Анализ крови на вирус h1n1

[09-119]
Influenza virus A/H1N1 (sw2009), РНК [реал-тайм ПЦР]

2125 руб.

Свиной грипп – это несколько подтипов вируса гриппа А, способных вызывать заболевание у свиней. Наиболее актуальным в плане эпидемиологической настороженности в настоящее время является подтип А/H1N1.

Синонимы русские

Вирус гриппа H1/N1 (свиной грипп) [полимеразная цепная реакция в режиме реального времени].

Синонимы английские

Swine influenza virus, SIV, pH1/N1, pndH1/N1, H1N1v, (swine flu, swine influenza, 2009 flu pandemic), RNA [real-time polymerase chain reaction, RT-PCR, quantitative RT-PCR, qPCR, qRT-PCR].

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок из зева (ротоглотки) и носа, мокроту.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Рекомендуется употребить большой объем жидкости (воды) за 8-12 часов до сбора мокроты.
Не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.

Общая информация об исследовании

Influenza virus A/H1 – один из подтипов вируса гриппа, характеризующийся особой вирулентностью и приводящий к тяжелым формам заболевания и пандемиям. Грипп, вызванный Influenza virus A/H1 (грипп свиней, свиной грипп), отличается от сезонного (эпидемического) гриппа по нескольким характеристикам. Во-первых, возбудитель гриппа свиней – это новый вариант вируса гриппа, возникший в организме свиней в результате мутаций его генетического материала и затем распространившийся в популяции человека. Большинство людей не имеют иммунитета к нему, поэтому заболевание характеризуется очень высокой заразностью. Кроме того, оно чаще протекает в более тяжелой форме с вовлечением нижних отделов респираторного тракта и с осложнениями (в виде пневмонии, дыхательной и почечной недостаточности, энцефалопатии и др.), что обуславливает необходимость раннего и интенсивного лечения. Поэтому диагностика гриппа свиней должна быть произведена в кратчайшие сроки. На основании опыта борьбы с пандемией гриппа Influenza A H1/N1 в 2009 году был сделан вывод, что «золотым стандартом» идентификации этого подтипа вируса является полимеразная цепная реакция в режиме реального времени – метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в отделяемом носоглотки) фрагменты генетического материала (РНК) возбудителя инфекции. Такое исследование позволяет получить максимально точный результат в кратчайшие сроки.

РТ-ПЦР относится к так называемым быстрым методам диагностики гриппа, обеспечивающим возможность постановки окончательного, лабораторно подтвержденного диагноза еще до начала лечения. Это преимущество отличает РТ-ПЦР от выделения вируса в культуре клеток (требует 7-10 дней) и большинства серологических методов (требуют нарастания титра антител, 10-14 дней).

Так как серотипы и подтипы вируса гриппа отличаются друг от друга по некоторым генетическим последовательностям (например, по гену белка гемагглютинина, H1), с помощью исследования РТ-ПЦР возможно идентифицировать конкретный подтип вируса (Influenza A/H1). Специфичность этого анализа составляет 98-100 %. Среди «быстрых» тестов только РТ-ПЦР способна дифференцировать подтип вируса гриппа свиней от других подтипов Influenza A. Положительный результат исследования указывает на наличие генетического материала Influenza A/H1 в образце, однако не всегда означает продолжающуюся репликацию вируса, так как в реакции определяется не сам вирус, а фрагменты его РНК. По этой же причине положительный результат исследования биоматериала, взятого на фоне начатого противовирусного лечения, не означает его неэффективность.

Чувствительность исследования составляет 86-100 %. Это самый высокий показатель среди других «быстрых» диагностических тестов. Например, чувствительность экспресс-тестов для определения антигена вируса гриппа в отношении Influenza H1/N1 составляет 10-70 %, а чувствительность прямого и непрямого метода иммунофлюоресценции – 47-93 %. Важно отметить, что несмотря на это возможность ложноотрицательного результата все же существует. В отличие от большинства других лабораторных методов, результат РТ-ПЦР в меньшей степени зависит от распространенности гриппа среди населения, однако необходимо помнить, что частота ложноотрицательных результатов выше в период эпидемии. Для более точной постановки диагноза рекомендуется повторное (многократное) исследование образцов разных биоматериалов (отделяемого носоглотки, ротоглотки, мокроты) с интервалом 48-72 часа. Причем отрицательный результат РТ-ПЦР полностью не исключает диагноза «грипп Influenza A/H1» и не препятствует назначению противовирусной терапии.

Для чего используется исследование?

