Анализ крови на совпадение супругов по hla системе

Роль системы тканевой совместимости человека

Система биологической (тканевой) совместимости человека (HLA) II класса выполняет в организме ряд важных защитных функций:

-иммунный ответ на внедрение инфекции;
-удаление из организма опухолевых клеток;
-развитие приобретенного иммунитета.

Термин «HLA» (Human Leukocyte Antigen) используется в связи с тем, что все антигены (белки) этой системы расположены на поверхности лейкоцитов. За работу HLA отвечают три гена, локализованные на коротком плече 6-й хромосомы: DRB1, DQA1, DQB1. Каждый ген представлен двумя вариантами (аллелями), унаследованными от родителей: один – от папы, другой – от мамы. В генах закодированы определенные признаки. Если аллели разные (гетерозигота), то проявляется «сильный» (доминантный) признак, если одинаковые (гомозигота) — «слабый» (рецессивный). Имеется чрезвычайное разнообразие (около 3000) аллелей генов HLA.

Предрасположенность к аутоиммунным заболеваниям

Как мы уже сказали, система гистосовместимости HLA отвечает за иммунный ответ. Обратной стороной ее работы могут стать аутоиммунные процессы – синтез защитных антител на собственные клетки и их разрушение.

В настоящее время установлена причастность определенных вариантов HLA-генов класса II к развитию таких аутоиммунных заболеваний, как сахарный диабет (СД) 1 типа, ревматоидный артрит, болезнь Крона, язвенный колит, системная красная волчанка, аутоиммунный гепатит, атопический дерматит, аутоиммунный тиреоидит и пр.

Одними из первых проявлений аутоиммунных расстройств могут стать бесплодие и невынашивание беременности из-за поражения собственными антителами различных антигенов репродуктивной и эндокринной систем: яйцеклеток, сперматозоидов, половых гормонов и пр.

Биологическая совместимость и имплантация зародыша

Система гистосовместимости, даже при отсутствии аутоиммунных заболеваний, влияет на зачатие, имплантацию (внедрение эмбриона) и течение беременности. Зародыш, образующийся после слияния мужской и женской половых клеток, имеет на своей поверхности специальные белки – антигены. Для нормальной имплантации очень важна их «чужеродность». Появление «белков-незнакомцев» эмбриона запускает в организме матери особые иммунные реакции, направленные на сохранение беременности: блокируются специальные NK-клетки-киллеры (убийцы), которые могут спровоцировать выкидыш.

Необходимая «чужеродность» антигенов может возникнуть у эмбриона лишь в том случае, если HLA-гены матери и отца отличаются друг от друга. Совпадение некоторых аллелей HLA-генов (полное совпадение бывает у близких родственников) ведет к появлению HLA-гомозиготного плода, что является неблагоприятным фактором для нормального течения беременности.

HLA-гены и невынашивание беременности

В последнее время установлено: чем больше у супружеской пары совпадений по аллелям HLA-генов, тем выше вероятность прерывания беременности. Треть супружеских пар с привычным невынашиванием имеют 2-3 совпадения. При наличии 4-х и более идентичных аллелей повторные выкидыши и неудачные попытки ЭКО случаются у большинства пар.

Большое число совпадающих антигенов HLA II класса приводит к отсутствию достаточного иммунного ответа у матери. Эмбрион не распознается как плод, а воспринимается как скопление собственных измененных клеток, против которых иммунная система начинает работать на уничтожение.

Это вызывает некроз в плодовых оболочках и раннее прерывание беременности. Таким образом, несовпадение супругов по HLA-антигенам и отличие антигенов зародыша от материнских HLA-белков являются необходимыми для сохранения беременности факторами.

Важное значение для вынашивания имеет не только число совпадений, но и набор аллей у каждого из супругов. Так, в парах с тремя и более выкидышами выявлено увеличение числа некоторых аллелей: у женщин – DQB1 0301, 0501, 0602; у мужчин – DRB1 10, 12; DQA1 0102, DQA1 0301, 0102; DQB1 0501, 0602. Также при повторных выкидышах снижается частота встречаемости аллелей DRB1 03 и DQB1 0303 как у женщин, так и у мужчин, что говорит об их защитном эффекте на течение беременности.

