Анализ крови на резус ребенка

Метод определения
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) в режиме реального времени.

Исследуемый материал
Плазма крови (ЭДТА)

Обнаружение гена RHD плода в крови беременной женщины с отрицательным резус-фактором применяют с целью прогнозирования риска развития резус-конфликта и гемолитической болезни плода и новорожденного.

Резус (Rh) – одна из важнейших систем эритроцитарных антигенов (наряду с системой АВ0), клинически значимая при оценке возможности возникновения резус-конфликта и риска развития гемолитической болезни плода и новорожденного.

В системе резус различают пять антигенов. Наиболее иммуногенным является антиген D, аминокислотная последовательность которого кодируется геном RHD. Присутствие антигена D на поверхности эритроцитов определяет положительный резус-фактор (Rh+). Доля резус-положительных лиц, носителей антигена D, в популяции составляет около 86%, а резус-отрицательных лиц (Rh-), не имеющих антигена D – около 14%.

Течение беременности резус-положительным плодом у резус-отрицательных женщин* часто осложняется развитием гемолитической болезни плода, связанной с трансплацентарным переносом эритроцитов плода в кровоток матери. 98% случаев гемолитической болезни новорожденных связаны с D-резус-антигеном. Попадая в кровь резус-отрицательной матери, он вызывает образование специфических антител, которые проникают через плаценту и разрушают эритроциты плода. Это влечет за собой развитие гемолитической болезни плода и новорожденного. При раннем проявлении резус-конфликт может послужить причиной самопроизвольного прерывания беременности или преждевременных родов. Сенсибилизация матери к D-антигену и риск развития резус-конфликта возрастают с каждой последующей беременностью резус-положительным плодом независимо от того, прервалась ли беременность или завершилась родоразрешением.

В настоящее время при выявлении резус-конфликта назначают следующий комплекс исследований:

измерение уровня специфичных антител матери к D-антигену плода;
получение плодного материала при хорион- и плацентобиопсии в ходе амнио- и кордоцентеза, что относится к инвазивным методам;
допплерометрическое исследование скорости кровотока в аорте и средней мозговой артерии плода.

Риск самопроизвольного прерывания беременности при применении инвазивных методов исследования составляет 2-3%, а отсутствие антител не гарантирует, что плод резус-отрицательный, т. к. даже при положительном резусе у плода антитела у матери могут не вырабатываться по причине целостности плаценты в момент обследования или слабого иммунного ответа. Ситуация осложняется тем, что резус-конфликт может возникнуть на любом сроке беременности. Кроме того, возможна сенсибилизация матери. Выявление ДНК плода (фетальной фракции, свободно циркулирующей ДНК, фетДНК) в крови матери обладает рядом преимуществ:

относится к неинвазивным для плода процедурам, не несет угрозы течению беременности, не вызывает осложнений;
исследование фетДНК возможно, начиная со срока 10 акушерских недель беременности;
точность результата 96 – 100%**
позволяет оценить целесообразность назначения терапии иммуноглобулином при отсутствии в крови беременной женщины анти-резусных антител на сроке 20 недель.

Аналитические показатели метода

Определяемые участки ДНК: 7-й и 10-й экзоны гена RHD. Диагностическая чувствительность: 92-100%. Диагностическая специфичность: 90-100%. Чувствительность метода составляет 150 копий геномной ДНК (суммарной ДНК матери и плода), что соответствует 400 копиям гена RHD плода в 1,0 мл исследуемого образца плазмы.

Ограничения метода

У 1% серологически резус-отрицательных женщин определяется наличие гена RHD. Это происходит в следующих случаях:

Ген RHD присутствует и генотипически резус-фактор будет положительным, но в результате мутаций D-антиген не синтезируется и серологическим методом определяется как отрицательный;
Ген RHD присутствует полностью или частично, и генотипически резус-фактор будет положительным; из-за мутаций синтезируется измененный D-антиген. Серологически это определяется или как слабый резус-фактор, или как нестабильно положительный.

По крови таких пациенток определить резус-фактор плода методом ПЦР невозможно. Чаще всего отрицательный резус-фактор обусловлен полным отсутствием гена RHD. В таких случаях применяют серологический метод вместе с ПЦР. Резус-фактор определяется как отрицательный при совпадении отрицательных результатов тестов.

