Анализ крови на ротавирусную инфекцию инвитро

Анализ крови на ротавирусную инфекцию инвитро thumbnail

Метод определения
ПЦР в реальном времени (RT-PCR).

Исследуемый материал
Кал

Тест используют в целях лабораторного подтверждения энтеровирусной инфекции (выявляется общая для различных видов и серотипов энтеровирусов нуклеотидная последовательность).

Энтеровирусы – род РНК-содержащих вирусов, который относится к семейству пикорнавирусов (Picornaviridae). Энтеровирусной инфекции подвержены лица всех возрастов, но наиболее восприимчивы к ней дети. Эта инфекция часто может оставаться нераспознанной, поскольку в большинстве случаев протекает бессимптомно (у 85% инфицированных лиц) либо в легкой или среднетяжелой форме, напоминающей обычную простуду (в 12-14% случаев). Тяжелое течение заболевания (спектр клинических форм см. ниже) отмечают у 1-3% инфицированных. Потребность в лабораторном подтверждении энтеровирусной инфекции для отличия от других видов патологии возникает при тяжелых формах заболевания (в том числе менингитах, энцефалитах) или при эпидемических вспышках инфекции. 

Среди энтеровирусов выделяют различные виды и серотипы. Заболеваемость, связанная с полиомиелитными энтеровирусами (полиовирусами), во многих странах, включая Россию, практически ликвидирована благодаря эффективной вакцинации. Среди неполиомиелитных энтеровирусов потенциальную опасность для человека представляют 70 серотипов.

ВидЧисло серотиповСеротипы
A16Коксаки A2–8, 10, 12, 14, 16 Энтеровирусы 71, 76, 89–91
B41Коксаки A9, Коксаки B1–6 ЕСНО 1–7, 9, 11–21, 24–27, 29–33 Энтеровирусы 69, 73–75, 77, 78
C11Коксаки A1, 11, 13, 15, 17–22, 24
D2Энтеровирусы 68 и 70

Пик заболеваемости, связанной с энтеровирусами, приходится на лето и осень. Основной механизм передачи – фекально-оральный (включает пищевой, водный и бытовой (через предметы обихода) пути), возможен воздушно-капельный путь передачи инфекции. Относительная роль каждого из путей передачи может варьировать в зависимости от разновидности энтеровирусов, сроков после начала болезни, жизненных условий. Возможна вертикальная (трансплацентарная) передача инфекции от матери к плоду во время беременности. 

Размножение вирусов начинается в эпителии желудочно-кишечного тракта. Из желудочно-кишечного тракта вирусные частицы попадают в кровоток и поражают внутренние органы, где проходит вторая волна размножения вируса. Энтеровирусы можно обнаружить в секретах дыхательных путей и фекалиях инфицированных лиц, иногда – в крови и спинномозговой жидкости. 

Особенностью энтеровирусной инфекции является то, что различные клинические формы заболевания могут быть обусловлены представителями одного серотипа, а сходные клинические проявления могут вызывать разные серотипы вирусов. Лишь для некоторых серотипов энтеровирусов характерен определенный комплекс симптомов, который не наблюдается при инфицировании другими разновидностями. Многие из возможных клинических проявлений не являются специфичными для энтеровирусной инфекции и встречаются при других инфекционных заболеваниях. 

Заболевания, вызываемые энтеровирусами, можно разделить на две группы: 

  1. Менее опасные формы заболевания: трехдневная лихорадка с сыпью или без, герпангина, плевродиния, везикулярный фарингит, конъюнктивит, увеит, гастроэнтерит. 
  2. Потенциально тяжелые формы заболевания: менингит, энцефалит, острый паралич, септикоподобные состояния у новорожденных, миокардит, перикардит, гепатит, хронические инфекции у лиц с иммунодефицитами. 

Основные методы лабораторной диагностики энтеровирусной инфекции – выделение энтеровирусов в культуре клеток и обнаружение РНК энтеровирусов методом ПЦР. По сравнению с методом выделения и идентификации вируса с применением культуры клеток, ПЦР-исследование обладает большей чувствительностью и требует меньших временных затрат. 

