Анализ крови на мутацию раковых клеток

Существует множество техник. Все зависит от вида исследования. Если проводится анализ крови на определение онкомаркеров, он проводится иммуноферментными методами. В основе этого метода лежит реакция агглютинации, в ходе которой маркер онкологической опухоли выступает как чужеродный агент для организма (антиген). Иммунная система сразу же реагирует на него, вырабатывая антитело. Действие антител направлено на разрушение чужеродного организма и дальнейшее его выведение. Антитело находит антиген, который является маркером раковой опухоли, атакует его и стимулирует разрушение. В ходе этой борьбы антиген и антитело сливаются между собой, происходит реакция агглютинации. Именно эти комплексы и обнаруживаются в ходе анализа при введении в кровь антител.

Для этого у пациента забирают кровь в нужном количестве. Для предотвращения свертывания добавляют несколько капель гепарина. Затем кровь доставляют в лаборатории. Там производят разделение крови на фракции. Отдельно выделяют сыворотку крови, поскольку онкомаркеры обнаруживаются именно в сыворотке. Для этого применяют центрифугирование. При помощи специального аппарата – центрифуги, кровь в пробирке вращают при большом количестве оборотов. В результате все форменные элементы крови оседают на дно, в пробирке содержится только сыворотка. С ней и проводят дальнейшие манипуляции.

Берут специальный набор для анализа (ИФА), на дно ячейки вносят определенное количество сыворотки крови. Добавляют специальное антитело к раковой опухоли. Ждут в течение нескольких часов. Если происходит реакция комплексообразования, в ходе которой сливаются антитела и антигены, значит, в крови присутствует антиген, который и выступает онкомаркером, указывающим на наличие раковой опухоли. Образование комплексов антиген-антитело можно увидеть невооруженным глазом, поскольку в пробирке появляется помутнение и осадок в виде хлопьев. По степени мутности можно судить о количестве онкомеркеров. Но для точности результатов, производят специальные измерения. Используют международный стандарт мутности, или спектрофотометр, которые по углу преломления света, проходящего через раствор, определяют его концентрацию и выдают готовый результат.

Существует и другой метод – иммуномагнитное разграничение фракций крови. Для этого применяют специальный прибор, который дает возможность обнаружить онкологические клетки путем определения онкомаркеров, которые присоединяются к измененной клетке и становятся видимыми в магнитном поле. Точность этого метода достаточно высока – даже из миллиона здоровых клеток можно обнаружить одну раковую.

Также при помощи подобных анализов можно устанавливать точное количество раковых клеток, скорость их распространения и спрогнозировать динамику роста. Также преимущество этих анализов состоит в том, что они дают возможность контролировать ход лечения, определять эффективность терапии, а также с высокой точностью подбирать препараты и их оптимальную дозировку. Точность дозирования при лечении играет ведущую роль, поскольку позволяет эффективно бороться с осложнениями, снижать количество раковых клеток, а также предупреждать развитие метастаз. Кроме того, правильно подобная дозировка снижает токсический эффект от препаратов для организма.

Также существует метод исследования биоптата, при котором на исследование берется кусочек ткани. Затем проводится цитологическое и гистологическое исследование. Анализ на цитологию подразумевает приготовление микропрепарата из полученного образца ткани для дальнейшего изучения его свойств под микроскопом. Изучаются основные морфологические, анатомические свойства. Микропрепарат из образца здоровой ткани резко отличается от такового раковой опухоли. Есть определенные различия в структуре, внешнем виде и происходящих внутриклеточных процессах. На раковую опухоль могут указывать и специальные включения.

При гистологическом исследовании производят посев ткани на специальные питательные среды, предназначенные для выращивания культуры тканей. В течение 7 дней посев культивируют в специальных условиях, после чего отслеживают характер роста опухоли, скорость и направление. Это имеет важную диагностическую значимость.

Анализ крови на раковые опухоли

Самый быстрый способ определения онкологического заболевания – провести анализ крови. Проводится такое исследование в течение 1-2 дней, а при необходимости получить срочные результаты можно за 3-4 часа. Это экспресс метод, который все же требует дополнительных уточняющих исследований. Однако для получения предварительного диагноза и точной идентификации опухоли этого вполне достаточно. Анализ дает возможность определить даже точную локализацию опухоли и стадию онкологического процесса.

