Анализ крови на вич новорожденному
Диагностика ВИЧ-инфекции у детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, затруднена в связи с тем, что в крови таких детей в течение длительного времени сохраняются материнские АТ к ВИЧ. На сегодняшний день разработаны эффективные методы профилактики вертикальной передачи ВИЧ: антиретровирусная терапия (АРВТ), которая проводится у матери во время беременности и родов и у ребенка в первые недели жизни; акушерские вмешательства, включая плановое кесарево сечение; отказ от грудного вскармливания. Там, где эти методы доступны и применяются, частоту передачи ВИЧ от матери ребенку удается снизить до 1–2%. Поскольку материнские АТ сохраняются в крови новорожденных детей в течение длительного времени, определение АТ позволяет снять диагноз ВИЧ-инфекции детям только в возрасте 15–18 месяцев с последующим подтверждением результата методом ИБ.
Проблема более ранней диагностики ВИЧ-инфекции у новорожденных детей за рубежом была решена несколько лет назад с появлением молекулярно-биологических методов, которые позволяют выявлять фрагменты генома ВИЧ в крови на ранних сроках инфицирования. Было показано, что у большинства инфицированных детей ДНК провируса ВИЧ может быть выявлена к первому месяцу жизни и практически у всех к шестому месяцу.
Показания к применению различных лабораторных исследований и особенности интерпретации результатов. Для ранней диагностики ВИЧ-инфекции у детей, рожденных от ВИЧинфицированных матерей, предпочтительно выявлять ДНК провируса ВИЧ в клетках крови. Не рекомендуется использовать выявление РНК ВИЧ, поскольку профилактическая АРВТ, проводимая во время беременности матери и после рождения ребенку, может существенно снизить репликацию вируса, что приведет к снижению концентрации РНК ВИЧ и повысит вероятность получения ложноотрицательного результата при обследовании ребенка. Для определения ДНК провируса ВИЧ используют методики, основанные на АНК (в подавляющем большинстве случаев – ПЦР).
Обследование ребенка, рожденного от ВИЧ-инфицированной матери, для выявления ДНК провируса ВИЧ желательно проводить в возрасте:
- до 48 ч жизни;
- 1–2 мес;
- 3–6 мес.
Положительный результат наличия ДНК провируса ВИЧ должен быть подтвержден, для повторного анализа следует использовать дополнительный образец крови, полученный в более поздние сроки по сравнению с предыдущим образцом.
Получение положительных результатов выявления ДНК ВИЧ в двух отдельно взятых образцах крови у ребенка старше одного месяца является лабораторным подтверждением диагноза ВИЧ-инфекции.
Получение двух отрицательных результатов выявления ДНК провируса ВИЧ у ребенка в возрасте старше 4–6 месяцев (при отсутствии грудного вскармливания) свидетельствует против наличия у ребенка ВИЧ-инфекции, однако снятие ребенка с диспансерного учета по поводу интранатального и перинатального контакта по ВИЧ-инфекции может производиться в возрасте старше 1 года при одновременном наличии следующих условий:
- два отрицательных результата исследования обнаружения ДНК провируса ВИЧ методом ПЦР, один из которых выполнен в возрасте 4 месяца или старше;
- два и более отрицательных результата исследования обнаружения антител к ВИЧ методом ИФА, выполненных в возрасте 12 месяцев или старше;
- отсутствие гипогаммаглобулинемии на момент исследования крови на наличие антител к ВИЧ;
- отсутствие клинических проявлений ВИЧ-инфекции.
Показания к обследованию для обнаружения ДНК провируса ВИЧ
- Ранняя лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции у детей, рожденных от ВИЧинфицированных матерей;
- разрешение сомнительных результатов иммунного блота;
- выявление ВИЧ-инфекции у лиц с подозрением на недавнее инфицирование.
Источник
Диагностика ВИЧ-инфекции у детей затруднена из-за присутствия пассивно приобретенных антител матери, которые могут пер-систировать до 18 месяцев жизни. Ранняя диагностика возможна при помощи культуры вируса, полимеразной цепной реакции (ПЦР), определения антигена р24. Культура ВИЧ является точным методом диагностики, который занимает много времени, является дорогим и требует наличия специализированных лабораторий. Использование ELISA с целью определения антигена р24 является наиболее распространенным антигенным тестом. Поли-меразная цепная реакция (ПЦР) является методом амплификации последовательности ДНК к неклеточной системе. Техника чувствительна и играет особое значение при исследовании детей, рожденных от ВИЧ-сероположительных матерей, при неинформативности серологической диагностики в определении статуса инфекции. Чувствительность ПЦР в первые дни жизни составляет около 40% с дальнейшим быстрым возрастанием до 100% к первому месяцу жизни.
