Анализ крови на определение вируса
Многие вирусы могут очень долго присутствовать в организме и циркулировать в крови, до поры до времени не вызывая никаких неприятностей. Однако это вовсе не значит, что они безопасны. Лабораторные анализы на вирусы позволяют выявить наличие последних, даже если никаких симптомов нет.
Анализы на вирусы: какие инфекции они выявляют
Для выявления вирусов лаборатории проводят исследования крови несколькими методами. Наибольшее распространение на сегодня получили ПЦР и иммуноферментный (ИФА) анализы.
Иммуноферментный анализ крови определяет наличие антител к вирусам (или антигенов к ним) в крови — иммуноглобулины (lgA, lgG, lgM) вырабатываются при заражении вирусами и являются своеобразными маркёрами инфекции.
Анализ на ДНК вируса, или ПЦР-исследование, позволяет выявить тип инфицирующего агента.
В качестве биоматериала для исследования обычно берут кровь. Анализ крови может подтвердить гепатит, герпес и вирус Эпштейна-Барра, аденовирус, различные половые инфекции (в том числе и сифилис), вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) и другие инфекции. Однако кровь не единственный биоматериал, пригодный для выявления вирусных поражений. В зависимости от заболевания и симптомов, для анализа на вирусы сдают соскоб слизистой оболочки, кал, мочу, мазок, слюну.
Кстати
Нередко целесообразно проводить исследование крови на вирусы одновременно с общим биохимическим анализом крови для получения максимально точных результатов.
Методы анализа на вирусы
Как мы уже отмечали, исследование крови на вирусы можно проводить двумя разными способами. Расскажем о них подробнее.
ПЦР
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это новый способ выявления вирусов, основанный на принципах молекулярной биологии. ПЦР идентифицирует генетический материал «агрессора». Так можно установить и вид вируса, и, что особенно важно, количество инфицированных клеток. Для проведения анализа биоматериал, в котором могут находиться фрагменты ДНК или РНК возбудителя болезни, смешивают с особыми ферментами, создающими копию этих фрагментов. Каждая копия также создает копию, и вскоре на лабораторном стекле оказывается количество молекул, достаточное для идентификации «врага». Их анализируют и сравнивают с базой данных, чтобы выяснить тип вируса. Этот способ эффективен для выявления разных инфекций (не только вирусных) — гепатита, многих половых инфекций (уреаплазмоза, хламидиоза), микоплазмоза, ВИЧ, папилломавируса, вируса гриппа и некоторых других.
Иммуноанализ (ИФА)
Иммуноферментный метод анализа на вирусы позволяет установить форму болезни, вызванной вирусом (хроническая, острая или бессимптомная), а также оценить эффективность противовирусной терапии. Это один из самых распространенных и точных методов для выявления половых инфекций, в частности ВИЧ и ВПЧ, гепатита В.
Для анализа на вирусы чаще всего сдается кровь. Обязательно предупредите врача, если вы недавно проводили вакцинацию, — этот факт может отразиться на точности анализов. Рекомендуется не принимать пищу на протяжении 8-ми часов перед забором биоматериала, а также воздержаться от употребления алкоголя и от курения.
Время ожидания результатов зависит от типа вируса, на который проводится анализ, и от методики работы лаборатории. Обычно результаты готовы через 1–3 дня, но иногда приходится ждать и 2 недели.
Расшифровка результатов анализа на вирусы
Рассказать о том, каким образом следует трактовать результаты анализов на все виды вирусов, в рамках одной статьи невозможно. Далее мы поговорим лишь о наиболее известных заболеваниях и о часто назначаемых исследованиях.
Гепатит С
В случае проведения анализа методом ИФА наличие IgG в крови на гепатит говорит о том, что этот вирус в организме присутствовал, но иммунная система выработала к нему антитела. Присутствие одновременно антител класса IgM и IgG говорит о заболевании в острой форме. Иммуноглобулины только класса IgM — признак первичного инфицирования.
При проведении исследования методом ПЦР определяется РНК вируса. Результаты могут быть приведены в следующем формате:
- РНК вируса не выявлена.
- РНК вируса выявлена в концентрации ниже предела количественного определения (менее15 МЕ/мл). Сомнительный результат.
- РНК вируса гепатита С выявлена (от 15 и выше 100000000 МЕ/мл).
Гепатит В
Для выявления этого вируса гепатита чаще всего назначается ИФА. Если в крови присутствуют антитела IgG и IgM, это значит, что вирус очень активен или же заражение произошло недавно.
В случае проведения ПЦР-анализа определяется концентрация фрагментов ДНК вируса гепатита В. Пациент получает результат с одной из приведенных трактовок:
- Не обнаружено.
- Сомнительный результат (результат положительный с концентрацией ДНК вируса гепатита В на границе точности метода).
