Анализ крови при и рпга
Сифилис — инфекционное заболевание, которое стоит на первом месте по уровню распространенности. И, к сожалению, путь заражения не только половой. Медики, доноры, люди, проживающие в одной квартире с больным — все они в группе риска. Чтобы исключить сифилис нужно сдать кровь на анализ, например, РПГА. Этот метод диагностики точен, эффективен и позволяет выявить заболевание на любой стадии (кроме инкубационного периода).
Что такое РПГА
Условно лабораторные методы диагностики можно разделить на два типа: ищут или самого возбудителя, или антигены, которые иммунная система выработала к «чужаку». РПГА на сифилис — это специфическое серологическое исследование, позволяющее обнаружить антитела к бледной спирохете. Если они обнаружены, значит результат анализа положительный, если антитела не выявлены — отрицательный.
Для проведения исследования необходим эритроцитарная диагностика, а если проще — эритроциты, обработанные специальным раствором. Их получают, отделив на центрифуге плазму крови от форменных элементов. Если человек болен, то его эритроциты будут нести на себе антитела к антигену (бледной спирохете) и присоединяться к нему, «слипаться». Соответственно, чтобы их обнаружить, нужно ввести в сыворотку крови антиген и пронаблюдать реакцию, которая может быть:
- Слабой интенсивности (антител на поверхности эритроцитов нет, в организме отсутствует возбудитель сифилиса или присутствует в неопределяемом количестве).
- Средней интенсивности (эритроциты соединились с антигеном, но в количестве недостаточном, чтобы однозначно диагностировать заболевание).
- Интенсивная (на поверхности эритроцитов много антител, образовались скопления слипшихся клеток).
- Резко интенсивная (большое количество эритроцитов соединились с антигеном, образуя характерный осадок).
В последних двух случаях можно с уверенностью утверждать о наличии заболевания. Реакция средней интенсивности требует уточняющих анализов, так как возможно два варианта. Или заражение произошло недавно и еще не успело выработаться достаточное количество антител, или подготовка крови выполнена неверно, и нужно повторить исследование.
Возможен ли ложноположительный результат на сифилис? Да, несмотря на высокую точность метода РПГА (99-100%) такое может быть. Это связано с тем, что иммунитет вырабатывает антитела ко всем болезнетворным микроорганизмам, а некоторые из них сходны по структуре с бледной трепонемой, например:
- возбудители клещевого боррелиоза и сапрофитные спирохеты;
- палочка Коха и вирус ВИЧ;
Также ложноположительный результат возможен при наличии аутоиммунных заболеваний, при инфаркте миокарда и при беременности. И если клиническая картина не указывает на сифилис и есть сомнения, нужно сдать другой анализ, однозначно подтверждающий или исключающий болезнь.
Трепонема
В роли антигена используют фабрично изготовленные штаммы трепонем или выделенные от них рекомбинантные антигены. Культуры трепонем выращивают в пробирках и обрабатывают ультразвуком. Затем их быстро замораживают, высушивают под низким давлением, и полученный порошок расфасовывают в ампулы.
Виды РПГА
Так как при выполнении такого анализа интенсивность реакции варьируется, это послужило основанием для использования этого метода не только для диагностики, но и для отслеживания динамики болезни. Поэтому РПГА условно разделяют на два подвида.
РПГА качественный
Любой анализ, отвечающий на вопрос: есть или нет в организме возбудитель болезни, называют качественным. Часто этого достаточно для того, чтобы диагностировать недуг и приступить к лечению.
Мнение эксперта
Артем Сергеевич Раков, врач-венеролог, стаж более 10 лет
Антитела вырабатываются не сразу. Возбудителю (бледной трепонеме) нужно время, чтобы распространится по организму, и вызвать иммунный ответ. Поэтому сдавать анализ на следующий день после вероятного заражения не стоит, результат будет недостоверным.
Однако следует учитывать и тот факт, что антитела к возбудителю недуга остаются в организме навсегда. И если человек заболел сифилисом, прошел курс лечения и выздоровел, даже спустя десятилетия в его крови будут обнаружены антитела. Как же в таком случае узнать: опять произошло заражение или нет? Ответ на этот вопрос дает полуколичественный анализ РПГА.
