Анализ крови на мононуклеоз методом пцр
Инфекционный мононуклеоз – вирусное заболевание, которое встречается достаточно часто у детей и у молодых людей в возрасте до 20–30 лет. Его симптомы легко спутать с простудой, ангиной, ОРЗ. Заподозрить присутствие этой инфекции может опытный врач. Однако достоверную информацию о присутствии герпесвируса в организме могут дать только анализы.
В каких случаях направляют на анализ
Часто анализ на мононуклеоз не требуется, и врач может поставить диагноз без дополнительных методов диагностики. Однако есть некоторые случаи, в которых необходимо сдать биоматериалы для выявления мононуклеоза.
К таким случаям относят ситуации когда:
- Возникает проблема постановки диагноза и требуется отличить клинические проявления инфекционного мононуклеоза от тонзиллита, развития воспалительного процесса или других герпесвирусов.
- Предстоит проведение трансплантации различных органов и тканей.
- Пациенту поставлен диагноз ВИЧ.
- Была произведена пересадка органов или костного мозга и требуется разработка иммуносупрессивной терапии.
Чтобы отследить правильность и эффективность выбранного метода лечения мононуклеоза пациента могут направить на повторные анализы через некоторое время после начала лечения. Также повторные анализы потребуется сдавать каждые 3 месяца в течение 6 месяцев или 1 года после выздоровления.
Инфекционный мононуклеоз у детей
Какие анализы нужно сдавать
Для проведения анализа на мононуклеоз подходят практически любые биологические материалы:
- моча;
- слюна;
- соскоб из ротоглотки или носоглотки;
- кровь (венозная, капиллярная);
- мазки из уретры, влагалища, анального отверстия.
Развёрнутый клинический анализ крови
Общий анализ крови (развёрнутый клинический) – стандартный метод диагностики. Он помогает получить представление об изменениях в составе крови у детей и у взрослых.
Картина крови, характерная для мононуклеоза:
| Мононуклеары | Количество атипичных мононуклеаров в крови выше 10% |
| Моноциты | Уровень выше 10% |
| Эритроциты | Находятся в норме при отсутствии осложнений. При наличии осложнений количество резко снижается. Опасный показатель менее 3,0·1012/л |
| Лимфоциты+моноциты | Составляют около 90% от общего количества лейкоцитов |
| Палочкоядерные нейтрофилы | Превышают 6% |
| Сегментноядерные нейтрофилы | Уровень понижен относительно нормы |
| Лейкоциты | Количество в пределах нормы или незначительно превышает её |
| Лимфоциты | Количество лимфоцитов выше 40% |
| СОЭ | Незначительное превышение нормы |
| Тромбоциты | Данный показатель находится в норме при отсутствии осложнений. При наличии осложнений количество резко снижается. Опасный показатель менее 150·109/л |
Как правило, общего анализа крови при подозрении на мононуклеоз бывает недостаточно для постановки диагноза. Общие анализы крови и мочи не выявляют инфекцию, однако помогают определить присутствие в организме патологии.
Диагностика вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ): анализ крови, ДНК, ПЦР, печеночные пробы
Биохимический анализ крови
Биохимический анализ крови – также один из стандартных методов исследования. С помощью него оценивают работу внутренних органов. В случае мононуклеоза в данных биохимического исследования могут наблюдаться отклонения в показателях, связанных с работой печени и селезёнки.
Отклонения от нормы в показателях крови при инфекционном мононуклеозе:
| Фермент аланинаминотрансфераза (АлАТ) | Активность повышена в 2-3 раза в сравнении с нормой |
| Фермент аспартатаминотрансфераза (АсАТ) | Активность повышена в 2-3 раза в сравнении с нормой |
| Щелочная фосфатаза | Уровень превышает 90 Ед/л |
| Прямая фракция билирубина | Определяется в количестве свыше 5 мкмоль/л |
| Непрямая фракция билирубина | Показатель свыше 15 мкмоль/л говорит о наличии осложнений со стороны крови |
Общий анализ мочи
Общий анализ мочи – также стандартный метод диагностики. Исследование мочи при подозрении на инфекционный мононуклеоз помогает выявить изменения, которые связаны с патологическими процессами в печени и селезёнке, а также с активностью вируса в организме.