Сразу после рождения ребенка набирается пуповинная кровь для выявления антител к ВИЧ.
Антитела к ВИЧ определяются как у больных, так и у здоровых детей, рожденных ВИЧ-инфицированными матерями, поскольку материнские антитела циркулируют в организме ребенка до 18 месяцев, в редких случаях — до 3-х лет.
Положительные серологические тесты у ребенка до 18 месяцев не подтверждают наличие у него ВИЧ-инфекции.
Два изолированных отрицательных серологических анализа в возрасте 6-18 месяцев или один отрицательный в возрасте старше 18 месяцев позволяют считать ребенка неинфицированным.
Согласно Закону Украины о СПИДе, все дети, имеющие антитела к ВИЧ, выявленные методом ИФА через 18 месяцев после рождения, считаются ВИЧ-инфицированными.
Обнаружение антигена р24 обозначает присутствие ВИЧ в крови. Если у ребенка при рождении выявляется антиген р24, то развитие раннего СПИДа в четыре раза более вероятно.
У детей первых недель жизни при исследовании ДНК ВИЧ методом ПЦРнаблюдается большое число ложноположительных ре-
————————————— Глава 5 ——————————————-
зультатов в связи с контаминацией материнской кровью, поэтому исследовать пуповинную кровь нецелесообразно.
Исследование в возрасте 48 часов позволяет выявить около 40% инфицированных младенцев. Если ребенок был инфицирован внутриутробно, то уже через 48 часов после рождения определяются положительные результаты. Если ребенок был инфицирован в родах, то в возрасте 48 часов результаты будут отрицательными, но станут положительными через одну неделю.
Наиболее оптимально первый раз определять наличие ДНК ВИЧ методом ПЦР у новорожденных детей на 14-й день жизни (чувствительность — 93%).
В возрасте 1-2 месяца детям от ВИЧ-инфицированных матерей, у которых первый анализ был отрицательным, следует повторить определение ВИЧ методом ПЦР (чувствительность — 96%).
Повторное тестирование в возрасте 3-6 месяцев (чувствительность — 100%) для детей, у которых получены отрицательные результаты теста при рождении и в 1-2месяца.
Дети от ВИЧ-инфицированных матерей находятся на диспансерном учете в СПИД-центре, где проводятся динамическое обследование с целью уточнения инфекционного статуса, наблюдение, направленное на максимально раннее выявление признаков ВИЧ-инфекции.
Профилактика вертикальной трансмиссии ВИЧ-инфекции
У ВИЧ-инфицированной женщины планировать беременность, вынашивать и рожать ребенка целесообразно, если уровень CD4+ лимфоцитов не менее 600 в 1 мкл крови.
Чем ниже уровень CD4+ лимфоцитов к началу беременности, тем хуже прогноз как для вертикальной трансмиссии ВИЧ, так и для прогрессирования ВИЧ-болезни. Если уровень CD4+ лимфоцитов ниже 200 в 1 мкл, т. е. болезнь перешла в стадию СПИДа, такую беременность целесообразно прервать, потому что ее вынашивание и последующие роды могут привести к смертельному исходу.
Для планирования беременности, ее вынашивания и рождения ребенка наиболее благоприятным является уровень «вирусной нагрузки» менее 10 000 копий при условии проведения антиретрови-русной терапии.
Антивирусное лечение снижает материнскую вирусную нагрузку и/или подавляет вирусную репликацию, что приводит к
————————————— Глава 5 ———————————————
снижению риска трансмиссии. Существует несколько схем анти-ретровирусной терапии (APT) с применением одного, двух, трех и более антиретровирусных препаратов. С целью профилактики вертикальной трансмиссии ВИЧ в нашей стране используется короткий курс APT.
Зидовудин (ретровир, азидотимедин) назначается перорально, начиная с 28 недель беременности, по 300 мг 2 раза в день; во время родов — по 300 мг каждые 3 часа до окончания родов.
Для профилактики перинатальной трансмиссии ВИЧ в родах используется также невирапин (вирамун) — с началом родовой деятельности 200 мг однократно или за 4-6 часов до предполагаемой операции кесарева сечения. Если у женщины в течение одного часа после приема невирапина возникла рвота, то препарат дают повторно.
Новорожденные получают зидовудин (ретровир) внутрь в виде сиропа — 4 мг/кг веса каждые 12 часов на протяжении 7 суток и однократно одну дозу вирамуна на 2 мг/кг массы тела между 48 и 72 часами жизни. Если мать получила препарат менее чем за один час до рождения ребенка, новорожденному необходимо назначить вирамун дважды в дозе 2 мг/кг как можно раньше после рождения и в сроки между 48 и 72 часами, а также сироп ретровира в дозе 4 мг/кг веса каждые 12 часов на протяжении 4-х недель.
