Анализ крови на рнк генотип

[09-010]
HCV, генотипирование (типы 1a, 1b, 2, 3a, 4), РНК [реал-тайм ПЦР]

1355 руб.

Молекулярно-генетическое исследование для определения генотипа вируса гепатита С.

Применяемый набор реагентов может быть использован для диагностики вируса гепатита С и наиболее распространенных на территории России генотипов HCV (1a, 1b, 2, 3a и 4) in vitro.

Синонимы русские

Вирус гепатита С (ВГС).

Синонимы английские

Hepatitis C Virus (HCV) Genotyping, HCV Subtype.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирус гепатита С (ВГС) способен поражать клетки печени, а также некоторые клетки крови (нейтрофилы, моноциты, В-лимфоциты). В основном инфекция передается через кровь (препараты для переливания элементов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, инструменты), реже вероятно заражение половым путем.

Острый вирусный гепатит, как правило, протекает бессимптомно и в большинстве случаев остается невыявленным. У 60-85  % инфицированных развивается хроническая инфекция, которая увеличивает риск развития цирроза, печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы. За свое скрытое, но разрушительное действие инфекция получила неофициальное название «ласковый убийца».

ВГС обладает наибольшей вариабельностью среди всех возбудителей вирусных гепатитов и благодаря высокой мутационной активности способен избегать воздействия защитных механизмов иммунной системы. Геномы вируса значительно отличаются в разных странах мира и имеют различную чувствительность к препаратам интерферонов.

Существует 6 основных генотипов вируса гепатита С и около 500 субтипов. Наиболее распространен в мире генотип 1 (40-80  %). 1а тип часто выявляется в США, 1b характерен для Западной Европы и Южной Азии. Генотип 2 встречается с частотой 10-40  %. Генотип 3 распространен в Шотландии, Австралии, Индии и Пакистане. ВГС 4 типа характерен для Средней Азии и Северной Африки, генотип 5 – для Южной Африки, 6 – для некоторых стран Азии. В России преобладает генотип 1b, далее с убывающей частотой — 3, 1a, 2, в США – 1a/1b, 2b, и 3a.

Противовирусная терапия, направленная на подавление прогрессирования заболевания, в редких случаях может ускорить развитие осложнений со стороны печени. Это происходит при неправильной оценке клинических и лабораторных показателей. Генотипирование РНК вируса гепатита С позволяет спрогнозировать эффект от планируемой терапии.

Генотип 1 хуже поддается лечению, чем генотипы 2 и 3. Кроме того, биопсию печени важнее провести именно при генотипе 1. Повышенные дозы препаратов интерферона рекомендованы для пациентов с 1-м и 4-м генотипами. Курс терапии у таких пациентов должен быть продлен до 48 недель даже при отсутствии вируса в крови более 24 недель. В случае успешности лечения, которая подтверждается снижением вирусной нагрузки крови (

Генотипы 2 и 3 хорошо поддаются терапии в 80  % случаев, обычно это занимает 24 недели.

Лечение разрабатывается с учетом пола и возраста пациента, присутствующих у него симптомов, ранее проводимой терапии, структуры и функции печени, а также лабораторных показателей.

Для чего используется исследование?

• Чтобы определить необходимость лечения и спрогнозировать течение заболевания.
• Для планирования длительности противовирусной терапии и дозировки лекарств.
• Для прогнозирования эффективности лечения.
• Для принятия решения о биопсии печени.

Когда назначается исследование?

• При обнаружении РНК вируса гепатита С и планировании противовирусной терапии.

Что означают результаты?

Референсные значения: РНК HCV не обнаружена.

При обнаружении указывается генотип:

Что может влиять на результат?

• Генотип вируса гепатита С иногда не выявляется при концентрации вируса в крови менее 1,25*10^3 МЕ/мл.



Важные замечания

• Решение о длительности терапии, необходимой дозе препаратов и прекращении лечения может принять только лечащий врач на основании биохимических анализов функции печени, биопсии (при необходимости) и вирусной нагрузки.
• Существует вероятность повторного заражения вирусным гепатитом С другого генотипа из-за отсутствия перекрестного иммунного ответа и стойкого иммунитета.

