Анализ крови на квантифероновый тест
КВАНТИФЕРОНОВЫЙ ТЕСТ (QuantiFERON®-ТВ Gold) – современный лабораторный тест для выявления туберкулезной инфекции, альтернатива классическому кожному тесту с туберкулином. В настоящий момент в различных странах разработано и выпущено большое число национальных рекомендаций по применению данного теста.
Квантифероновый тест основан на определении INF-γ (гамма-интерферона), высвобождаемого сенсибилизированными Т-клетками, стимулированными in vitro специфическими протеинами (ESAT-6, CFP-10, TB7.7 (p4)) микобактерий туберкулеза, входящих в комплекс Mycobacterium tuberculosis complex (M. tuberculosis, M. bovis, M. canettii, M. caprae, M. pinnipedii, M. mungi, M. microti, M. africanum и др.). Эти протеины отсутствуют в вакцинных штаммах M. bovis BCG и в большинстве нетуберкулезных микобактерий, за исключением M. kansasii, M. szulagai, M. marinum.
В исследуемой крови пациента (из пробирки с ТВ-антигеном) определяется содержание INFγ, результат анализируется в совокупности с данными, полученными из 2-х других пробирок (выполняющих роль контрольных).
Примерно 1/3 часть населения мира инфицирована МБТ, и только у 5-10% инфицированных лиц развивается заболевание. При наличии неблагоприятных факторов латентная туберкулезаня инфекция (ЛТИ – состояние, когда микобактерии туберкулеза (МБТ) присутствуют в организме человека, но при этом отсутствуют клинические и рентгенологические признаки туберкулеза) может перейти в активную форму с развитием внелегочного туберкулеза (например, туберкулез почек).
К группе высокого риска инфицирования МБТ относятся лица, имевшие контакт с больным туберкулезом, или имеющие высокую вероятность контакта (работники противотуберкулезных диспансеров, приютов, исправительных учреждений и др.), а также лица с сопутствующими заболеваниями (ВИЧ-инфекцией, сахарным диабетом и др.).
Используемые для диагностики ЛТИ кожные тесты – проба Манту и Диаскинтест®, имеют ряд противопоказаний и ограничений к применению.
Противопоказания к проведению пробы Манту и Диаскинтеста:
- Индивидуальная непереносимость туберкулина;
- Острые и хронические инфекционные заболевания и соматические заболевания в период обострения;
- Кожные заболевания и аллергические состояния в период обострения;
- Период карантина в детских коллективах.
У пациентов с индивидуальной гиперчувствительностью к туберкулину может наблюдаться ложноположительная реакция.
Сравнение тестов для диагностики туберкулезной инфекции
| Параметр | Проба Манту | Диаскинтест® | Квантифероновый тест |
|---|---|---|---|
| Метод исследования | Кожный тест | Кожный тест | Исследование крови |
| Побочные реакции | Возможны | Возможны | Нет |
| Противопоказания | Есть | Есть | Нет |
| Специфичность | Низкая | Высокая | Высокая |
| Ложноположительные результаты после вакцинации БЦЖ | Да | Нет | Нет |
| Зависимость от сроков проведения профилактических прививок | Да (не ранее чем через месяц) | Да (не ранее чем через месяц) | Нет |
| Интерпретация результатов | Субъективна | Субъективна | Объективна |
Преимущества КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА:
- отсутствие противопоказаний и ограничений по времени проведения;
- отсутствие ложноположительных результатов в случае вакцинации БЦЖ;
- безопасность процедуры и отсутствие побочных реакций;
- интерпретация результатов этого теста менее субъективна, чем интерпретация результатов кожных туберкулиновых тестов;
- высокая специфичность (99,1%) и высокая чувствительность (89,0%).
Показания к назначению КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА:
- Выявление ЛТИ в группах высокого риска: работники специализированных противотуберкулезных и других учреждений, где есть высокий риск контакта с возбудителем или больным туберкулезом, пациенты с сопутствующими заболеваниями и др.;
- Наличие известных контактов с больным туберкулезом (бактериовыделителем);
- Наличие положительной реакции пробы Манту для исключения поствакцинальной реакции;
- Наличие противопоказаний к проведению кожных туберкулиновых проб (пробы Манту и Диаскинтеста®);
- Дифференциальная диагностика инфекций, вызванных МБТ;
- Обследование иммигрантов.