Материалом исследования служит кровь пациента. Анализ проводится утром, натощак. В основном используется для подтверждения или опровержения диагноза, дает возможность дифференцировать доброкачественную опухоль от злокачественной. Также применяется для отслеживания показателей в динамике с целью определения эффективности лечения, контроля состояния опухоли и предупреждения рецидивов.

Принцип метода состоит в определении основных антигенов, которые продуцируются раковыми клетками в ходе развития опухоли. При их обнаружении можно точно сказать, что у человека рак. Однако если такие онкомаркеры не были обнаружены, отрицательный результат не выдают. В таком случае назначают дополнительные исследования.

Локализацию опухоли можно определить по виду онкомаркера. Обнаружение в крови пациента антигена СА19-9, можно говорить о раке поджелудочной железы. Маркер РЭА указывает на локализацию опухоли в кишечнике, печени, почках, легких и других внутренних органов. Если обнаружен СА-125, он указывает на онкологический процесс в яичниках или придатках. Маркеры ПСА и СА-15-3 указывают на рак простаты и молочной железы соответственно. СА72-3 указывает на рак желудка и рак легких, Б-2-МГ указывает на лейкоз, лейкемию, миелому. При раке печени и метастазах появляется АПФ. Анализ крови не является единственным фактором, подтверждающим методом. Его нужно применять в комплексе с многими другими факторами.

[23], [24], [25], [26], [27], [28], [29]

Анализ на раковые клетки шейки матки

Раковые клетки шейки матки можно определить при помощи анализа крови, который направлен на выявление онкомаркера. Как правило, в таких случаях обнаруживается РЭА, или раково-эмбриональный антиген. Также для исследования берут мазок из влагалища, шейки матки. Сначала проводят предварительное цитологическое исследование. В ходе анализа на цитологию можно обнаружить трансформированные клетки и специфические включения, указывающие на онкологические процессы.

После этого проводится биопсия при необходимости, в ходе которой берется кусочек ткани для исследования. Производится ее посев на питательные среды, инкубирование, после чего изучаются основные морфологические и биохимические свойства. На основании полученных данных делается заключение о характере опухоли, степени ее развития, концентрации раковых клеток.

[30], [31], [32], [33], [34], [35], [36], [37], [38], [39], [40], [41], [42]

Анализ на раковый эмбриональный антиген

Представляет собой антиген, который используют для диагностики и лечения рака желудка, кишечника, прямой кишки, женских репродуктивных органов и молочных желез. У взрослого человека в незначительных количествах продуцируется бронхами и легкими, обнаруживается в составе многих биологических жидкостей и секретов. Показателем является его количество, которое резко возрастает при онкологии. Нужно учитывать, что его количество может быть повышено и у людей, страдающих аутоиммунными заболеваниями, туберкулезом, доброкачественными опухолями и даже у курильщиков. Поэтому обнаружение высокой концентрации этих маркеров (20 нг/мл и выше) является только косвенным подтверждением рака и нужно обязательно провести ряд дополнительных исследований. Также этот показатель нужно отслеживать в динамике для того чтобы иметь возможность сделать полноценные выводы. Материалом исследования служит венозная кровь. Антиген обнаруживают в сыворотке крови.

[43], [44], [45], [46], [47], [48], [49], [50]

Анализ на мутацию раковых клеток

Под рецептором эпидермального фактора роста подразумевают трансмембранный рецептор, который взаимодействует с внеклеточными лигандами эпидермальных факторов роста. Принимает участие в образовании раковых опухолей многих органов, в частности является достоверным признаком рака легких. Дело в том, что в норме основные гены направлены на обеспечение контроля над ростом и размножением клеток организма. Клетки растут, размножаются до определенного предела, после чего ген подает сигнал о прекращении дальнейшего размножения, и клетки перестают делиться.

Также ген контролирует процесс апоптоза – своевременное отмирание старых, отживших клеток. При мутациях в генах они перестают контролировать размножение (пролиферацию) и отмирание (апоптоз), подают сигнал о беспрерывном росте, в результате чего клетки неограниченно растут и постоянно, бесконтрольно делятся. Это и приводит к образованию раковой опухоли, которая оличается способностью к неограниченному росту. В самом примитивному виде, рак можно представить, как бесконтрольное деление и бессмертность клетки. Также процесс рассматривают как неспособность клетки к своевременному отмиранию.