Присутствие энтеровирусов в фекалиях не является специфичным только для периода острых клинических проявлений, вирусная РНК в пробах кала может обнаруживаться до одного месяца и более от начала инфицирования. Следует учитывать, что, в соответствии с указаниями Роспотребнадзора, обнаружение РНК энтеровирусов в образцах фекалий (в отсутствие эпидемической вспышки) не может служить основанием для лабораторного подтверждения этиологии серозных менингитов, заболеваний верхних дыхательных путей, диарейных инфекций и лихорадочных заболеваний неясной этиологии вследствие высокой частоты носительства энтеровирусов в популяции.

Аналитическая чувствительность (фекалии) – 1х104 ГЭ/мл.

Литература

  • Ботвиньева В.В., Намазова-Баранова Л.С., Гордеева О.Б., Ботвиньев О.К., Коноплева Т.Н. Современные возможности диагностики, профилактики и лечения энтеровирусной инфекции Коксаки у детей. Педиатрическая фармакология. — М. 2012;9(3):40-45. 
  • Инфекционные болезни у детей. Под ред. Д. Марри. — М.: Изд. «Практика». 2006:928. 
  • Эпидемиологический надзор и профилактика энтеровирусных (неполио) инфекций: Методические указания. МУ 3.1.1.2363-08. Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. — М. 2008. 
  • Kupila L., Vuorinen T., Vainionpõā R., Marttila R.J., Kotilainen P. Diagnosis of Enteroviral Meningitis by Use of Polymerase Chain Reaction of Cerebrospinal Fluid, Stool, and Serum Specimens. Clinical Infectious Diseases. 2005;40(7):982-987.
  • Материалы фирмы-производителя реагентов.

Источник

Ротавирусы группы А (Rotavirus A)
Ротавирусное заболевание (ротавирусный гастроэнтерит) — острая вирусная инфекция с преимущественным заболеванием детей, характеризующееся симптомами острой интоксикации, поражением желудочно-кишечного тракта и дегидротацией.
Ротавирусы (Rotavirus) — род вирусов из семейства Reoviridae.
В соответствии с антигенной специфичностью выделяют 3 группы ротавирусов: А, В, С. Ротавирусы группы А вызывают большинство случаев ротавирусной инфекции.
Эпидемиология.
Источник и резервуар инфекции: только человек. Возбудитель выделяется с испражнениями (в 1г. кала содержится от 10 до 100 вирусных частиц) на протяжении до 3-х недель (чаще 7-8 дней от начала болезни).
Путь передачи: фекально-оральный.
Как в развивающихся так и в развитых странах ротавирусы самый частый возбудитель тяжелой диареи с обезвоживанием у детей до 3-х лет. Они вызывают 30-50% гастроэнтеритов, требующих госпитализации и интенсивной регидротации.Тяжёлые ротавирусные инфекции наблюдаются в основном в первые годы жизни, но ротавирусы часто обнаруживают при диареи и у взрослых (чаще контактирующих с заболевшими грудными детьми) и у пожилых лиц с иммунодефицитом. Ротавирусы также вызывают 10% случаев диареи путешественников.
Клиническая картина.
Ротавирусы вызывают гибель зрелых клеток тонкого кишечника, они замещаются незрелыми всасывающими клетками, неспособными адекватно абсорбировать углеводы и другие питательные вещества, что приводит к осмотической диарее.
Инкубационный период длиться 1-5 суток.
Острый период длиться 3-7 суток(при тяжелом течении болезни более 7 суток).
Период реконвалесценции 4-5 суток.
Для ротавирусной инфекции характерно острое начало: рвота, резкое повышение температуры тела, понос, зачастую и очень «узнаваемый стул»-на второй, третий день — серожелтый и глинообразный. Кроме того у большинства заболевших появляется насморк, покраснения в горле, они испытывают боли при глотании. В острый период отсутствует аппетит , наблюдается упадок сил. Наиболее крупные вспышки заболевания возникают во время или в канун эпидемии гриппа, за что оно получило неофициальное название «кишечный грипп».
Кал и моча очень сходны по признакам с симптомами гепатита (светлый кал, тёмная моча, иногда с хлопьями крови). Обычно если в семье или в организованном коллективе есть инфицированные, то в течение 3-5 суток поочерёдно начинают заболевать остальные. Так как ротавирусы в большом количестве выделяется с калом, выявить их сравнительно легко методом ПЦР.
ПЦР (полимеразно-цепная реакция) — это метод, который позволяет найти в исследуемом клиническом материале небольшой участок генетической информации (ДНК) любого организма среди огромного количества других участков и многократно размножить его.
Биологический материал: кал.

