Анализ крови на парную сыворотку
Методика забора крови на парные сыворотки применяется для лабораторной серологической диагностики гриппа и других острых респираторных заболеваний. Серологический метод основан на определении нарастания титра антител к возбудителю заболевания в период реконвалесценции по сравнению с острым периодом болезни.
Кровь для исследования методом «парные сыворотки» берут из вены также как на серологическое исследование в количестве 2-3 мл. Кровь берут дважды: первую порцию в первые дни заболевания (не позднее 5 дня), вторую через 10-12 дней. После отстаивания и центрифугирования крови сыворотку переносят в другую пробирку, маркируют и хранят в холодильнике при температуре +2+40С. В лабораторию доставляют обе порции сыворотки одновременно.
Охарактеризуйте состав аптечки для оказания экстренной помощи при возникновении аварийной ситуации (аптечка анти-СПИД).
Аптечка для оказания экстренной помощи при возникновении аварийной ситуации (аптечка анти-СПИД).
1. Спирт этиловый 70 -для обработки кожных покровов, полоскания ротовой полости.
—5% р-р йода – для обработки кожи;
Перевязочный материал: лейкопластырь – для заклеивания пореза, прокола после обработки. Салфетки медицинские – для обработки кожи
Аптечка хранится в промаркированной ёмкости из материала подвергающегося дезинфекции, в доступном месте.
6.Опишите порядок действий медицинского работника, в случае возникновении аварийных ситуаций.
Действия медицинского работника при аварийной ситуации.
— в случае порезов и уколов немедленно снять перчатки, вымыть руки с мылом под проточной водой, обработать руки 70%-м спиртом, смазать ранку 5%-м спиртовым раствором йода;
— при попадании крови или других биологических жидкостей на кожные покровы это место обрабатывают 70%-м спиртом, обмывают водой с мылом и повторно обрабатывают 70%-м спиртом;
— при попадании крови и других биологических жидкостей пациента на слизистую глаз, носа и рта: ротовую полость промыть большим количеством воды и прополоскать 70% раствором этилового спирта, слизистую оболочку носа и глаза обильно промывают водой (не тереть);
— при попадании крови и других биологических жидкостей пациента на халат, одежду: снять рабочую одежду и погрузить в дезинфицирующий раствор или в бикс (бак) для автоклавирования;
— Прием антиретровирусных препаратов должен быть начат в течение первых двух часов после аварии, но не позднее 72 часов.
— Необходимо в возможно короткие сроки после контакта обследовать на ВИЧ и вирусные гепатиты B и C лицо, которое может являться потенциальным источником заражения, и контактировавшее с ним лицо.
Опишите порядок действий медработника, проводимых для предупреждения профессионального заражения при работе с кровью и другими биологическими жидкостями.
(Выписка из СП 3.1.5.2826-10 «Профилактика ВИЧ-инфекции»)
Основным принципом работы медперсонала для предотвращения внутрибольничной передачи ВИЧ является применение в каждом ЛПУ мер предосторожности в отношении каждого больного как потенциально зараженного ВИЧ.
— при выполнении любых манипуляций медицинского характера сотрудник ЛПУ должен быть одет в халат, шапочку, одноразовую маску (а при необходимости — очки или защитные щитки).
— При наличии ран на руках, экссудативных поражений кожи или мокнущего дерматита, медработник на время заболевания отстраняется от ухода за пациентами и контакта с предметами для ухода за ними.
— Все манипуляции, при которых может произойти загрязнение рук кровью, сывороткой крови или другими биологическими жидкостями, проводить в резиновых медицинских перчатках. Резиновые перчатки, снятые единожды, повторно не используют из-за возможности загрязнения рук. В процессе работы перчатки обрабатывают 70% спиртом или любыми другими дезинфицирующими препаратами.
— соблюдать меры предосторожности при выполнении манипуляций с режущими и колющими инструментами (иглы, скальпели, боры и пр.); следует избегать уколов, порезов перчаток и рук;
-. При подготовке к проведению манипуляции больному с ВИЧ-инфекцией убедится в целостности аварийной аптечки;
—Выполнять манипуляции ВИЧ-позитивному пациенту в присутствии второго специалиста, который может в случае разрыва перчаток или порезе продолжить их выполнение.
