Анализ крови на мононуклеары инвитро

Анализ крови на мононуклеары инвитро thumbnail

ВАЖНО!

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Вирус Эпштейна-Барр относится к семейству герпесвирусов, подсемейство g-герпесвирусов — вирус герпеса человека IV типа. Вирусная частица состоит из нуклеоида, капсида и оболочки.

Нуклеоид содержит двухцепочечную ДНК, он окружен капсидом, состоящим из белковых субъединиц. Нуклеоид и капсид (нуклеокапсид) окружены липидсодержащей внешней оболочкой, образующейся из ядерной или наружной мембраны клетки-хозяина, в которую ещё до начала сборки вирусной частицы встраиваются некоторые вирусные белки. 

При инфицировании вирус проникает в эпителий ротоглотки и слюнных желёз человека и вызывает активную инфекцию с лизисом клеток и высвобождением вирусных частиц, в результате чего вирус обнаруживается в слюне. Кроме того, он может проникать в В-лимфоциты и эпителий носоглотки и вызывать латентную инфекцию. Вирус Эпштейна-Барр можно обнаружить в оральных секретах здоровых, но латентно инфицированных людей. Вирус тропен к В-лимфоцитам, Т-лимфоциты он не поражает. Проникнув в лимфоциты, вирус Эпштейна-Барр может вызывать их трансформацию, в результате которой образуются способные к неограниченной пролиферации клоны атипичных лимфоцитов, содержащие кольцевую вирусную ДНК в виде плазмиды. Рецептором вируса на эпителиальных клетках и В-лимфоцитах служит молекула CD21, которая служит также рецептором фрагмента комплемента C3d. Вирус запускает как гуморальный, так и клеточный ответ. Среди образующихся антител есть специфические к антигенам вируса и неспецифические, гетерофильные. Последние появляются в результате поликлональной активации В-лимфоцитов (это может быть причиной интерференции при проведении ряда серологических исследований у людей с активной инфекцией вирусом Эпштейна-Барр). Главную роль в элиминации данной инфекции играет клеточный иммунитет. При острой инфекции первичная репродукция вируса в В-лимфоцитах сменяется выраженной пролиферацией Т-лимфоцитов с соотношением CD4/CD8 меньше 1.

Острая инфекция вирусом Эпштейна-Барр известна под названиями инфекционный мононуклеоз, болезнь Филатова, моноцитарная ангина, идиопатическая железистая лихорадка, болезнь Афейффера, острый доброкачественный лимфобластоз.

Вирус Эпштейна-Барр — главная причина мононуклеоподобного синдрома (хотя острая первичная инфекция, вызванная этим вирусом, и инфекционный мононуклеоз не являются синонимами). Для острой инфекции характерно повышение температуры, боли в горле и увеличение заднешейных лимфоузлов (реже – переднешейных и локтевых, встречается генерализованное увеличение лимфоузлов). В 50% случаев выявляется увеличение селезенки, в 10 — 30% случаев – увеличение печени. Другими проявлениями инфекции могут быть сыпь и периорбитальный отек. Изредка наблюдаются осложнения, в том числе, неврологические, изменения со стороны системы крови в виде гемолитической или апластической анемии, нейтропении, тромбоцитопении. После перенесённого заболевания иногда подолгу сохраняется фарингит, увеличение лимфоузлов, утомляемость и неспособность концентрации внимания.

Заболевание малоконтагиозно. Инкубационный период (период активного размножения и распространения вируса по всей лимфоидной ткани) может длиться от 30 до 50 суток. Инфицирование данным вирусом в любом возрасте, а у детей особенно, в большинстве случаев может протекать бессимптомно или как респираторная инфекция. Доля серопозитивных лиц (имеющих специфические антитела к антигенам вируса) уже среди подростков в разных странах составляет от 50 до 90%, среди взрослых людей серологические признаки инфекции обнаруживаются почти в 100% случаев. Вирус выделяется со слюной, передается через поцелуи и другие контакты слизистой со слюной или загрязнёнными ею предметами. Трансплацентарная передача вируса происходит редко. Иммунитет при инфекционном мононуклеозе стойкий.

Хотя канцерогенность вируса окончательно не доказана, есть основания полагать, что он может играть роль в развитии ряда злокачественных новообразований – лимфомы Беркитта, рака носоглотки, лимфогранулематоза и ряда посттрансплантационных лимфопролиферативных синдромов. На фоне нарушения клеточного иммунитета (СПИД, иммуносупрессия при трансплантации и пр.) вирус Эпштейна — Барр может вызывать инфекционный мононуклеоз с летальным исходом или лимфопролиферативные синдромы с развитием В-клеточных лимфом. 