* У беременных женщин, имеющих резус-положительную принадлежность, проблем совместимости по резус-фактору с плодом не возникает.

** Величина обусловлена состоянием плаценты, особенностью течения беременности и возрастает с увеличением срока беременности.

Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.

Противопоказания к проведению исследования:

Трансплантации органов и тканей в анамнезе у пациентки

Литература

Costa J.M., Giovangrandi Y., Ernault P., Lohmann L., Nataf V., El Halali N., Gautier E. Fetal RHD genotyping in maternal serum during the first trimester of pregnancy. British journal of haematology. 2002;119:255-260.
Finning K.M., Martin P.G., Soothill P.W., Avent N.D. Prediction of fetal D status from maternal plasma: introduction of a new noninvasive fetal RHD genotyping service. Transfusion. 2002;42:1079-1085.
Freeman K., Osipenko L., Clay D., Hyde J., Szczepura A. A Review of Evidence on Non-invasive Prenatal Diagnosis (NIPD): Tests for Fetal RHD Genotype. Workpackage 6, SAFE Network of Excellence Warwick Medical School, UK. 2006.
Wagner F.F., Frohmajer A., Flegel W.A. RHD positive haplotypes in D negative Europeans. BioMed Central genetics. 2001;15:10.
Минеева П.В. Группы крови человека. Основы иммуногематологии. – СПб. 2004:188.
Инструкция по применению набора реагентов для выявления гена RHD плода в крови матери методом ПЦР в режиме реального времени Резус-фактор плода ООО «ДНК-технология». Регистрационное удостоверение № ФСР 2017/5310.

Источник

Метод исследования: Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Иммунологический конфликт по системе резус является актуальной проблемой. Гемолитическая болезнь новорожденных (ГБН) входит в пятерку самых частых пренатальных патологий. ГБН развивается, как правило, при беременности женщины с резус-отрицательной принадлежностью резус-положительным плодом. Мембрана эритроцитов у людей с резус-положительным статусом пронизана комплексом специфических белков, которые на поверхности клетки образуют своеобразный комплекс системы антигенов. Наиболее иммуногенным и значимым среди них является D-антиген. Ген RHD кодирует синтез белка RhD (D-антигена). В случае делеции участка хромосомы, на которой расположен ген RHD, на поверхности эритроцита отсутствует белок системы резус. Таким образом, резус-отрицательный генотип определяет резус-отрицательную принадлежность крови (Rh-). Иммунная система беременной женщины с Rh- атакует эритроциты плода, на поверхности которых есть чужеродный для нее белок RhD. Эритроциты разрушаются, что ведет к соответствующей клинической картине — анемии плода, гемолитической желтухе, холестазу, энцефалопатии и водянке плода. Тяжесть клинических проявлений не всегда можно предугадать, и зависит она от защитных механизмов по сохранению беременности в каждом конкретном случае. Определить резус-принадлежность плода очень важно для предупреждения развития ГБН и для своевременного проведения необходимых мер ее профилактики. Так же данное исследование дает возможность избежать диагностических манипуляций, направленных на многократное определение уровня антител и отказаться от инвазивных процедур (кордоцентез), применение которых может стать причиной прерывания беременности и ее осложнений.

Во время беременности происходит обновление клеток плаценты и в кровоток матери в небольшом количестве попадает внеклеточная фетальная ДНК плода. Определение резус-фактора происходит путем исследования непосредственно фетальной ДНК плода в крови матери и является неинвазивным, высоко информативным, достоверным и выполняется всего один раз. Исследование позволяет дать ответ о резус-принадлежности плода уже на ранних сроках беременности (начиная с 8 недель). В процессе исследования из крови матери выделяют фракцию ДНК плода, и далее ДНК плода исследуют на наличие гена RHD. При выявлении гена RHD, можно сделать вывод о резус-положительной принадлежности, при отсутствии гена RHD соответственно о резус-отрицательной принадлежности. С целью предупреждения негативных последствий, важно как можно раньше выявить резус-статус плода.

