Анализ крови на стерильность инвитро

В норме кровь является стерильной средой. Это обеспечивается за счет специальных клеток иммунной защиты. Но в некоторых случаях в кровь могут проникать бактерии, вызывая ухудшение общего состояния организма. В связи с этим врач может назначить анализ крови на стерильность.

Что это за исследование, зачем оно нужно?

Посев крови на стерильность является специальным методом диагностики, который позволяет определить присутствие различных микроорганизмов в крови для установления точного диагноза. Попадание бактерий в кровь возможно при различных хирургических вмешательствах, травмах кожных покровов и слизистых оболочек, а также в результате развития внутреннего очага инфекции.

Благодаря иммунитету организм способен уничтожать чужеродные агенты, однако в некоторых случаях, возможно, их размножение в кровеносном русле. Специальный посев поможет определить патогенность микрофлоры и предупредить развитие септических состояний.

Показания

Сдавать кровь на стерильность необходимо в следующих ситуациях:

• Заболевания, невыясненной этиологии, с частыми подъемами температуры до высоких значений (выше 38°C).
• Состояния, связанные с понижением температуры тела ниже 36°C).
• Пациенты после обширных хирургических вмешательств, особенно с сердечно-сосудистыми патологиями.
• Лица, имеющие искусственные клапаны в сердце.
• Пациенты, использующие катетеры длительное время.
• Значительное увеличение количества лейкоцитов в общем анализе крови.
• Диагностика острых инфекционно-воспалительных заболеваний, таких как остеомиелит, эндокардит, артрит, а также пневмония различной степени тяжести.

При резких перепадах температуры тела в течение 2 и более дней, необходимо обратиться к специалисту для диагностики и выявления причины такого состояния.

Что показывает тест, и какие заболевания выявляет?

Рассмотрим, что определяет этот анализ. Наличие бактерий в крови может быть временным, либо постоянным. Данное микробиологическое исследование показывает наличие или отсутствие микроорганизмов в кровяном русле.

Бактериемия бывает трех видов:

1. Транзиторная или временная. Бактерии попадают в кровь на короткое время, после чего подавляются иммунной защитой организма. Данное явление не вызывает ухудшений общего состояния.
2. Интермиттирующая появляется при наличии очагов инфекции в виде абсцесса, пневмонии или хронических воспалительных процессов в период обострения.
3. Продолжающаяся бактериемия, проявляющаяся распространением и размножением микроорганизмов в сосудах.

Благодаря посеву крови на стерильность можно выявить очаги инфекции в организме, с последующим выделением конкретного возбудителя и его чувствительности к антибиотикам. Данное исследование поможет диагностировать такие заболевания как:

• Воспаление легких различной степени тяжести.
• Остеомиелит – инфекционно-воспалительное заболевание костных тканей.
• Заболевания, вызываемые золотистым стафилококком, синегнойной палочкой.
• Менингит, менингококкоцемия.
• Воспалительные процессы в почках – пиелонефрит, гломерулонефрит.
• Инфекции клапанов сердца – эндокардит.
• Туберкулез.
• Гнойные поражения кожи, пиодермию.
• Инфекционные поражения соединительных тканей – артрит.

Такое исследование особенно важно для пациентов с иммунодефицитными состояниями, такими как ВИЧ-инфекция, для ранней диагностики и лечения. Так как организм таких людей не способен сопротивляться различным микроорганизмам.

Правила подготовки

Посев проводят в период обострения заболевания, повышения температуры тела. Однако кровь необходимо брать до начала терапии антибиотиками, иначе результаты анализа будут неверными. Перед тем как брать кровь необходимо правильно подготовиться к исследованию:

1. За 3 дня до анализа крови из рациона питания исключаются жирные и острые блюда.
2. За 4-5 дней запрещается употребление алкогольных напитков.
3. Принимать пищу можно за 6-8 часов до исследования, так как процедура проводится натощак.
4. Не следует курить за 4 часа до сдачи крови.