Лабораторная диагностика инфекционного мононуклеоза 

Диагностика инфекционного мононуклеоза основывается на клинической картине, характерных изменениях в клиническом анализе крови:

Читайте также:  Сколько действует результат биохимический анализ крови

и результатах серологических тестов:

Ко второй неделе заболевания развивается относительный и абсолютный лимфоцитоз с присутствием 10 — 20% атипичных мононуклеаров. Гематологические изменения, напоминающие картину инфекционного мононуклеоза, могут наблюдаться и при цитомегаловирусной инфекции, токсоплазмозе, острых респираторных вирусных заболеваниях, ветряной оспе, кори, инфекционных гепатитах и других заболеваниях. Поэтому для постановки дифференциального диагноза целесообразно проведение серологических тестов. Антитела к антигенам вируса появляются достаточно быстро, и исследование в остром периоде заболевания даже однократное взятие сыворотки на разные виды антител может дать достаточно точное представление о наличии иммунитета или восприимчивости пациента к инфекции вирусом Эпштейна-Барр, текущей инфекции или реактивации.

Дополнительным подтверждением течения острых стадий инфекции может служить выявление ДНК вируса Эпштейна — Барр в крови и/или слюне методом ПЦР 

ПЦР-тестирование особенно полезно для выявления данной инфекции у новорождённых, когда серологические исследования мало информативны вследствие незрелости иммунной системы, а также в сложных и сомнительных случаях. 

Серологические тесты.

При литическом жизненном цикле вируса сначала появляются каскадом различные регуляторные белки ранней фазы (ранние антигены, early antigens, EA), к которым относятся используемые в различных тест-системах ЕА-D (p54), EA-R (p85), EA p138. Позже образуются структурные белки вируса — вирусные капсидные антигены (virus capsid antigens, VCA), мембранные белки (membrane antigens, MA). При латентной инфекции образуются только некоторые белки, в число которых входит Эпштейна-Барр ядерный (нуклеарный) антиген (Epstein-Barr nuclear antigens, EBNA, NA). Специфическая серологическая диагностика инфекции основана на использовании комбинации тестов, выявляющих наличие IgG и IgM антител к различным белкам-антигенам вируса, что позволяет дифференцировать инфекцию и уточнить стадию патологического процесса. В серологической диагностике острого мононуклеоза используется также тест на гетерофильные антитела.

ВАЖНО!

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Информация проверена экспертом

Анализ крови на мононуклеары инвитро

Лишова Екатерина Александровна

Высшее медицинское образование, опыт работы — 19 лет

Источник

Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме «реального времени».

Исследуемый материал
Сыворотка крови

Количественное определение ДНК вируса Эпштейна-Барр в сыворотке крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени». 

Вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ), или вирус герпеса человека 4-го типа является причиной инфекционного мононуклеоза. С этим вирусом связывают также этиологию некоторых онкологических, преимущественно лимфопролиферативных, заболеваний. Имеются данные о том, что ВЭБ может быть причиной так называемого «синдрома хронической усталости». Подтверждением течения острых стадий инфекции может служить выявление ДНК вируса Эпштейна-Барр в крови и/или слюне методом ПЦР. Определение ДНК вируса особенно полезно для выявления данной инфекции у новорожденных, когда серологические исследования малоинформативны вследствие незрелости иммунной системы, а также в сложных и сомнительных случаях. 

Количественное определение ДНК вируса Эпштейна-Барр в сыворотке крови дает возможность отличить носительство (низкая концентрация вируса) от проявлений инфекционного процесса с активным размножением ВЭБ. 

Определение концентрации вируса в сыворотке крови имеет значение для установления активности процесса и оценки эффективности терапии.

Аналитические показатели: 

  • определяемый фрагмент – специфичный участок ДНК вируса Эпштейна-Барр; 
  • специфичность определения – 100%; 
  • чувствительность определения – 400 МЕ/мл. 