Кроме того, установлено, что определенные аллели могут нарушать процесс сперматогенеза у мужчин и влиять на качество половых клеток, что впоследствии сказывается на полноценности эмбриона.

Обследование на HLA-совместимость

Исследование HLA-совместимости не входит в алгоритм первичного обследования бесплодных пар. Его рекомендуют проводить лишь у супругов с привычным невынашиванием беременности, а также после 2-х и более неудачных попыток ЭКО.

Биологическая несовместимость партнеров по генам HLA класса II может быть констатирована, если у обследуемых выявлено большое число совпадений (четыре и более – из шести возможных) по генам DRB1, DQA1, DQB1.

При подозрении на гистонесовместимость партнеров, помимо генотипирования, выполняются следующие иммунологические методы обследования будущей мамы:

-анализ состава лимфоцитов в крови;
-оценка интерферонового статуса;
-определение блокирующих свойств женской сыворотки (БФ);
-концентрация антиотцовских антилейкоцитарных антител (АОАТ);
-уровень аутоантител (антифосфолипидных антител, волчаночного антикоагулянта);
-содержание антител к хорионическому гонадотропину;
-определение чувствительности к иммуномодуляторам.

У женщин с бесплодием и привычным невынашиванием может быть повышен уровень NK-клеток (киллеров), сывороточного интерферона, а также снижены: интерфероновая реакции лейкоцитов и содержание БФ и АОАТ.

Однако стоит заметить, что процессы иммунной регуляции репродуктивного здоровья являются сложными и недостаточно изученными, а роль HLA-антигенов до сих пор признается не всеми специалистами.

Кроме того, помимо системы HLA, имеются и другие факторы, влияющие на течение беременности: тромбофилии, нарушение фолатного обмена, гипергомоцистеинемия, хромосомные аномалий плода и пр. Анализы на их выявление также необходимо включать в алгоритм обследования при невынашивании беременности.

«Прививка» лимфоцитами мужа

На сегодняшний день данные мировой литературы весьма противоречивы по вопросу возможной коррекции иммунных нарушений репродуктивного здоровья. Тем не менее, в настоящее время при выявлении иммунологической несовместимости партнеров по генам HLA у супругов с привычным невынашиванием беременности и неудачными попытками ЭКО в качестве основного метода терапии используется активная иммунизация женщины («прививка») лимфоцитами мужа – лимфоцитоиммунотерапия (ЛИТ).

Механизм ее действия состоит в активации иммунного ответа у матери, направленного на поддержание имплантации эмбриона, в ответ на подкожное введение лейкоцитов отца будущего ребенка.

Противопоказаниями для проведения ЛИТ являются: гепатиты В и С, перенесенные партнером; вирусные заболевания в остром периоде. В этих случаях при необходимости используют лимфоциты обследованного донора.

Для нормализации показателей интерферонового статуса на первом этапе назначают индукторы интерферона (галавит, иммуномакс, имунофан) в зависимости от выявленной чувствительности к препарату.

Затем выполняется ЛИТ. Для этого женщине внутрикожно вводят предварительно полученные лейкоциты мужа в дозе 50-100 млн с последующим (через 3 недели) контролем показателей функционального состояния иммунной системы. В дальнейшем возможно увеличение дозы лимфоцитов (100 или 150 млн. клеток) в зависимости от количества совпадений по HLA антигенам и показателей иммунного статуса.

Процедуру проводят на 5-9 день менструального цикла 1 раз в месяц за 2-3 месяца до планируемого зачатия или программы ЭКО под контролем функционального состояния иммунной системы (анализа состава лимфоцитов крови, показателей БФ и АОАТ).