В зависимости от заболевания существует несколько особенностей взятия крови:

• При острых инфекционно-воспалительных заболеваниях пробы берут из двух разных сосудов.
• Если причина лихорадки не выявлена, то необходимо взять для начала 2 пробы, а затем повторить процедуру через 1-1,5 суток.
• В случае подозрения на сепсис требуется 2 пробы в первые часы увеличения температуры, а затем на второй день берут 3 пробы.
• Пациенты, получающие антибиотикотерапию должны сдать 6 проб в течение двух дней, при этом кровь берут перед введением антибиотика.

Как берется анализ: алгоритм проведения процедуры

Для получения достоверных результатов необходимо соблюдать определенные правила при заборе крови.

Как правильно взять у взрослого?

Рассмотрим алгоритм взятия крови у взрослого человека. Для проведения анализа требуется кровь, полученная из вены. Процедура проводится медсестрой, которая обязательно надевает стерильные перчатки. Перед этим участок кожи в месте инъекции обрабатывают 70% раствором спирта, после чего протирают 1-2% раствором йода в течение 30 секунд. Далее ждут полного высыхания дезинфицирующего средства. После чего прикасаться к коже пальцами для пальпации вены запрещено.

Стерильным шприцем производят забор крови в объеме 10 мл. Если процедура проводится с флаконами с двойной средой, то флакон открывают над пламенем спиртовки. Иглу снимают с шприца и выливают кровь во флакон. Края флакона обжигают огнем и закрывают пробкой.

Биоматериал необходимо доставить в лабораторию как можно быстрее.

Особенности забора биоматериала у новорожденного ребенка

Забор крови у новорожденного будет отличаться от способа проведения у взрослого человека, в связи с анатомическими особенностями строения детского организма:

1. Кровь берут в меньшем объеме – всего 5 мл.
2. Для этого используют вакуумные пробирки и специальные иглы-бабочки.
3. Для снижения болевых ощущений применяют автоматические ланцеты и микропробирки.
4. Место инъекции обычно пяточная область.
5. Обработку кожи проводят аналогично взрослым, но без использования раствора йода.

Методика проведения

Алгоритм проведения бак посева заключается в следующем:

1. Полученный биоматериал наносят на специальную питательную среду и помещают в термостат для поддержания постоянной температуры 37 °С.
2. Наблюдения проводят в течение 8 дней, ежедневно отмечая рост микроорганизмов, либо его отсутствие. Через несколько дней на питательной среде можно увидеть появление колоний микроорганизмов невооруженным глазом.
3. После выделения культуры бактерий, их высевают на другую чашку с питательной средой и по контуру раскладывают специальные диски, смоченные растворами антибиотиков. Это проводится для определения чувствительности к определенным группам препаратов и назначения специфического лечения в дальнейшем.
4. На основе изменений и роста микроорганизмов на 9 день дают заключение, которое будет являться результатом анализа.

Длительность проведения может составлять до 14 дней, что является единственным недостатком данной процедуры.

Расшифровка результатов

Изменения на питательной среде, либо их отсутствие интерпретируются для выяснения результатов посева.

Макроскопически возможны следующие проявления:

• Гемолиз характерен для клостридий, стерптококков, листерий и стафилококков.
• Помутнение специфично для аэробных грамотрицательных палочек, а также стафилококков.
• Появление пузырьков газа в питательной среде свидетельствует о наличии анаэробов и грамотрицательных палочек.
• Образование пленки на поверхности субстрата происходит в результате деятельности дрожжевых клеток, бацилл и псевдомонад.
• Появление хлопьев является специфичным для золотистого стафилококка.

