Анализ крови на эритроцитарные антитела

Содержание

Показания
Подготовка к анализу и забор материала
Нормальные значения
Повышение значений
Снижение значений
Лечение отклонений от нормы

Анализ на аллоиммунные антиэритроцитарные антитела – лабораторное исследование, направленное на выявление в резус-отрицательной крови антител к резус-фактору – специфическому белку, который находится на поверхности эритроцитов резус-положительной крови. Показатель имеет самостоятельное диагностическое значение, исследование проводится после получения результатов анализов на определение группы крови и резус-фактора. Данные используются для выявления резус-конфликта матери и плода, определения необходимости введения инъекций иммуноглобулина беременной с резус-отрицательной кровью. Материалом для исследования является венозная кровь. Титр антирезусных антител выявляется при помощи реакции агглютинации. В норме, при низкой вероятности резус-конфликта, результат отрицательный. Готовность результатов анализа составляет 1 рабочий день.

Антиэритроцитарные антитела – иммуноглобулины, которые вырабатываются к различным группам антигенов эритроцитов. Эти антигены относятся к структурным образованиям клеток крови, расположены на внешней поверхности мембран. По своей химической природе они разнообразны – часть представлена белками, другая гликопротеинами, третья – гликолипидами. Их наличие или отсутствие передается по наследству и в течение жизни не меняется. На состояние здоровья набор антигенов никак не влияет. Если в кровь к человеку, у которого отсутствуют антигены эритроцитов определенного типа, перелить кровь с такими антигенами, то организм выработает антитела – разовьется иммунный ответ. Такие ситуации возникают после гемотрансфузий, выполненных без предварительного анализа на антитела к резус-фактору, а также при попадании антигенов крови плода в кровоток беременной.

Своевременное выявление антиэритроцитарных антител в крови необходимо для предупреждения развития резус-конфликта, последствиями которого являются гемолитические реакции, то есть разрушение эритроцитов донора. При беременности возможно ее спонтанное прерывание на различных сроках. Наибольшее распространение исследования антител к резус-фактору приобрело в акушерско-гинекологической практике как инструмент для мониторинга беременностей у женщин с резус-отрицательной кровью. Вовремя проведенная вакцинация анти-D гамма-глобулином позволяет избежать развития резус-конфликта и связанных с ним осложнений. Кроме этого, исследование антител к резус-фактору востребовано в хирургической и реаниматологической практике как часть подготовки пациентов к гемотрансфузиям. Для проведения анализа на антиэритроцитарные антитела забор крови выполняется из вены. Распространенным методом исследования является реакция агглютинации на буферном геле.

Показания

Скрининговый анализ на антиэритроцитарные антитела в крови применяется для профилактики внесосудистого гемолиза после гемотрансфузий, для предупреждения развития фетального эритробластоза плода. По результатам теста выявляются аллосенсибилизированные пациенты, назначается необходимое лечение. В рамках подготовки к беременности и ее мониторинга тест на антитела к резус-фактору выполняется с определенной периодичностью. Исследование показано матерям с резус-отрицательной кровью при условии, что существует вероятность передачи положительного резус-фактора от отца к ребенку. Особенно тщательный контроль антиэритроцитарных антител требуется женщинам, которые уже были иммунизированы ранее – имели беременности с резус-конфликтом, в том числе окончившиеся абортом или выкидышем, перенесли гемотрансфузии. Также риск развития резус-конфликта выше у пациенток с осложнениями беременности, приводящими к нарушению целостности или повышению проницаемости плаценты. Вероятность проникновения эритроцитов плода увеличивается при отслойке плаценты, травмах живота, инфекциях, инвазивных вмешательствах на матке. На основании результатов анализа делается вывод о риске развития резус-конфликта и необходимости введения иммуноглобулиновых инъекций.

К другим показаниям для выполнения анализа на антитела к резус-фактору относятся привычное невынашивание беременности и гемолитическая болезнь новорожденных. Результаты исследования позволяют подтвердить или опровергнуть роль резус-конфликта в развитии патологии. В хирургии, реаниматологии и смежных областях анализ на антитела к резус-фактору показан при подготовке к гемотрансфузиям, а также через 15-30 суток после процедур. По данным исследования определяется сенсибилизация к антигенам и возможность переливания крови конкретного донора.