Наряду с применением антиретровирусной терапии необходимо соблюдать следующие принципы рационального ведения родов у ВИЧ-инфицированных женщин:
— не проводить амниотомии, если роды протекают без осложнений;
— избегать длительного безводного периода (более 4-х часов);
— избегать любой процедуры, повышающей возможность контакта плода с кровью матери (инвазивный мониторинг, эпизиото-мия, наложение акушерских щипцов);
— нежелательно проводить родовозбуждение и родостимуля-
цию;
— проводить санацию родовых путей (2% -ный раствор хлоргек-сидина каждые два часа);
— тщательно аспирировать содержимое полости рта, носа, желудка новорожденного, чтобы снизить риск заглатывания и всасывания ВИЧ-инфицированных материнских жидкостей;
— новорожденного желательно вымыть в дезинфицирующем
или мыльном растворе, избегать повреждения кожи и слизистых;
————————————— Глава 5——————————————- ——
— ребенка не выкладывают на грудь матери и не кормят материнским молоком. Необходимо объяснить матери о риске заражения ребенка ВИЧ при грудном вскармливании.
Рекомендуется проводить кесарево сечение у ВИЧ-инфицированных при наличии акушерских показаний, а не с целью снижения риска интранатальной трансмиссии, учитывая наличие иммунодефицита, высокого риска послеродовых гнойно-септических заболеваний.
Согласно данным некоторых авторов, плановое кесарево сечение снижает риск трансмиссии от матери к ребенку (вследствие уменьшения взаимодействия с зараженной кровью или выделениями шейки матки) более чем на 50% после введения антиретровирус-ной терапии, учета ожидаемого веса ребенка и статуса материнской инфекции. Как следует из данных рандомизированного исследования и метанализа, не существует достаточных подтверждений для рекомендации планового кесарева сечения для ВИЧ-инфицированных женщин в случаях, когда это является небезопасным.
Совместное пребывание матери и новорожденного после родов не противопоказано, мать может и должна ухаживать за своим ребенком, однако грудное вскармливание категорически противопоказано!
Выводы
1.Современную ситуацию с ВИЧ-инфекцией в мире можно охарактеризовать как пандемическую и поставить в один ряд с двумя мировыми войнами как по числу унесенных жизней, так и по тому ущербу, который эта инфекция наносит обществу.
2. В последние годы изменился механизм передачи ВИЧ-инфекции. Если в начале эпидемии преобладал парентеральный (в 1987 году — 85,0%), то в 2004 году на первое место вышел половой (53,0%).
3. Наблюдается увеличение темпов роста распространения ВИЧ-инфекции среди беременных женщин и детей раннего возраста, что вызывает особую тревогу у врачей акушеров-гинекологов и педиатров и требует принятия неотложных мер для профилактики вертикальной трансмиссии ВИЧ-инфекции.
4. У ВИЧ-инфицированной женщины планировать беремен
ность, вынашивать и рожать ребенка целесообразно, если уровень
CD4+ лимфоцитов не менее 600 в 1 мкл крови.
————————————— Глава 5 ———————————————
5. Если уровень CD4+ лимфоцитов ниже 200 в 1 мкл (т. е. болезнь перешла в стадию СПИДа) такую беременность целесообразно прервать, поскольку ее вынашивание и последующие роды могут привести к смертельному исходу.
6. Установлено, что внутриутробное инфицирование ВИЧ может произойти в любом триместре беременности, в родах и в послеродовом периоде.
7. Применение антиретровирусной терапии значительно снижает риск инфицирования детей ВИЧ. Так, по данным Донецкого областного центра по профилактике и борьбе со СПИДом, в Донецкой области на фоне проведения антиретровирусной терапии вертикальная транссмиссия ВИЧ снизилась с 25,6% в 2000 году до 8,4% в 2004 году.
8. Так как роды рассматриваются как период высокого риска вертикальной трансмиссии ВИЧ от матери ребенку, большое внимание уделяется акушерской тактике.
9. Частота передачи ребенку вируса при грудном вскармливании составляет 12-20%, поэтому грудное вскармливание категорически противопоказано!
5.9 ЭНТЕРОВИРУСЫ
Энтеровирусы широко распространены и обычно вызывают бессимптомные инфекции. Различают около 70 различных сероваров энтеровирусов. Многие из них вызывают всевозможные заболевания у людей: от тяжелых и длительных параличей до неспецифических незначительных лихорадок. Но общим проявлением для всех серотипов является субклиническая инфекция. Энтеровирусы могут поражать разные органы-мишени, а симптомы и признаки инфекции варьируют в зависимости от того, какой именно орган поражен. Так, полиовирусы поражают клетки головного мозга, многие другие энтеровирусы — мозговые оболочки, а вирусы Кок-саки группы В воздействуют на сердечную мышцу.