После ЛИТ у женщины повышаются значения БФ и АОАТ в 1,5 и 3 раза, соответственно. Как результат, у супружеских пар с совпадениями по HLA увеличивается частота наступления беременности в 2 раза. Наиболее выраженный эффект данной терапии наблюдается у супругов, имеющих 4 и более совпадений по системе HLA: они беременеют в 3-4 раза чаще, чем «непривитые» пары. После зачатия ЛИТ продолжают весь первый триместр, начиная с 4-5 недели, далее каждые 3-4 недели под контролем уровня БФ.

«Прививка» лимфоцитами мужа позволяет женщинам с иммунологическим невынашиванием зачать и выносить здорового малыша!

Всегда с вами,Ольга Панкова

Ссылки по теме:

Школа женского здоровья Ольги Панковой
Форум «Беременность»

Источник

При неудачных попытках родить ребёнка супруги задаются вопросом — в чём причина? Первичные анализы и исследования часто не могут ответить на него. Для выявления проблемы врачи дополнительно назначают HLA-типирование пары. Иммунологическая идентичность родителей становится серьёзным препятствием на пути к рождению ребёнка.

Актуальность генетических анализов

Генетические анализы — наиболее современный метод выявления заболеваний и отклонений у человека

Вся информация о человеке, его особенностях развития, склонностях к заболеваниям зашифрована в молекуле ДНК. В настоящее время существуют сотни генетических тестов, позволяющих быстро выявить причину отклонений в здоровье и даже спрогнозировать их появление в будущем. В пренатальной диагностике такие анализы используются для раннего выявления наследственных заболеваний плода и «совместимости» супругов.

Типы и свойства HLA

HLA (Human Leucocyte Antigens), что в переводе с английского означает человеческий лейкоцитарный антиген, отвечает за реакцию гистологической совместимости. У нас всех есть свой набор HLA-молекул и HLA-генов. Дети получают половину HLA-генов от мамы и папы.

Самыми распространёнными являются «классические» и «неклассические» гены HLA. В данной статье для нас представляют интерес первые, а точнее, HLA II класса, основная функция которых сводится к антигенному распознаванию и межклеточному взаимодействию, обеспечению устойчивости человека к инфекциям. Но у них есть и минусы — они могут стать причиной аутоиммунных заболеваний и проблем во время беременности.

Роль HLA в протекании беременности

Для полноценного вынашивания ребёнка антигены отца и матери должны различаться. Зародыш, сформированный в результате соединения родительских половых клеток, обладает специализированными антигенами, «чужими» для иммунитета матери. Организм женщины реагирует на новые клетки ребёнка включением особых механизмов, защищающих плод: синтезируются антитела-протекторы, подавляющие специализированные NK-клетки-киллеры. Если этого не происходит, последние начинают убивать зародыш, что приводит к прерыванию беременности.

Если антигены отца и матери совпадают, то ребёнок будет носителем антигенов идентичных материнским. В таком случае женский организм считает клетки зародыша своими, а значит, не запускает защитные механизмы для сохранности плода. Иммунитет воспринимает плод как некое опухолевое заболевание и пытается его уничтожить или приостановить деление клеток. В обычной жизни это спасает нас от многих заболеваний, но в этом случае становится причиной некроза в тканях зародыша и приводит к выкидышу.

Комплекс гистосовместимости оказывает влияние на сам процесс оплодотворения, прикрепление зародыша и вынашиваемость плода. Существует прямая зависимость: чем больше аллелей HLA-генов оказалось схожим у супругов, тем больше риск выкидыша. Около 35% пар с повторяющимися случаями выкидыша имеют по 2–3 совпадения. Если обнаружено четыре и больше сходных аллелей, то невынашиваемость и безуспешные попытки ЭКО будут почти во всех случаях.

Для полноценного вынашивания плода очень важно не только количественное совпадение у родителей, но и сами аллели HLA-генов у каждого из супругов. Так, в парах с тремя и более выкидышами при расшифровке результатов NLA-типирования выявлено увеличение числа некоторых аллелей: у женщин – DQB1 0301, 0501, 0602; у мужчин – DRB1 10, 12; DQA1 0102, DQA1 0301, 0102; DQB1 0501, 0602. При повторяющихся выкидышах уменьшается частота аллелей DRB1 03 и DQB1 0303 как у женщин, так и у мужчин, что говорит об их защитном эффекте на течение беременности.