Какие происходят изменения в составе мочи при мононуклеозе:
| Белок | Превышение показателей нормы (0,250 г/сут) |
| Билирубин | В норме билирубин не определяется в моче вовсе. О проблеме говорит показатель 5,1 мкмоль/л |
| Цвет мочи | При мононуклеозе моча становится тёмной, практически бурой. В ней могут быть примеси крови и гноя |
Иммуноферментный анализ (ИФА)
Данный метод исследования применяется для выявления в организме антител к вирусу Эпштейна-Барр, который и приводит к развитию мононуклеоза. Исследование на антитела позволяет максимально точно определить присутствие герпесвируса и мононуклеоза в исследуемой крови, срок его нахождения в организме и стадию инфекционного процесса.
Тест на мононуклеоз включает в себя определение антител IgG и IgM.
| Тест на антитела IgG | |
|---|---|
| Положительно (более 40 Ед/мл) |
|
| Отрицательно (менее 10 Ед/мл) |
|
| Сомнительно (от 10 до 40 Ед/мл) |
|
| Тест на антитела IgM | |
|---|---|
| Положительно (более 40 Ед/мл) |
|
| Отрицательно (менее 20 Ед/мл) |
|
Полимеразная цепная реакция
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – тест, который позволяет выявить наличие вируса Эпштейна-Барр.
Результаты теста имеют качественные показатели. В бланке будет отмечено «положительный» результат или «отрицательный».
Расшифровка анализа:
- Положительная реакция говорит о присутствии в сданном биологическом материале вируса.
- Отрицательная реакция может говорить об отсутствии признаков инфекционного заболевания, либо о недостаточном количестве частиц герпесвируса в сданном материала.
Присутствие вируса определяется при наличии минимум 80 вирусных частиц на 5 микролитров крови, которая прошла процедуру выделения ДНК.
Определить по анализу присутствие вируса можно с точностью в 98%.
Моноспот
Моноспот тест – специальное экспресс исследование крови на определение вируса Эпштейна-Барр. Тест применяется при подозрении на недавнее первичное заражение. Если первые признаки заболевания проявились более 90 дней назад, то тест не нужно сдавать, так как результаты будут необъективны.
Суть этого анализа крови на мононуклеоз состоит в процессе агглютинации – клетки вируса склеиваются и выпадают в осадок биоматериала.
Результаты теста агглютинации бывают либо положительными (вирус обнаружен), либо отрицательными (вирус не обнаружен).
Серология, ИФА, ПЦР при вирусе Эпштейна-Барр. Положительный и отрицательный результат
Как правильно подготовиться к сдаче анализов
Подготовка к сдаче биологического материала важна. От правильного подхода будет зависеть достоверность лечения. Нарушение правил приведёт к получению некорректных данных, а соответственно и к отсутствию адекватного лечения.
Подготовка к анализу крови
Рекомендации по подготовке к сдаче материала на определение вируса Эпштейна-Барр ничем не отличаются от стандартных правил подготовки к исследованию крови:
- Сдать кровь лучше в утреннее время и только натощак. Последний приём пищи должен быть за 8–10 часов до процедуры. Разрешено выпить половину стакана простой воды.
- За 2-3 суток до теста на мононуклеоз прекращают приём антибиотиков. Если пациент принимает различные других препараты, то целесообразность исследования определяется лечащим врачом.
- Нельзя употреблять алкоголь в течение минимум 1 суток. Курить дозволяется за 1 час до процедуры.
Подготовка к анализу мочи
Детальные рекомендации относительно подготовки и правил сдачи мочи на анализ следует узнать в клинике или лаборатории, где будет проводиться исследование. Существуют разные подходы к сбору мочи.
Общее правило – перед сбором мочи необходимо проводить гигиенические процедуры в области уретры и гениталий. После гигиенических процедур нужно убедиться, что все моющие средства были тщательно смыты.
Также общее требование – сдача материала на исследование в одноразовых стерильных контейнерах.
Мононуклеоз – заболевание, вызванное герпесвирусом. При подозрении на эту болезнь пациента направляют на стандартные исследования, которые проводят для выявления герпеса. Не стоит игнорировать этап диагностики. К нему нужно отнестись со всей серьёзностью и правильно подготовиться к сдаче анализа, так как от наличия развёрнутой информации и от её достоверности зависит правильность назначенного лечения.