Показания к назначению исследования:

ведение беременности у женщин с отрицательным резус-фактором для своевременного выявления риска развития резус-конфликта;
перед профилактическим введением иммуноглобулина. В случае если в крови беременной женщины с отрицательным резус-фактором отсутствуют антитела к D-антигену плода, но при этом резус-статус отца ребенка положительный;
при наличии в анамнезе у женщины с отрицательным резус-фактором хирургического прерывания беременности или выкидыша. При резус-конфликте в анамнезе женщина заведомо сенсибилизирована антирезусными антителами. Для прогнозирования развития резус-конфликта необходимо определить резус-фактор плода.

Пример результата исследования:

Параметр	Результат
Выявление гена RHD	Не выявлен
Заключение: Резус-фактор плода генотипически отрицательный. Развитие резус-конфликта маловероятно (<0.1%).

Результат лабораторного исследования не является диагнозом. Тактика обследования, назначение лечения пациентам, интерпретация результатов лабораторных исследований определяется лечащим врачом.

Однако бывают случаи, когда фетальная ДНК плода в крови матери присутствует в недостаточном для анализа количестве. Такая ситуация может быть связана с физиологическими особенностями беременной женщины. При большой массе тела женщины снижено процентное соотношение фетальной ДНК плода к свободной циркулирующей ДНК матери. Ещё одно состояние, при котором может снижаться фракция фетальной ДНК — это анеуплоидии плода. В этих случаях рекомендуется повторная сдача анализа через 1-2 недели, когда уровень фетальной ДНК плода в крови матери возрастет.

Следует отметить, что существует небольшой процент женщин, у которых есть мутация в гене RHD. Мутации могут приводить к сокращению выработки белка или изменению его функциональных свойств (например, невозможности полноценного встраивания в мембрану эритроцита). В таких случаях генотип называют Weak D (D – ослабленный), что означает снижение иммунного потенциала. При серологическом исследовании статус таких женщин определяется как резус-отрицательный, хотя генотипически это резус-положительные женщины. При таких особенностях генотипа матери определить резус-принадлежность плода невозможно.

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом ФЗ № 323 «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации», должны производиться врачом соответствующей специализации.

Источник

Валерия, как у вас сейчас дела, сделали уже иммуноглобулин? Я вот раздумываю тоже над этим анализом, но знаю себя — если мне скажут что малыш с +, то я буду переживать и изводиться на ровном месте. Поэтому не знаю что делать

Нифталиева Рамиля

Я сделала нипт — малышка взяла папин положительный резус. Мониторю антитела раз в месяц. Контрольная сдача на следующей неделе. Если антител не будет — на 28 неделе уколю иммуноглобулин.
Если у вас есть фин возможность — сделайте анализ. Вам так будет спокойнее вдруг малыш с отрицательным резусом — тогда вообще не будете переживать)
А у вас какой срок?

Валерия

У меня 20 недель. Возможность есть, но вдруг он будет положительный я тогда буду переживать ещё больше )))

Нифталиева Рамиля

Антител нет?
Если боитесь узнавать резус ребёнка — не узнавайте) просто мониторьте антитела

Подскажите, вы сдали этот анализ!? Завтра поеду сдавать. Мне сказали что если ребёнок положительный будет, то с 28 по 30 неделю уколят иммуноглобулин, и после родов иммуноглобулин. После иммуноглобулин титры вроде сдавать уже не нужно. А если отрицательный, то вообще отлично! У нас этот анализ стоит 3100 российских рублей, за такие деньги можно и сдать!)

Элена

Ещё не сдала. Но обязательно сдадим.
Ой, у вас очень дёшево! У нас столько же, но в гривнах ????
Врачи правильно сказали — если ребёнок положительный, то нужно мониторить титры и колоть иммуноглобулин, если отрицательный — то вообще можно не переживать и ничего не сдавать.

Элена

Ну что, вы сдали анализ? Я сдала. Мой малыш все таки взял папин положительный резус. Ну теперь я хотя бы знаю, что нужно мониторить титры и быть на чеку????????

Валерия

И я сделала, тоже положительная дочь будет у меня! Сказали поставят в 28 недель иммуноглобулин, перестрахуются, т. К беременность вторая ♀️

Элена

А титры вы мониторите?