Результаты посева выдаются бактериологической лабораторией каждые два три дня и считаются промежуточными. Окончательное заключение делается на 9-10 день наблюдений. Итоги посевов разделяют на 3 основные группы:

1. Отсутствие роста микроорганизмов.
2. Рост монокультуры, при этом выделяют только одну бактерию в чистом виде.
3. Смешанный рост, вследствие которого получают два и более различных видов бактерий.

Отрицательный результат не всегда связан с отсутствием микроорганизмов. Такой итог анализа называется ложноотрицательным, так как может быть вызван рядом причин:

• Антибиотикотерапия, проводимая во время взятия образцов крови привела к угнетению роста бактерий.
• Недостаточное количество биоматериала на питательной среде.
• Неправильно выбранное время для взятия крови, в связи с чем была упущена интермиттирующая форма бактериемии.
• Инфекционный процесс в организме носит локализованный характер и подавляется иммунными силами.
• Короткий инкубационный период для выделения редких видов бактерий, обладающих медленными способностями к росту.

Возможно получение ложноположительных результатов посева. Это связанно с выделением культуры условно-патогенных бактерий. Такие микроорганизмы могли попасть на питательную среду из-за бактериального загрязнения, нарушения дезинфекции области инъекции, а также правил перевозки биоматериалов. В таких ситуациях кровь на исследование берут повторно.

При получении роста культур микроорганизмов бактериологическая лаборатория обязательно проводит исследование по определению чувствительности данных бактерий к антибиотикам.

Получение положительных результатов посева возможно при росте монокультур или смешанного типа. При этом учитывают скорость и массивность роста микроорганизмов. Такие результаты свидетельствуют о начальной стадии сепсиса.

Результат с показателями стерильности менее 100% является положительным и требует немедленного лечения.

Где сдать анализ и какова цена?

При назначении анализа крови на стерильность можно обратиться в любую клинико-диагностическую лабораторию (КДЛ), занимающуюся данными исследованиями. К числу таких заведений относятся Ситилаб, Инвитро и Гемотест. Для этого необходимо заранее уточнить часы взятия биоматериалов на данное исследование и правила подготовки.

• В Инвитро анализ крови на стерильность проводится в среднем за 1210 рублей без учета цены за взятие крови, результаты теста выдаются через 8 дней.
• Ситилаб предлагает исследование крови на стерильность за 1200 рублей, длительность исследований составляет 9 дней с момента сдачи.
• Гемотест проводит данные исследования в течение 6-7 дней, цена процедуры составляет 610 рублей.

Посев крови на стерильность проводится с диагностическими целями для выделения специфического возбудителя, а также постановки окончательного диагноза.

Благодаря данному исследованию возможно предупреждение тяжелых осложнений и выявление сепсиса на начальных стадиях. Это позволяет подобрать грамотную антибиотикотерапию и эффективнее воздействовать на патогенные микроорганизмы. Стоит помнить, что данное исследование проводится по назначению врача и требует специальной подготовки.

Полезное видео

Рекомендуем посмотреть видео о том, что такое анализ крови на стерильность и как правильно его сдавать:

Интерпретация результатов

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Ограничение метода

При исследовании биологических жидкостей (семенной, плевральной, перитонеальной, эякулята и др.) основной целью исследования является выявление бактерий. Из-за того, что в большинстве случаев данные виды материала бедны по клеточному составу, мазки на стекле плохо держатся и фиксируются, в процессе окраски возможна потеря части мазка, что приводит к малой информативности описания клеточного состава.

ВНИМАНИЕ: данный вид микроскопического исследования не заменяет общеклинический анализ, основной целью которого является микроскопическое исследование клеточного состава, проводимое строго в жидком (нативном) материале.

При просмотре мазка обращается внимание на:

• наличие и вид эпителиальных клеток, присутствующих в мазке;
• наличие клеточного детрита и слизи; 
• количество лейкоцитов, определяемых в одном поле зрения; 
• наличие определенных морфологических типов (морфотипов) бактерий и элементов грибов, их отношение к красителям (при окраске по Граму), а также на их относительное количество.