Лечение вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ) у детей и взрослых. Длительность и схема лечения при ВЭБ
Источник
Сегодня изучение заболеваний, вызванных вирусом Эпштейна-Барр, представляет интерес для врачей различного профиля. Это обусловлено тропностью вируса к иммунной системе, а также значением вируса в возникновении злокачественных новообразований, в частности лимфом.
Инфекционный мононуклеоз – наиболее часто встречающаяся патология, вызванная вирусом Эпштейна-Барр. Она также известна, как «болезнь поцелуев», что связано с преобладающим путем распространения инфекции.
В этой статье на estet-portal.com подробно изложена информация о современных подходах к лабораторной диагностике инфекционного мононуклеоза.
Роль цитомегаловируса в возникновении инфекционного мононуклеоза
Цитомегаловирус вызывает около 3% случаев инфекционного мононуклеоза. Особенность инфекционного мононуклеоза, вызванного цитомегаловирусом, заключается в наличии длительных фебрильных эпизодов, лимфаденопатии, гепатита. Но при этом фарингеальные проявления заболевания отсутствуют в большинстве случаев.
Цитомегаловирусная инфекция особенно опасна в период беременности: риск возникновения тяжёлых патологий у плода составляет около 10%.
О возможности цитомегаловируса инициировать возникновение инфекционного мононуклеоза следует помнить при проведении лабораторной диагностики заболевания. Определение ДНК вируса методом ПЦР подтверждает его роль в развитии инфекционного мононуклеоза.
Читайте нас в Telegram.
Изменения общего анализа крови при инфекционном мононуклеозе
Изменения общего анализа крови при инфекционном мононуклеозе являются достаточно характерными. В первые дни заболевания может наблюдаться лейкопения. В последующем она сменяется на лейкоцитоз с преобладанием одноядерных клеток: в общем анализе крови лимфоциты составляют больше 50%. Тромбоцитопения и гранулоцитопения довольно часто встречаются на фоне инфекционного мононуклеоза. На фоне поражения печени может наблюдаться повышение уровней трансаминаз: АЛТ (аланинаминотрансферазы) и АСТ (аспартатаминотрансферазы).
Читайте также: FDA предупреждает: повышен риск развития крупноклеточной лимфомы после имплантации груди
Инфекционный мононуклеоз: что собой представляют атипичные мононуклеары
Для пациентов с инфекционным мононуклеозом очень характерным лабораторным признаком является появление в картине крови атипичных мононуклеаров.
Атипичные мононуклеары – это одноядерные клетки с большим ядром, широкой протоплазмой и поясом просветления на границе ядра и цитоплазмы (последнее не обязательно). Ядро клеток большое и расположено в клетке асимметрично. Атипичные мононуклеары являются молодыми лимфоцитами, морфологически сходными с моноцитами. Они также известны под названием «вироциты».
Инфекционный мононуклеоз: современные методы диагностики заболевания
Сегодня изучение заболеваний, вызванных вирусом Эпштейна-Барр, представляет интерес для врачей различного профиля. Это обусловлено тропностью вируса к иммунной системе, а также значением вируса в возникновении злокачественных новообразований, в частности лимфом.
Инфекционный мононуклеоз – наиболее часто встречающаяся патология, вызванная вирусом Эпштейна-Барр. Она также известна, как «болезнь поцелуев», что связано с преобладающим путем распространения инфекции.
В этой статье на estet-portal.com подробно изложена информация о современных подходах к лабораторной диагностике инфекционного мононуклеоза.
Роль цитомегаловируса в возникновении инфекционного мононуклеоза
Цитомегаловирус вызывает около 3% случаев инфекционного мононуклеоза. Особенность инфекционного мононуклеоза, вызванного цитомегаловирусом, заключается в наличии длительных фебрильных эпизодов, лимфаденопатии, гепатита. Но при этом фарингеальные проявления заболевания отсутствуют в большинстве случаев.
Цитомегаловирусная инфекция особенно опасна в период беременности: риск возникновения тяжёлых патологий у плода составляет около 10%.
О возможности цитомегаловируса инициировать возникновение инфекционного мононуклеоза следует помнить при проведении лабораторной диагностики заболевания. Определение ДНК вируса методом ПЦР подтверждает его роль в развитии инфекционного мононуклеоза.