Пример результата исследования и интерпретация:
Примечание: Данный тест не дифференцирует латентный и активный туберкулез. В случае положительного результата необходима консультация врача-фтизиатра для определения дальнейшей тактики. Величина уровня гамма-интерферона не коррелирует со стадией и степенью инфицирования, уровнем иммунной реактивности или вероятностью перехода латентного туберкулеза в активный.
| Параметр | Результат | Критерии оценки результатов |
|---|---|---|
| Содержание гамма-интерферона в контрольной пробирке (NIL) | 0,05 | До 8,00 |
| Содержание гамма-интерферона в пробирке с ТВ-антигеном (ТВ Ag) | 0,09 | Менее 0,35 (или свыше 0,35, но до 25% контрольного значения NIL) |
| Содержание гамма-интерферона в пробирке с митогеном (Mitogen) | 9,56 | От 0,50 |
| Квантифероновый тест (диагностика туберкулеза) | Отрицательный | Отрицательный |
Интерпретация результатов QFT:
Отрицательный — вероятность инфекции М.tuberculosis complex отсутствует.
Положительный — инфекция M.tuberculosis complex вероятна.
Сомнительный — в силу чувствительности к TB-антигену.
Интерпретация результата исследования
| Положительный результат | Сомнительный результат | Отрицательный результат |
|---|---|---|
|
В этом случае врач принимает решение либо в пользу забора нового образца крови, либо в пользу проведения других медицинских обследований. |
Ложноотрицательные результаты могут быть:
|
Внимание! Интерпретация результатов должна проводиться с учетом клинико-эпидемиологического анамнеза и результатов других диагностических исследований.
Метод исследования: твердофазный иммуноферментный анализ.
Материал для исследования: кровь (специальный комплект из трех пробирок, который используется только для проведения исследования «Квантифероновый тест»).
Срок выполнения исследования: 3-10 рабочих дней.
Подготовка к проведению исследования: забор крови производят утром строго натощак (или не ранее, чем через 8 часов после последнего приема пищи).
В лабораторию CMD доставляются все 3 пробирки, помещенные в пакет «Комплект пробирок для Квантиферонового теста»!
Источник
Метод определения
Твердофазный иммуноферментный анализ.
Исследуемый материал
Цельная кровь (литий-гепарин)
Туберкулез – инфекционное хроническое заболевание, вызываемое микобактериями туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis complex). Активный туберкулез развивается приблизительно у 10% людей, инфицированных M. tuberculosis. В остальных случаях благодаря иммунной системе происходит элиминация возбудителя из организма или развивается латентная туберкулезная инфекция (ЛТИ). При ЛТИ микобактерии персистируют в организме в неактивном состоянии, обуславливая стойкий иммунный ответ на антигены возбудителя при отсутствии клинических проявлений активной формы заболевания.
Диагностика активного туберкулеза основывается на изучении клинических и радиографических данных в совокупности с результатами прямого микроскопического исследования, выделения культуры Mycobacterium tuberculosis, ПЦР-исследований.
Диагностика латентной инфекции затруднена отсутствием клинических и рентгенологических признаков заболевания, а также отсутствием возбудителя в пробах доступного биоматериала. Однако ее выявление важно для определения лиц, нуждающихся в контроле и превентивной терапии.
В настоящее время существуют два метода выявления вероятной латентной инфекции:
- in vivo: внутрикожные тесты с очищенным или рекомбинантным туберкулезным аллергеном (проба Манту, Диаскинтест);
- in vitro: исследование проб крови для оценки ответа иммунных клеток обследуемого на антигены микобактерий туберкулеза по высвобождению гамма-интерферона (IGRA-тесты).
Оба подхода основаны на оценке характера иммунной реакции человека на антигены возбудителя, т. е. не являются методами прямого выявления инфекционного агента.
В соответствии с клиническими рекомендациями МЗ РФ и Российского общества фтизиатров по выявлению и диагностике туберкулеза у детей, поступающих и обучающихся в образовательных организациях (2017), квантифероновый тест является альтернативным внутрикожным пробам методом обследования на туберкулезную инфекцию.
Квантифероновый тест (QuantiFERON-TB Gold) основан на измерении продукции INF-γ (гамма-интерферона). Выработка гамма-интерферона осуществляется сенсибилизированными Т-клетками крови пациента, стимулированными in vitro специфическими для микобактерий туберкулеза антигенами: кодируемые регионом RD 1 (region of difference) – ESAT-6 (early secreted antigenic target – ранний секретируемый антиген), CFP-10 (culture filtrate protein – белок клеточного фильтрата) и пептид, кодируемый RD 11 – TB7.7 (p4). Указанные антигены отсутствуют в вакцинных штаммах M. bovis BCG и у большинства нетуберкулезных микобактерий (за исключением M. kansasii, M. szulagai, M. marinum), чем достигается высокая специфичность показаний теста.
Преимущества исследования:
- высокая специфичность и чувствительность;
- отсутствие противопоказаний;
- отсутствие побочных реакций;
- результат не зависит от предшествующей вакцинации BCG.
