Анализ крови на наличие антител к вирусу гепатита с
В ответ на внедрение чужеродного агента иммунная система человека вырабатывает иммуноглобулины (Ig). Эти специфические вещества предназначены для связывания с чужеродным агентом и его обезвреживания. Определение противовирусных антител имеет большое значение для диагностики при хроническом вирусном гепатите С (ХВГС).
Содержание
Как выявить антитела?
Суммарные антитела к гепатиту С
Расшифровка анализа на антитела к гепатиту С
ПЦР: обнаружение антигенов гепатита С
Носитель антител к вирусу гепатита С
После лечения гепатита С антитела остаются
Как выявить антитела?
Антитела к вирусу в крови человека выявляет метод ИФА (иммуноферментный анализ). Эта методика основана на реакции между антигеном (вирусом) и иммуноглобулинами (antiHVC). Суть метода состоит в том, что в специальные планшеты вносят чистые вирусные антигены, антитела к которому ищут в крови. Затем в каждую лунку добавляют кровь больного. Если в ней есть антитела к вирусу гепатита С определенного генотипа, в лунках происходит образование иммунных комплексов «антиген-антитело».
Спустя некоторое количество времени в лунки добавляют специальное красящее вещество, которое вступает в цветную ферментную реакцию с иммунным комплексом. По плотности окраски проводят количественное определение титра антител. Метод имеет высокую чувствительность – до 90%.
К преимуществам метода ИФА можно отнести:
- высокую чувствительность;
- простоту и быстроту проведения анализа;
- возможность проведения исследования при малом количестве биологического материала;
- невысокую себестоимость;
- возможность ранней диагностики;
- пригодность для скрининга большого количества людей;
- возможность отслеживать показатели в динамике.
Единственным недостатком ИФА является то, что он определяет не сам возбудитель, а лишь реакцию иммунной системы на него. Поэтому при всех преимуществах метода для постановки диагноза ХВГС его недостаточно: требуется проведение дополнительных анализов, выявляющих генетический материал возбудителя.
Суммарные антитела к гепатиту С
Современная диагностика с помощью метода ИФА позволяет обнаружить в крови пациента как отдельные фракции антител (IgM и IgG), так и их общее количество — antiHVC total. Эти иммуноглобулины с диагностической точки зрения являются маркерами ХВГС. Что означает их обнаружение? Иммуноглобулины класса М определяются при остром процессе. Они могут выявляться уже спустя 4-6 недель после заражения. G-иммуноглобулины являются признаком хронизации процесса. Их можно обнаружить в крови спустя 11-12 недель после инфицирования, а после лечения они могут сохраняться до 8 и более лет. При этом их титр постепенно снижается.
Бывают случаи, когда у здорового человека при проведении ИФА на antiHVC total обнаруживают противовирусные антитела. Это может быть как признаком хронической патологии, так и следствием самопроизвольного излечения пациента. Такие сомнения не позволяют врачу установить диагноз ХВГС, руководствуясь только ИФА.
Различают антитела к структурным (ядерным, core) и неструктурным (nonstructural, NS) белкам вируса. Целью их количественного определения является установление:
- активности вируса;
- вирусной нагрузки;
- вероятности хронизации процесса;
- степени повреждения печени.
AntiHVC core IgG – это антитела, которые появляются при хронизации процесса, поэтому для определения острой фазы ХВГС не используются. Своей максимальной концентрации эти иммуноглобулины достигают к пятому-шестому месяцу болезни, а у длительно болеющих и не получающих лечения пациентов они определяются в течение всей жизни.
AntiHVC IgМ являются антителами острого периода и говорят об уровне виремии. Их концентрация нарастает в течение первых 4-6 недель болезни, а после перехода процесса в хронический – уменьшается вплоть до исчезновения. Повторно в крови больного иммуноглобулины класса М могут появляться при обострении заболевания.
Антитела к неструктурным белкам (AntiHVC NS) выявляются в разные сроки болезни. Диагностически значимыми из них являются NS3, NS4 и NS5. AntiHVC NS3 – самые ранние антитела к вирусу ХВГС. Они являются маркерами острого периода болезни. По титру (количеству) этих антител определяют вирусную нагрузку на организм пациента.
AntiHVC NS4 и NS5 – антитела хронической фазы. Считается, что их появление связано с поражением ткани печени. Высокий титр AntiHVC NS5 указывает на наличие в крови вирусной РНК, а его постепенное снижение – на начало фазы ремиссии. Эти антитела длительное время после выздоровления присутствуют в организме.