Норовирусы 2 генотипа (Norovirus A)
Норовирусная инфекция – это желудочно-кишечная инфекция, вызванная норовирусом (Norovirus), в народе называют «желудочный грипп».
Норовирус (Norovirus) — это содержащий РНК вирус семейства Caliviridae.
Норовирус можно классифицировать на 5 геногрупп — G1, G2, G3, G4, G5, которые далее подразделяются на разные генотипы. Например, геногруппа -2 наиболее превалирующая человеческая геногруппа, которая содержит 19 генотипов. Генотипы — 1, 2, 4 вызывают поражение у человека, а геногруппа-3 инфицирует рогатый скот. Геногруппа-5 недавно была обнаружена у мышей. Эпидемиология. Норвавирусная инфекция поражает все возрастные группы, но чаще детей школьного возраста и взрослых. Восприимчивость к норвовирусам повсеместная. Сведения о появлении иммунитета после заболевания неопределенные. Резистентность к определённому штамму вируса может продолжаться от 4-6 месяцев до 2-3-х лет.
Источники инфекции: больной человек.
Пути передачи: фекально-оральный и контактный.
Факторы передачи: загрязненные вода и пища.
Клинические проявления.
Инкубационный период: от 24 до 51 часов, возможен менее продолжительный.
Заболевание вызванное норвовирусами характеризуется рвотой и диареей; часто сопровождается тошнотой, кишечной коликой, общим недомоганием, ознобом, головной болью. Лихорадка присутствует в половине случаев, как правило невысокая. Диарея умеренная по количеству 4-8 раз в сутки, без примеси крови. Клинические симптомы отмечаются в течение 24-60 часов, течение сомо-ограниченное. Более тяжелое течение отмечается у ослабленных и у больных со сниженным иммунитетом.
Для выявления вируса в стуле может быть выполнена ПЦР.
ПЦР (полимеразно-цепная реакция) — это метод, который позволяет найти в исследуемом клиническом материале небольшой участок генетической информации (ДНК)любого организма среди огромного количества других участков и многократно размножить его.
Биологический материал: кал.

Астровирусы (Astrovirus)
Астровирусная инфекция – это острая кишечная инфекция, вызванная астровирусами. Возбудитель – астровирус диаметром 28 нм. На сегодняшний день идентифицировано 8-серотипов астровирусов, из которых только один серотип (HAStV1) имеет существенное значение в развитии патологии человека.
Эпидемиология.
Астровирусной инфекцией приемущественно болеют дети до 7 лет, причем наиболее часто заболевание регистрируется у детей до года.
Сезонность при астровирусной инфекции нетипична.
Источник инфекции: больной человек.
Путь передачи: фекально-оральный и контактный.
Клиническая картина. Болезнь протекает как правило в ассоциации с энеробактериями и другими вирусами, в частности ротавирусами. Астровирус персистирует в организме 3-9 дней. Поражает эпителий кишечника и Пейеревы бляшки. При этом развивается энтерит, сопровождающийся поносом и обезвоживанием организма, снижением аппетита и симптомами интоксикации.
Исследования последних лет свидетельствуют, что одним из наиболее перспективных методов диагностики астровирусной инфекции является ПЦР.
ПЦР (полимеразно- цепная реакция) — это метод, который позволяет найти в исследуемом клиническом материале небольшой участок генетической информации (ДНК) любого организма среди огромного количества других участков и многократно размножить его.

