Анализ крови на пцр печень

Анализ ПЦР гепатит С – это исследование, основной целью которого является идентификация генетического материала возбудителя. Анализ выявляет возбудитель заболевания методом использования полимеразной цепной реакции. Данная диагностика отличается высокой степенью точности, специфичностью к выявлению отсутствия или наличия вирусной инфекции.

Суть диагностики

Чтобы провести ПЦР анализ на определение вируса гепатита С у пациента берётся венозная кровь, которая потенциально содержит в себе РНК (рибонуклеиновая кислота) HCV искомого вируса.

Тест ПЦР на гепатит С подразумевает порядок действий, когда в частицы крови пациента добавляют:

праймеры (короткие искусственно-синтезируемые участки необходимо гена);
специальный фермент (РНК-полимераза).

После забора биологический материал отправляется на исследования в лабораторию. Одна порция крови нужна для проведения непосредственно ПЦР анализа, вторая – отправляется на исследование по методу ИФА. Фермент способен за короткое время увеличить численность генетического материала вируса возбудителя. В специальном аппарате проводится несколько циклов тепловых и охлаждающих процессов. На конечном этапе полученный материал сопоставляется с генами вируса и делается заключение о наличии или отсутствии патологии в организме пациента.

Суть и проведение ПЦР анализа в лаборатории. Снято каналом SiberianMedicalLaboratory.

Виды исследования

Существует 3 вида диагностики, дающие возможность определять наличия вируса гепатита С в организме человека:

генотипирование;
качественный;
количественный.

Качественный метод

Диагностика гепатита С качественным методом применима для пациентов, у которых в анализе крови определены антитела к вирусу. В случае наличия острой фазы РНК ВГС подобные диагностические мероприятия позволяют определить наличие заболевания за 1-2 недели после инфицирования. В этот период антитела к гепатиту С могут быть ещё не выработаны.

Количественный метод

Количественный метод диагностики используется для определения концентрации вируса в образцах крови. Подобный тест на виремию (степень концентрации) даёт возможность точно определить количество единиц вирусной РНК. Конечный результат выражается в соответственном объёме. Если речь идёт о количественном анализе, тогда показатели измеряются в 1 мл (1 куб. см).

Параметр вирусной нагрузки означает уровень инфекционности заболевания, то есть отображает степень «заразности» пациента. На практике это значит, что чем выше концентрация вируса в крови, тем больше шансов у пациента заразить окружающих гепатитом С. Количественный метод исследования также позволяет установить качество и результативность проведённого лечения.

Генотипирование

Генотипированием выявляют мутации возбудителя заболевания. Перед назначением лечебного плана определяют генотип вируса: от этого зависит качество и продолжительность терапии. Так, например, при лечении заболевания I-типа эффективность составляет 60%, в случае II, III-типа – около 80%.

Достоинства анализа ПЦР на гепатит

Среди основных достоинств проведения процедуры выделяют:

Возможность ранней диагностики. ПЦР анализ способен определить наличие вируса на ранних стадиях заражения.
Низкая погрешность результатов. Исследуемый биологический ресурс позволяет диагностировать участок генетического материала, который является характерным только для одного типа вирусной инфекции. Это обстоятельство позволяет не допустить ложных результатов диагностики.
Высокая степень чувствительности. Анализ ПЦР способен выявлять РНК вируса в небольших количествах, что также дает возможность вовремя отследить скрытые инфекции.

Показания к проведению

Сдавать анализ ПЦР на гепатит C нужно, если есть:

наличие контактов с больными людьми, которое могло бы привести к заражению;
симптомы заболевания цирроза печени (увеличение селезенки, нехарактерные изменения размеров печени, обнаружение на животе венозного сплетения под кожей);
положительные результаты ИФА;
увеличение активности АСТ и АЛТ (проявляется в биохимическом анализе крови);
необходимость контроля ведения антивирусной терапии;
проведение начального этапа лечения для необходимости установления вирусной нагрузки;
проведение завершающего этапа терапии для исключения возможных рецидивов;
наличие у пациента гепатита В, чтобы исключить вариант развития смешанного поражения печени.

Как подготовиться к сдаче крови для ПЦР-исследования

Подготовка к ПЦР анализу включает следующие рекомендации:

забор крови проводится утром;
анализ проводится натощак, поэтому желательно выдержать перерыв между последним приёмом пищи 8-10 часов;
за несколько дней до проведения диагностики следует исключить жирную, острую и жареную пищу, алкогольные напитки и курение;
за сутки до анализа следует воздержаться от тяжёлых физических нагрузок, исключить занятия в спортзале или бассейне.

