Анализ крови на паразитов ифа иммуноферментный анализ
Диагностика – первый и важный этап медицинской помощи, от успешности которого зависит эффективность назначаемой терапии при любом заболевании. Это утверждение справедливо и для паразитарных болезней, большинство из которых не вызывают специфических симптомов, поэтому поиски причин полностью сводятся к назначаемым анализам. Из самых современных и высокоинформативных следует выделить иммуноферментный анализ. Он даёт представление не только о наличии антител к определённому виду паразитов, но выявляет количественную характеристику этих антител, которая даёт информацию о стадии заболевания или о ходе лечения.
Преимущества и недостатки
Иммуноферментный анализ крови (ИФА) на паразитов произвёл настоящую революцию в лабораторной аналитике паразитологии, на что есть целый ряд причин:
- Высокая чувствительность метода. Даже если в образец попадёт единственный элемент организма паразита, этого будет достаточно, чтобы получить удовлетворительный результат. Другие лабораторные методы анализов не могут конкурировать с ИФА по этому показателю.
- Специфичность метода. Безошибочность диагностики исключает неправильную идентификацию возбудителя, поскольку за реакцию отвечают специфические антитела. То есть, вид паразитов, вызвавший заболевание, при ИФА не может быть спутан даже с очень близким по внешнему виду или хромосомному набору.
- ИФА с успехом заменяет бактериологический метод, который требовал более длительного периода до получения данных и подразумевал проведение лечения вслепую до ознакомления с результатами. Иммуноферментный метод позволяет получить данные в течение двух суток.
- Высокий уровень технологичности сводит к минимуму ошибки, вызванные влиянием человеческого фактора, который остаётся неизменно высоким при других методах. Это гарантирует высокую точность диагностики и исключает значительные погрешности.
- ИФА даст результаты даже на начальных стадиях заражения, когда остальные анализы ещё не выявят ни возбудителей, ни их продуктов жизнедеятельности.
- Можно узнать, на какой стадии развития в момент забора крови находился возбудитель: циста, личинка или взрослая особь.
У метода есть и определённые недостатки:
- Расшифровкой полученных данных должен заниматься только квалифицированный специалист.
- В назначении на анализ должен быть безошибочно указан тип возбудителя, то есть врач должен заранее предполагать, наличие какого паразита могло вызвать начало болезни.
- Для проведения иммуноферментного определения гельминтов необходима высокотехничная лаборатория со специализированным оборудованием и высококвалифицированным персоналом, прошедшим специальную подготовку и получившим соответствующие сертификаты о праве выполнения ИФА. Такие лаборатории встречаются далеко не в каждой больнице.
- Высокая стоимость. Аналогичные методики стоят в разы дешевле, поэтому иммуноферментный анализ иногда недоступен по цене для пациентов из социальных групп с низкой платежеспособностью.
Иммуноферментный анализ крови на паразитов выполняют только по направлению от специалиста, в котором указано, на какой тип гельминтов или группу необходимо проверить пациента. Без направления пробу крови в лаборатории попросту не возьмут.
Принцип действия
Основной принцип заключается в образовании комплекса антигенов с антителами. Процесс зависит от двух составляющих:
- Иммунный ответ. Он означает, что искомая часть в пробе связывается с молекулами того препарата, который добавляется по методике. Это приводит к образованию особого комплекса, не возникающего, если добавляемый препарат не будет рассчитан на имеющийся тип паразитов.
- Ферментативная реакция. После образования комплекса лаборант судит о результате по появлению определённой окраски. После этого результаты можно увидеть, оценить и измерить.
Такой подход обеспечивает очень высокую результативность – около 99,97%.
Биоматериал для анализа
Для проведения иммуноферментного анализа на паразитов у пациента берут пробу венозной крови в объёме 3-5 см3. Дальше в лаборатории все форменные элементы (эритроциты, гемоглобин и пр.) отделяют, а для теста оставляют только сыворотку желтоватого цвета, в которой содержатся необходимые антигены.
Биоматериал отбирают из локтевой вены. Чтобы избежать ложных результатов, кровь сдаётся натощак. За две недели до анализа для достоверности результатов нужно отказаться от любых антибиотиков и алкоголя. Также просят перед исследованием не пить газированную воду.
В тех случаях, когда исследование проводят для новорожденных детей, биоматериалом может быть плацента или пуповинная кровь.
Как проводится
Кровь помещают в стерильную лабораторную пробирку. К имеющемуся образцу добавляют лабораторные заготовки с антителами к тем паразитам, которые пытаются определить у пациента. На образование комплекса уходит несколько суток.
