых вирусных и протозойных заболеваниях, проказе, пемфигусе, лептоспирозе, новообразованиях, во время менструации, после наркоза, после употребления накануне взятия крови спиртных напитков, жирной пищи, лекарств, введения чужеродных сывороток тоже может быть получен положительный ответ. В таких случаях для уточнения диагноза используются другие методы (РПГА, ИФА, РИФ).
В популярной культуре[править | править код]
- Название «Вассерманова реакция» дал одной из своих ранних критических статей Борис Пастернак.
- На телеканале НТВ утром существовала передача «Реакция Вассермана»[5], которую вёл Анатолий Вассерман.
Примечания[править | править код]
- ↑ М. Милич, «Эволюция сифилиса»
- ↑ Ю. К. Скрипкин «Кожные и венерические болезни», учебник для студентов лечебного факультета
- ↑ Флек, Людвик. Возникновение и развитие научного факта: введение в теорию стиля мышления и мыслительного коллектива. — Москва: Идея-Пресс, Дом интеллектуальной книги., 1999. — С. 220. с. — ISBN 5-7333-0018-3.
- ↑ Ludwik Fleck. Entstehung und Entwicklung einer wissenschaftlichen Tatsache. Einführung in die Lehre vom Denkstil und Denkkollektiv. — Basel: Schwabe und Co., Verlagsbuchhandlung, 1935.
- ↑ YouTube — Реакция Вассермана-1. Ливийский пример заразителен
Источник
Реакция Вассермана является основой для диагностики такого заболевания как сифилис. Классический вариант этого исследования не применяется в РФ с 1980-х годов, однако заложенная основа используется в аналогах.
Сифилис – это заболевание инфекционной этиологии, которое вызывает Treponema pallidum (бледная трепонема). Инфицирование сифилисом происходит преимущественно половым путем, также возможна вертикальная передача инфекции (при родах от зараженной матери ребенку).
Течение заболевания характеризуется постоянным прогрессированием, наличием рецидивов, периодичностью клинической симптоматики и способностью поражать все органы и системы организма.
Для диагностики сифилиса используют специальные тесты:
- нетрепонемные (микрореакцию преципитации (RPR – антикардиолипиновый тест), реакцию Вассермана, микроскопический тест VDRL, сифилис АгКЛ и другие),
- трепонемные (ИФА, РИФ, РПГА, реакцию иммобилизации трепонем, иммуноблотинг и т.д).
Наиболее «классическим» тестом считается реакция Вассермана.
Реакция вассермана. Что это
Справочно. Реакция Вассермана – это иммунологический метод диагностики сифилиса, основанный на реакции связывания комплемента.
Суть RW заключается в том, что кровь больного сифилисом, при добавлении в нее специального белка-агрессора, способна образовывать с ним комплексы, абсорбирующие комплемент, которые будут выпадать в осадок.
Как проводится исследование крови по Вассерману
По сути, реакция Вассермана объясняется наличием в белой трепонеме кардиолипина. Это антиген, который стимулирует синтез антител, которые выявляются в крови при помощи RW.
То есть, к сыворотке крови пациента присоединяют искусственный аналог трепонемы (кардиолипиновый антиген) и специальный связывающий белок (комплимент). Если в крови присутствуют антитела (специфические белки защитники) к бледной трепонеме, то происходит связывание кардиолипинового антигена и этих антител при участии комплемента. Полученное соединение выпадает в осадок, оцениваемый как ++++.
В норме, в сыворотке здоровых людей происходит гемолиз эритроцитов. То есть, в крови нет антител, с которыми могут реагировать кардиолипиновый антиген, а, следовательно, в сыворотке не происходит реакции адсорбирования и связывания комплемента. Свободный комплемент участвует в гемолизе, появление которого оценивается как отрицательная реакция Вассермана, то есть “-“.
Анализ крови на реакцию Вассермана имеет пять вариантов ответа:
- – (свидетельствует о том, что в сыворотке произошел полный гемолиз эритроцитов, а значит, анализ на сифилис отрицателен);
- + (такой ответ трактуется как сомнительный, одним + оценивают слабовыраженную задержку гемолиза);
- ++ (наблюдается при частичной задержке гемолиза и расценивается как слабоположительная реакция Вассермана);
- +++ (такой результат расценивается как положительная RW, свидетельствующая о значительной задержке гемолиза);
- ++++ (резко положительная RW, полное отсутствие гемолиза и выпадение осадка говорит о наличии у пациента сифилиса или других заболеваний, ставших причиной получения ложноположительной RW).
Первый ответ свидетельствует об отрицательной RW и не требует дальнейших исследований. При получении других результатов, следует учитывать, что реакция Вассермана не является высокоточной и специфичной.
Внимание. При проведении анализа крови на реакцию Вассермана достаточно часто наблюдаются ложноположительные результаты.
В связи с этим, при получении сомнительных, слабоположительных и резко положительных реакций Вассермана, для уточнения диагноза проводят трепонемные тесты.
Ложноположительные результаты могут быть связаны с употреблением жирной пищи, спиртных напитков, беременностью, менструацией, малярией, системной красной волчанкой и т.д.
