Анализ крови реакция кана что это за анализ
Текущая версия страницы пока не проверялась опытными участниками и может значительно отличаться от версии, проверенной 19 июня 2018;
проверки требуют 6 правок.
Реакция Вассермана (RW), или ЭДС (экспресс-диагностика сифилиса) — метод диагностики сифилиса.
Названа по имени немецкого иммунолога Августа Вассермана, предложившего методику проведения этой реакции. В клинической практике зачастую все методы диагностики сифилиса называют реакцией Вассермана, хотя в лабораторной диагностике данная методика не используется в России с 1980-х годов[1][2]. Преимуществом реакции является простота её выполнения, недостатком — низкая специфичность, приводящая к ложноположительным результатам.
В настоящее время метод устарел и заменён реакцией микропреципитации (антикардиолипиновый тест, MP, RPR (Rapid Plasma Reagin)).
История[править | править код]
История открытия реакции Вассермана подробно описана в книге Л.Флека (1896—1961) «Возникновение и развитие научного факта»[3] (первое оригинальное издание вышло в 1935 г.[4]).
Техника[править | править код]
В образец крови или ликвора вводится антиген — кардиолипин из бычьего сердца. Сифилис-неспецифические антитела образуют реакцию с липидом — реакцию Вассермана антител антифосфолипида. Интенсивность реакции (1, 2, 3, или 4) указывает на серьёзность поражения.
Диагностическая ценность[править | править код]
При первичном сифилисе реакция Вассермана становится положительной на 6—8 неделе течения заболевания (в 90 % случаев), при вторичном сифилисе она положительна в 98—100 % случаев. Вместе с другими серологическими реакциями (РПГА, ИФА, РИФ) позволяет не только выявить наличие возбудителя, но и выяснить приблизительный срок заражения.
По этой реакции (помимо осмотра пациента и других лабораторных исследований) оценивается эффективность проводимого лечения. Материалом для анализа является кровь пациента, которая берётся из вены. В процессе исследования крови происходит реакция связывания комплемента (РСК), позволяющая выявить наличие в крови антител к Treponema pallidum.
Реакция Вассермана также применяется в психиатрии для диагностирования прогрессивного паралича.
Специфичность[править | править код]
Возможны положительное проявление реакции Вассермана и у здоровых людей при некоторых других, отличных от сифилиса заболеваниях (туберкулёз, системная красная волчанка, заболевания крови) и физиологических состояниях (беременность) и после родов. При малярии, туберкулёзе, некоторых вирусных и протозойных заболеваниях, проказе, пемфигусе, лептоспирозе, новообразованиях, во время менструации, после наркоза, после употребления накануне взятия крови спиртных напитков, жирной пищи, лекарств, введения чужеродных сывороток тоже может быть получен положительный ответ. В таких случаях для уточнения диагноза используются другие методы (РПГА, ИФА, РИФ).
В популярной культуре[править | править код]
- Название «Вассерманова реакция» дал одной из своих ранних критических статей Борис Пастернак.
- На телеканале НТВ утром существовала передача «Реакция Вассермана»[5], которую вёл Анатолий Вассерман.
Примечания[править | править код]
- ↑ М. Милич, «Эволюция сифилиса»
- ↑ Ю. К. Скрипкин «Кожные и венерические болезни», учебник для студентов лечебного факультета
- ↑ Флек, Людвик. Возникновение и развитие научного факта: введение в теорию стиля мышления и мыслительного коллектива. — Москва: Идея-Пресс, Дом интеллектуальной книги., 1999. — С. 220. с. — ISBN 5-7333-0018-3.
- ↑ Ludwik Fleck. Entstehung und Entwicklung einer wissenschaftlichen Tatsache. Einführung in die Lehre vom Denkstil und Denkkollektiv. — Basel: Schwabe und Co., Verlagsbuchhandlung, 1935.
- ↑ YouTube — Реакция Вассермана-1. Ливийский пример заразителен
Источник
КАНА РЕАКЦИЯ (R. L. Kahn, амер. микробиолог, род в 1887 г.) — одна из наиболее распространенных серологических реакций для диагноза сифилиса. Впервые описана Каном в 1922 г., затем как стандартный метод в 1924 г. К. р. основана на феномене выпадения преципитата из смеси липоидного экстракта сердца быка и сыворотки крови человека, больного сифилисом; при тех же условиях смесь экстракта и сыворотки здорового человека остается прозрачной.