Также рекомендуется

1. Anti-HCV, антитела, ИФА
2. Аnti-HCV, антитела
3. Антитела к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита С
4. HCV, РНК [реал-тайм ПЦР]
5. HCV, РНК количественно [реал-тайм ПЦР]
6. Гамма-глютамилтранспептидаза (гамма-ГТ)
7. Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
8. Аспартатаминотрансфераза (АСТ)
9. Фосфатаза щелочная общая
10. Альбумин в сыворотке
11. Билирубин общий
12. Холестерол общий
13. Тромбиновое время
14. Фибриноген
15. Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ)
16. Лейкоцитарная формула
17. Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)

Кто назначает исследование?

Инфекционист, гепатолог.

Литература

• Возианова Ж. И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3х т. — К.: Здоровье, 2000 – Т.1.: 600-690.
• Кишкун А. А. Иммунологические и серологические исследования в клинической практике. — М.:ООО МИА, 2006 – 471-476 с.
• Germer J., Mandrekar J., and others. Hepatitis C Virus Genotypes in Clinical Specimens Tested at a National Reference Testing Laboratory in the United States. J Clin Microbiol. 2011 August; 49(8): 3040–3043. PMCID: PMC3147781.
• Kuzin S., Samokhvalov E., Zabotina E, and others. Hepatitis virus genotype structure in patients with chronic hepatitis C. Zh Mikrobiol Epidemiol Immunobiol. 2011 May-Jun;(3):33-8. PMID:21809642.
• Mahaney K, Tedeschi V, Maertens G, et al, “Genotypic Analysis of Hepatitis C Virus in American Patients,”Hepatology, 1994, 20(6):1405-11. PubMed 7982639.
• Paintsil E, Verevochkin SV, and others Hepatitis C virus infection among drug injectors in St Petersburg, Russia: social and molecular epidemiology of an endemic infection.Addiction. 2009 Nov;104(11):1881-90. Epub 2009 Aug 27. PMID:19712125.

Генотипирование РНК гепатита С – это определение принадлежности возбудителя к одному из множества штаммов. Процедура играет важную роль в выборе тактики лечения. Вирус гепатита С был идентифицирован еще 30 лет назад. Микроорганизм построен на основе молекулы РНК, принадлежит к семейству флавивирусов и по структуре похож на возбудителей желтой лихорадки, клещевого энцефалита и на других опасных микроорганизмов. Сегодня ученые исследовали его строение более подробно и выявили 6 генотипов, каждый из которых содержит 10 субтипов. 

Почему надо выяснять генотип гепатита С

Разные генотипы вируса по-разному реагируют на одно и то же лекарство. Выявление генотипа вируса гепатита С (ВГС) необходимо для того, чтобы определить следующие моменты:

1. выбор препаратов;
2. продолжительность курса лечения;
3. насколько эффективной будет терапия;
4. расчет дозы противовирусных средств;
5. вероятность развития внепеченочных проявлений заболевания.

Сегодня медицине известно 6 генотипов вируса и множество субтипов. Каждый из них обладает характерным поведением.

По информации ВОЗ, вирусом гепатита С заражено около 300 млн. человек. Предполагается, что в ближайшие пару десятков лет хронический гепатит С станет основной медицинской проблемой во многих странах мира. 

Методы определения штамма вируса

Для определения штамма используется молекулярно-генетическое исследование – методом ПЦР-анализа с генотипированием (HCV RNA genotyping). HCV постоянно мутирует, что помогает ему ускользать от защитных механизмов иммунной системы. Но некоторые участки его генома остаются неизменными – именно на них и ориентирован тест ПЦР. 

Анализ на генотип позволяет выявить эти участки и по ним установить принадлежность вируса к тому или иному генотипу. Чувствительность анализа составляет 200 копий РНК на 1 мл плазмы крови. Исследование с генотипированием назначается, если по результатам других анализов было обнаружено присутствие ВГС в крови. Определение РНК вируса гепатита С и генотипирование является надежным методом диагностики.

Результат исследования позволяет сделать прогноз относительно течения заболевания и выбрать эффективную противовирусную терапию. В некоторых случаях дополнительно назначается биопсия печени или эластометрия (ультразвуковая диагностика эластичности паренхимы печени).

Кроме генотипирования, пациентам с ВГС обязательно проводят количественный ПЦР с целью оценить вирусную нагрузку.

Распространенные в России генотипы

Для генотипов вируса гепатита С характерно географическое различие. Так тип 1 часто называют «японским», так как здесь он получил широкое распространение. В США распространен тип 1а, его называют «американским», а в странах Европы чаще фигурирует 1b. Генотип 3 чаще регистрируется в Шотландии, Австралии, Индии и Пакистане. Тип 4 – в Средней Азии и на севере Африки. Пятый генотип характерен для Южной Африки, шестой – для стран Азии.