Показания к HLA-типированию

HLA-типирование не является стандартной процедурой при беременности. Этот тест назначают только в случаях с постоянным невынашиванием плода и при повторяющихся неудачах экстракорпорального оплодотворения.

Его проведение иногда рекомендовано только отцу, т. к. некоторые варианты антигенов приводят к отклонениям во время сперматогенеза и отрицательно сказываются на качестве половых клеток, что влияет на развитие плода.

Метод проведения

Полимеразная цепная реакция — высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики

Для проведения генетического анализа супруги должны сдать кровь из вены. Из собранного материала будут выделены лейкоциты. Анализ проводят методом цепной полимеразной реакции (ПЦР). Врач-генетик на основе полученных результатов будет устанавливать степень иммунологической совместимости родителей.

Расшифровка результатов

В данном варианте у супругов 3 совпадения по вариантам HLA-антигенов

Полная иммунологическая несовместимость устанавливается, если у пары получен высокий процент совпадений (пять и более из шести возможных в трёх локусах, имеющих по 2 варианта в каждом из локусов) среди генов DRB1, DQA1, DQB1. При частичной несовместимости результат не может быть назван главной причиной выкидышей. Полное несовпадение партнёров — положительный результат, идеальный для беспроблемного протекания беременности.

Иммунотерапия при совпадении анализов в паре

Методы сохранения беременности при иммунологической идентичности родителей были придуманы несколько десятилетий назад. Один из способов — вшивание ткани отца беременной женщине. Иммунитет начинал атаковать не плод, а инородные ткани. В дополнение проводилась чистка крови и подавление иммунитета матери.

Иммунизация — самый распространённый метод борьбы с HLA-идентичностью супругов

Сейчас возможны другие варианты поддержания беременности и защиты плода. После получения результатов лечащий врач может порекомендовать использовать иммунизацию. Существует два вида иммунизации — активная и пассивная.

При активной женщине вводятся концентрированные лимфоциты супруга. Таким образом, организм будущей матери постепенно учится узнавать клетки мужа. Некоторые исследования приводят данные о 60% положительных результатов при вовремя проведённой процедуре.
Пассивная иммунизация проводится специальными препаратами иммуноглобулинов (Октагам, Интраглобин, Иммуновенин и др.) Начинается процедура до зачатия, длится два — три месяца. Затем прописываются поддерживающие беременность курсы. Этот метод используется при экстракорпоральном оплодотворении.

Типирование HLA-генов супругов (видео)

Генетический анализ на HLA-антигенную совместимость супругов поможет выяснить, является ли бесплодие или невынашивание следствием генетической несовместимости пары. В случае подтверждения диагноза не теряйте надежду: современная медицина зачастую способна решить эту проблему и помочь в появлении на свет здорового малыша. Иммунизация матери является распространённым методом борьбы с генетической идентичностью родителей по HLA-антигенам.

Автор: Екатерина Сергеевна
Распечатать

Высшее образование в сфере биологии (СПбГУ, магистр биологии), специализация — генетика человека.

Оцените статью:

(12 голосов, среднее: 5 из 5)

Источник

Содержание:

Анализ HLA типирование
Когда необходимо сдавать анализ на совместимость
Иммунизация

Многочисленные неудачи при попытках зачать ребенка могут обуславливаться иммунными нарушениями у супругов. Одно из самых распространенных таких нарушений – идентичность HLA-антигенов женщины и мужчины. Поэтому парам, которым длительное время не удается зачать ребенка, рекомендуют проверить HLA-совместимость. Анализ крови HLA на совместимость супругов позволяет определить степень «несовместимости». HLA-типирование дает возможность уточнить причины бесплодия и определить дальнейшую тактику лечения пары.