Антигеном служит алкогольный холестеринизированный экстракт из миокарда быка. Антиген титруют, добавляя к постоянному количеству его (1 мл) различные дозы (от 0,6 до 1,2 мл) 0,9% р-ра хлорида натрия.
О титре антигена судят по наименьшему количеству р-ра хлорида натрия, к-рое, будучи прибавлено к 1 мл антигена, вызывает образование агрегата, исчезающего при втором добавлении 0,9% р-ра хлорида натрия. Стандартный антиген выпускают с титром 1 мл антигена + 1,1 мл 0,9% р-ра хлорида натрия.
Постановка реакции
К 1 мл антигена быстро приливают 0,9% р-р хлорида натрия, и смесь переливают из пробирки в пробирку 12 раз. В течение 10 мин. антигенная эмульсия «созревает», после чего ее встряхивают и разливают микропипеткой для каждой сыворотки на дно в три пробирки в дозах 0,05; 0,025 и 0,0125 мл. В каждую пробирку прибавляют по 0,15 мл сыворотки, прогретой 30 мин. при t° 56°. Штатив встряхивают в течение 3 мин. в шюттель-аппарате, после чего добавляют 0,9% р-р хлорида натрия в дозах 1 мл, 0,5 мл и 0,5 мл соответственно. После встряхивания учитывают результаты немедленно и через 15 мин., обозначая их в зависимости от степени преципитации как «положительные» (4+, 3+ и 2+), «сомнительные» (+ и ±) и «отрицательные» (—). Среднее арифметическое показаний трех пробирок является общим результатом. В СССР реакция ставится в одной пробирке с дозой антигена 0,025 мл.
При резко положительных результатах можно применить количественную реакцию Кана, к-рую ставят с разведениями сыворотки: 1:1, 1:5, 1:10 и Т; д. в дозах по 0,15 мл и с дозой антигена 0,01 мл, разведенного по титру 1 мл антигена +1 мл 0,9% р-ра хлорида натрия. Наибольшее разведение сыворотки, дающее положительный результат, определяет титр сыворотки.
В случае неопределенных или сомнительных результатов рекомендуется поставить дополнительные испытания: с дозами сыворотки 0,05 и 0,1 мл, с антигеном в дозе 0,05 мл и с разведениями сыворотки 1:4, 1:8 и 1:16 в дозах 0,05 мл и с дозой антигена 0,0125 мл. Если результаты каждого испытания явно положительны, реакция специфична.
Реакция Кана c цереброспинальной жидкостью
Вследствие малого количества реагинов в цереброспинальной жидкости реакцию ставят с ее глобулиновой фракцией, разведенной в 0,1 объема 0,9% р-ра хлорида натрия. Для этого к 1,5 мл цереброспинальной жидкости прибавляют 1,5 мл насыщенного р-ра сульфата аммония и смесь прогревают 15 мин. на водяной бане при t° 56°, после чего центрифугируют для осаждения глобулина и отсасывают надосадочную жидкость. К осадку добавляют 0,15 мл 0,9% р-ра хлорида натрия и р-р переносят в пробирку с 0,01 мл разведенного антигена. После трехминутного встряхивания добавляют 0,5 мл 0,9% р-ра хлорида натрия и учитывают результаты. В целях повышения чувствительности реакции Кан описал также «презумптивный тест» (presumptive test), позволяющий ставить серодиагноз с большей степенью вероятности, что достигается усилением антигена сенсибилизирующим реагентом. Реакцию ставят в одной пробирке с 0,025 мл разведенного антигена. Результаты сопоставляют с показаниями других реакций и с клин, данными, т. к. при этом методе повышается процент неспецифических реакций. В случае подозрения на неспецифические результаты, получаемые в обычной постановке реакции, автором предложен «подтверждающий тест» (verification test). Для этого полученные при реакции преципитаты испытывают на их способность к дисперсии и на их отношение к изменению температуры. В первом случае в три опытные пробирки добавляют 0,1; 0,1 и 0,15 мл 20% р-ра хлорида натрия и штатив ставят на 10 мин. в водяную баню при t° 37°. В случае специфической реакции преципитат стабилен, а при ложноположительной — легко диспергируется. Во втором случае реакцию ставят параллельно: в обычных условиях при t° 37° и при t° 1°. Специфический результат реакции при этих условиях почти не меняется, тогда как результат ложноположительной реакции значительно усиливается при t° 1°, а при t° 37° преципитат легко диспергируется.