- Обнаружено.
Герпес
Если говорить о трактовке ИФА, то наличие антител, обозначаемых как Anti-HSV-IgG, говорит не об иммунитете к вирусу, а о том, что вы уже были когда-то инфицированы. Этот маркёр наблюдается у большинства пациентов. Если показатель anti-HSV-IgG в пробах, взятых в динамике за 2-недельный период, заметно растет, это значит, что заражение произошло недавно. О рецидиве говорит высокий показатель IgG.
Папилломавирус
Для выявления этого вируса исследуется соскоб эпителиальных клеток. Наличие вируса выявляется методом идентификации его ДНК. Если в результате сказано «ДНК не обнаружено», это говорит об отсутствии вируса. Менее 3 Lg говорит о незначительной концентрации вируса, 3–5 Lg – о клинически значимой, более 5 Lg — об очень высокой.
Вирус Эпштейна-Барр
Если иммуноглобулины VGA IgM, VGA IgG, EA IgG и EBNA IgG в бланке анализа значатся как «отрицательные», вируса в организме нет. Положительный VGA IgM при отрицательном результате на остальные антитела сигнализирует о ранней стадии заражения.
Справка
Вирус Эпштейна-Барр (EBV) вызывает развитие инфекционного мононуклеоза, многих онкологических процессов в организме. Он передается через слюну или кровь.
Вирус иммунодефицита человека
Расшифровка анализа крови на ВИЧ очень проста — если результат отрицательный, это значит, что вирус не обнаружен, если положительный — увы, вирус в крови есть. Но следует знать, что сегодня даже самые надежные методы точны лишь на 98–99%, то есть всегда остается шанс, что результат будет, например, ложноположительным.
Аденовирус
При анализе на аденовирус, вызывающий респираторные заболевания, применяется в основном ИФА. В ходе анализа подсчитываются IgG-антитела. Если показатель менее 0,8 условных единиц — результат отрицательный, более 0,8 — положительный.
Ротавирус
Ротавирус (в народе его называют кишечным гриппом) — острая кишечная инфекция, самый распространенный возбудитель диареи. Для анализа обычно берется образец кала. Обозначение «отрицательно» в результатах говорит о том, что следов антигенов не обнаружено, «положительно» — что состояние вызвано именно ротавирусом.
Проходить обследование на вирусы обязательно, даже если нет никаких изменений в самочувствии. Как мы уже говорили, некоторые вирусные поражения никак не проявляют себя, однако отсутствие симптомов еще не означает, что человек здоров. Яркий пример таких «тихих» вирусов — ВИЧ, который на ранних стадиях не дает никаких симптомов, оставаясь, тем не менее, смертельно опасным.
Источник
Метод определения
Полимеразная цепная реакция с детекцией в режиме реального времени (Real-time PCR).
Исследуемый материал
Соскоб эпителиальных клеток рото- и носоглотки
Определение РНК вируса гриппа в соскобе эпителиальных клеток ротоглотки и носоглотки методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени.
Грипп – острая респираторная вирусная инфекция, передаваемая воздушно-капельным путем.
Возбудители гриппа – РНК-содержащие вирусы, относящиеся к семейству Orthomyxoviridae, в котором выделяют три рода: Influenza A virus, Influenza B virus, Influenza C virus.
Вирусы гриппа А и В ежегодно вызывают эпидемии большей или меньшей интенсивности практически во всех странах мира. Вирусы гриппа А широко распространены в природе, их выделяют у большинства зверей и птиц, в связи с чем они имеют высокий пандемический потенциал, так как способны преодолевать межвидовый барьер. Основной причиной возникновения эпидемий и пандемий гриппа является высокая вариабельность вируса вследствие изменений в его геноме. Это касается фрагментов, кодирующих поверхностные антигены вирусов типов А и В и определяющих их специфичность.
Вирусы Influenza А и B поражают преимущественно верхние отделы дыхательных путей: нос, горло, трахею и реже бронхи. Однако симптомы общей интоксикации при гриппе доминируют над умеренными катаральными проявлениями. Обычно заболевание сопровождается резким повышением температуры, мышечными и головной болями, сильным недомоганием, сухим кашлем, болью в горле и слизистыми выделениями из носа. Для гриппа, обусловленного новым или значительно измененным вирусом (например, для гриппа птиц типа А(H5N1) и А(H7N9), реже А (H1N1) pdm 2009), характерно острейшее, молниеносное начало, развитие различных вариантов токсикоза (нейротоксикоза, инфекционно-токсического шока в сочетании с гемодинамическими расстройствами) и III степени ДВС-синдрома (гемокоагуляционного шока).