В сложных случаях, когда для начала лечения нужны срочные данные, применяют лабораторные методы катализа процесса для ускорения реакции. Цена таких методик ещё выше, но они немного уступают классическим в точности. Зато эти экспресс-методики позволяют получить ответ уже через 2-3 часа после отбора биологического материала.
Расшифровка полученных данных
Заниматься интерпретацией результатов ИФА может только специалист, направивший пациента на тестирование. Иногда для того, чтобы получить реальную картину, необходим сравнительный анализ свежих данных с теми, которые были получены раньше.
Иммуноферментная методика предоставляет данные о трёх типах иммуноглобулинов (антител):
- IgM. Появляются в крови на четвёртые сутки после заражения и наращивают свою концентрацию, потом она идёт на спад, и после шести недель эти вещества уже могут не присутствовать в пробе. Их наличие показывает, что процесс протекает остро, и паразиты активно размножаются в кишечном тракте или других органах и системах органов.
- IgG. Начинают вырабатываться после третьей-четвёртой недели заражения и могут сохраняться на протяжении нескольких месяцев или лет. Такая картина говорит о том, что заболевание приняло хроническую форму и протекает скрыто. При рецидивах уровни IgМ и IgG параллельно увеличиваются.
- IgA. Этот тип иммуноглобулинов начинает появляться после двух недель присутствия паразитов в организме, а исчезает после одного-двух месяцев. Значительное повышение уровня может указывать на начало рецидива.
Адекватно оценить все эти показатели, их взаимодействие и реальную картину может далеко не каждый врач, а только высококвалифицированный специалист. Поэтому категория врача в этом отношении играет не меньшую роль, чем уровень лаборатории, где проводят исследования.
Результаты пациенту предоставляют на стандартном бланке лаборатории в виде таблицы, в которой перечислены все антитела, а напротив них указаны плюсы (в случае обнаружения) или минусы (если элементы не выявлены). Также указываются данные в количественном выражении, свидетельствующие о концентрации найденных веществ в условных единицах.
Стоимость
Иммуноферментный анализ входит в категорию дорогостоящих, но его цена отличается в зависимости от региона и уровня лаборатории.
Стоимость варьирует в зависимости оттого, на какой вид паразита направлено исследование. В сети медицинских лабораторий «Гемотест» цена на ИФА стартует от 520 рублей (на токсокароз) и доходит до 1120 рублей (дифференциальная диагностика гельминтозов).
В независимой лаборатории «Invitro», которая имеет представительства во многих крупных и средних городах России, цена на иммуноферментное определение паразитов начинается от 650 рублей (на лямблиоз) и достигает 1000 рублей (на токсоплазмоз).
Читайте также:
- Норма и расшифровка анализа крови на антитела IgG к аскаридам
- Как сдавать анализ крови на хламидии, его расшифровка
- Кому нужно сдавать анализ крови на наличие глистов и как он называется
Источник
Человеческий организм является «привлекательным местом» для обитания патогенных микроорганизмов, паразитов: поселившись во внутренних органах, они становятся причиной нарушения самочувствия и развития многих патологических процессов. Для обнаружения паразитарного поражения необходимо сдать анализ крови для проведения исследования методом ИФА.
Особенности проведения анализа крови на паразитов методом ИФА
Некоторые виды паразитов почти не влияют на здоровье человека, а некоторые – могут нести смертельную опасность. Обнаружить паразитарное поражение возможно только с помощью методов лабораторной диагностики. До недавнего прошлого для выявления наличия в организме вредоносных микроорганизмов применяли методы исследования каловых масс, мокроты и дуоденального содержимого.
В современной медицине существует более эффективная методика, позволяющая определить паразитарную инвазию на самой ранней стадии – иммуноферментный анализ крови.
Иммунологическое исследование крови позволяет выявить наличие в человеческом организме вредителей более достоверно (не менее 85%) – его суть заключается в обнаружении и определение в циркулирующей крови количества антител специфических иммуноглобулинов класса М и G к антигенам паразитов и продуктам их жизнедеятельности. Антитела IgM продуцируются иммунной системой спустя 10 дней после заражения. Выработка антител IgG происходит несколько позже, их концентрация сохраняется на высоком уровне до периода реконвалесценции (выздоровления).
Иммуноферментный анализ позволяет определить количество и вид патогенных микроорганизмов, изучить динамику паразитарной инвазии и вызванных ею патологических процессов.
Выявление специфических антител возможно при изучении несвойственной здоровому организму иммунной реакции, во втором этапе исследования – ферментативной реакции – полученные данные переводятся в стадию качественного и количественного оценивания.