Анализ HLA типирование

На поверхности всех клеток организма имеются особые рецепторы – белковые антигены главного комплекса гистосовместимости. Уникальность структуры этих рецепторов у каждого человека обеспечивает надежность работы иммунной системы, функционирующей по принципу «свой-чужой». На поверхности лейкоцитов находится больше всего HLA-антигенов. При изменении структуры рецепторов (обнаружения чужеродного тела или опухолевого перерождения клетки) антиген связывается иммунными клетками и посредством НLА – комплекса инициируется запуск иммунного ответа.

Плод получает от каждого из родителей по одному гену, наследуя, таким образом, от них по 50% генетической информации. То, что для организма матери ребенок – чужеродное тело, запускает определенные иммунологические реакции, которые способствуют сохранению беременности. Различия белковых структур антигенов НLА плода и матери – важный фактор для полноценного развития беременности. Организм матери в норме с самых ранних сроков вырабатывает к антигенам ребенка антитела. Когда антигены НLА родителей похожи, что случается при близкородственном браке, в следствии каких-либо эндокринных или иммунологических нарушений у матери, нарушается антигенная стимуляция, и течение беременности осложняется тяжелыми гестозами или может самопроизвольно прерваться. Каждый третий случай бесплодия и привычного невынашивания беременности обусловлен генетическими особенностями пары.

Чтобы определить степень схожести антигенов НLА паре проводят анализ HLA-типирования. Для анализа делают забор венозной крови, из которой выделяют лейкоциты, затем, используя метод полимеразной цепной реакции, проводят HLA-типирование.

Когда необходимо сдавать анализ на совместимость

Желательно, чтобы будущие родители ещё до предполагаемого зачатия прошли клиническое обследование. Назначение необходимых анализов и выдача направления на обследование производится терапевтом и гинекологом. Когда все анализы отличные, а беременность не наступает, то причина может быть не в состоянии здоровья партнеров по отдельности, а скрываться в иммунологической совместимости пары.

Схожесть партнеров по показателям тканевой совместимости служит причиной недостаточной активности иммунной системы женщины, в результате в организме не запускаются реакции, которые необходимы для зачатия и сохранения беременности.

Нередко организм женщины воспринимает сперматозоиды мужчины, как вредоносные агенты, и начинает интенсивную выработку белков-антител, которые их обезвреживают, подавляя способность к оплодотворению. Невозможность встречи сперматозоидов с яйцеклеткой делает и наступление беременности невозможным.

Таким образом, случаи, когда необходимо сдавать анализ на совместимость, нередки. Для исключения возможности возникновения подобных проблем у пары, обоим нужно сдать анализ крови на совместимость, HLA-типирование.

Иммунизация

Когда после консультации с врачом, парой принимается решение продолжать попытки зачатия общего ребенка, то может быть рекомендовано проведение процедуры активной или пассивной иммунизации.

Активная иммунизация матери проводится концентрированной культурой лимфоцитов партера или донора, и позволяет преодолеть проблему сходства партнеров по HLA-антигенам. Процедура должна «научить» женский организм распознавать клетки партнера. Обычно процедуру проводят в три этапа при помощи препарата, который изготавливают из крови партнера или донора. На сегодняшний день мнения специалистов генетиков и иммунологов о эффективности иммунотерапии лимфоцитами разделались пополам. Одной стороной этот метод считается средством спасения, а другой вовсе отрицается её всяческий смысл.

Некоторые данные свидетельствуют о 60% случаев эффективности тщательно подобранного и вовремя назначенного метода активной иммунизации. Процедуру иммунизации лимфоцитами, к сожалению, сейчас можно пройти только в некоторых крупных городах.

Пассивная иммунизация является более доступной, для нее нет необходимости в длительном периоде подготовки, но данные об её эффективности противоречивы. Этот метод состоит в иммунизации матери при помощи препаратов иммуноглобулинов. Препарат назначается исключительно врачом, как правило, внутривенно, в три этапа.

Важность этих анализов состоит в том, что они предоставляют паре возможность осознанного выбора при оценке всех рисков в пользу продолжения попыток зачатия или в пользу услуг банка яйцеклеток и спермы. Поэтому перед принятием такого серьезного решения, необходимо владеть соответствующей информацией и заручиться мнением нескольких специалистов иммунологов и генетиков.

Источник