Диагностика инфекции осуществляется комплексно, на основании анамнестических данных о контакте с больными гриппом и характерной клинической картины. Подтверждение диагноза возможно с помощью лабораторных исследований, что целесообразно при наличии клинических проявлений гриппа, в эпидемический сезон роста заболеваемости острыми респираторными инфекциями, при тяжелом течении респираторных болезней.
В качестве базовых тестов могут быть использованы следующие лабораторные исследования: определение антигенов вируса гриппа в мазках слизистой носа и ротоглотки методом непрямой иммунофлуоресценции или иммунохроматографии; определение антител к антигенам вируса гриппа А/B в сыворотке крови методом ИФА. Результаты ИФА, как правило, оцениваются ретроспективно. Вследствие поздней диагностики они не влияют на коррекцию терапии, но применимы в научных целях и для эпидемиологического надзора и контроля за гриппом. Наиболее современным методом лабораторной диагностики гриппа является выявление РНК вируса методом ПЦР.
Максимального уровня специфичности и чувствительности достигают тесты на основе ПЦР-ОТ (полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов амплификации в режиме реального времени, позволяющие обнаруживать в биологическом материале РНК возбудителя инфекции.
Аналитические показатели:
определяемый фрагмент – специфический участок нуклеиновой кислоты вирусов гриппа А (Influenza virus A) и гриппа В (Influenza virus B);
специфичность обнаружения – отсутствие неспецифических реакций в отношении других вирусных и бактериальных возбудителей ОРЗ.
Аналитическая чувствительность:
вирус гриппа А (Influenza virus A) – 1х10^3 ГЭ/мл пробы;
вирус гриппа В (Influenza virus В) – 1х10^3 ГЭ/мл пробы.
Литература
- Грипп у взрослых. Клинические рекомендации. МЗ РФ. 2017:57. https://cr.rosminzdrav.ru/#!/schema/909
- Грипп у детей. Клинические рекомендации. МЗ РФ. 2017:43. https://cr.rosminzdrav.ru/#!/schema/172
- Грипп у взрослых: методические рекомендации по диагностике, лечению, специфической и неспецифической профилактике. Под ред. академика, профессора А.Г. Чучалина, главного внештатного инфекциониста СЗФО проф. Т.В. Сологуб. — СПб.: Издательско-полиграфический комплекс «НП-Принт». 2014:192.
- Яцышина С.Б., Творогова М.Г., Шипулин Г.А., Малеев В.В. Лабораторная диагностика гриппа и других ОРВИ методом полимеразной цепной реакции. Лабораторная служба. 2017;6(3):238-267. https://doi: 10.17116/labs201763238-267.
Источник
Кровь является жидкой тканью организма. Она циркулирует по закрытой системе кровеносных сосудов и увлажняет ткани, а также все органы человека. В медицинской терминологии существует понятие анализа крови (общий анализ крови) – это установление ее составных частей, а также их количества и качества. Во многих случаях лаборатории проводят анализ крови на различные инфекции, поскольку в человеческий организм проникают различного рода бактерии, вирусы, микробы и другие организмы. Такое исследование крови помогает определить их количество в организме и, соответственно, вид.
Виды анализов крови на вирусы
Медицинские лаборатории проводят несколько видов исследования крови на вирусы. К ним можно отнести иммуноферментный анализ крови, серологический анализ крови и полимеразную цепную реакцию.
ИФА
Иммуноферментный анализ крови (ИФА) применяется при определении антигенов и (или) антител в ее составе. Выделяют качественный (устанавливает наличие антигенов или антител) и количественный (определяет количество антигенов или антител) метод исследования. Также иммуноферментный анализ крови выявляет уровень гормонов, иммунологических комплексов и других биологически активных веществ. В основном, иммуноферментный анализ крови используется в таких случаях:
- исследование крови на вирусы гепатита, герпеса, Эпштейна-Барра и других;
- анализ крови на инфекции, передающиеся половым путем (хламидиоз, гонорея, трихомонада, микоплазма, уреаплазма, сифилис);
- определение уровня гормонов;
- диагностика онкологических заболеваний;
- диагностика иммунодефицита;
- диагностика аллергий.
Серологический анализ крови
Используется для диагностики инфекционного заболевания, а также установления стадии процесса заражения. Данный метод основывается на взаимодействии антител и антигенов. Кроме того, он позволяет выявить наличие в анализе крови вирусов различных заболеваний.
Проявление вируса Эпштейна-Барра в анализе крови
Вирус Эпштейна-Барра(Epstein-Barr virus, Human Herpes Virus type 4) – это вирус семейства герпесвирусных. Один из самых известных и распространенных вирусов человека. Проявляется вирус Эпштейна-Барра в анализе крови в том случае, когда лимфомы Беркитта прогрессируют в культуре клеток, а также в головном мозге человека. Кроме того, инфекционный мононуклеоз свидетельствует о наличии вируса Эпштейна-Барра в анализе крови.