Для диагностики Influenza A/H1-гриппа.

Когда назначается исследование?

При постановке диагноза «грипп, среднетяжелая/тяжелая форма» и при осложнениях гриппа (пневмония, дыхательная недостаточность, энцефалопатия и др.).
При постановке диагноза «грипп» у пациента с факторами риска гриппа Influenza A/H1: возраст до 2 лет и старше 65 лет, беременность, хроническая обструктивная болезнь легких, хронические заболевания сердца, почек, печени, сахарный диабет, иммуносупрессия.
При отсутствии улучшения или при ухудшении состояния в течение 72 часов после постановки диагноза «грипп, легкая форма» у пациента без факторов риска Influenza A/H1.
При обследовании пациента, контактировавшего с больным с установленной Influenza A/H1-инфекцией.

Читайте также: Анализ крови крс на рид

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата:

Influenza A/H1-инфекция.

Причины отрицательного результата:

отсутствие Influenza A/H1-инфекции.

Важные замечания

Оптимально брать биоматериал через 48-72 часа после начала заболевания. Несмотря на то что идентификация вируса гриппа с помощью РТ-ПЦР возможна в течение более длительного времени от начала заболевания по сравнению с большинством других тестов, биоматериал должен быть получен как можно раньше. У детей, а также при вовлечении нижних отделов респираторного тракта этот период более длительный.
Отрицательный результат не препятствует назначению противовирусной терапии.
Положительный результат исследования биоматериала, взятого на фоне начатого противовирусного лечения, не означает его неэффективность.

Также рекомендуется

Общий анализ крови
Лейкоцитарная формула
С-реактивный белок, количественно
Mycoplasma pneumoniae, ДНК [ПЦР]
Adenovirus, ДНК [реал-тайм ПЦР]
Adenovirus, иммунофлюоресценция
Streptococcus pneumoniae, ДНК [реал-тайм ПЦР]
Streptococcus pyogenes, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Кто назначает исследование?

Инфекционист, эпидемиолог, педиатр, врач общей практики, анестезиолог-реаниматолог.

Литература

Li K, Xiao L, Liu C, Zhang J, Sirois P. Transforming viral sequences to A (H1N1) flu diagnosis: the current status and future prospects of rtPCR based assays. Curr Pharm Biotechnol. 2010 Jan;11(1):113-6.
Kamps B. S, Hoffmann C, Preiser W. Influenza Report 2006 / B. S. Kamps, С. Hoffmann, W. Preiser W. – Flying Publisher, 2006.
WHO Global Influenza Surveillance Network. Manual for the laboratory diagnosis and virological surveillance of influenza. – World Health Organization, 2011.
WHO World Health Organization. Clinical management of human infection with pandemic (H1N1) 2009: revised guidance. – World Health Organization, 2009.

Источник

Метод определения
Полимеразная цепная реакция с детекцией в режиме реального времени (Real-time PCR).

Исследуемый материал
Соскоб эпителиальных клеток рото- и носоглотки

Определение РНК вируса гриппа в соскобе эпителиальных клеток ротоглотки и носоглотки методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени.

Грипп – острая респираторная вирусная инфекция, передаваемая воздушно-капельным путем.

Возбудители гриппа – РНК-содержащие вирусы, относящиеся к семейству Orthomyxoviridae, в котором выделяют три рода: Influenza A virus, Influenza B virus, Influenza C virus.

Вирусы гриппа А и В ежегодно вызывают эпидемии большей или меньшей интенсивности практически во всех странах мира. Вирусы гриппа А широко распространены в природе, их выделяют у большинства зверей и птиц, в связи с чем они имеют высокий пандемический потенциал, так как способны преодолевать межвидовый барьер. Основной причиной возникновения эпидемий и пандемий гриппа является высокая вариабельность вируса вследствие изменений в его геноме. Это касается фрагментов, кодирующих поверхностные антигены вирусов типов А и В и определяющих их специфичность.

Вирусы Influenza А и B поражают преимущественно верхние отделы дыхательных путей: нос, горло, трахею и реже бронхи. Однако симптомы общей интоксикации при гриппе доминируют над умеренными катаральными проявлениями. Обычно заболевание сопровождается резким повышением температуры, мышечными и головной болями, сильным недомоганием, сухим кашлем, болью в горле и слизистыми выделениями из носа. Для гриппа, обусловленного новым или значительно измененным вирусом (например, для гриппа птиц типа А(H5N1) и А(H7N9), реже А (H1N1) pdm 2009), характерно острейшее, молниеносное начало, развитие различных вариантов токсикоза (нейротоксикоза, инфекционно-токсического шока в сочетании с гемодинамическими расстройствами) и III степени ДВС-синдрома (гемокоагуляционного шока).