Ограничения исследования:
- квантифероновый тест не позволяет дифференцировать латентный и активный туберкулез;
- величина уровня гамма-интерферона не коррелирует со стадией и степенью инфицирования, уровнем иммунной реактивности или вероятностью перехода латентного туберкулеза в активный;
- не используется для мониторинга ответа на лечение ЛТИ.
Отрицательные результаты тестов in vitro при отсутствии клинических симптомов заболевания (респираторного и интоксикационного характера, других локальных патологических проявлений) позволяют врачу-фтизиатру выдать справку об отсутствии у ребенка в настоящий момент активного туберкулеза. Специфичность и чувствительность данного метода не достигает 100% и может варьировать у пожилых людей, детей младше 5 лет и лиц с иммунодефицитом.
Литература
- Васильева Е.В., Лапин С.В., Блинова Т.В., Никитина И.Ю., Лядова И.В., Вербов В.Н., Тотолян А.А. Сравнительная ценность квантиферонового теста, неоптерина и специфических противотуберкулезных антител для клинико-лабораторной диагностики туберкулеза легких. Клиническая лабораторная диагностика. 2013;5:21-26.
- Клинические рекомендации «Выявление и диагностика туберкулеза у детей, поступающих и обучающихся в образовательных организациях». 2017:33.
- Корнева Н.В., Старшинова А.А., Овчинникова Ю.Э., Потапенко Е.И., Якунова О.А., Довгалюк И.Ф. Иммунологические показатели при различной активности туберкулезной инфекции у детей. Медицинская иммунология. 2014;16(5):425-430.
- Кривохиж В.Н., Королюк А.М. Латентная туберкулезная инфекция у детей: диагностика, лечение, наблюдение. 2016:562-564.
- Мордовская Л.И., Аксенова В.А., Владимирский М.А., Аксенова Е.И., Ефремов Е.Е., Власик Т.Н. Количественный анализ индукции интерферона γ клетками цельной крови IN VITRO в присутствии антигенов микобактерий туберкулеза. Педиатрия. 2009;88(5):43-46.
- Новые технологии в диагностике туберкулеза: Квантифероновый тест (QuantiFERON®-TB Gold IT). Главный врач, фтизиатрия. 2013;1(32):55-58.
- Толемисова А.М., Сидоренко О.А., Балмахаева Р.М., Бекбенбетова З.С., Смагулова Н.К. Квантифероновый тест в диагностике туберкулеза. Вестник КазНМУ. 2015;1:330-332.
- Материалы фирмы-производителя реагентов (QIAGEN).
Источник
Квантифероновый тест – современный лабораторный тест для выявления скрытой и активной туберкулезной инфекции. В настоящий момент в различных странах разработано и выпущено большое число национальных рекомендаций по применению данного теста.
Туберкулёз — широко распространённое во всем мире инфекционное заболевание, вызываемое различными видами микобактерий (Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium bovis, Mycobacterium africanum и др.). При туберкулезе чаще поражаются органы дыхания, но могут быть вовлечены в процесс и другие органы и системы организма — суставы, кости, мочеполовая система, кожа и т.д.
Микобактерии туберкулёза (МБТ) распространяются преимущественно воздушно-капельным путем (при кашле, чихании, отхаркивании). Источник инфекции – человек с легочной формой туберкулеза. Возможно несколько вариантов исхода проникновения возбудителя в организм:
- полная элиминация МБТ;
- развитие заболевания;
- латентная туберкулезная инфекция (ЛТИ);
- реактивация туберкулеза.
Примерно 1/3 часть населения мира инфицирована МБТ, и только у 5-10% инфицированных лиц развивается заболевание. Состояние, когда МБТ присутствуют в организме человека, но при этом отсутствуют клинические и рентгенологические признаки туберкулеза, носит название ЛАТЕНТНАЯ туберкулезная инфекция. При наличии неблагоприятных факторов ЛТИ может перейти в активную форму туберкулеза. К группе высокого риска инфицирования МБТ относятся лица, имевшие контакт с больным ТБ, или имеющие высокую вероятность контакта (работники противотуберкулезных диспансеров, приютов, исправительных учреждений и др.), маленькие дети, лица с сопутствующими заболеваниями, приводящими к снижению иммунитета (ВИЧ, сахарный диабет и др.) или находящиеся на иммуносупрессивной терапии.