Важно знать, что ИФА проводится опытными квалифицированными специалистами в компетентном лабораторном центре, обеспеченным сложным оборудованием и необходимыми реактивами.
На каких паразитов сдают анализ?
Иммуноферментное исследование крови позволяет выявить следующие виды вредителей:
- Простейшие микроорганизмы – состав их тела имеет одну клетку. Паразитируют на слизистых покровах, висцеральных органах, кишечнике, циркулирующей крови. Наиболее распространенные представители – токсоплазмы (проникают и размножаются в клетках крови – моноцитах, макрофагах), дизентерийная амеба, лямблии (обитают в желчевыводящих путях и тонкой кишке).
- Многоклеточные паразиты — состоят из множества клеток, ярчайшими представителями этого класса являются гельминты (паразитические черви, вызывающие гельминтозы). Чаще всего человек подвержен инфицированию аскаридами, острицами, ленточными червями (паразитируют в тонком кишечнике), эхинококком (способен поражать любой орган — легкие, сердце, головной мозг).
Когда необходимо сдать анализ на паразитов?
Наиболее распространенный вариант попадания вредителей в человеческий организм – немытые руки, фрукты и овощи.
Практикующие инфекционисты, гастроэнтерологи рекомендуют проведение иммуноферментного исследования при наличии у пациента следующих характерных клинических признаков инвазии:
- дисбактериоза;
- синдрома раздраженного кишечника – метеоризма, расстройств стула;
- зуда в аноректальной области;
- железодефицитной анемии;
- суставной и мышечной боли;
- нарушений сна;
- высыпаний на кожных покровах;
- язвенных поражений слизистых оболочек;
- общего недомогания, тошноты;
- раздражительности;
- нарушений аппетита;
- апатии;
- повышенной чувствительности к некоторым продуктам питания;
- изменений веса;
- дефицита витаминов и жизненно важных элементов;
- воспалительных заболеваний органов дыхательного тракта;
- ларвального конъюнктивита;
- иммунодефицита.
Как подготовиться к сдаче?
Биологический материал для исследования – плазма крови, лишенная фибриногена. Отбор производят из локтевой вены в утреннее время – до 11.30.
Накануне манипуляции пациенту необходимо выполнить несколько условий
- Исключить прием лекарственных препаратов, газированных и алкогольных напитков.
- Ограничить курение, психоэмоциональные, физические и пищевые нагрузки (воздержаться от жирных, жареных и острых блюд).
- Сдавать кровь на голодный желудок, до выполнения других медицинских процедур (рентгеноскопии, УЗИ, сканирования, сеансов массажа и физиотерапии).
Расшифровка результата анализа крови на паразитов
Данные иммуноферментного анализа содержат значения концентраций иммунных антител.
Негативным результатом считается уровень содержания в крови IgG IgM: <0,85 Ед/мл — свидетельствует об отсутствии паразитарной инвазии.
Титр иммуноглобулинов от 0,85 до 1,15 – сомнительный результат, наблюдается при:
- ранней или поздней стадии инфицирования;
- слабом иммунном ответе.
Концентрация специфических антител: >1,15 Ед/мл – позитивный результат, свидетельство паразитарного поражения организма. В острой фазе заболевания у пациентов преобладают антитела класса М, при хроническом процессе – антитела класса G. При обострении хронической инвазии наблюдается одновременное увеличение количества иммуноглобулинов М и G.
Когда анализ крови на паразитов нужно сдать повторно?
Опытные специалисты рекомендуют повторить исследование крови для:
- подтверждения достоверности негативного результата;
- уточнения сомнительного результата (спустя 14 дней после первого тестирования) – если при повторном определении результат снова сомнительный, тест трактуют как негативный.
Регулярное исследование крови на наличие паразитов необходимо проводить людям:
- имеющим домашних животных;
- работающим в сельском хозяйстве и животноводстве;
- употребляющим пищевые продукты, не прошедшие достаточную термическую обработку – суши, сыровяленое мясо и рыбу;
- предпочитающим пить неочищенную воду из скважин и «парное» молоко.
Источник
Иммуноферментный анализ (ИФА) — метод лабораторной диагностики, позволяющий обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях.
Где можно сдать анализ?
ИФА — один из самых распространенных и точных методов для выявления инфекций, передающихся половым путем, в частности ВИЧ, ВПЧ, гепатита В.
Узнать больше…
Для того чтобы результаты анализов были максимально достоверными, необходимо правильно подготовиться к их сдаче.
Как подготовиться?