Инфицироваться вирусом Эпштейна-Барра можно через слюну, реже во время переливания крови и трансплантации костного мозга. Вирус имеет свойство выделяться во внешнюю среду через ротоглотку в течение 18 месяцев после заражения. Зачастую у взрослых при вирусе Эпштейна-Барра в анализе крови обнаруживают антитела, что свидетельствует о хроническом инфицировании.
Расшифровка анализа крови при вирусных инфекциях
Интерпритация исследования зависит от вида определяемого вируса, а также используемого метода анализа крови. Например, при гепатите С назначается анализ крови на вирус, а расшифровка анализа крови с вирусом этого вида не должна показывать уровня вирусной нагрузки.
Если, например, при расшифровке иммуноферментного анализа на вирус гепатита С выявлен иммуноглобулин G, это свидетельствует о том, что данный возбудитель в организме человека присутствовал раньше. К нему выработались антитела, и лечение не понадобится. Когда исследование установило присутствие антител и класса М, и класса G, это может означать, что хроническое заболевание проявляется в острой форме и требует лечения. Если при иммуноферментном анализе в крови присутствуют иммуноглобулины класса М, – это свидетельство первичной инфекции человека вирусом гепатита С. При расшифровке диагностики крови на данный тип вируса указывается количество найденных антител. Но для более детального разъяснения всех результатов необходима консультация врача.
При герпесе также проводится анализ крови, и расшифровка анализа крови на вирус такого вида может принимать следующие значения:
- IgM-, IgG- (отсутствует иммунитет к вирусу и существует опасность первичной инфекции),
- IgM-, IgG+ (риска к первичному заражению нет, но риск вторичного обострения зависит от состояния иммунной системы),
- IgM+, IgG- (выявлено первичное инфицирование и необходимо лечение),
- IgM+, IgG+ (обнаружено вторичное обострение).
Анализ крови на вирус герпеса
Данный вид анализа проводится для определения вируса простого герпеса в крови человека. Заболевание протекает в виде маленьких болезнетворных язв, которые напоминают волдыри. Они появляются на коже и слизистой оболочке (поверхность носа, горла, рта, мочеиспускательного канала, прямой кишки, влагалища). Герпес может возникать в виде единичных высыпаний, но в большинстве случаев у человека проявляется несколько вспышек. Выделено два типа простого вируса герпеса:
- вирус простого герпеса-1 – это герпетическая лихорадка, которая проявляется на губах. Передается через поцелуи и совместное использование столовых приборов (ложки, вилки, чашки). При данном виде герпеса язвочки могут высыпать и на половых органах человека;
- вирус простого герпеса-2 – это генитальный герпес (к примеру, во влагалище или вокруг него). Данный вид инфекции может появиться у малышей, которые рождены естественным образом женщинами с положительным результатом диагностики крови на вирус герпеса. В большинстве случаев такой вид герпеса передается половым путем.
Показания к анализу
Анализ крови на вирус герпеса проводится только при инфекции гениталий. Для исследования обычно используют кровь, а также жидкость спинного мозга, мочу или слезы. При этом анализепроисходит выявление антител, которые вырабатываются иммунной системой для борьбы с заболеванием. Данный вид исследования проводится редко, так как результаты не всегда бывают точными. Кроме того, при анализе нельзя установить форму проявления заболевания (первичное или хроническое инфицирование). Для такого процесса требуется время на выработку антител после первого инфицирования, а у человека может не проявиться положительный результат при исследовании. По некоторым анализам крови на вирус герпеса можно определить тип заболевания (вирус простого герпеса-1 или вирус простого герпеса-2).
Считается, что инфекция герпеса неизлечима. Вирус постоянно присутствует в организме человека после заболевания. Он остается в определенных типах нервных клеток и вызывает образование множественных язв, а также высыпаний. Повторное инфицирование проявляется в случае пережитого стресса, переутомления, воздействия солнечного света или других инфекций, к примеру, простуды или гриппа.
Анализ крови на вирус герпеса проводят для того, чтобы выяснить:
- действительно ли вирус простого герпеса вызывает сыпь вокруг рта или области гениталий;
- какой тип вируса (вирус простого герпеса-1 или вирус простого герпеса-2) вызывает сыпь вокруг рта или области гениталий;
- передалась ли инфекция партнеру пациента с генитальным герпесом;
- есть ли инфекция у малыша, рожденного от матери с заболеванием генитального герпеса.
Результаты различных анализов на вирус герпеса получают через разные промежутки времени. Например, заключение экспресс-метода вирусной культуры можно узнать через два-три дня. Результаты стандартного метода можно получить в течение 14 дней. Результаты анализа на антигены готовы через день.
Источник