В странах с умеренным климатом энтеровирусные инфекции чаще являются причиной заболеваний летом и осенью; в тропических и субтропических районах они распространены в течение всего года.
Вспышки, вызываемые вирусами определенного типа, имеют циклический характер распространения. У одних — цикл длится 3-4 года, у других — 8 лет и более, причем ежегодно преобладают три или четыре типа энтеровирусов. Частота вторичных инфекций
————————————— Глава 5 ——————————————-
для лиц, проживающих в одном доме, может составлять 40-70%. В 2/3 случаев вирус выделяется в культуре у детей моложе 9 лет.
Риск заражения беременной зависит от предшествующего состояния иммунитета, времени года и массивности контакта с детьми младшего возраста. При беременности возможно трансплацентарное инфицирование плода, но значительно чаще инфицирование происходит при рождении или вскоре после него. Следует отметить, что источником заражения для новорожденного может быть не только мать, но и другие инфицированные младенцы. Передача энтеровирусных инфекций может осуществляться через руки сестринского или другого персонала, ухаживающего за детьми.
Частота развития энтеровирусной инфекции у новорожденных варьирует в зависимости от популяции, времени года и риска воздействия инфекции у матери и лиц, ухаживающих за ребенком. Результат зависит от вирулентности конкретного циркулирующего серотипа, способа передачи инфекции и наличия или отсутствия пассивно передаваемых материнских антител.
Этиология
Энтеровирусы — это небольшие двадцатигранные однонитчатые РНК-вирусы без оболочки, которые относятся к группе Picorno-viruses. В настоящее время энтеровирусы разделены на 4 класса:
1 — полиовирусы;
2 — вирус Коксаки А и В;
3 — вирус ECHO;
4 — энтеровирусы типов 68-71.
Энтеровирусы погибают при высушивании и при нагревании до 50 °С или выше, при воздействии химических соединений, таких как формальдегид и гипохлорид и при ультрафиолетовом облучении. При комнатной температуре эти микроорганизмы выживают в течение нескольких дней, при охлаждении — на протяжении нескольких недель, а при температуре 70 °С — в течение нескольких лет.
Вирус распространяется фекально-оральным и капельным путем при кашле и чиханье. Инкубационный период обычно составляет от 2 до 10 дней.
Вирус реплицируется в лимфоидной ткани верхних дыхательных путей и ЖКТ с последующей «малой виремией». Большинство случаев заканчивается субклинической инфекцией и прекращением репликации вируса. Однако у меньшинства инфицированных людей продолжается дальнейшая репликация вируса и развивает-
————————————— Глава 5 ———————————————
ся «большая виремия». Затем инфицируются органы-мишени (головной и спинной мозг, мозговые оболочки, сердце, эндотелий сосудов, печень, поджелудочная железа, половые железы, легкие, кожа).
У пациента может развиться неспецифическая лихорадка или один из клинических синдромов, связанных с энтеровирусным поражением. Симптоматика зависит от прямого литического действия вируса, вторичные последствия инфекции иммунологически обусловлены.
Клинические проявления
Энтеровирусные инфекции в 50-80% случаев протекают бессимптомно, в остальных случаях — в виде слабовыраженного лихорадочного состояния в сочетании с сыпью или респираторными симптомами. У некоторых пациентов наблюдаются кратковременные жалобы на лихорадку и абдоминальные боли, которые локализуются в околопупковой зоне и носят схваткообразный характер. В небольшом проценте случаев развиваются более тяжелые заболевания, такие как асептический менингит, миокардит, перикардит или боли в межреберных мышцах.
Для большинства энтеровирусных инфекций у беременных женщин клиническая картина сходна с таковой, наблюдаемой у других категорий взрослых, с возможным развитием менингоэнце-фалита, миокардита или полиомиелита.
Врожденная инфекция
Внастоящее время нет точных данных о формировании врожденных пороков развития плода в результате материнской энтеро-вирусной инфекции, но этот вопрос все еще вызывает споры. Трансплацентарная передача вируса плоду наблюдается редко и возможна только при наличии у беременной женщины стадии «большой виремии».
Внутриутробное инфицирование вирусами Коксаки А и В может быть причиной аборта, рождения маловесных детей и мерт-ворождения. Инфицирование ЕСНО-вирусом во время беременности не связано с самопроизвольными абортами, врожденными пороками или преждевременными родами, тем не менее они могут быть причиной антенатальной гибели плода в поздние сроки беременности.
————————————— Глава 5 ——————————————-
Источник