Литература

  1. Баранова И.П., Лесина О.Н., Курмаева Д.Ю. Роль инфекционного мононуклеоза в формировании частых заболеваний у детей. Инфекционные болезни. 2011;9(1):36. 
  2. Забков О.И., Зурочка В.А., Добрынина М.А., Гриценко В.А. Клинико-диагностические критерии эффективности комплексной этиопатогенетической терапии хронической Эпштейна-Барр вирусной инфекции. Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН (электронный журнал). 2018;3:1-13. 
  3. Катин Н.А., Жильцов И.В., Семенов В.М., Новик Д.К. Полимеразная цепная реакция в оценке прогноза и мониторинге вирус Эпштейна-Барр-Ассоциированной лимфомы Ходжкина. Клиническая онкогематология. 2018;11(2):182–186. 
  4. Львов Н.Д., Дудукина Е.А. Ключевые вопросы диагностики Эпштейна-Барр вирусной инфекции. 2013:26. 
  5. Arvin A., Campadelli-Fiume G., Mocarski E., Moore P.S., Roizman B., Whitley R. et al. Human Herpesviruses: Biology, Therapy, and Immunoprophylaxis. Cambridge University Press. 2007;1432.
Читайте также:  Анализ крови по минеральным элементами

Специальной подготовки к исследованию не требуется. С общими рекомендациями для подготовки к исследованиям можно ознакомиться 

здесь

.

  • ослабление иммунитета (ВИЧ, химиотерапия по поводу злокачественных новообразований, иммуносупрессивная терапия при трансплантации внутренних органов и т. п.); 
  • увеличение лимфоузлов на затылке, под подбородком и в углах нижней челюсти; 
  • лейкопения; 
  • перенесенное острое вирусно-респираторное заболевание с высокой лихорадкой (до 40°С); 
  • профилактические скрининговые исследования;
  • диагностика инфекционного мононуклеоза (в т. ч. обнаружение в крови атипичных мононуклеаров).

Интерпретация результатов

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения: МЕ/мл. 

Референсные значения: нет. 

Интерпретация результатов 

  • «не обнаружено»: ДНК вируса Эпштейна-Барр не выявлена или значение ниже предела чувствительности метода (400 МЕ/мл). Результат интерпретируют как «ДНК вируса Эпштейна-Барр не выявлена»; 
  • < 5х10^2 МЕ/мл: результат положительный с концентрацией ДНК вируса Эпштейна-Барр менее 5х10^2 МЕ/мл; 
  • от 5х10^2 до 10^8 МЕ/мл: результат положительный. Полученное значение находится в пределах линейного диапазона; 
  • > 10^8 МЕ/мл: результат положительный с концентрацией ДНК вируса Эпштейна-Барр более 10^8 МЕ/мл.

Артикул:
3511

Срок исполнения:

до 3 рабочих дней ?

Указанный срок не включает день взятия биоматериала

Цена:
450 руб

В этом разделе вы можете узнать, сколько стоит выполнение данного исследования в вашем городе, ознакомиться с описанием теста и таблицей интерпретации результатов. Выбирая, где сдать анализ «Вирус Эпштейна-Барр, количественное определение ДНК в сыворотке крови (Epstein-Barr virus, EBV, quantitative)» в Москве и других городах России, не забывайте, что цена анализа, стоимость процедуры взятия биоматериала, методы и сроки выполнения исследований в региональных медицинских офисах могут отличаться.

Источник

Метод определения
Иммуноанализ.

Исследуемый материал
Сыворотка крови

Маркёры первичной инфекции вирусом Эпштейна-Бар.

Вирус Эпштейна-Барр относится к семейству герпесвирусов, подсемейство g-герпесвирусов — вирус герпеса человека IV типа. Вирусная частица состоит из нуклеоида, капсида и оболочки.

Антитела класса IgM к капсидному антигенному комплексу вируса Эпштейна-Барр характерны для острой инфекции. Они появляются в ранней фазе и исчезают в течение 4 — 6 недель от начала острой первичной инфекции. Этот тип антител выявляется также и при реактивации инфекции. Наличие VCA-IgM на фоне отсутствия анти-EBNA IgG подтверждает первичную инфекцию.

Тест используется в комбинации с тестами в лаборатории ИНВИТРО — анти-EA IgG № 255, анти-EBNA IgG № 187, анти-VCA IgG № 275 (см. таблицу). 

Литература

  1. Инфекционные болезни у детей. Ред. Д. Марри. М. Практика, 2006. 928 с.
  2. Gorgievski-Hrisoho, W Hinderer, H Nebel-Schickel, et. al. Serodiagnosis of infectious mononucleosis by using recombinant Epstein-Barr virus antigens and enzyme-linked immunosorbent assay technology. J Clin Microbiol. 1990 October; 28(10): 2305 — 2311.

Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи.

С общими рекомендациями для подготовки к исследованиям можно ознакомиться здесь >>.

  • Лабораторное подтверждение диагноза при клинических подозрениях на острый инфекционный мононуклеоз.
  • Оценка стадии текущей инфекции.
  • Диагностика лимфопролиферативных и онкологических заболеваний, связываемых с вирусом Эпштейна-Барр.