Симптомы активной формы туберкулеза (кашель, лихорадка, ночной пот, потеря веса и др.) могут быть умеренными в течение многих месяцев. Это может приводить к запоздалому обращению за медицинской помощью и распространению инфекции. За год человек, больной туберкулезом, может инфицировать до 10–15 других людей, с которыми он имеет тесные контакты. Поэтому выявление лиц с ЛТИ и активной формой туберкулёза и их своевременное лечение имеют большое значение в борьбе с этим заболеванием.
До недавнего времени единственными доступными тестами выявления латентной туберкулезной инфекции были кожные туберкулиновые тесты — проба Манту и Диаскинтест®. Однако оба теста, учитывая специфику постановки реакции – внутрикожно — имеют ряд противопоказаний и ограничений к проведению.
Противопоказания к проведению туберкулинового кожного теста (проба Манту и Диаскинтест®):
- Индивидуальная непереносимость туберкулина;
- Острые и хронические (в период обострения) инфекционные заболевания, за исключением случаев, подозрительных на туберкулез;
- Соматические заболевания в период обострения;
- Заболевания кожи;
- Аллергические состояния (период обострения);
- Эпилепсия;
- Период карантина в детских коллективах.
В настоящее время помимо туберкулиновых кожных тестов существует другой подход для диагностики всех видов туберкулеза: гамма-интерфероновые тесты IGRA (КВАНТИФЕРОНОВЫЙ ТЕСТ и T-SPOT.TB), которые имеют ряд преимуществ перед кожными тестами.
КВАНТИФЕРОНОВЫЙ ТЕСТ на туберкулёз – это тест, позволяющий определить уровень специфического гамма-интерферона в крови пациента с целью подтверждения или опровержения наличия туберкулезной инфекции.
Преимущества квантиферонового теста перед кожными тестами:
- Не имеет противопоказаний и ограничений по времени проведения;
- Не дает ложноположительных результатов в случае вакцинации БЦЖ;
- Безопасность процедуры и отсутствие побочных реакций;
- Интерпретация результатов этого теста менее субъективна, чем интерпретация результатов кожной туберкулиновой пробы;
- Высокая специфичность и высокая чувствительность.
Согласно клиническим рекомендациям, утвержденным Российским обществом фтизиатров и Министерством здравоохранения РФ, «Выявление и диагностика туберкулеза у детей, поступающих и обучающихся в образовательных организациях» (Москва, 2017 г.; стр. 14) КВАНТИФЕРОНОВЫЙ ТЕСТ может использоваться как замена пробы Манту.
Показания к назначению исследования:
- дети, старше 5 лет, привитые БЦЖ, у которых выявлена ложноположительная реакция Манту;
- при противопоказаниях проведения кожных проб (эпилепсия, вакцинация, острый инфекционный процесс или обострение хронического, карантин и т.д.);
- при подозрении на внелегочные формы туберкулеза
- проведение скрининга среди пациентов, относящихся к группам риска по развитию ТБ:
- медицинские работники;
- люди, которые много путешествуют;
- военные;
- беременные;
- иммигранты;
- заключенные или прибывшие из мест заключения;
- больные наркоманиями;
- лица, контактирующие с туберкулезными больными.
Пример результата исследования и интерпретация:
| Параметр | Результат | Критерии оценки результатов | Ед. изм. |
|---|---|---|---|
| Квантифероновый тест (диагностика туберкулеза) | Отрицательный | Отрицательный | |
| Содержание гамма-интерферона в контрольной пробе (Nil), | 0,05 | < 8,00 | МЕ/мл |
| Содержание гамма-интерферона в пробе с ТВ-антигеном (ТВ Ag), | 0,09 | < 0,35 (или ≥0,35, но < 25% контрольного значения Nil) | МЕ/мл |
| Содержание гамма-интерферона в пробе с митогеном (Mitogen), МЕ/мл | 9,56 | ≥0,50 | МЕ/мл |
Примечание к Квантифероному тесту: данный тест не дифференцирует латентный и активный туберкулез. В случае положительного результата необходима консультация врача-фтизиатра для определения дальнейшей тактики. Величина уровня гамма-интерферона не коррелирует со стадией и степенью инфицирования, уровнем иммунной реактивности или вероятностью перехода латентного туберкулеза в активный.
Интерпретация результатов:
— отрицательный — вероятность инфекции М.tuberculosis complex отсутствует;
— положительный — инфекция M.tuberculosis complex вероятна;
— сомнительный — в силу чувствительности к TB-антигену.
Интерпретация результата исследования
| Положительный результат | Сомнительный результат | Отрицательный результат |
|---|---|---|
|
В этом случае врач принимает решение либо в пользу забора нового образца крови, либо в пользу проведения других медицинских обследований. |
Ложноотрицательные результаты могут быть:
|
Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом ФЗ № 323 «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации», должны производиться врачом соответствующей специализации.
Источник