Диагностика инфекции осуществляется комплексно, на основании анамнестических данных о контакте с больными гриппом и характерной клинической картины. Подтверждение диагноза возможно с помощью лабораторных исследований, что целесообразно при наличии клинических проявлений гриппа, в эпидемический сезон роста заболеваемости острыми респираторными инфекциями, при тяжелом течении респираторных болезней.

В качестве базовых тестов могут быть использованы следующие лабораторные исследования: определение антигенов вируса гриппа в мазках слизистой носа и ротоглотки методом непрямой иммунофлуоресценции или иммунохроматографии; определение антител к антигенам вируса гриппа А/B в сыворотке крови методом ИФА. Результаты ИФА, как правило, оцениваются ретроспективно. Вследствие поздней диагностики они не влияют на коррекцию терапии, но применимы в научных целях и для эпидемиологического надзора и контроля за гриппом. Наиболее современным методом лабораторной диагностики гриппа является выявление РНК вируса методом ПЦР.

Максимального уровня специфичности и чувствительности достигают тесты на основе ПЦР-ОТ (полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов амплификации в режиме реального времени, позволяющие обнаруживать в биологическом материале РНК возбудителя инфекции.

Аналитические показатели:

определяемый фрагмент – специфический участок нуклеиновой кислоты вирусов гриппа А (Influenza virus A) и гриппа В (Influenza virus B);

специфичность обнаружения – отсутствие неспецифических реакций в отношении других вирусных и бактериальных возбудителей ОРЗ.

Аналитическая чувствительность:

вирус гриппа А (Influenza virus A) – 1х10^3 ГЭ/мл пробы;

вирус гриппа В (Influenza virus В) – 1х10^3 ГЭ/мл пробы.

Литература

Грипп у взрослых. Клинические рекомендации. МЗ РФ. 2017:57. https://cr.rosminzdrav.ru/#!/schema/909
Грипп у детей. Клинические рекомендации. МЗ РФ. 2017:43. https://cr.rosminzdrav.ru/#!/schema/172
Грипп у взрослых: методические рекомендации по диагностике, лечению, специфической и неспецифической профилактике. Под ред. академика, профессора А.Г. Чучалина, главного внештатного инфекциониста СЗФО проф. Т.В. Сологуб. — СПб.: Издательско-полиграфический комплекс «НП-Принт». 2014:192.
Яцышина С.Б., Творогова М.Г., Шипулин Г.А., Малеев В.В. Лабораторная диагностика гриппа и других ОРВИ методом полимеразной цепной реакции. Лабораторная служба. 2017;6(3):238-267. https://doi: 10.17116/labs201763238-267.

Источник

Грипп, начавшийся в этом сезоне, опасен серьезными осложнениями, поэтому очень важно как можно раньше поставить точный диагноз, чтобы назначить адекватное лечение. И тем более важно отличить грипп от других респираторных инфекций.

В этом сезоне основным эпидемическим штаммом является пандемический вирус гриппа А/H1N1pdm09 «свиного» происхождения.

Также возможно заражение вирусом гриппа B и А/H3N2, а также инфицирование одним из 13 возбудителей ОРВИ, вызывающих гриппоподобные симптомы.

Каждый из вирусов имеет свои особенности, и заболевание требует индивидуального подхода к лечению. Грипп, вызванный вирусом A/H3N2 тяжело переносят дети до 5 лет, пожилые люди, лица с хроническими заболеваниями бронхо-легочной и сердечно-сосудистой системы. «Свиной грипп» тяжело переносят люди среднего возраста, чаще с хроническими заболеваниями сердечно-сосудистой системы, ожирением, сахарным диабетом, бронхиальной астмой и беременные женщины. При эпидемии гриппа 2009 года, вызванной «свиным» штаммом А/H1N1pdm09 летальный исход чаще наблюдался у лиц в возрасте от 30 до 67 лет, причем в 21% случаев в начале заболевания температура не поднималась выше 38оС и около 10% не имели каких-либо хронических заболеваний.

Инфицирование детей до 2х лет респираторно-синцитиальным вирусом, вирусами парагриппа и бокавирусом может привести к тяжелым состояниям, требующим госпитализации — крупу и бронхо-обструктивному синдрому. Респираторно-синцитиальный вирус, метапневмовирус, вирусы гриппа и аденовирусы могут вызвать бронхиты и пневмонию преимущественно у детей до 5 лет.