Современная диагностика в медицине немыслима без высокочувствительных лабораторных анализов. Прежде для установления причин тех или иных симптомов врачи были вынуждены ориентироваться на косвенные признаки болезни, а также проводить многоступенчатые микроскопические исследования в попытке обнаружить возбудителя инфекции. Сегодня достаточно одного-единственного теста — такого как иммуноферментный анализ — чтобы подтвердить или опровергнуть первоначальный диагноз.
Основные понятия и принцип метода иммуноферментного анализа
Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод лабораторной диагностики, основанный на реакции «антиген-антитело», который позволяет выявить вещества белковой природы (в том числе ферменты, вирусы, фрагменты бактерий и другие компоненты биологических жидкостей).
Чтобы понять, как устроен иммуноферментный анализ, попробуем разобраться в сути реакции «антиген-антитело». Антиген — это чужеродная для организма молекула, как правило, белкового происхождения, которая может попасть в тело человека вместе с инфекционным агентом. Частицы чужой крови (если она не совпадает с нашей по группе) также являются антигенами. В организме антигены способны вызывать иммунную реакцию, направленную на защиту целостности внутренней среды от чужеродных веществ. Поэтому наше тело синтезирует особые вещества — антитела (иммуноглобулины), способные по принципу «ключ к замку» соединяться с антигенами, связывая их в иммунный комплекс (этот процесс как раз называется реакцией «антиген-антитело»). Такие иммунные комплексы легче распознаются и уничтожаются клетками иммунитета.
Существует несколько разновидностей антител, каждая из которых вступает в действие на определенном этапе иммунного ответа. Так, первыми в ответ на проникновение антигена в организм синтезируются иммуноглобулины класса М (IgM). Содержание этих антител наиболее высоко в первые дни инфекционного процесса.
Следом за ними иммунная система выбрасывает в кровь иммуноглобулины класса G (IgG), которые помогают уничтожать антигены до полной победы над инфекцией, а также продолжают циркулировать по сосудам в дальнейшем, обеспечивая иммунитет к повторному заражению. На этом явлении основана вакцинация: благодаря прививкам, содержащим ослабленные антигены микробов и вирусов, в нашей крови появляется большое количество IgG, которые при контакте с реальной угрозой быстро подавляют инфекцию — до того, как она нанесет вред здоровью.
Также существуют иммуноглобулины класса А (они в большом количестве содержатся в слизистых оболочках, защищая «подступы» к организму), Е (борются с паразитарными инфекциями) и другие. В лабораторной диагностике объектами интереса чаще всего являются IgM, IgG и IgA: по их концентрации можно оценить, на какой стадии находится инфекционный процесс, а также узнать, болел ли когда-либо человек тем или иным недугом (например, краснухой или ветряной оспой).
Как узнать, какие именно антигены или антитела присутствуют в организме человека? Когда врач предполагает, что причиной заболевания является определенная инфекция, или желает измерить концентрацию определенного гормона, он назначает пациенту иммуноферментный анализ.
Реакцию «антиген-антитело» можно воспроизвести в лабораторных условиях: использовать уже готовые антитела или антигены, чтобы определить, есть ли в исследуемом образце соответствующее им соединение.
Для начала необходимо получить образец биологической жидкости — обычно, это сыворотка крови. Лаборатория использует пластиковые планшеты с лунками, в которых уже содержатся очищенные антигены предполагаемого возбудителя (или — антитела, в случае если задачей является поиск антигена). Образцы вносятся в лунки, где происходит — или не происходит — образование иммунных комплексов. Если «встреча» состоялась, особое красящее вещество вступает в ферментную реакцию с объединенной молекулой, что позволяет с помощью инструментальной оценки оптической плотности сделать выводе о результатах анализа.
ИФА бывает качественным и количественным. В первом случае подразумевается однозначный ответ: искомое вещество или найдено, или не найдено в образце. В случае с количественным анализом более сложная цепь реакций дает возможность оценить концентрацию антител в крови человека, что в сравнении с результатами предыдущих тестов даст ответ на вопрос о том, как развивается инфекционный процесс.
Это интересно
Предшественником иммуноферментного анализа был радиоиммунный анализ, в котором для идентификации успешной реакции использовались меченые антитела и антигены. Поскольку проведение такой диагностики представляло потенциальную угрозу для здоровья сотрудников лаборатории, ученые озаботились поиском безопасной альтернативы по «окраске» образцов. Так в 1971 году был изобретен ИФА.