Результаты анализа: нормы и отклонения

Сам анализ делается недолго, а расшифровывает результаты ПЦР на гепатит С высококвалифицированный специалист гепатолог или инфекционист. На основании результатов анализа пациенту выставляется диагноз.

Чтобы правильно расшифровать результаты обследования, учитывают показатели:

биохимического анализа крови;
данные ультразвукового исследования;
результаты биопсии.

Расшифровка количественного анализа

При получении результатов количественного анализа ПЦР учитываются следующие показатели:

Показатель	Характеристика
Не обнаружено	Норма здорового человека. Данный показатель обозначает, что в организме человека не присутствует генетический материал вируса или его концентрация ниже порога чувствительности.
До 1,8*10^2 МЕ/мл	Значение подобных результатов изучается с повышенной осторожностью, так как необходимо соотношение информации с другими видами диагностирования. Такой результат требует повторного проведения процедуры, ввиду того, что концентрация РНК возбудителя ниже порога количественного определения.
До 8*10^5 МЕ/мл	Вирусная нагрузка данного параметра считается низкой. Снижение концентрации вируса говорит о том, что лечебные мероприятия проводятся эффективно.
Больше 8*10^5 МЕ/мл	Высокая вирусная нагрузка, следует пересмотреть подход к лечению.
Больше 2,4*10^7 МЕ/мл	В этом случае концентрация РНК возбудителя достигает запредельных отметок, поэтому делать выводы об уровне вирусной нагрузке нет смысла. Чаще всего при таком результате назначается повторный тест с разведение частиц крови.

Расшифровка качественного анализа

В заключении качественного анализа ПЦР на гепатит С могут присутствовать следующие данные:

Показатель	Характеристика
Обнаружено	Если зафиксирован положительный ответ, это значит, что в исследуемом образце крови присутствует генетический материал вируса. Простыми словами – подтверждается факт заражения человека.
Не обнаружено	Если в конечном итоге выходит отрицательный ответ, значит, заражение не произошло или количество РНК вируса недостаточно для определения чувствительности.

Расшифровка генотипирования

При получении анализов на генотипирование вируса можно обнаружить следующие варианты показателей:

Показатель	Характеристика
Обнаружена РНК конкретного генотипа	Данный результат показывает то, что в биологическом материале пациента найден вирус гепатита С конкретного генотипа и субтипа. Обозначается каждый генотип цифрой и латинской буквой.
Обнаружена РНК вируса гепатита С	При подобных результатах назначается повторное исследование, так как данный параметр обозначает наличие вируса гепатита, который не относится к 1,2,3 типу. Подобные случаи считаются редкими в России.
Не обнаружено	Данный результат считается нормой и свидетельствует о том, что человек здоров или концентрация вируса ниже порога определения.

Ложноположительные и ложноотрицальные результаты

Ложно положительные и ложноотрицательные результаты ПЦР исследования получаются в таких случаях:

при недостаточной квалификации медицинского персонала, которые проводят диагностику;
ошибки в работе лаборантов, когда кровь транспортируется в лабораторию ненадлежащим способом или биоматериал загрязнён;
случаи ненамеренной подмены проб крови;
нарушения в процессе подготовки биологического материала;
воздействие на исследуемые образцы повышенной температурой.

Среди других причин получения неточных результатов выделяют такие:

кровь пациента содержит остаточные частицы гепарина и прочих коагулянтов;
в образце присутствуют вещества-ингибиторы, способствующие замедлению или остановке полимеразной цепной реакции.

Где сделать ПЦР-диагностику и сколько стоит?

Подобные исследования проводятся:

в частных медицинских центрах;
в КДВ;
в государственных поликлиниках.

Государственные поликлинники проводят анализ ПЦР на гепатит С бесплатно на основаниях наличия у пациента направления от гепатолога или инфекциониста.

Диагностика заболевания на платной основе проводится во всех крупных городах России.

Стоимость диагностики зависит от:

качества оборудования клиники;
скорость выполнения работы;
типа теста.

Цена на изучение крови методом ПЦР колеблется в следующих пределах:

качественный ПЦР анализ — 600-900 рублей (в Москве и Санкт-Петербурге);
качественный ПЦР анализ — 300-800 рублей (регионы);
определение вирусной нагрузки — 17000-22000;
определение других видов инфекции количественного анализа 1200-10000 рублей.

Фотогалерея

Загрузка …

Видео

Ошибочные анализы на гепатит С. Снято каналом Гепатит С побежден.

Источник

После заражения герпетической инфекцией вирус встраивается в структуру ДНК нервной системы. В отсутствии заболеваний и иных факторов, ослабляющих иммунитет, возбудитель не несёт опасности для организма. Однако перед беременностью, а также лицам с иммунодефицитом, необходимо провести анализ на ВПГ (вирус простого герпеса). В первом случае возбудитель способен нарушить внутриутробное развитие ребёнка, во втором — вызвать тяжёлые болезни внутренних органов.