Каким возбудителем инфицирован человек, может сказать только лабораторная диагностика, по клинической картине, к сожалению, это сделать невозможно.

Лабораторный анализ на определение гриппа и других возбудителей респираторной инфекции даёт возможность назначить адекватное лечение, точно определить прогноз, не допустить характерных для каждого возбудителя осложнений и в ряде случаев избежать необоснованной антибиотикотерапии.

Где можно сдать анализ на грипп?

Сдать анализ на вирус гриппа и другие возбудители респираторных инфекций можно в Центре Молекулярной диагностики (CMD) ФБУН ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора. Диагностические тесты позволяют выявить возбудителей гриппа, ОРВИ, микоплазменной и хламидийной инфекций, коклюша и других острых респираторных заболеваний в течение одного дня. Целесообразно сдавать анализ на выявление гриппа и возбудителей ОРВИ при подозрении на вирусную инфекцию в первые — вторые сутки заболевания, когда возбудитель содержится в максимальном количестве. Помните, что точный диагноз — правильное лечение!

Диагностика гриппа и острых респираторных вирусных инфекций в CMD:

Вирус гриппа (Myxovirus influenzae) А и В, качественное определение РНК, ПЦР
Вирус гриппа (Myxovirus influenzae) А и В/ Вирус парагриппа (Parainfluenzae virus) 1,2,3,4 типов, качественное определение РНК
Вирус гриппа (Myxovirus influenzae) А, А/Н1N1/СА/2009, В, качественное определение РНК, ПЦР
Диагностика ОРВИ. Возбудители респираторных вирусных инфекций (РНК Respiratory Syncytial virus, РНК Metapneumovirus, РНК Coronavirus, РНК Rhinovirus, ДНК Adenovirus B, C, E, ДНК Bocavirus, РНК Parainfluenza virus 1, 2, 3, 4),качественное определение,ПЦР
Возбудители респираторных инфекций

Как работают диагностические тесты

Молекулярно-генетические методы, в частности полимеразная цепная реакция (ПЦР), способны обнаружить геном возбудителя в мазке из носоглотки заболевшего.

ПЦР — быстрый прямой метод диагностики, обнаруживающий специфичные участки генома микробов, то есть отличающие их друг от друга. Именно поэтому метод ПЦР по сути является экспресс-анализом на грипп и другие респираторные инфекции.

ПЦР увеличивает в миллиард раз количество этих участков за счет работы фермента ДНК-полимеразы, достраивающего цепи ДНК после присоединения к специфическим участкам коротких молекул олигонуклеотидов — праймеров. В процессе достраивания цепей ДНК происходит разрушение ДНК-полимеразой меченой флуоресцентными красителями молекулы – олигонуклеотидного зонда, также специфично отжигающегося на участке ДНК искомого возбудителя, и преграждающего путь движущегося фермента.

Чем больше возбудителя было в образце клинического материала пациента, тем раньше приборы будут фиксировать увеличение над пороговым значением уровня флуоресценции в процессе реакции. Анализ проводится с детекцией в режиме реального времени. Если в образце нет возбудителя, повышение уровня флуоресценции не происходит. В процессе разработки тестов они обязательно проверяются на специфичность, то есть отсутствие перекреста с другими вирусами и бактериями.

Источник

Исследуемый биоматериал	Аспират, Мазок, НАЗО-ФАРИНГ. СМЫВ, Мазок из носоглотки, Мазок/отделяемое носовых ходов, Отделяемое зева, Мазок из носоглотки и ротоглотки, Мазок/отделяемое носоглотки и ротоглотки
Метод исследования	ПЦР в реальном времени (Real-Time PCR)
Cрок исполнения с момента поступления биоматериала в лабораторию	4 к.д.

Стоимость анализа: 1 600 Р

Взятие мазка/соскоба: 395 Р

Описание

Всем известное заболевание грипп вызывается вирусом гриппа. Выделяют три типа — типы А, В и С. Все они имеют в своем составе РНК в качестве генетического кода. Помимо спирали РКН тело вируса содержит геммаглютинин и нейраминидазу. Эти белки отвечают за губительное действие вируса на клетки организма. Так геммаглютинин вызывает агглютинацию эритроцитов крови, а нейроминадиза — это фермент, который обеспечивает прохождение вируса гриппа через слизистые дыхательных путей. Эти два белка являются антигенами, основным свойством которых является способность меняться из года в год. Этим объясняется образование новых форм гриппа, а их названия указывают на тип геммаглютинина и нейроминидазы, например, H1N1 (геммаглютинин 1, нейраминидаза 1). Поверхностные антигены лежат в основе проведения лабораторной диагностики, выборе комплекса лечения.