Читайте нас в Telegram.
Изменения общего анализа крови при инфекционном мононуклеозе
Изменения общего анализа крови при инфекционном мононуклеозе являются достаточно характерными. В первые дни заболевания может наблюдаться лейкопения. В последующем она сменяется на лейкоцитоз с преобладанием одноядерных клеток: в общем анализе крови лимфоциты составляют больше 50%. Тромбоцитопения и гранулоцитопения довольно часто встречаются на фоне инфекционного мононуклеоза. На фоне поражения печени может наблюдаться повышение уровней трансаминаз: АЛТ (аланинаминотрансферазы) и АСТ (аспартатаминотрансферазы).
Читайте также: FDA предупреждает: повышен риск развития крупноклеточной лимфомы после имплантации груди
Инфекционный мононуклеоз: что собой представляют атипичные мононуклеары
Для пациентов с инфекционным мононуклеозом очень характерным лабораторным признаком является появление в картине крови атипичных мононуклеаров.
Атипичные мононуклеары – это одноядерные клетки с большим ядром, широкой протоплазмой и поясом просветления на границе ядра и цитоплазмы (последнее не обязательно). Ядро клеток большое и расположено в клетке асимметрично. Атипичные мононуклеары являются молодыми лимфоцитами, морфологически сходными с моноцитами. Они также известны под названием «вироциты».
Атипичные мононуклеары могут присутствовать не только при инфекционном мононуклеозе, но и других вирусных заболеваниях. Но именно в случае инфекционного мононуклеоза их количество составляет более 10%, что практически не встречается на фоне других вирусных инфекций и поэтому является диагностическим признаком инфекционного мононуклеоза. В картине крови вироциты появляются уже на 2-3 день заболевания и могут наблюдаться до двух месяцем и больше.
Коварные TORCH-инфекции: чем опасен токсоплазмоз при беременности
В чем заключается серологическая диагностика инфекционного мононуклеоза
Серологическая диагностика инфекционного мононуклеоза заключается в проведении иммуноферментного анализа (ИФА), который дает возможность идентифицировать специфические антитела.
С целью серологической диагностики инфекционного мононуклеоза используется метод иммуноферментного анализа.
К антителам, которые являются маркерами инфекционного мононуклеоза, относятся:
1. анти-VCA Ig M (viral-capsid antigen с англ. – вирусный капсидный антиген): присутствуют в крови с самого начала заболевания в 100% случаев и определяются в последующие 3 недели в высоких титрах. Анти-VCA IgM исчезают к 1-6 месяцу заболевания. Выявление их специфично как для диагностики острой первичной инфекции, так и её реактивации;
2. анти-VCA Ig G – могут появляться с 1-4 недели заболевания, количество их снижается с выздоровлением. Наличие их в большинстве случаев свидетельствует о перенесенном инфекционном мононуклеозе. Повышение титра в 4 и более раз в динамике говорит об остром инфекционном процессе.
3. анти-EBNA Ig G (Epstein–Barr nuclear antigen с англ. – ядерный антиген Епштейн-Барр вируса) – идентифицируются позже всего (через 4-6 месяцев после начала заболевания) и могут сохраняться в течении многих лет и даже пожизненно.
4. анти EBV EA-D IgG ( early D antigen с англ. – ранние антигены D) – представляют собой антитела к D-компоненту белка, необходимого для репликации вируса. Характерны для острой первичной инфекции, появляются в первые две недели заболевания и быстро исчезают с выздоровлением. Увеличение титра анти EBV EA-D IgG указывает на реактивацию инфекции.
Для определения этиологии инфекционного мононуклеоза можно также использовать ПЦР. Идентификация ДНК Епштейн-Барр вируса в крови и соскобах слизистых оболочек подтверждает его роль в развитии заболевания. Определение гетерофильных антител в наше время практически не используется ввиду технических сложностей и низкой специфичности анализов.
Спасибо, что Вы остаетесь с estet-portal.com. Читайте другие интересные статьи в разделе Инфекционные болезни». Возможно, Вас также заинтересует: Почему важно диагностировать воспалительные поражения кожи кольцевидной формы.