Расшифровка анализа на антитела к гепатиту С
В зависимости от клинической симптоматики и результатов анализа на РНК вируса гепатита С данные, полученные после ИФА, могут трактоваться по-разному:
- положительные результаты на AntiHVC IgМ, AntiHVC IgG и вирусную РНК говорят об остром процессе или об обострении хронического;
- если в крови обнаружены только антитела класса G без генов вируса, это указывает на перенесенное, но излеченное заболевание. При этом РНК вируса в крови нет;
- отсутствие в крови и AntiHVC и РНК вируса считается нормой, или отрицательным анализом на антитела.
Если выявлены специфические антитела, а самого вируса в крови нет, это не означает, что человек болен, но и не отрицает этого. Такой анализ считается сомнительным и требует повторного исследования через 2-3 недели. Таким образом, если в крови найдены иммуноглобулины к вирусу ХВГС, необходима комплексная диагностика: клинические, инструментальные, серологические и биохимические исследования.
Для постановки диагноза важен не только положительный ИФА, что означает наличие вируса в крови в настоящее время или ранее, но и обнаружение вирусного генетического материала.
ПЦР: обнаружение антигенов гепатита С
Вирусный антиген, а точнее его РНК, определяют методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Этот метод, наряду с ИФА, является одним из ключевых лабораторных анализов, позволяющих врачу поставить диагноз ХВГС. Назначается он тогда, когда получен положительный результат анализа на антитела.
Анализ на антитела является более дешевым, чем ПЦР, поэтому именно он используется для скрининга некоторых категорий населения (беременных, доноров, медиков, детей из группы риска). Вместе с исследованием на гепатит С чаще всего проводят и определение австралийского антигена (гепатит В).
Носитель антител к вирусу гепатита С
Если методом ИФА в крови пациента обнаружены AntiHVC к вирусу, но никаких клинических признаков гепатита С при этом нет, это может быть трактовано, как носительство возбудителя. Вирусоноситель может сам не болеть, но при этом активно заражать контактирующих с ним людей, например, через кровь носителя. В таком случае нужна дифференциальная диагностика: расширенный анализ антител и проведение ПЦР. Если анализ ПЦР окажется отрицательным, человек, возможно, перенес заболевание латентно, то есть бессимптомно, и самостоятельно излечился. При положительном ПЦР вероятность носительства очень высока. Как быть, если антитела к гепатиту С есть, а ПЦР отрицательный?
Важно правильно трактовать анализы не только для постановки диагноза ХВГС, но и для контроля эффективности его лечения:
- если на фоне проводимого лечения антитела к гепатиту С не пропадают, это указывает на его неэффективность;
- если после противовирусной терапии вновь выявлены AntiHVC IgМ, это означает, что процесс снова активировался.
В любом случае, если по результатам анализов РНК вирус не обнаружен, но антитела к нему обнаружены, следует провести повторное обследование, чтобы убедиться в точности результата.
После лечения гепатита С антитела остаются
Остаются ли антитела в крови после курса лечения и почему? После эффективной противовирусной терапии в норме могут выявляться только IgG. Время их циркуляции в организме переболевшего человека может составлять несколько лет. Главным признаком излеченного ХВГС является постепенное уменьшение титра IgG при отсутствии вирусной РНК и IgМ. Если пациент вылечил гепатит С уже давно, а суммарные антитела у него остались, нужно провести идентификацию антител: остаточные титры IgG – это норма, а вот IgМ – это неблагоприятный признак.
Не стоит также забывать, что бывают ложные результаты анализов на антитела: как положительные, так и отрицательные. Так, например, если в крови есть РНК вируса (качественной или количественной ПЦР), а антител к нему нет, это можно трактовать как ложноотрицательный или сомнительный анализ.
Причин появления ложных результатов несколько:
- аутоиммунные заболевания;
- доброкачественные и злокачественные опухоли в организме;
- тяжелые инфекционные процессы; после прививки (от гепатитов А и В, гриппа, столбняка);
- лечение интерфероном-альфа или иммунодепрессантами;
- значительное повышение печеночных показателей (АСТ, АЛТ);
- беременность;
- неправильная подготовка к сдаче анализа (прием алкоголя, употребление жирной пищи накануне).