-Передавать все острые инструменты в ходе операции через промежуточный лоток, а неиз рук в руки, исключить использование пальцев для направления иглы, желательноизменить хирургические приемы с переходом на использование иглодержателей.
— Все медработники должны проходить регулярное обучение по мерам профилактики профессионального заражения и внутрибольничной передачи ВИЧ-инфекции.
Источник
это обнаружение антител к определенному антигену в сыворотке
больного и определение их титра. Используются серологические
реакции: реакция агглютинации (РА), реакция непрямой
гемагглютинации (РНГА), реакция связывания комплемента (РСК), и др.
Существует два способа подтверждения диагноза заболевания
серологическим методом: 1 – определения наличия антител в
диагностическом титре; 2 – определение природы антител. По природе
антитела могут быть: инфекционные, прививочные,
анамнестические.Природу антител определяют при исследовании
парных сывороток. Парные сыворотки– это две сыворотки, взятые у
больного с интервалом в 5-10 дней. Титр инфекционных антител в
парных сыворотках возрастает в 4 раза и более, что подтверждает
клинический диагноз заболевания. Титр анамнестических и
прививочных антител в парных сыворотках не меняется или меняется
незначительно. Для обнаружения антител необходимы известные
антигены. Диагностические препараты, содержащие антитела и
используемые для серологической диагностики, называются
диагностикумы.Диагностикумы могут содержать взвесь убитых
микробов, отдельные антигены микробов, эритроциты с нагруженным на их поверхность антигеном (эритроцитарные диагностикумы).
Собственно иммунный метод диагностики. Цель метода – индикация и
идентификация антигенов возбудителя в исследуемом материале.
Используются РП, РИФ, ИФА, РСК. Собственно иммунный метод – это
экспресс-диагностика, результат исследования получается в течение
нескольких часов или одних суток.
ВОПРОС 23
Агглютинация — это склеивание и выпадение в осадок микроорганизмов или других клеток (корпускулярных антигенов) под действием специфических антител в присутствии электролитов.
РА применяется для серологической диагностики инфекционных заболеваний (реакция Видаля — при брюшном тифе и паратифах, р. Вейгеля — при эпидемическом сыпном тифе, р. Райта — при бруцеллезе и др.) и для серологической идентификации микробов.
В РА участвуют 3 ингредиента:
1) корпускулярный АГ (агглютиноген);
2) антитело (агглютинин);
3) изотопический раствор хлорида натрия (электролит).
Антигены — взвесь живых и убитых микроорганизмов.
Идентификацию вида (серотила) микроба, выделенного от больного или внешней среды, определяют по известному антителу (диагностической иммунной сыворотки). Положительный результат реакции укажет на то, что неизвестный микроб идентичен тому, который был взят в качестве антигена для приготовления иммунной диагностической сыворотки.
Агглютинирующая диагностическая иммунная сыворотка готовится в производственных условиях путем иммунизации кроликов (реже лошадей) соответствующими антигенами (взвесью живых или убитых микроорганизмов, эритроцитов и т.д.).
Полученную иммунную сыворотку, определив его титр, разливают по ампулам с добавлением консерванта. Иногда употребляют высушенную сыворотку.
Существует два основных метода постановки РА:
1) ориентировочная РА на предметном стекле, наступающая в течение нескольких минут. Применяется только с целью идентификации вида (серотипа) выделенной из организма больного чистой культуры по его специфичности как АГ к серотипу АТ;
2) развернутая РА в пробирках, которая учитывается через 2 часа выдерживания при 37 «С и на следующий день стояния при комнатной температуре. Применяется с целью идентификации микроба и обнаружения АТ в сыворотке крови.
РА входит в группу методов, в которых реакция протекает в две фазы:
1) соединение АГ с АТ (специфическая фаза)
2) выпадение образовавшегося комплекса АГ-АТ (агглю-тината) в растворе солей (электролите) в осадок (неспецифическая фаза).
Достоинства РА: простота постановки и экспрессность.
Недостатки: уступает по специфичности и чувствительности.
ВОПРОС 25
Таким образом, реакцией лизиса называется серологический тест, основанный на
растворении цельноклеточного АГ, соединенного с АТ, в присутствии комплемента.
б а к т е р и о л и з а— растворения бактерий и гемолиза.
Бактериолиз.Реакция бактериолиза состоит в том, что при соединении иммунной
сыворотки с соответствующими живыми бактериями в присутствии комплемента происходит
лизис микробов.