РПГА полуколичественный
Посчитать количество антител к бледной спирохете невозможно. Однако для того, чтобы примерно оценить их количество проводят титрование исследуемого образца. Определить сифилис рпга полуколичественно значит последовательно разбавлять сыворотку до того момента, когда «слипшиеся» эритроциты перестают определяться. Соответственно если их мало, потребуется небольшое количество разведений, а если много — разводить придется в большом объеме титранта.
Как сдавать
В качестве исследуемого образца у пациента берут 3-5 мл венозной крови. Лучше сдавать анализ утром, за день до сдачи нужно исключить из своего рациона:
- жирную пищу и соленые продукты;
Почему нужно соблюдать диету перед сдачей анализа? В первую очередь это нужно для того, чтобы с полученным образцом крови можно было работать. Например, после приема в пищу белковых и молочных продуктов в крови повышается количество микрочастиц жира. После разделения в центрифуге плазма крови будет представлять собой мутную, белесую сыворотку. Отделить эритроциты из такого материала или очень трудно, или вообще невозможно.
Правда ли, что алкоголь никак не влияет на результат анализов?
ДаНет
Алкоголь снижает защитные функции организма, а значит, и возможность вырабатывать антитела к болезнетворным микроорганизмам. Поэтому анализ может показать или слабую, или ложноотрицательную реакцию. Кроме того, этанол влияет на количественные показатели форменных элементов крови, что также усложняет проведение анализа.
Нельзя сдавать анализ на сифилис во время острой фазы вирусного заболевания. Антитела к вирусу могут показать ложноположительную реакцию. Обязательно нужна консультация врача, который скажет, когда можно проводить диагностику.
Видео
Также вы можете посмотреть видеоролик, где врач уролог-венеролог расскажет вам, что представляет собой анализ РПГА.
РПГА — современный и высокоточный анализ, позволяющий с высокой степенью вероятность подтвердить или исключить сифилис. Однако окончательная постановка диагноза происходит с учетом всех факторов: клинической картины, анамнеза, результатов других анализов. И, конечно, интерпретировать результаты любого исследования должен только врач.
Источник
Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ). Обязательным условием является исключение перед обследованием приема больным антибиотиков, которые оказывают токсическое действие на бледные трепонемы, вызывая их неспецифическое обездвижение.
Положительные результаты РИБТ обнаруживаются примерно с середины вторичного свежего периода сифилиса, и могут длительно сохраняться после проведенного лечения. При необходимости метод используют для выявления АТ в СМЖ, это исследование отличает высокая специфичность, но низкая чувствительность (около 40 %).
РИБТ мало пригодна для диагностики ранних форм сифилиса ввиду позднего (не ранее 8–9 недель от момента заражения) появления АТ-иммобилизинов; метод может давать ложноположительные результаты, в особенности у больных с аутоиммунной патологией, злокачественными заболеваниями, диабетом. Кроме того, РИБТ – достаточно сложный, трудоемкий и дорогостоящий анализ, требующий высокой квалификации персонала и наличия вивария, в связи с чем в последние годы он используется лишь в отдельных лабораториях. В диагностике РИБТ применяется как реакция-арбитр при расхождении результатов других серологических исследований, для дифференцирования ложноположительных результатов и при установлении диагноза поздних форм сифилиса.
Реакция связывания комплемента с трепонемным антигеном (РСК с ТА).Чувствительность метода – около 80 %, специфичность – 98 %. Метод входил в состав комплекса стандартных серологических реакций на сифилис, регламентированного приказом Минздрава СССР № 1161 от 02.09.1985 «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса». В настоящее время использование этой реакции, как и РСК с кардиолипиновым антигеном, ограничено отдельными лабораториями.
Реакция иммунофлуоресценции (РИФ). Для диагностики сифилиса используют несколько модификаций РИФ: РИФ-ц – для выявления АТ в СМЖ, РИФ-200 (тестируемую сыворотку перед реакцией разводят в 200 раз); РИФ-абс (РИФ с абсорбцией), IgM-РИФ-абс (для определения АТ IgM). По чувствительности и специфичности РИФ-абс не уступает РИБТ, но выполнение этого метода намного проще. Результаты РИФ-абс становятся положительными с 3–й недели после заражения (до появления твердого шанкра или одновременно с ним), это метод ранней диагностики сифилиса. Нередки положительные результаты исследования спустя много лет после полноценного лечения раннего сифилиса, а у больных с поздним сифилисом – на протяжении десятилетий.