По чувствительности К. р. занимает одно из первых мест среди описанных реакций преципитации и в этом отношении наиболее сходна с реакцией Закса — Витебского (см. Закса — Витебского реакция). К. р. получила высокую оценку на двух международных серол, конференциях — в Копенгагене (1928) и Монтевидео (1930). В СССР К. р. применяют с 1924 г.; она входит в комплекс серол, реакций, принятых для серодиагноза сифилиса. За рубежом ее применяют значительно реже.
См. также Вассермана реакция, Сифилис, диагноз.
Библиография: Кан Р. Л. Реакция Кана, пер. с англ., М.—Л., 1931; К a h n R. L. Recent significant changes in technic of Kahn presumptive and standard diagnostic flocculation tests, Vener. Dis. Inform., Suppl. 9, p. 183, 1939; он ж e, Verification test in serology of syphilis, J. Lab. clin. Med., v. 28, p. 1175, 1943; о н ж e, Serology with lipid antigen with special reference to Kahn and universal reactions, p. 327, Baltimore, 1950.
H. В. Нарциссов.
Источник
Реакция непрямой гемолитической агглютинации (РНГА) относится к серологическим методам исследования. Серология – наука об изучении различных свойств плазмы крови. Если точнее говорить, то серология изучает взаимодействие антител, находящихся в организме человека, с определёнными антигенами. В медицинской клинико-лабораторной диагностики серология является одним из разделов иммунологии.
Основными серологическими методами исследования являются различные реакции. Такие реакции, как правило, делятся на прямые и косвенные. В свою очередь прямые бывают двухкомпонентными – это агглютинация, гемолитическая агглютинация или реакция преципитации. А косвенные реакции в основном трехкомпонентные, к ним относятся реакции торможения гемолитической агглютинации и нейтрализации (микроорганизма и вируса).
Агглютинация представляет собой слипание и выпадения в осадок клеток, имеющих определенный антиген, который вступил во взаимодействие с таким же антигеном. Реакция преципитации помогает определить в организме или исследуемом материале неизвестный антиген путем добавления определенного антитела. В результате при положительном результате выпадает осадок в виде хлопьев.
Такие исследования проводят для определения инфекционного или бактериологического заболевания. К сожалению, такие методы не являются однозначными в диагностики данных групп заболеваний. Поэтому при постановке диагнозов следует учитывать анамнез пациента, клинические проявления заболевания, а также назначать дополнительные подтверждающие методы исследования.
Реакция непрямой гемолитической агглютинации (РНГА) – этот метод специфичен для определения инфекционных заболеваний, вызванных бактериями (например, сальмонеллезов или дизентерии), риккетсиями, простейшими или грибами. Также этот метод эффективен в отношении диагностирования сифилиса.
Принцип метода РНГА
При постановке реакции используются эритроциты (может использоваться латекс), которые имеют на своей стенке определенные антигены. К планшету с эритроцитами добавляется исследуемый материал. Если в нем имеются специфические антитела или белки определяемого возбудителя заболевания, то они вступают в связь с антигенами, слипаются и образуют видимый осадок.
Стандартный набор в основном содержит пустой планшет, эритроциты баранов, которые и имеют чувствительность к антигену выявляемого заболевания. Также в наборе присутствуют эритроциты, не имеющие антигенов. Контроли – положительный и отрицательный и стандартный реактив для разведения сывороток.
Самое главное в постановке реакции – это строгое соблюдение всех этапов. Для начала берут пустой планшет для РНГА, в лунки раскапываются последовательно заранее разведенные исследуемые образцы. В первую и последнюю лунки капают контроли. К сывороткам добавляют эритроциты со специфическими антигенами. Инкубируют планшет 2 часа.