Реакция бактериолиза наблюдается как в организме иммунного животного, так и в
пробирке. Под воздействием антител — бактериолизинов микробы теряют подвижность,
меняют форму (набухают), затем распадаются как бы на отдельные зернышки и, наконец,
совсем растворяются.
Комплемент проявляет литическое действие только в присутствии иммунного
комплекса «клетка + лизин». Большинство микроорганизмов
малочувствительны к литическому действию комплемента. Поэтому
реакция лизиса не нашла широкого применения в лабораторной практике.
В практике реакцией бактериолиза пользуются для: 1) определения вида неизвестного
микроба при помощи специфической бактериолитической сыворотки; 2) определения в
исследуемой сыворотке наличия бактериолизинов к заранее известному микробу. Реакция
бактериолиза воспроизводится в пробирке (in vitro) и в организме животного (in vivo).
Реакция гемолизаявляется разновидностью реакции лизиса. В качестве антигена в этой
реакции применяют эритроциты, которые лизируются гемолизинами в присутствии комплемента.
Гемолизины появляются в организме при искусственной иммунизации чужеродными
эритроцитами. Иммунная сыворотка, содержащая гемолизины, носит название гемолитической
сыворотки. Реакция гемолиза состоит в том, что при воздействии гемолитической сыворотки
на соответствующие эритроциты в присутствии комплемента происходит их растворение
(гемолиз), причем мутная взвесь эритроцитов превращается в ярко-красную прозрачную
жидкость — так называемую лаковую кровь. Действие иммунной гемолитической сыворотки
строго специфично — она вызывает гемолиз только тех эритроцитов, которые были взяты для
иммунизации. Реакция гемолиза благодаря своей демонстративности получила широкое
применение в лабораторной практике: ею пользуются в качестве показателя адсорбции
комплемента при диагностических реакциях,
Обычно для реакции гемолиза принято пользоваться в качестве антигена бараньими
эритроцитами и, следовательно, гемолитической сывороткой, полученной при иммунизации
животного (кролика) теми же эритроцитами.
П о с т а н о в к а р е а к ц и и .
Для постановки реакции гемолиза необходимо иметь:
1) антиген: отмытые эритроциты барана в
2) иммунную гемолитическую сыворотку, содержащую гемолизины к бараньим
эритроцитам;
3) комплемент — свежую сыворотку морской свинки в разведении 1:10;
4) физиологический раствор (ИХН)
Титром гемолитической сыворотки называют ее максимальное разведение, которое в
присутствии комплемента при температуре 37° С вызывает полный гемолиз эритроцитов барана на протяжении 1 ч.
ВОПРОС 26
Источник
Осуществляется в периферической лимфоидной ткани при участии 3 типов клеток: АПК, Тл-хелперов, Тл-эффекторов. Его результатом является появление Т -цитотоксических клеток ( ЦТЛ или Тл-киллеры) и Тгзт . Клеточный иммунный ответ – это второй механизм иммунитета, возникающий на антигенный стимул. Он лежит в основе многих физиологических и патологических реакций организма.
Клеточный иммунный ответ всегда носит нестерильный характер. Клеточный иммунный ответ обеспечивает иммунитет при: -вирусных инфекциях, бактериальных, где возбудители паразитируют внутриклеточно, -аллергию замедленного типа, трансплантационный иммунитет, противоопухолевый, некоторые виды иммунопатологии и старение.
Первичный иммунный ответ –ответ, возникающий на первое попадание антигена в организм, вторичный иммунный ответ– возникает при повторном попадании антигена. При гуморальном иммунном ответе есть две фазы: индуктивная и продуктивная.
Индуктивная фаза– это время от момента попадания антигена в организм до начала выработки антител, она включает клеточную перестройку, восприятие антигена АПК, пролиферацию и трансформацию определенного клона лимфоцитов. Продуктивная фаза– это выработка антител и уничтожение антигена. При первичном иммунном ответе индуктивная фаза длительная, ее продолжительность 3-5 суток. Выработка антител начинается с Ig M, титр антител достигает максимума к концу 2, началу третьей недели, титр антител быстро падает, к концу 4 недели антител в сыворотке крови остается очень мало. Во время первичного иммунного ответа образуются клетки иммунной памяти, которые быстро распознают антиген и быстро реагируют на него при повторном его попадании в организм. При вторичном иммунном ответе индуктивная фаза короткая – максимально 24 часа ( как правило, она короче), выработка антител начинается с Ig G, титр антител достигает максимума к 7-8 дню, титр антител в несколько раз выше, чем при первичном иммунном ответе и сохраняется несколько недель или даже месяцев.