Показания к сдаче анализа

Анализ на вирус простого герпеса 1 и 2 типа (HSV 1 и 2) проводится несколькими способами. К подобным исследованиям прибегают в следующих случаях:

заболевание протекает без выраженных признаков (особенно важно проводить диагностику инфекций, когда идёт развитие генитального герпеса);
у женщин, планирующих беременность, ранее не проявлялись признаки герпеса на слизистой оболочке половых органов или на других участках тела;
частые рецидивы герпеса;
частые обострения хронических заболеваний;
бесплодие и иные болезни органов репродуктивной системы неустановленной этиологии.

Анализ на HSV 1 и 2 также рекомендован лицам, у которых повышен риск развития герпеса: пациенты, перенёсшие операцию по пересадке органов, химиотерапию. Не менее важно пройти процедуру больным ВИЧ и аутоиммунными патологиями.

Анализы на герпес

Сдать анализ на антитела к ВПГ 1 и 2 потребуется в обязательном порядке как до, так и после зачатия. Объясняется это тем, что в отсутствии вируса в организме контакт с носителем возбудителя болезни приводит к заражению не только матери, но и будущего ребёнка. Первичная инфекция во время беременности провоцирует нарушения в развитии или гибель плода. Кроме того, чтобы избежать заражения новорождённого во время родов, рекомендуется провести анализ крови на ВПГ 2. В случае если результаты исследования покажут наличие герпеса этого типа, нередко назначают кесарево сечение.

Обнаружить ВПГ можно с помощью следующих методов:

Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Этот анализ крови на вирус герпеса 1 и 2 типа способен выявить наличие ДНК вируса в организме человека.
Иммуноферментный анализ (ИФА). Метод основан на выявлении иммуноглобулинов, которые организм вырабатывает после заражения ВПГ. ИФА помогает диагностировать вирус, даже если инфицирование было давно.

В случае если проведённый анализ на герпес 1 и 2 типа не дал точного результата, применяется реакция иммунофлюоресценции (РИФ). Данный метод также предусматривает исследование крови, взятой у пациента.

Если герпес часто проявляется на губах, необходимо оценить состояние иммунной защиты, для чего назначается иммунограмма. В тяжёлых ситуациях применяется биохимический анализ крови, с помощью которого выявляются нарушения в работе внутренних органов. Этот метод особенно актуален в случаях обострения генитальной инфекции.

Полимеразная цепная реакция

ПЦР-диагностика проводится с помощью жидкости, взятой из пузырьковой сыпи, или соскобов со слизистых оболочек. Это исследование наиболее результативно непосредственно после инфицирования. Определение ДНК методом ПЦР проводится с целью диагностирования типа вируса.

Эффективность полимеразной цепной реакции объясняется тем, что организм после заражения вырабатывает антигены к ВПГ, которые выявляются в исследуемом материале.

ПЦР анализ – что это такое

Подготовка к процедуре

Диагностику инфекций проводят в лаборатории. Прежде чем сдать материал на ПЦР, пациенту необходимо:

в течение 3-4 дней избегать половых контактов;
за неделю отказаться от спринцевания и использования вагинальных свечей;
отказаться от посещения бань, саун, бассейнов;
не потреблять алкогольные напитки, жареные и солёные продукты;
по возможности ограничить приём медикаментов.

Полимеразная цепная реакция не проводится в период острого течения инфекционных заболеваний, после сильного переутомления или стресса. Каждый из приведённых факторов может повлиять на результаты исследования.

Результаты

Анализ на выявление антигенов вируса простого герпеса позволяет оценить концентрацию частицы возбудителя во взятом материале. В случае если исследование дало положительный результат, говорят о наличии инфекции в организме. В подобных ситуациях назначается лечение противовирусными препаратами либо корректируется проводимая терапия.

Когда исследование даёт результат с отрицательным значением, то процедуру необходимо повторить. Если и следующий анализ не выявил наличие антигенной нагрузки, то противовирусное лечение не проводится.

ПЦР — ни одна инфекция не останется не обнаруженной

Биопсия как дополнение ПЦР

Важная особенность ПЦР заключается в том, что результаты анализов на герпес 1 и 2 типов будут положительны при условии наличия вируса в собранном материале. Однако со временем концентрация возбудителя в отделяемых жидкостях снижается. При этом сохраняется воспаление тканей органов репродуктивной системы.