При беременности процент ложных анализов достигает 10-15%, что связано со значительным изменением реактивности организма женщины и физиологическим угнетением ее иммунной системы. Нельзя игнорировать также человеческий фактор и нарушение условий проведения анализа. Анализы проводятся «инвитро», то есть вне живых организмов, поэтому лабораторные ошибки имеют место быть. К индивидуальным особенностям организма, которые могут влиять на результаты исследования, относятся гипер- или гипореактивность организма.
Анализ на антитела, несмотря на все свои преимущества, не является 100%-ным поводом для постановки диагноза. Риск ошибок есть всегда, поэтому, чтобы избежать возможных ошибок, нужно комплексное обследование пациента.
Источник
Метод определения
Хемилюминесцентный иммуноанализ
Исследуемый материал
Сыворотка крови
Показатель, характеризующий наличие антител (независимо от класса М и G) к вирусу гепатита C.
Внимание. При положительных и сомнительных реакциях, срок выдачи результата может быть увеличен до 3-х рабочих дней.
Антитела класса М начинают вырабатываться через 4 — 6 недель после инфицирования, их концентрация быстро достигает максимума. По прошествии 5 — 6 месяцев уровень IgM падает и повышается вновь во время следующей реактивации инфекции. Антитела класса G появляются с 11 — 12 недели после инфицирования, достигают пика концентрации к 5 — 6 месяцу и сохраняются в крови на более-менее постоянном уровне в течение всего периода болезни и реконвалесценции. Таким образом, суммарный уровень антител (total) определяется с 4 — 5 недели после инфицирования и далее.
Особенности инфекции. Гепатит С — вирусное заболевание, характеризующееся поражением печени и аутоиммунными нарушениями, часто имеющее первично-хроническое и латентное течение. Протекает в желтушной (5%) или безжелтушной (95%) формах. Вирус гепатита С (ВГC) относится к флавивирусам, достаточно устойчив во внешней среде. Три структурных белка вируса имеют сходные антигенные свойства, обусловливая выработку anti-HCV-core. В настоящее время выделено 6 генотипов вируса. Высокая степень генетической изменчивости HCV способствует «ускользанию» вируса из-под иммунного ответа. С этим связаны трудности в создании вакцины и лабораторной диагностике (серонегативный гепатит С), а также частое первично-хроническое течение заболевания. Гепатит С передается с кровью и биологическими жидкостями парентеральным, половым и трансплацентарным путями. Группу повышенного риска составляют лица, практикующие внутривенную наркоманию, беспорядочные половые связи, а также медицинские работники, пациенты, нуждающиеся в гемодиализе или переливаниях крови, заключенные. Проникая в организм, HCV попадает в макрофаги крови и гепатоциты печени, где происходит его репликация. Повреждение печени происходит в основном за счет иммунного лизиса, также вирус оказывает прямое цитопатическое действие. Сходство антигена вируса с антигенами системы гистосовместимости человека обусловливает возникновение аутоиммунных («системных») реакций. В программе системных проявлений HCV-инфекции могут возникать аутоиммунный тиреоидит, синдром Шегрена, идеопатическая тромбоцитопеническая пурпура, гломерулонефрит, ревматоидный артрит и др. По сравнению с другими вирусными гепатитами, гепатит С имеет менее яркую клиническую картину, чаще переходит в хронические формы. В 20 — 50% случаев хронический гепатит С приводит к развитию цирроза печени и в 1,25 — 2,50% — к развитию гепато-целлюлярной карциномы. С высокой частотой возникают аутоиммунные осложнения. Инкубационный период — 5 — 20 дней. В конце инкубационного периода повышаются уровни печеночных трансаминаз, возможно увеличение печени и селезенки. Острый период протекает со слабостью, снижением аппетита. В трети случаев возникает лихорадка, артралгия, полиморфная сыпь. Возможны диспептические явления и полинейропатии. Холестаз возникает крайне редко (5% случаев). Лабораторные показатели отражают цитолиз. При высоком уровне трансаминаз (более 5 норм) и признаках печеночно-клеточной недостаточности следует заподозрить микст-инфекцию: HCV+HBV.
При анонимном обследовании, заявке и полученному от клиента образцу биоматериала присваивается номер, известный только пациенту, и медперсоналу, оформлявшему заказ. ! Результаты исследований, выполненных анонимно, не могут быть представлены для госпитализации, профессиональных осмотров и не подлежат регистрации в ОРУИБ.
Источник