Типы бактерий, которые могут встретиться в мазках:

• грамположительные и грамотрицательные кокки, расположенные вне- и внутриклеточно, парами, группами, цепочками;
• грамотрицательные колиформные бактерии;
• лактоморфотипы (тип лактобактерий);
• морфотипы дифтероидов или коринебактерий;
• морфотипы строгих анаэробных бактерий (мобилункус, пептострептококки, фузобактерии, бактероиды)

Интерпретация микроспической картины мазков:

• оценивается общее количество материала на стекле.
• оценивается состояние эпителия, присутствие ключевых клеток. Количество эпителиальных клеток не учитывается, т. к. не имеет диагностической значимости (справедливо для гинекологических мазков).

Оценка лейкоцитарной реакции:

• лейкоциты отсутствуют, ед. в п/зр.;
• до 10 в п/зр. — небольшое количество;
• 10 — 15 в п/зр. — умеренное количество;
• 30 — 50 в п/зр. и более — большое количество;
• умеренное и большое количество оцениваются как этиологически значимые для воспалительной реакции.

Количественная оценка микрофлоры:

• + или до 10 в п/зр. незначительное/скудное количество;
• ++ или 11 — 100 в п/зр. умеренное количество;
• +++ или 100 — 1000 в п/зр. большое количество/значительное;
• ++++ или более 1000 в п/зр. массивное количество.

Посев рекомендован:

• в случае умеренной и большой лейкоцитарной реакции при отсутствии в мазке микробов (т. к. микроскопический метод имеет нижний предел выявляемости > 105 КОЕ/мл, а патогенные потенции условно-патогенных микроорганизмов могут проявляться в небольшом количестве (на уровне 104 — 105 КОЕ/мл); 
• в случае если морфотипы УПМ обнаруживаются при микроскопии даже как единичные в поле зрения для определения рода и вида микроорганизма, постановки чувствительности к антибиотикам и оценки количества для выявления этиологической значимости; 
• для дифференцированной диагностики лактобацилл, клостридий, эубактерий, пропионобактерий и др., т. к. они представлены единым морфотипом; 
• для определения вида грибов и определения их чувствительности к антимикотическим препаратам; 
• в случае бактериального вагиноза, если он сочетается с неспецифическим воспалительным процессом, сопровождаемым умеренно выраженной лейкоцитарной реакцией.

Посев не рекомендован (или не обязателен):

• в случае бактериального вагиноза, если он не сочетается с УПМ; 
• в случае цитолитического вагиноза; 
• в случае промежуточной формы микроценоза; 
• в случае вагинальной атрофии.

Интерпретация результатов

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Достаточного количества данных о защитных свойствах и длительности персистирования (функционирования) разных видов иммунных антител после инфицирования вирусом SARS-CoV-2 пока не накоплено. Результаты исследований не предназначены для самостоятельной интерпретации пациентом и не могут служить единственным основанием для постановки диагноза. Интерпретация результатов исследования антител к SARS-CoV-2 осуществляется врачом в комплексе с клинической картиной, результатами других видов исследований и в контексте эпидемиологической ситуации, они не могут служить единственным основанием для постановки диагноза. Диагноз COVID-19 устанавливается лечащим врачом на основании клинического обследования, эпидемиологического анамнеза и результатов лабораторных исследований. Наличие специфических IgM к SARS-CoV-2 при отрицательных результатах исследования специфических IgG к SARS-CoV-2 может свидетельствовать о подострой фазе инфекции COVID-19, при этом не предоставляя информации о том, есть или нет у пациента клинические проявления инфекции, является ли он потенциальным распространителем вируса или нет. Наличие специфических IgG к SARS-CoV-2, в отсутствие признаков заболевания и при отрицательных результатах исследования вирусной РНК (методом ПЦР) в биоматериале из верхних дыхательных путей, вне зависимости от наличия специфических IgM к SARS-CoV-2, может быть свидетельством того, что пациент контактировал с SARS-CoV-2, что привело к выработке обнаруженных антител, и вероятность его заражения ниже, чем у пациентов, у которых антитела IgG к SARS-CoV-2 не определяются. 