Ну это только мнение, решать конечно Вам. Людей с отрицательным резусом гораздо меньше, чем с положительным, поэтому шанс родить ребёнка с плюсом больше. Будет плюс, также все и придётся мониторить и колоть потом. У меня похоже — после родов вкололи иммуноглобулин, а вот после лапары по удалению внематочной нет. Тоже в зоне риска, но делать не буду, так как по сути это ничего не меняет. Сдавать раз в месяц титры ненапряжно. Верить надо в лучшее

Если у вас уже вторая беременность то сделайте обязательно) при первой вроде как резус конфликт не так страшно, а ко второй иммунитет уже. У моего сотрудника жены при второй беременности завтыкали резус конфликт. Девочка родилась раньше времени. Ну и проблемы были

Alina Dushuk

резус-конфликт всегда страшен, при первой просто вероятность меньше.

Если ребёнок -, то не надо сдавать на титры

Мария

Это понятно. Но нужно же определить, какой у него резус. В этот то и весь вопрос

Валерия

Ну да. Мне определили в 12 недель на скрининге

Мария

У нас в обычный скрининг этот анализ не входит

У меня тоже отрицательный резус, врачи отправляли сделать этот анализ, я не стала делать это платный анализ, если у вас беременность первая то редко происходит конфликт, я сдавала на антитела каждый месяц все отлеживалось, иммуноглабулин колола, как объяснил мне платный хороший врач, что хуже от этой прививки не будет, отрицательный резус на вторых детей действует, после первых родов нужно подождать года три кажется, не помню точно, чтобы на здоровье ребёнка это никак не отразилось

И у меня родилась дочь с положительным резусом, все норм

Анна

Да не первая. В том то и дело. Была бы первая — вообще не переживала бы????

Года 3-4 назад еще редко такой анализ назначали. Если бы назначили, сдала бы. Если у ребенка папин, можно заранее подготовиться: на 28 нед поставить иммуноглобулин и сразу после родов.

Я тоже думала сдать, но очень уж дорого. Притом, если ребенок +, все равно сдавать титры и колоть иммуноглобулин. А достоверность высокая очень. Думаю насчет этого переживать не стоит.

Екатерина

Ну, 120$ не скажу, что баснословные деньги (хотя и не дёшево).
Но если ребёнок минус — то можно вообще титры не мониторить и не переживать. А для меня скинуть градус волнения — самое главное)

Валерия

А почему переживаете? У вас высокие риски?

Екатерина

У меня была одна б при которой не кололи иммуноглобулин (это было давно и никто и не думал об этом). Но самое главное — мы очень долго планировали. У нас эко. Если бы ребёнок дался просто — возможно, так не переживала бы. Но прошли с мужем через многое.

Валерия

Для меня больше вопрос не переживаний, а лишней сдачи крови. Считаю, что у меня риски не слишком высокие, роды одни, иммуноглобулин колола дважды. Деньги не маленькие считаю за такой анализ, и если ребенок будет плюс, то по сути деньги на ветер)

Валерия

Тогда сдавайте, гарантии 100% никто никогда не даст, но достоверность высокая

Екатерина

Ну, у вас риски не высокие. Каждый же выбирает то, что ему больше подходит. Мы хотим сделать этот тест. Муж настаивает прямо. А то 120$ это раз в ресторан сходить)

Валерия

Да, поэтому меня даба душит) в вашем случае, конечно бы сдала. Хотя по большому счету контроль титров и иммуноглобулин- все, что могут предложить для предотвращения конфликта

Валерия

Офигеть у вас ресторан 8 тысяч стоит ???? (это не по теме ) а так конечно сдай, лишние переживания в беременность не к чему, я вот только буду делать эко в этом году, тоже хочу сдать все анализы которые врачи не назначают, но они важны, так что на это дело денег жалеть думаю не стоит, нервы важнее

Ксения

Ну это если хорошо так посидеть
Мы столько потратили на эко, что эти деньги просто копейки ????

Валерия

Да я представляю, у нас хотя бы по омс идёт

Ксения

Да у нас тоже есть бесплатное эко при трубном факторе (у меня такой). Но мы не захотели ждать.
А вам удачи????????