Серологический метод диагностики инфекционных заболеваний –это обнаружение антител к определенному антигену в сыворотке больного и определение их титра. Используются серологические реакции: реакция агглютинации (РА), реакция непрямой гемагглютинации (РНГА), реакция связывания комплемента (РСК), и др.
Существует два способа подтверждения диагноза заболевания серологическим методом: 1 – определения наличия антител в диагностическом титре; 2 – определение природы антител. По природе антитела могут быть: инфекционные, прививочные, анамнестические.Природу антител определяют при исследовании парных сывороток. Парные сыворотки– это две сыворотки, взятые у больного с интервалом в 5-10 дней. Титр инфекционных антител в парных сыворотках возрастает в 4 раза и более, что подтверждает клинический диагноз заболевания. Титр анамнестических и прививочных антител в парных сыворотках не меняется или меняется незначительно. Для обнаружения антител необходимы известные антигены. Диагностические препараты, содержащие антитела и используемые для серологической диагностики, называются диагностикумы.Диагностикумы могут содержать взвесь убитых микробов, отдельные антигены микробов, эритроциты с нагруженным на их поверхность антигеном (эритроцитарные диагностикумы).
Реакция агглютинации –склеивание корпускулярных антигенов под действием антител в присутствии электролита. Реакция агглютинации используется для идентификации бактерий по антигенной структуре, в этом случае она ставится на предметном стекле (ориентировочная реакция), для идентификации бактерий по антигенной структуре необходимы диагностические агглютинирующие сыворотки.
Диагностические сыворотки – это сыворотки крови кроликов, иммунизированных определенными микробными антигенами. Реакция агглютинации используется также для определения титра и природы антител в серологическом методе диагностики. В этом случае ставится развернутая РА с использованием диагностикумов.
Нагрузочные реакции иммунитета –реакции, в которых антиген нагружается на какой-либо носитель. В качестве носителя антигена используются эритроциты (РНГА), частицы латекса (латексная агглютинация), убитые микробные клетки (коагглютинация), частицы активированного угля (угольная конгламерация).
Реакция Кумбса.Реакция Кумбса используется для определения неполных антител. Неполные антитела – антитела с одним активным центром (одновалентные антитела), они не дают видимых реакций при взаимодействии с антигеном. В реакции Кумбса используется антиглобулиновая сыворотка (АГС), с помощью которой можно увидеть результат реакции по выявлению неполных антител.
Источник
Кровь представляет собой соединительную ткань, состоящую из жидкой среды, иначе называемой плазмой, клеток в ней, представленных лейкоцитами, а также структур без ядра – эритроцитов и тромбоцитов. Она осуществляет ряд жизненно важных для организма функций:
— обогащает клетки кислородом;
— способствует обогащению тканей питательными веществами;
— регулирует температуру организма;
— защищает от бактерий, вирусов и грибков.
Плазма крови: ее составляющие, функции
Плазма является жидким бесцветным раствором крови, имеющим сложный состав, в котором растворены все питательные вещества организма. Она состоит на 90% из воды и на 10% из форменных элементов, представленных в виде белков, липидов, углеводов и минеральных веществ. Плазма способствует разжижению крови и делает ее консистенцию оптимальной для того, чтобы транспортировать важные питательные элементы и вещества ко всем клеткам организма.
Если из плазмы удалить фибриноген, компонент, отвечающий за свертываемость крови, то получится сыворотка крови. Она применяется для переливания после хирургического вмешательства, а также в акушерстве и гинекологии.
Что представляет собой кровяная сыворотка?
Это жидкость желтоватого цвета, отделенная от кровяного сгустка. Ее специфический цвет свидетельствует о наличии в ней жёлчного пигмента – билирубина. Применяется для биохимических анализов, исследования на наличие разного рода инфекционных заболеваний, для оценивания результативности вакцинации. Сыворотка крови человека или животного, иммунизированная определенным антигеном, может стать иммунной сывороткой, применяемой для диагностики и лечения ряда болезней. Ее также применяют для определения группы крови. Для клинических практик используют свежую или предварительно замороженную кровяную сыворотку.