Химиотерапия и различные противоопухолевые препараты направлены именно на разрушение и инактивацию этого гена. Если ингибировать его активность удается, то развитие рака можно остановить. Но за долгие годы лечения такими целенаправленными преператами, у гена, как и у любого организма произошла адаптация, и он стал устойчивым к ряду средств.

После этого лекарственные средства были усовершенствованы, изменилась их формула, они вновь стали активны в отношении данного гена. Но совершенствуется и сам ген: он также неоднократно мутировал, вырабатывая каждый раз устойчивость к препаратам. За длительные годы накопилось множество разновидностей мутаций этого гена, свыше 25. Это влечет за собой неэффективность специфической терапии. Для того чтобы не терять время на напрасное лечение, которое не будет эффективно, проводят анализ на определение мутации данного гена.

Например, обнаружение мутаций в гене KRAS указывает на то, что лечение рака легкого и толстого кишечника ингибиторами тирозинкиназы будет неэффективно. Если обнаруживаются мутации в гене ALK и ROS1, это говорит о том, что нужно назначать кризотиниб, который быстро и эффективно ингибирует этот ген и предотвращает дальнейшее развитие опухоли. Ген BRAF приводит к образованию меланомных опухолей.

Сегодня существуют препараты, которые могут блокировать активность этого гена и менять его установку на неограниченный рост. Это приводит к тому, что опухоль замедляет рост или прекращает расти. В комплексе с противоопухолевыми препаратами можно добиться значительных результатов в лечении, вплоть до уменьшения размеров опухоли.

[51], [52], [53], [54], [55], [56], [57], [58], [59]

Анализ кала на раковые клетки

Обычно суть анализа состоит в обнаружении в кале скрытой крови. Этот признак может указывать на наличие онкологического процесса в ободочной или прямой кишке. Людям старше 45-50 лет, которые наиболее подвержены риску развития раковых опухолей, необходимо сдавать этот анализ ежегодно. Это может указывать и на другие патологии, но тогда необходимо провести дополнительные исследования для дифференциальной диагностики. Это ранний способ диагностики, который дает возможность выявить опухоль на этапе ее зарождения и предпринять меры для лечения. Часто при помощи этого метода можно обнаружить даже предраковое состояние.

Биопсия на раковые клетки

Это исследование, которое дает максимально точные и достоверные результаты. Состоит из двух этапов. На первом этапе производят забор биологического материала для дальнейшего исследования. Материалом служит кусочек ткани, взятый непосредственно из того органа, в котором локализована опухоль. По сути, при помощи специальной техники и инструментов, врач отрезает кусочек опухоли и передает ее для дальнейшего исследования в лабораторию. Забор обычно производится с применением местной анестезии.

На втором этапе биологический материал подвергается дальнейшему цитологическому и гистологическому исследования. При цитологическом исследовании готовится микропрепарат, проводится его изучение под микроскопом. По общей картине, внешнему виду, характеру включений, можно предварительно сделать ввод о том, является ли опухоль доброкачественной или злокачественной. Этот этап не превышает 30 минут.

После этого ткань вымачивают и производят ее посев в специальную питательную среду, которая содержит все условия для роста клетки. Помещается культура в оптимальные условия, в инкубатор, выдерживают в течение месяца. Исследование достаточно длительное и определяется скоростью роста клеток. Если это раковая опухоль, она начнет активно расти. Доброкачественная, нераковая опухоль роста не дает. Для ускорения роста можно добавить факторы роста, которые дополнительно стимулируют рост опухоли. В таком случае результаты могут быть получены в течение 7-10 дней.

Выросшую опухоль подвергают дальнейшим биохимическим, микроскопическим исследованиям и в конечном итоге выдают результат в виде окончательного диагноза, в котором определен вид опухоли, ее стадия, распространенность и направление опухолевого роста. Это обычно окончательный вариант, которые определяет результат со 100% точностью.

[60], [61], [62], [63], [64], [65], [66], [67]