Источник
При заражении герпесвирусом 4 типа у человека может развиться инфекционный мононуклеоз. Диагностика заболевания требует проведения лабораторных и дифференциальных методов исследования. Это надо для подтверждения вида возбудителя и патологии, поскольку общие симптомы заражения напоминают другие инфекции, спровоцированные прочими представителями патогенов, а их лечение – кардинально различается.
Какая требуется диагностика при мононуклеозе
Причиной заболевания является заражение ВГЧ-4 (вирус Эпштейна-Барр) – лимфокриптовирусом из рода лимфотропных герпесвирусов. Если у человека слабый иммунитет или имеется его дефицит (СПИД, раковые заболевания, прочее), патоген быстро размножается, провоцируя мононуклеоз. Причины, из-за которых лимфокриптовирус может не проявить себя – отсутствие благоприятных условий для массовой репликации вирионов и нормальная работа защитной системы организма. В этом случае человек становится либо вирусоносителем, либо же болезнь протекает в субклинической форме, напоминая простуду.
При инфекционном мононуклеозе меняется состав крови, увеличивается селезёнка, печень, лимфоузлы (повсеместно). Среди прочих симптомов числится лихорадка, отёчность слизистой носа и глотки, покраснение миндалин, общий токсикоз – тошнота, головная боль, повышение температуры и потоотделения, сыпь, прочее.
При обращении человека в медучреждение, врачами будет проведена дифференциальная диагностика инфекционного мононуклеоза. Специалисты исключают патологии, при которых воспаляются и увеличиваются в размере миндалины, слизистые зева, печень, селезёнка, слюнные железы и лимфоузлы на шее, в паху и прочих местах, возникает интоксикация, сыпь, возрастает температура. Эти симптомы в полной мере или частично проявляются при ВИЧ, ЦМВ-инфекции, токсоплазмозе, вирусном гепатите, краснухе, кори, лимфогранулематозе, ангинах других этиологий, дифтерии. Дифференциальный диагноз инфекционного мононуклеоза должен быть обоснован результатами анализов и комплексным обследованием у инфекциониста, ЛОРа, иммунолога, гастроэнтеролога и других врачей.
Для подтверждения заболевания потребуется скрупулёзно исследовать клеточный состав крови. Она должна сдаваться натощак или после еды не ранее чем через 8 – 9 часов.
Какие анализы крови на мононуклеоз нужно сделать:
- клинический (развёрнутая гемограмма);
- биохимический;
- серологический;
- иммуноферментный (ИФА);
- иммунохемилюминисцентный (ИХЛА);
- полимеразную цепную реакцию (ПЦР).
Лаборанты изучают показатели СОЭ, гемоглобина, наличие атипичных мононуклеаров и их процентное соотношение к лейкоцитам других видов. Они также должны выявить 3 типа антигенов, составляющих белковую оболочку ВГЧ-4: EA (ранний), VCA (капсидный), EBNA (ядерный) эпитопы. Лаборанты исследуют кровь на наличие к вирусу антител Ig двух классов – M и G.
У выздоровевшего после мононуклеоза человека в результатах исследования крови отмечается гематологическое нарушение на протяжении 6–9 месяцев, но показатели убывают. В этот период человек уже прекращает лечиться и щепетильно должен проводить профилактику мононуклеоза, чтобы не стать источником заражения, а также предотвратить рецидив инфекции. Контрольное исследование биоматериала рекомендуется повторять каждые 3 месяца на протяжении года после заболевания.
Клинический анализ крови при мононуклеозе
Расшифровку результатов должен делать врач, поскольку он знает нормы показателей гемограммы для каждой возрастной категории людей и сразу заметит отклонение.
Лабораторная диагностика инфекционного мононуклеоза совершается в любой из стадий заболевания: конец инкубации, обострение, период реконвалесценции.
Показатели крови при мононуклеозе:
- СОЭ (20 – 30 мм/час);
- лейкоцитоз (до 15 – 30х109/л);
- лимфомоноцитоз (от 10% до 90 – 95%);
- широкоплазменные и базофильные лимфоциты (от 5% до превышения 50%);
- нейтропения (лейкоцитарная формула сдвинута влево);
- атипичные мононуклеары (меняется структура, форма и размер клетки).