Как получают кровяную сыворотку?
Сыворотка крови может быть получена несколькими способами:
— В термостате, куда помещается стерильно взятая кровь на полчаса. После этого при помощи пипетки отслаивается сгусток от стенки пробирки и размещается в холодильнике. Оставшаяся сыворотка сливается или отсасывается в стерильную пробирку.
— Путем нейтрализации элементов фибриногенов с помощью ионов кальция, за счет чего резко увеличивается стабильность.
— Путем естественного свертывания получают так называемую нативную сыворотку.
Биохимическое исследование крови
Анализ сыворотки крови можно осуществить путем биохимического анализа, что позволяет понять, как работают внутренние органы. Стандартный анализ показывает состояние и количество белков, углеводов, липидов, минерального обмена.
Кровь для исследования берется из вены, объем составляет в среднем 5 мл. Сдается сыворотка крови утром, на голодный желудок, то есть нельзя есть или пить за 12 часов до забора кроки. За 14 дней до сдачи необходимо приостановить прием препаратов, действие которых направленно на снижение количества жиров.
Правильная трактовка полученных результатов анализа и знание стандартных показателей дает возможность четко установить все дисбалансы, нарушения и воспалительные процессы в организме и расскажет о состоянии внутренних органов.
Нормальные показатели
Исследование сыворотки крови начинается со сдачи общего анализа. Анализ на общий белок покажет количество всех белков (альбумина и глобулина), содержащихся в сыворотке. Норма белков и аминокислот для младенцев до 1 месяца колеблется в пределах 46,0 – 68,0 г/л, для детей до года – 48,0 – 76,0 г/л. Белки сыворотки крови для детей в возрасте до 16 лет должный иметь показатели 60,0-80,0 г/л, у взрослых – 65,0-85,0 г/л.
Количество белка может меняться в зависимости от положения тела и физической активности. При подъеме тела количество белков увеличивается на 10% в течение получаса, активная физическая работа заставляет меняться показатели в пределах 10%. Пережатие вены и работа рукой в процессе забора крови могут также дать завышенные показатели.
Изменения нормальных показателей: основания
Белки плазмы синтезируются клетками печени. Анализ показывает уровень содержания:
— нормальный;
— пониженный;
— повышенный.
Анализ сыворотки крови покажет пониженное содержание белка, если возникает недостаточное его поступление в организм вследствие голодания или соблюдения диеты без белков. Причиной снижения уровня может послужить рак печени или другое воспалительное заболевание этого органа, новообразования, ожоги и другие заболевания, спровоцированные повышенной потерей белка.
Также может быть нарушен процесс образования белка в организме, например, после длительного лечения кортикостероидами или как результат расстройства процесса всасывания из-за энтерита, энтероколита, панкреатита.
Последствием дегидратации после травмы или ожога может стать повышение концентрации белка. Возникновение острой инфекции приводит к повышению показателей, связанных с обезвоживанием организма. При этом уровень белков может нормализоваться самостоятельно, что будет свидетельствовать о процессе выздоровления.
Определение крови
Сыворотка для распознания группы крови должна быть стандартной, то есть определенной группы, приготовленной из человеческой крови. Для теста необходимо подготовить сухое предметное стекло, стандартную сыворотку трех групп крови, раствор хлорида натрия, вату, стеклянные палочки и пипетки.
Предметное стекло разделяется на три сектора, куда помещают различными пипетками по капле сыворотки каждой из групп крови. Стеклянной палочкой капли взятой крови переносятся на тарелку рядом с сывороткой. Поочередно новыми палочками смешиваем кровь с сывороткой до получения однородного розового цвета. По истечении трех минут к каждой полученной смеси добавляем физраствор. Постоянно покачивая предметное стекло следим за реакцией. Уже в первые минуты положительной реакции должны просматриваться зернышки, представляющие собой склеенные эритроциты. Эти зернышки могут слиться в более крупные, а иногда положительная реакция может проявиться в виде хлопьев разной величины. При отрицательной реакции первоначальный розовый цвет смеси останется без изменений.
Сыворотка крови — это не просто сложная смесь способная рассказать о состоянии организма, но и важный элемент большинства противовирусных лекарств.
Источник