Этот процесс развивается из-за того, что вирус герпеса меняет иммунный ответ, и организм начинает атаковать собственные клетки. В итоге полимеразная цепная реакция не даёт положительный результат при хроническом течении заболевания. В подобных обстоятельствах менее информативным становится анализ на антитела класса М и G к вирусу простого герпеса (ИФА).

В таких условиях назначается провокационный тест, в рамках которого пациенту назначается приём «Пирогенала» или других препаратов, после чего исследуется кровь на предмет обнаружения частиц возбудителя.

Дополнительно проводится биопсия тканей органов, которые, как предполагает врач, поражены герпесом. Материал забирается из полости матки, предстательной железы или других отделов репродуктивной системы.

Цитопатические изменения клеток герпес определяются посредством обработки взятых образцов формалином и парафином. Вирус, встраиваясь в организм, повреждает ткани изнутри. Поэтому, если в ходе исследования выявляются изменённые ядра и цитоплазма клеток, диагностируется наличие герперовируса. Кроме того, соответствие норме лейкоцитов в мазке также указывает на инфицирование данным возбудителем.

Иммуноферментный анализ

После заражения герперовирусом организм человека вырабатывает особые белки (антитела), которые подавляют активность инфекции. Эти иммуноглобулины разносятся по телу и начинают бороться с возбудителем в зонах, в которые тот «спускается».

Выделяют несколько классов антител, которые выявляются с помощью иммуноферментного анализа:

IgM. Антитела этого типа формируются в течение первых двух недель после заражения. В случае если ИФА покажет наличие IgM в крови, то говорят о недавнем инфицировании либо об обострении герпеса. Со временем концентрация этих антител постепенно снижается.
IgG. Антитела появляются спустя некоторое время после заражения (примерно на 12-16 день). Как и в случае с IgM концентрация IgG повышается при рецидивах заболевания.
IgG к предранним белкам герперовируса. Эти антитела также возникают во время обострения болезни.

В рамках иммуноферментного анализа оценивается авидность иммуноглобулинов IgG. Данный показатель определяет способность антител связываться с вирусными частицами. При обострении болезни авидность низкая. По мере прогрессирования герпеса показатель постепенно повышается. Авидность помогает уточнить, когда произошел рецидив.

Что такое ИФА

Расшифровка

В расшифровке анализа крови на герпес 1 и 2 типа указывают обычно herpes simplex титр. Исследование даёт следующие результаты:

Отсутствие антител IgG и IgM. Пациент не является носителем герпеса.
Отсутствие IgM и наличие ранних и поздних IgG. Результат свидетельствует о недавнем заражении (подтверждается с помощью ПЦР) или рецидиве болезни.
Наличие только поздних IgG. Результат анализа показывает наличие вируса в организме в латентном состоянии.
Наличие IgM и IgG (в том числе и поздних). Результат анализа сообщает о недавнем обострении или заражении.
Результаты анализа на авидность расшифровываются следующим образом:
50-60%. Такой результат требует повторного проведения иммуноферментного анализа через 2 недели.
Ниже 50%. Показатель свидетельствует о недавнем заражении.
Выше 60%. Выявлен хронический герпес.

В случае если результат исследования окажется положительным, то пациенту необходимо обратиться к терапевту (дерматологу) при герпесе, локализующемся на теле, или гинекологу (урологу) — на половых органах.

Реакция иммунофлюоресценции

Эффективность РИФ напрямую зависит от уровня концентрации вируса в собранном материале. Суть метода сводится к следующему: в кровь вводятся специальные красящие вещества, в состав которых включают антитела к герпесу. В случае если в организме присутствует возбудитель, последний вступает в химическую реакцию. Красящие вещества подсвечивают вирусные частицы под микроскопом.

РИФ для выявления герпеса применяется редко. Объясняется это высокой чувствительностью метода к различным инфекциям. Поэтому, если в организме человека присутствуют другие вирусные частицы, результат РИФ окажется ложноположительным.

Другие методики

Иногда для выявления герпеса в организме применяется культуральный метод, в рамках которого производится забор клеток. Последние затем заражаются вирусными частицами, после чего оценивается характер протекающих процессов.

При необходимости назначаются аллергопробы, которые исключают или подтверждают наличие у пациента повышенной чувствительности к определённым раздражителям. Данная процедура проводится в случаях, когда не удаётся дифференцировать по внешним признакам аллергическую реакцию и обострение герпеса из-за схожести в симптомах.

Список анализов, необходимых для постановки диагноза, составляется индивидуально для каждого пациента. Герперовирусы 1 и 2 типов не создают угрозы для организма. При этом частые проявления инфекции свидетельствуют о резком ослаблении иммунитета. В подобных случаях нужно обращаться к иммунологу.

Источник: herpes.center

Источник