Интерпретация результатов

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Формат выдачи результата: количественный.

Единицы измерения в лаборатории ИНВИТРО: Ед/мл.

Читайте также:  Анализ крови на паразитов показатели

Референсные значения:

  • > 40 Ед/мл — положительно; 
  • 20 — 40 Ед/мл – сомнительно.

Положительный результат:

  1. острая или недавняя (в предшествующие 1 — 2 месяца) инфекция вирусом Эпштейна-Барр;
  2. реактивация инфекции;
  3. хроническая активная инфекция вирусом Эпштейна-Барр.

Отрицательный результат:

  1. отсутствие инфицирования;
  2. инкубационный период;
  3. ранние и поздние сроки пастинфекции;
  4. атипичная первичная инфекция или реактивация.

Таблица. Интерпретация серологических данных.

Стадия инфекцииVCA IgMVCA IgGEA-IgGEBNA IgG
Отсутствие инфекции и большая

часть инкубационного периода (30 — 50 суток)

Подозрение на раннюю стадию первичной инфекции

+

Острая стадия первичной инфекции

++

++++

++

Недавняя инфекция (менее 6 месяцев)

+

++++

++

Перенесённая инфекция

+++

+/-

+

Хроническая инфекция или её реактивация

-/+

++++

+++

-/+

Злокачественные новообразования,

связанные с вирусом Эпштейна-Барр

++++

+++

-/+

Источник

Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме «реального времени».

Исследуемый материал
Соскоб эпителиальных клеток ротоглотки

Определение ДНК вируса Эпштейна-Барр в соскобах эпителиальных клеток ротоглотки методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени». 

Вирус Эпштейна — Барр (ВЭБ) является причиной инфекционного мононуклеоза. С вирусом Эпштейна — Барр связывают также этиологию некоторых онкологических, преимущественно лимфопролиферативных заболеваний. Имеются данные о том, что этот вирус может быть причиной так называемого «синдрома хронической усталости». Подтверждением течения острых стадий инфекции может служить выявление ДНК вируса Эпштейна – Барр в крови и/или слюне методом ПЦР. Определение ДНК вируса особенно полезно для выявления данной инфекции у новорожденных, когда серологические исследования мало информативны вследствие незрелости иммунной системы, а также в сложных и сомнительных случаях.

Аналитические показатели:

  • определяемый фрагмент – специфичный участок ДНК вируса Эпштейна-Барр;
  • специфичность определения — 100%;
  • чувствительность определения — 100 копий ДНК Эпштейна-Барр в образце.
  • Взятие материала желательно проводить до диагностических и лечебных манипуляций в предполагаемом месте локализации возбудителя. 

    Взятие биологического материала рекомендуется проводить до начала применения лекарственных препаратов (антибактериальных, противовирусных, противопаразитарных). При проведении исследований в целях контроля лечения целесообразно проводить взятие проб на ПЦР-тесты не ранее, чем через 10-14 дней после окончания применения соответствующих препаратов локального действия и не ранее, чем через один месяц после проведения системной терапии. 

    При подготовке пациента к процедуре следует учесть: 

    • за 6 часов до исследования не рекомендуется использовать лекарственные средства для орошения ротоглотки и препараты для рассасывания; 
    • перед проведением исследования не чистить зубы, не использовать жевательную резинку/пастилки для освежения дыхания;  
    • перед началом исследования прополоскать полость рта водой комнатной температуры.

    Желательно соблюдать все описанные условия, если лечащим врачом не рекомендовано иное.

    • Ослабление иммунитета (ВИЧ, химиотерапия по поводу злокачественных новообразований, иммуносупрессивная терапия при трансплантации внутренних органов и т. п.).

    • Увеличение лимфоузлов на затылке, под подбородком и в углах нижней челюсти.

    • Лейкопения.

    • Перенесённое острое вирусно-респираторное заболевание с высокой лихорадкой (до 40°С).

    • Профилактические скрининговые исследования.

    • Диагностика инфекционного мононуклеоза (в т. ч. обнаружение в крови атипичных мононуклеаров).

    Интерпретация результатов

    Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

    Тест качественный. Результат выдаётся в терминах «обнаружено» или «не обнаружено».

    «Обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала найден фрагмент ДНК, специфичный для вируса Эпштейна-Барр, инфицирование вирусом Эпштейна-Барр.

    «Не обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала не найдено фрагментов ДНК, специфичных для вируса Эпштей-Барр, или концентрация возбудителя в образце ниже границы чувствительности метода.

    Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.

    Источник