Преимущества метода
Бесспорные преимущества ИФА — высокая чувствительность и специфичность метода. Чувствительность — это возможность распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока. Специфичность же подразумевает безошибочность диагностики: если результат положительный, значит, найдены именно те антитело или антиген, которые предполагались, а не какие-то другие.
ИФА во многом заменил «золотой стандарт» микробиологии — бактериологический метод диагностики, в ходе которого для идентификации возбудителя требовалось выделить его из организма, а затем в течение нескольких дней выращивать культуру на питательной среде в пробирке. Все то время, пока производился анализ, врачи были вынуждены лечить пациента «вслепую», догадываясь о происхождении микроорганизма по симптомам болезни. Определение IgM с помощью ИФА позволяет поставить точный диагноз уже в первые дни болезни.
Высокая степень технологичности проведения иммуноферментного анализа минимизирует влияние человеческого фактора, что снижает вероятность ошибки. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.
Недостатки метода
К сожалению, для проведения ИФА нужно знать, что именно искать: методика анализа подразумевает, что врач заранее имеет предположение о природе заболевания. Поэтому нет смысла назначать такой тест в надежде случайно «угадать» диагноз.
В случае диагностики инфекционных заболеваний иммуноферментный анализ не может найти возбудителя и определить его специфичные свойства: он лишь указывает на наличие антител в крови у больного, косвенно свидетельствующих о присутствии чужеродного микроорганизма в теле человека.
ИФА — крайне точный, но не дешевый метод, поэтому обращаться к нему нужно с умом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.
Показания к назначению и выявляемые заболевания
Невозможно охватить полный список показаний к проведению ИФА. Вот наиболее распространенные цели анализа:
- Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:
- IgM и IgG к вирусным гепатитам А, B, C, E, а также антигенов гепатитов В и С;
- IgG к ВИЧ;
- Ig M и IgG к цитомегаловирусной инфекции;
- Ig M и IgG к вирусу Эпштейна-Барр;
- Ig M и IgG к герпетическим инфекциям;
- Ig M и IgG к токсоплазмозу;
- Ig M и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
- IgG к паразитарным заболеваниям;
- Ig M и IgG к инфекциям, передающимся половым путем;
- IgG к хеликобактерной инфекции.
Анализируемый биоматериал и особенности его забора
Основной биоматериал для проведения ИФА — это сыворотка крови: в лаборатории у пациента берут образец крови из вены, из которого в дальнейшем удаляют форменные элементы, затрудняющие проведение анализа. В некоторых других случаях для анализа используется спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.
Для того чтобы избежать искажений в результатах, рекомендуется сдавать кровь натощак, а за две недели до исследования (если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний) необходимо отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов.
Сроки готовности результатов ИФА
При наличии необходимых реактивов и хорошей организации работы лаборатории результат анализа вы получите в течение 1–2 суток после забора крови. В некоторых случаях, при необходимости получения экстренного ответа, этот срок может быть сокращен до 2–3 часов.
Расшифровка иммуноферментного анализа
Результатом качественного ИФА будет однозначный вердикт: искомое вещество либо найдено, либо не найдено в образце. Если же речь о количественном анализе, то концентрация может выражаться числовым значением или определенным количеством знаков «+» (от одного до нескольких).
Анализируемые показатели
- IgM — наличие этого класса иммуноглобулинов говорит об остром инфекционном процессе в организме. Отсутствие IgM может говорить как об отсутствии конкретного возбудителя в организме, так и о переходе инфекции в хроническую стадию.
- IgA при отрицательном результате теста на IgM чаще всего свидетельствует о хронической или скрыто протекающей инфекции.
- IgM и IgA (совместное присутствие) — два положительных результата говорят о разгаре острой фазы заболевания.
- IgG говорит либо о хронизации заболевания, либо о выздоровлении и выработке иммунитета к инфекционному агенту.
Возможные результаты ИФА
В зависимости от содержания анализа в бланке могут быть представлены данные в виде таблицы с перечислением всех антител или антигенов с пометками об отрицательной или положительной реакции, либо будет указано количественное значение результата (отрицательный, слабоположительный, положительный или резко положительный). Последний вариант определяет, сколько антител содержится в анализируемом образце.
Еще один количественный показатель — индекс авидности антител, выраженный в процентах. Он указывает, сколько времени прошло от начала инфекционного процесса (чем выше индекс — тем больше).
Сегодня выпускаются тысячи видов тест-систем ИФА, позволяющих обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях. Поэтому этот анализ используется практически во всех медицинских отраслях. Диагноз, поставленный с помощью ИФА, — это гарантия назначения адекватной терапии и эффективного лечения заболевания.
Источник