Результат: IgM-положительный и IgG-отрицательный 

Может свидетельствовать о подострой фазе инфекции COVID-19, не предоставляя информации о наличии или отсутствии у пациента клинических проявлений инфекции, является ли он потенциальным распространителем вируса или нет. 

Рекомендовано: 

Наличие специфических IgM к SARS-CoV-2 в отсутствие IgG, признаков заболевания и при отрицательном результате исследования вирусной РНК (методом ПЦР) в биоматериале из верхних дыхательных путей может свидетельствовать о поздней подострой фазе инфекции COVID-19.

Рекомендовано: 

Наличие специфических IgM к SARS-CoV-2 в отсутствие IgG, признаков заболевания при положительном результате исследования вирусной РНК (методом ПЦР) в биоматериале из верхних дыхательных путей может свидетельствовать о подострой фазе инфекции COVID-19 с выделением вируса и возможностью стать источником потенциального заражения. 

Рекомендовано: 

Результат: IgM-отрицательный и IgG-положительный 

Положительный тест на IgG свидетельствует о факте контакта в прошлом с вирусом SARS-CoV-2 с формированием специфического иммунного ответа. Предполагается, что вероятность повторного заражения в данном случае существенно ниже, чем у пациентов с отрицательным результатом. Однако возможность подтверждения наличия устойчивого иммунитета к вирусу SARS-CoV-2 данным тестом в настоящее время не доказана. 

Вероятность выделения вируса с потенциальной возможностью заражения окружающих минимальная. Дополнительного обследования при отсутствии особых текущих показаний (в т. ч. наличие клинической симптоматики, факторов высокого эпидемиологического риска) или же при факте перенесенной в прошлом инфекции COVID-19 обычно не требуется. 

Рекомендуется продолжать соблюдение социального дистанцирования и использование средств индивидуальной защиты, так как на сегодняшний день не накоплено достаточно данных, позволяющих полностью исключить возможность повторного заражения. 

Результат: IgM-положительный и IgG-положительный 

Данное сочетание может свидетельствовать о факте инфицирования в прошлом вирусом SARS-CoV-2 с формированием специфического иммунного ответа. Вероятность повторного заражения в данном случае в существенно ниже, чем у пациентов с отрицательным результатом. 

Вероятность выделения вируса с потенциальной возможностью заражения окружающих минимальная. Дополнительного обследования при отсутствии особых текущих показаний (в т. ч. наличие клинической симптоматики, факторов высокого эпидемиологического риска) или же при факте перенесенной в прошлом инфекции COVID-19 обычно не требуется. 

Рекомендуется продолжать соблюдение социального дистанцирования и использование средств индивидуальной защиты, так как на сегодняшний день не накоплено достаточно данных, позволяющих полностью исключить возможность повторного заражения. 

Результат: IgM-отрицательный и IgG-отрицательный 

Нет данных, указывающих на контакт организма с вирусом SARS-CoV-2 с выработкой специфического антительного иммунного ответа. 

Рекомендовано: 

В качественных тестах результат представлен в виде индекса (коэффициент позитивности – КП, иногда называют индекс позитивности), отражающего отношение результата в пробе пациента к пороговому значению. Его получают делением результата измерения в пробе пациента к порогу. То есть, если результат пациента равен пороговому значению, КП=1, выше 1 – положительный, ниже 1 – отрицательный. Иногда выделают сомнительную околопороговую зону, например, индекс 0,8-1,0 – сомнительно. Чем выше КП, тем ориентировочно больше антител. Но качественные тесты не позволяют сделать вывод, что при КП=10 уровень антител обязательно в 2 раза больше, чем при КП=5.