По данным Всемирной Организации Здравоохранения, штамм вируса гриппа А/Н1N1/СА/2009 (А(H1N1)pdm09) продолжает встречаться по настоящее время, внося свой вклад в общую заболеваемость гриппом. Поэтому в эпидемический период анализы на грипп с выявлением субтипа А/Н1N1/СА/2009 (А(H1N1)pdm09) не теряют своей актуальности.
Наиболее часто встречается грипп типа А. Но так как возможна передача и типа В от человека человеку, проводится диагностики и этого типа. Путь передачи воздушно-капельный, чем объясняется склонность к эпидемиям и пандемиям при распространении данной вирусной инфекции.
Так как заболевание является достаточно серьезным, крайне важно вовремя его идентифицировать. Конечно, основная дифференциальная диагностика проводится с ОРВИ. К сожалению, в нашей стране отмечается некоторая недооценка опасности гриппа, вероятности развития осложнений, поэтому очень часто можно встретить утверждение о том, что у человека грипп. При этом имеется в виду, что есть некая вирусная инфекция. Учитывая, что диагностика гриппа становится все более доступной, можно ожидать, что со временем о гриппе будут говорить только в случае лабораторного подтверждения данного заболевания. Следует отметить, что идентификация вируса при помощи ПЦР достаточно точна и не требует длительного времени. Так, в мазке из носоглотки при помощи данного метода можно в течение 1-2 дней определить РНК вируса гриппа, поверхностные антигены — геммаглютинин и нейраминидаза, которые указывают непосредственно на тип вируса, а, следовательно, определяют тяжесть течения заболевания.

Так как вирус гриппа поражает дыхательные пути, вплоть до легких, что проявляется сложным течением пневмонии, для диагностики могут использовать в том числе мокроту. Основными рекомендациями для проведения исследования материала на факт наличия вируса гриппа являются сроки заболевания. Так, лучше проводить диагностику в первые 48-72 часа заболевания, когда вирус гриппа максимально размножается. Таким образом можно вовремя решить вопрос о необходимой терапии. Наиболее остро данный вопрос стоял, когда начали появляться случаи свиного гриппа, протекавшего даже с летальными исходами. Если прибегнуть к анализу уже получая терапию, ответ не будет ложным. Дело в том, что ПЦР определяет сам генетический материал возбудителя, при этом не важно, вирусная частица жива или погибла. На этом основывается цель исследования — выявить возбудителя заболевания. Но в качестве оценки эффективности проводимой терапии, мониторинга состояния, это исследование не может быть показательным, так как результат будет оставаться положительным в течение некоторого времени после подавления действия вируса, до тех пор, пока организм не очистится от погибших частиц вируса. Поэтому для комплексной оценки состояния пациента врач обычно использует несколько методов, включая общеклинические анализы, например общий анализ крови.

Показания к исследованию:

• Подозрение на вирусную инфекцию, протекающую с интоксикацией и поражением дыхательных путей, в том числе для исключения наличия свиного гриппа H1N1.
• Учитывая сложность течения заболевания, очень часто исключение гриппа требуется в случаях нейроинфекций, протекающих с поражением структур головного мозга.
Результаты исследования:
• Положительный. Такой результат говорит о том, что в организме есть вирус гриппа, но активен он или нет можно будет судить по клинической картине и общеклиническому обследованию. Конечно, в первые дни заболевания данное исследование наиболее информативно и позволяет правильно выбрать тактику лечения.
• Отрицательный результата исключает наличие вирусов гриппа типа А и В, включая вирус свиного гриппа H1N1. При этом исследование не определяет грипп типа С.

Подготовка

Мазок из носоглотки. Перед взятием мазка из носа очистить носовые ходы от слизи.
Мазок из ротоглотки. Натощак или через 4 часа после еды, (не полоскать рот, не пить).

Интерпретация результата

Результаты лабораторных исследований не являются единственным критерием, учитываемым лечащим врачом при постановке диагноза и назначении соответствующего лечения, и должны рассматриваться в комплексе с данными анамнеза и результатами других возможных обследований, включая инструментальные методы диагностики.
В медицинской компании «LabQuest» Вы можете получить персональную консультацию врача службы «Doctor Q» по результатам исследований во время приема или по телефону.

Источник