В клиническом анализе крови может быть обнаружено снижение количества лейкоцитов, что отображается записью лейкопения. При исследовании биоматериала также выявляется возрастание активности у щелочной альдолазы, фосфатазы, трансаминазы, увеличение концентрации билирубина.
При диагностике других заболеваний с наличием мононуклеозного синдрома, в результатах лабораторных анализов также видны гематологические нарушения. Обычно возрастает показатель скорости оседания эритроцитов – свыше 25 мм/час, отмечается тромбо-, нейтроцитопения, а также лейко- и лимфоцитоз, появляются атипичные мононуклеары в размере 5 – 50%, моноцитоз до 15%. Чтобы дифференцировать заболевание, продолжают анализ биоматериала другими способами.
Серологический метод диагностики
В XX столетии начали проводить тест Пауля-Буннелля с целью обнаружения в сыворотке крови гетерофильных антител. Если в анализе их титр превышает соотношение 1:224, это подтверждает развитие мононуклеоза. Однако результат теста в первую неделю от начала клинических проявлений инфекции в 40% случаев бывает отрицательным, поэтому для достоверности требуется повторное проведение анализа через 7 дней и 14 суток после первого анализа.
Сегодня тест Пауля-Буннелля считается менее эффективным для подтверждения мононуклеоза, поскольку точность реакции не высокая, в результатах не отображается стадия и тяжесть заболевания. При этом методе также не понятно, является ли инфекция первичной, или происходит её реактивация. Нередко при анализе крови отмечается снижение гетерофильных антител, а затем их уровень вновь повышается. Такое явление случается и при других вирусных инфекциях.
Иммуноферментный метод диагностики
При ИФА в крови сопоставляется соотношение антител класса G, М к раннему, капсидному и ядерному антигенам ВГЧ-4. Лаборанты также определяют их значение – положительное либо отрицательное.
В биоматериале при первичном заболевании в остром периоде мононуклеоза определяются антитела к раннему антигену – anti -ЕА-D IgG, которые прекращают выявляться вскоре после выздоровления. Если высокие титры в крови сохраняются длительное время, значит, инфекция приобрела хроническую форму и требуется неспецифическое лечение. О развитии патологии говорят показатели EA+ IgG наличие anti -VCA IgМ, отсутствие – EBNA IgG.
Метод иммунохемилюминисцентного анализа
При исследовании ИХЛА прогрессирующую инфекцию подтверждает присутствие в крови IgG к EBV более 40 E/мл. Цифры ниже этого показателя свидетельствуют об отсутствии мононуклеоза либо сомнительном результате реакции, поэтому требуется ИХЛА повторить дней через 5. Если показатели аналогичны данным предыдущего исследования – ниже 40 E/мл, то инфекции нет.
Антитела к капсидному антигену ВГЧ-4 – anti -VCA IgМ, в крови проявляются ещё в конце инкубационного периода. Их высокие показатели отмечаются первые 3 недели, затем значения снижаются, а через 6 месяцев после выздоровления исчезают совсем. Если на протяжении 90 дней от начала болезни присутствуют в крови высокие титры anti -VCA IgM, возможно, у человека иммунодефицитное состояние, вследствие чего течение инфекции затянулось. О приближении выздоровления указывает возрастание уровня антител к ядерному эпитопу ВГЧ-4 – anti -EBNA IgG.
Полимеразная цепная реакция при мононуклеозе
Самым чувствительным методом является ПЦР.
Применяется для диагностики мононуклеоза у новорождённых, при сомнительных результатах предыдущих анализов, а также людям, если их клиника инфекции проходит с осложнениями. Для проведения ПЦР человеку надо сдать кровь с вены или слюну, мочу, околоплодные воды. Перед забором биоматериала нельзя есть не менее 8 часов, а накануне следует употреблять жирную пищу. ПЦР-диагностика позволяет идентифицировать тип вируса и обнаружить его ДНК в клетках на самых ранних стадиях. Положительное значение в анализе указывает на наличие ВГЧ-4 и подтверждает этим причину инфекции.
Заключение
Диагностика мононуклеоза проводится после несложной подготовки больного к забору биоматериала. Это касается времени, когда надо сдать кровь, питания, отказа от приёма медикаментов, но только если это разрешил врач, и прочих действий накануне анализа, рекомендованных доктором. На базе полученных результатов обследования подбирается лечение и неспецифическая профилактика.
Источник