Современное понимание реакции Вассермана
В современных лабораториях «классическая» реакция Вассермана считается устаревшей и не используется. Однако в листе ответов и бланке назначений все равно часто пишут RW.
В настоящее время под этим термином подразумевают модифицированные современные RW.
Наиболее распространенный аналог реакции Вассермана – это RРR (неспецифический антифосфолипидный тест). Он также относится к нетрепонемным тестам (то есть не обладает высокой специфичностью), однако более чувствителен и имеет меньший риск ложноположительных результатов, чем классическая реакция Вассермана.
Тест RРR является скрининговым исследованием, позволяющим обнаружить антитела (IgG и IgM) к кардиолипину.
Для проведения анализа, также, как и для классической реакции Вассермана, применяется венозная кровь.
Анализ желательно сдавать натощак. За час до взятия крови исключается курение. Несмотря на то, что риск ложноположительных результатов при RРR ниже, чем при RW, в идеале, предпочтительно не употреблять накануне анализа спиртные напитки и жирную пищу.
Где сдавать кровь и сколько стоит обследование
Обследование на сифилис можно пройти как в кожно-венерологическом диспансере (бесплатно), так и в частной клинике (или лаборатории).
Справочно. Ориентировочная стоимость RРR составляет от 330 до 400 рублей и зависит от лаборатории, в которой сдаются анализы.
Также, может использоваться специфический трепонемный тест (РПГА или ИФА IgG/IgМ на сифилис). Этот тест обнаруживает в крови специфические антитела исключительно к бледной трепонеме, поэтому может применяться для уточнения результатов после проведения нетрепонемных тестов. Его стоимость составляет от 320 до 380 рублей.
Показания к исследованию
Положительная RPR может выявляться уже через семь – десять суток после появления у пациента первичного сифилитического шанкра или через три-пять недель после заражения.
Реакция Вассермана обладает чувствительностью от 70 до 80% при диагностике первичного сифилиса и практически стопроцентной чувствительностью при раннем латентном и вторичном сифилисе.
После наступления вторичной стадии, титры начинаю снижаться. Следует учитывать, что около тридцати процентов позднего сифилиса может быть ложноотрицательным по RPR.
Поэтому проведение трепонемных тестов, с целью уточнения диагноза, является обязательным.
Однако, реакция Вассермана (RPR) может эффективно применяться для контроля проводимого лечения сифилиса.
Основными показаниями к проведению анализа служат:
- случайные половые связи;
- употребление наркотиков;
- контакт с больным сифилисом;
- подозрение на сифилис (наиболее специфично появление твердого шанкра);
- контроль лечения сифилиса;
- беременность, донорство, работа в медицинских учреждениях (входит в список стандартных обследований);
- расстройства психики и поражения нервной системы (нейросифилис).
Также, обязательному обследованию подлежат дети, рожденные от инфицированных матерей.
Анализ при беременности
Классическая реакция Вассермана при беременности часто давала ложноположительные результаты. Новые тесты (RРR) реже дают подобные погрешности. Однако, учитывая, что некоторые заболевания также могут стать причиной возникновения ложноположительных результатов, при получении положительного ответа следует выполнить ИФА или РПГА.
Ложноположительная реакция Вассермана. Причины
Важно. При проведении первичного обследования следует учитывать, что нетрепонемные тесты не обладают специфичностью. Это связано с тем, что антитела к кардиолипину могут появляться не только при инфицировании сифилисом.
Чаще всего ложноположительная реакция Вассермана выявляется у пациентов с:
- СД (сахарный диабет);
- туберкулезом;
- злокачественными новообразованиями;
- аутоиммунными патологиями (системное поражение соединительной ткани);
- вирусными гепатитами;
- энтеровирусной инфекцией;
- тяжелой пневмонией;
- инфекционным мононуклеозом;
- скарлатиной;
- малярией;
- подагрой;
- алкоголизмом;
- антифосфолипидным синдромом (при исключенном до этого (при помощи трепонемного теста) сифилисе, RW может применяться с целью подтверждения этого синдрома);
- эозинофильным инфильтратом в легких.
Также, ложноположительные результаты возможны у детей на седьмой-десятый день жизни, беременных, пациентов после вакцинации и носителей несифилитических трепонем. У лиц, принимающих наркотические средства, реакция Вассермана также будет ложноположительной.
Еще следует учитывать, что при очень высоком титре сифилитических антител могут диагностироваться ложноотрицательные результаты.
В связи с этим, RW следует проводить в комплексе, с использованием специфических трепонемных тестов. Чаще всего применяют ИФА или РПГA к Trepоnemа pаllidum IgG/IgМ,
Положительная реакция Вассермана
Положительная RPR наблюдается при сифилисе:
- первичном (если заражение произошло от одного до трех месяцев назад);
- вторичном (заражение – более трех месяцев назад);
- третичном (заражение- более трех лет назад).
Также, положительный ответ может выявляться в течение года после проведенного лечения и при формировании серорезистентности (также после лечения).
При получении отрицательного ответа нельзя исключить раннее серонегативное первичное или позднее третичное заболевание.
Источник