В Российской Федерации распространены по убывающей следующие типы: 1 (b чаще, чем а), 3 (чаще 3а), 2. Каждый из подтипов имеет свои характерные особенности.

1а

Это наиболее распространенный в России генотип гепатита С, который отличается мягким течением. Поддается лечению современными противовирусными препаратами в 98% случаев. Эта разновидность имеет 30% вероятности развития цирроза и 15% вероятности образования карциномы. В 30% случаев гепатит с генотипом 1а протекает остро, с подъемом температуры и другими признаками воспаления. По этой причине возможна ранняя диагностика заболевания, на фоне которой гепатит хорошо поддается лечению.

1б

Второй по распространенности в России генотип гепатита С. Его чаще диагностируют на Дальнем Востоке. В группе риска по заражению находятся туристы, которые посещают Таиланд. 80% носителей генотипа 1Б заразились путем переливания крови и ее компонентов. Этот вид хуже поддается лечению, требует длительной терапии, создает высокий риск рецидива. Заболевание протекает на фоне астеновегетативного синдрома, то есть сопровождается сонливостью, слабостью, хронической усталостью. Гепатит С этого подтипа часто приводит к раку печени.

Для болезни характерно длительное бессимптомное течение. Скрытый период длится 10 лет и даже больше. К концу этого времени появляются симптомы усталости, которые пациент часто принимает за переутомление на работе и возрастные изменения. Ситуацию усугубляет тот факт, что вирус обычно обнаруживается у пациентов после 40 лет.

Риск перехода в хроническую форму составляет 70%. Хронический гепатит С 1б тяжело лечится, протекает с необратимыми последствиями для организма. На прогноз влияет возраст, сопутствующие заболевания, переносимость лекарственной терапии. Если лечение было назначено своевременно и адекватно, прогноз благоприятный.

2

Генотип 2 переносится легче других видов инфекции, не вызывает осложнений, несовместимых с жизнью, успешно поддается терапии. Это наименее распространенный тип, для которого характерна минимальная или нулевая симптоматика на начальном этапе заболевания, а также медленно протекающий воспалительный процесс. В активной фазе возникают такие симптомы:

• тошнота, рвота;

• отсутствие аппетита;

• головная боль, головокружение;

• слабость;

• температура до 37,5°С;

• боли в суставах;

• боль и увеличение печени;

• желтуха и кожный зуд.

Статистика излечения составляет 70-100%.

3

Подтип 3а встречается чаще, чем 3в. Вирус гепатита С подтипа 3 поражает в основном людей с алкогольной и наркотической зависимостью, но прогноз на выживаемость у него самый благоприятный. Имеет длительный бессимптомный период, а в период манифестации проявляется в виде головокружений, головных болей, слабости, утомляемости. Часто отмечаются «блуждающие» суставные боли, снижение аппетита, изменение цвета мочи и кала, боль в области печени, температура до 37,5°С, желтуха, кожный зуд.

Прогноз зависит от разных обстоятельств – у женщин лечение проходит в среднем успешнее, чем у мужчин. Вероятность выздоровления понижается с возрастом, при наличии лишнего веса, при высокой вирусной нагрузке и существенном повреждении печени.

Подбор лечения после генотипирования

До 2011 года для лечения гепатита С использовалась монотерапия интерфероном или комбинация интерферона и рибавирина. Лечение имело низкую результативность. Длительное применение интерферона вызывало устойчивую депрессию и другие нарушения в работе нервной системы, общее ухудшение самочувствия, головные боли, облысение.

С появлением препарата нового поколения схема лечения изменилась. Таким лекарством стал Софосбувир (торговое название Совальди). Препарат препятствует размножению вируса гепатита С, на фоне почти полного отсутствия побочных эффектов. Устойчивый результат достигается при лечении курсом в 12 недель.

Обычно Софосбувир назначается в составе комбинированной терапии вместе с Даклатасвиром (Даклинза), Ледипасвиром (торговое название Харвони) и Велпатасвиром (торговое название Эпклуса). Состав терапии назначается в зависимости от генотипа.

Препараты назначаются только после генотипирования. Схему лечения назначает врач-инфекционист или гепатолог. Нельзя самостоятельно совмещать прием разных средств во избежание нейтрализации их действия или получения нежелательных реакций.