Показания к ПЦР-диагностике:
-боли в животе
-жидкий стул
-урчание (слышное на расстоянии)
-вздутие живота
-боли вокруг пупка (усиливающиеся при дефекации)
-сочетание диареи с катаром верхних дыхательных путей.

Биологический материал: кал.

Источник

Ротовирус

сидел у нас вовка дома месяц, окрепнуть после гриппа, вышел на 4 дня, и привет расстройство… Вырвало в группе перед полдником, на след день температура 37,2, понос, ел отвратительно, самое дурацкое понос ночью, я только успевала вовку мыть и пеленки менять… Он не мог проконтролировать себя, спал бедолага, хорошо догадалась одноразовые подстилать это очень спасло… Решили сдать анализ в инвитро, и вот ротавирус положительно, ждем еще микрофлору… Теперь еще пару недель дома пусть сидит, будем в след выходные Алиску крестить…..

Читать далее →

ВЭБ (ИНФЕКЦИОННЫЙ МОНОНУКЛЕОЗ)

Моему сыну вчера поставили диагноз. О. и. мононуклеоз. Назначили Изопринозин. Но этого препарата нигде нет. Перерыла всех знакомых по разным городам узнавали по аптекам. Всю Балашиху объездили. До Москвы доберёмся завтра. Так как решила прикрепиться обратно к поликлинике в Москве. Там больше специалистов. У нас тут то одного нет то второго. Насколько страшен этот мононуклеоз — не знаю. Впервые о нем услышала в Тушинской больнице 2 года назад, когда с Даниской лежали там с отитом и ротавирус там же приплюсовали…

Читать далее →

Медицинская грамотность

Просто хочу зафиксировать свое мнение на этот счет.
Сегодня, в век интернета, который у каждого в кармане, получать информацию из самых разных сфер стало просто — в один клик. Наши предки, наверное, и мечтать о таком не могли, а мы порой даже ленимся поч…..

Читать далее →

Половинка: большой пост

А вот у нас уже и экватор.
Писать я обленилась, думала, после первого скрининга (как и все), или вообще каждый месяц, каждую неделю, но слишком богатыми на события была первая половина беременности, не до писанины было. Итак, основные вехи и пол малыша под катом.

5 недель — полосатый тест. Это было 26 сентября. И это было забавно. Ведь я ждала полосатого теста на месяц раньше, 25 августа, в свой день рождения. В итоге тогда начались месячные, и я, конечно, расстроилась…

Читать далее →

Здоровье — от трех до шести лет

Обсудите вашу тему в сообществе, узнайте мнение активных пользователей
Бэбиблога

Перейти в сообщество

Последний день свободы

Думала он будет завтра, но отгремел сегодня по ходу)) Причем был единственным за последнюю неделю, т.к. вчера ездили к фтизиатру, половину прошлой недели просидели дома из-за морозов. Думала сегодня-завтра свожу ребенка в сад, а с четверга путь нам туда закрыт. Минимум на 60 дней, а если будут кого-то еще прививать от полио, то так и весь год пролетит рванем на юга) Но в саду не оказалось воды, потому и завтра он закрыт. Так что… Как привыкнуть обратно к будням с…

Читать далее →

Как мы побывали…в больнице 🙁

Не знаю даже с чего и начать. Улеглось уже, слава богу…и вроде даже и вспоминать не хочется…Тем более мало кто и побеспокоился, куда это мы сгинули так надолго…В прошлое вс я писала, как у Дэни поднялась высокая тем-ра. Мы до последнего думали на зубы… Но ночью мне стало страшно…Тем-ра поднялась до 39,8, сын горел на руках, я сидела вся мокрая, а в голове крутились…страшные мысли…Озвучивать не буду, думаю, можно представить…Нурофен уже не помогал…свечи цефекон ненадолго… Он капризничал, с мужем по…

Читать далее →

Источник