Далее описывают визуальный результат. Он учитывается в крестах. Реакция считается верной только тогда, когда контроли прошли реакцию. Соответственно, в лунке с положительным контролем эритроциты располагаются по всему дну в виде хлопьев («зонтик»). В случае с отрицательным контролем на дне лунки выпадает маленькое четкое кольцо из эритроцитов («пуговка»).
Учет результатов
Результат учитывается по интенсивности осадка из эритроцитов в лунке.
- «-» отрицательный результат, как отрицательный контрольный образец, в виде плотного кольца на дне без какой-либо зернистости.
- «+» слабая интенсивность реакции, кольцо на дне в виде «пуговки», но при этом видны отдельные отложения эритроцитов. Результат описывается как «сомнительный». Обязательная пересдачи крови через 2 недели.
- «++» средняя интенсивность прошедшей реакции. Образовавшееся кольцо на дне лунки достаточно широкое с просветом в центре. Результат трактуется как слабо положительный.
- «+++» интенсивная реакция. В лунке эритроциты занимают всю поверхность, выпадают в виде «зонтиков». То есть с тонким кольцом по периферии. Результат оценивается как положительный.
- «++++» резкая интенсивность реакции. Вся лунка равномерно заполнена зернистыми выпадениями эритроцитов, иногда может быть в виде «зонтика». Также результат считается положительным или резко положительным.
Реакция может быть ложноположительной при протекании в организме человека тяжелых аутоиммунных заболеваний. Поэтому, если при пересдаче анализа реакция дает перекрест и результат отчитывается как ложноположительный, незамедлительно нужно обратиться к врачу для выяснения причины данной реакции.
Иногда этот метод принимают для подтверждения другого метода диагностики, основанного также на связывании антиген-антитело, называемого иммуноферментный анализ.
Подготовка к анализу
Чтобы не допустить ложноположительных результатов, к анализу нужно подготовиться заранее. Забор крови на данный анализ производится строго натощак и без употребления утром какой-либо жидкости. Нужно воздержаться от курения, хотя бы за час до сдачи анализа. Алкогольные напитки стоит исключить из рациона как минимум за сутки до анализа. Кровь на РНГА забирается из вены.
В настоящее время реакцию непрямой (пассивной) гемолитической агглютинации очень широко используют в медицинской лабораторной диагностике. Эта методика впервые была протестирована еще в 1965 году. И до сегодняшнего дня очень востребована. Она дает возможность не только определить, протекает ли в данный момент инфекционное заболевание у человека, но и на какой стадии оно находится.
Используют РНГА чаще всего для скрининга населения на наличие инфекционных заболеваний и для подтверждения положительных результатов, например, на сифилис. Основано это на том, что тест считается достаточно чувствительным и эффективным. Но при этом реакция проста в постановке и не требует много времени, результат можно получить уже в день сдачи крови.
Cергеева Екатерина Андреевна
Источник: comp-doctor.ru
Источник
Добрый день дорогой читатель!
Это уже четвёртая публикация на тему реабилитации после перенесенной коронавирусной инфекции. Но в начале мы должны определится в понятиях и терминах.
Сегодня речь пойдёт о лабораторных исследованиях крови, используемых при лечении коронавирусной инфекции (covid-19).
Важным элементом при оказании медицинской помощи больным с COVID-19 или подозрением на COVID-19 является оценка динамики лабораторных показателей. Лабораторные показатели служат для
определения тяжести состояния, своевременного назначения препаратов и коррекции терапии, определяют динамику течения заболевания.
Ниже перечислены показатели крови, используемые для контроля за инфекцией в соответствии с методическими рекомендациями (приведена точная последовательность и количество показателей):
1. уровень лейкоцитов, нейтрофилов, лимфоцитов, тромбоцитов;
2. уровень АЛТ, АСТ, СРБ, ферритина, тропонина;
3. уровень D-димера;
4. протромбиновое время;
5. уровень фибриногена;
6. уровень ИЛ-6;
7. количество Т- и В-лимфоцитов.
Разберём каждый из них.