Мне еще рано его сдавать, но я пойду наверное. У меня 3-, у мужа 3+ и у нас близнецы будут. Поэтому мне теперь в принципе сдавать дохрена всего, заодно и это сдам, одним анализом больше, одним меньше и это мое спокойствие)

Анастасия

А если близнецы его сдать можно? При двойне (разнояйцевой) он точно не информативный.
Сдают его с 10 недель.
Я тоже согласна, что лучше сдать и сразу понимать риски. Да и если ребёнок минус — то не нужно будет титры мониторить, что тоже плюс.
Вы где думаете сдавать?

Валерия

У меня однояйцевые близнецы) у них один резус)

Валерия

Где сдавать пока не знаю, думаю сейчас куда вставать на учет. Если Лелека или Адонис, то там и сдам у них. Я вообще за то, чтобы сдавать все по максимуму и не переживать.

Анастасия

Тогда конечно)
Легкой вам беременности

Анастасия

Я буду анализ в Адонисе как раз сдавать. Он стоит у них дешевле, чем в других клиниках. И на учёт там думала вставать (я у них эко делала), но передумала ???? я до сих пор ещё не стала ????
Но правильно — лучше перебдедь, чем недобдедь)

Валерия

Да с близнецами теперь гонять с 8й недели на учет. Адонис мне тоже двояко, не знаю пока, но он близко к дому. Эко я делала в Шупика и они беременность к сожалению не ведут(

Анализ крови на антитела? Я делала всю беременность каждые 2 недели. Но дочь взяла мой отрицательный резус. А вот про ложный не знаю… у сестры прошляпили врачи не уточнили резус, выяснили когда у неё уже серьёзные последствия начались, организм отторгал малыша, кололи иммуноглобулин.

Natalia Natalia

Нет. Не на антитела. Именно на определение резуса ребёнка.
Вот если бы вы сделали такой анализ — то не пришлось бы мониторить титры постоянно. Так как ваш ребёнок и так минус и с ним априори конфликта не будет.

Валерия

Хм, даже не знала про такой… а жаль )) на учете платно стояла, им наверное выгоднее было мне этот анализ делать постоянно????

Natalia Natalia

Этот анализ не входит в пакет ведения Б. Я тоже отдельно буду сдавать.

Я делала, но не очень доверяю этому анализу, все равно колола иммуноглобулин. Анализ в итоге не обманул

Екатерина

Хоть один ответ по теме ????????
Иммуноглобулин нужно все равно колоть, если ребёнок положительный.

Хм. Обычный анализ крови, показывает есть антитела или нет. Я минус, муж плюс. Антител не было. Дочка родилась минус, чем и подтвердила отсутствие антител. Титры нулевые были.

Валерия

Тогда проконсультируйтесь с другим врачом. Послушайте что он скажет

а почему просто не мониторить титры? просто если ребенок положительный, то что? не факт ведь, что титры попрут, все равно точно так же просто будете мониторить и все

pony

Когда они попрут, к сожалению, уже поздно будет что-то делать… Только ждать ♀️

pony

Лучше же сразу понимать риски. А если ребёнок минус — то можно вообще расслабиться.

Валерия

так тогда делайте, раз тест неинвазивный, ничего ведь не будет

Екатерина

не поздно, делают определенную терапию

Я не рискую делать. Ради резуса можно ребёнка поколечить

Наташа

Чем? Тем, что у меня с вены возьмут кровь??? Девушка, ну хоть прочитайте полностью «Неинвазивная пренатальная диагностика по КРОВИ матери»????♀️

Валерия

Ну у вас какое то новшество. У нас берут из пуповины. Риск 6%

Наташа

По крови матери можно и пол определить (уже с 7 недель), и разные генетические отклонения, типа СД. Не думаю, что это новшества.
На пуповину я бы не пошла точно!

А какой смысл в этом анализе?

Маруся

А вам сложно загуглить? Я же задала вопрос к тем, кто делал….
Но отвечу — у меня резус отрицательный. Врач рекомендует сдать этот анализ, так как мы с мужем переживаем (была одна Б при которой не кололи иммуноглобулин)

Валерия

Да в курсе я про анализ. У меня тоже -, просто смысл его делать, если раз в месяц сдаешь кровь на антитела, ну узнаете что ребенок +, дальше то что♀️

Источник