Показания для выполнения РИФ-абс:
- положительные результаты НТТ у беременных при отсутствии клинических и анамнестических данных, свидетельствующих о сифилисе;
- обследование лиц с различными соматическими и инфекционными заболеваниями, при которых отмечают положительные результаты НТТ;
- обследование лиц с клиническими проявлениями, характерными для сифилиса, но с отрицательными результатами НТТ;
- ранняя диагностика сифилиса;
- в части случаев – как критерий успешности противосифилитического лечения: переход положительной РИФ-абс в отрицательную после лечения является 100% критерием излеченности сифилиса.
IgM–РИФ–абс применяют для раздельного выявления АТ классов Ig, что представляет особый интерес при диагностике врожденного сифилиса, когда АТ к трепонеме, синтезированные в организме ребенка, представлены IgM, а АТ IgG имеют материнское происхождение. Показаниями к проведению этого исследования являются: диагностика врожденного сифилиса; оценка результатов лечения раннего сифилиса.
РИФ обладает высокой чувствительностью (98,5%) и специфичностью (99,6%) практически при всех формах сифилиса. Недостатками РИФ являются: невозможность автоматизации исследования и учета результатов; трудности приготовления качественного антигена из взвеси бледных трепонем, полученных из яичка зараженного кролика; субъективизм в оценке результатов.
Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА). Сопоставление результатов, полученных при использовании РПГА и РИБТ, РИФ–абс, КСР, МРП показало высокую чувствительность и специфичность РПГА при диагностике сифилиса, совпадающую с результатами РИФ–абс.
РПГА может быть выполнена в качественном и количественном вариантах, существуют их макро- и микромодификации. Количественный метод РПГА позволяет оценить концентрацию специфических трепонемных АТ в крови. Титры от 1 : 640 и ниже характерны для пациентов, леченных по поводу сифилиса в прошлом. Более высокие титры – обычно для активной нелеченной инфекции.
Положительные результаты РПГА, как правило, отмечают спустя 3 недели после появления твердого шанкра и далее у пациентов, перенесших сифилис, в течение многих лет, нередко пожизненно.
Чувствительность РПГА составляет 76% при первичном сифилисе; 100% при вторичном сифилисе; 97% при скрытом сифилисе; 94% при позднем сифилисе. Специфичность РПГА выше, чем специфичность РИФ–абс, составляет 99%.
Благодаря соотношению высокой специфичности, чувствительности, простоты выполнения, стандартизации реагентов среди трепонемных тестов для серодиагностики сифилиса РПГА стабильно занимает лидирующее место в клинической практике в мире.
Особые преимущества ИФА заключаются: в высокой чувствительности и специфичности метода; автоматизации постановки реакции; высокой степени стандартизации; возможности исследования большого количества образцов сывороток; в количественном учете и объективной документации полученных результатов; возможности одновременного определения титра противотрепонемных АТ разных классов (IgG и IgM) в одном образце; пригодности для ранней диагностики сифилиса и диагностики врожденного сифилиса; в удобстве применения для тестирования крови в службе переливания крови; применимости в качестве подтверждающего специфического трепонемного теста. Чувствительность ИФА 98–100%, специфичность 96–100%.
К недостаткам ИФА можно отнести: непригодность для исследования единичных образцов; более длительный срок до получения результата, и меньший срок годности ИФА-наборов, например, по сравнению с РПГА.
Иммунный блот (ИБ). Одним из современных методов диагностики сифилиса является ИБ для определения АТ IgG либо IgM к определенным АГ бледной трепонемы.
Метод обладает высокой чувствительностью (до 100%,), специфичностью (98%) и воспроизводимостью (100%). Исследование дает возможность изучения спектра АТ сразу к нескольким АГ T.pallidum, применения высокоочищенных рекомбинантных и пептидных АГ, снижающих до минимума неспецифическую реактивность сывороток.
Все это определяет возможность предпочтения применения метода ИБ перед другими трепонемными тестами для верификации диагноза сифилиса в сложных случаях, в частности, для диагностики сифилиса во второй половине инкубационного периода, скрытого врожденного сифилиса в первые дни жизни ребенка, для выявления скрытого сифилиса у лиц со слабым гуморальным ответом, а также для дифференцирования ложноположительных результатов других тестов.
Источник