1 . 1. Клинический анализ крови. Помимо рекомендуемых показателей (уровень лейкоцитов, нейтрофилов, лимфоцитов, тромбоцитов) определяет содержание гемоглобина, эритроцитов, СОЭ. Анализ крайне необходим для контроля за состоянием здоровья больного. Это самый распространённый анализ крови.
Нормы (нормативы могут варьировать в зависимости от лабораторий где проводится исследование, обращайте внимание на это внимание):
Лейкоциты — 4 – 10 10*9/л
Нейтрофилы: палочкоядерные 1 – 5%, сегментоядерные 47 – 72%
Лимфоциты – 19 – 37%
Тромбоциты – 170 – 390 10*9/л
2.2. Уровень АЛТ, АСТ, СРБ, ферритина, тропонина.
АЛТ, АСТ — проводится в рамках стандартного биохимического анализа крови. Считаются достоверным признаком поражения печени и нарушения ее работоспособности. Нормы до 41 Ед/лит.
СРБ — C-реактивный белок, белок плазмы крови, относящийся к группе белков острой фазы, концентрация которых повышается при воспалении и соответственно снижающийся при его утихании. Очень широко начал использоваться при коронавирусной инфекции, прогноза её течения. Норма до 5 мг/лит.
Ферритин. На сегодняшний день, пожалуй, самый информативный показатель запасов железа в организме. Норма для мужчин 20 – 250 мкг/л, женщин 10 – 120 мкг/л.
Тропонин. Один из высокочувствительных маркеров повреждения сердечной мышцы. Используется для определения острого инфаркта миокарда. Норма содержания тропонина в крови 0,2-0,5 нг/мл, высокий уровень свидетельствует о поражении сердечной мышцы.
3.3. Уровень D-димера. Тест с большой вероятностью определяет возможность возникновения тромбоза. При подозрении на ускоренное тромбообразование проводится определение уровня D-димера. Общепринятая единица измерения — мкг FEU/мл. В норме D-димер не должен превышать 0,55 мкг FEU/мл. В части лабораторий исследования проводятся по другим методикам. Для них единицей измерения является нг/мл. Норма D-димера для них — менее 243 нг/мл.
4.4. Протромбиновое время.
Протромбиновое время это временной промежуток процесса с начала и до формирования полноценного тромба. В случае нарушений кровь сворачивается быстрее, чем это необходимо, что может привести к тромбозу (закупорка просвета сосудов).
5.5. Уровень фибриногена.
Фибриноген — фактор I (первый) свертываемости крови. Демонстрирует свертывающую способность крови. Благодаря фибриногену образуется тромб. Концентрация его резко повышается при острых воспалительных процессах. Анализ на фибриноген используют для определения способности организма к гемостазу и тромбообразованию.
Норма фибриногена: 2—4 г/л.
6.6. Уровень ИЛ-6.
Интерлейкин-6 (ИЛ-6). Является маркером острых системных воспалений. Избыточная продукция интерлейкина-6 вызывает повреждение тканей вследствие аутоиммунной реакции. Повышение значений указывает в т.ч. на тяжелый воспалительный процесс, инфекционные заболевания и т.п.
Повышение означает выраженность воспалительного процесса. Показатель информативен при оценке в динамике (несколько дней, недель). При снижении значения можно судить о положительных результатах лечения.
Референсные значения: 0 — 7 пг/мл.
7.7. Количество Т- и В — лимфоцитов.
Показатели клеточного иммунитета организма, лимфоциты являются разновидностью лейкоцитов. Как правило определяют Т – лимфоциты хелперы (CD 4). Уровень CD4+ Т-лимфоцитов (хелперов) может варьировать от 600 до 1000 лимфоцитов/мкл. Эти анализы выполняет далеко не каждая лаборатория. Исследование трудоёмкое и требует высоких навыков. Результаты количества Т и В лимфоцитов, требуются для медикаментозной корректировки иммунитета.
Каждый по отдельности показатель крови и их совокупность помогает определить потребность в дополнительном лечении, прогнозировать течение и исход заболевания.
Перепосты приветствуются. Делитесь полезной информацией. Комментируйте.
Дорогие наши Читатели, владейте информацией, однако диагностику и лечение доверьте врачам!
Подписывайтесь на канал о здоровье и будьте на шаг впереди!
Источник