Анализ на антиэритроцитарные антитела не показан, если женщина с отрицательным резус-фактором крови вынашивает ребенка, отец которого также имеет резус-отрицательную кровь. В этих случаях у плода резус-фактор всегда отрицательный, иммунологический конфликт не развивается. Результаты исследования могут оказаться положительными при отсутствии резус-конфликта, если инъекция антирезусного иммуноглобулина была введена женщине менее чем 6 месяцев назад. Еще одним ограничением анализа является его чувствительность – в небольших концентрациях антирезусные антитела не поддаются определению. Несмотря на это, прогностическая ценность исследования очень высока – его результаты позволяют выявить риск возникновения резус-конфликта и предупредить его развитие.

Подготовка к анализу и забор материала

При выполнении анализа на антиэритроцитарные антитела биоматериалом является венозная кровь. Процедура забора, как правило, выполняется с утра, но строгих требований ко времени ее проведения нет. Подготавливаться к сдаче крови не нужно. Рекомендуется выдержать перерыв после еды не менее 4 часов, а последние 30 минут перед процедурой провести в спокойной обстановке, без эмоциональных и физических нагрузок. Кровь берут из локтевой вены методом пункции, помещают в герметичную пробирку и в течение нескольких часов направляют в лабораторию.

Антитела к резус-фактору определяются в крови методом агглютинации с использованием геля фильтрации. В ходе процедуры сыворотка с эритроцитами вводится в верхнюю часть микропробирок с гелем. Затем их инкубируют и центрифугируют. В результате агглютинированные эритроциты (те, что соединены с антиэритроцитарными антителами) из-за увеличенного размера не проходят сквозь гель и остаются на его поверхности. Если антител нет, то эритроциты легко опускаются через гель на дно пробирки. Таким образом, по характеру распределения эритроцитов определяется наличие антител к резус-фактору. Сроки исполнения анализа составляют 1 рабочий день.

Нормальные значения

В норме результат анализа на антиэритроцитарные антитела отрицательный (-). Это значит, что в исследуемом образце крови антител нет, вероятность развития резус-конфликта низкая. На итоговый показатель не оказывают влияния физиологические факторы, такие как режим физической активности или особенности питания. К получению ложных результатов может привести неправильное хранение и транспортировка образца крови.

Повышение значений

При наличии в крови беременной антиэритроцитарных антител результат анализа положительный. В этом случае проводится их полуколичественное исследование. В зависимости от силы реакции агглютинации в геле результат может быть сильноположительным (++++), положительным (+++), слабоположительным (++), очень слабоположительным (+). Причина увеличения значений анализа на антиэритроцитарные антитела – сенсибилизация организма к резус-фактору. Она свидетельствует о повышенном риске прерывания беременности, о риске развития эритробластоза новорожденного и осложнений после гемотрансфузий.

Снижение значений

Отсутствие антител к резус-фактору в крови является нормой и указывает на отсутствие риска развития резус-конфликта. Если антитела были определены ранее, то причиной снижения значений анализа является введение анти-D гамма-глобулина.

Лечение отклонений от нормы

Анализ на антиэритроцитарные антитела имеет диагностическое и прогностическое значение в акушерско-гинекологической практике. Его результаты дают возможность выявить риск развития иммунологического конфликта у беременной женщины с резус-отрицательной кровью и своевременно ввести иммуноглобулин. Такая мера позволяет избежать дальнейших осложнений: гемолитической болезни плода или новорожденного, выкидыша, преждевременных родов. С результатами анализа необходимо обратиться к акушеру-гинекологу, ведущему беременность.

Источник

Анализ крови на эритроцитарные антитела

Период беременности для каждой будущей мамы прекрасен и в то же время волнителен. Нося под сердцем свое дорогое дитя, каждая женщина переживает и желает легкой беременности и родов. Но резус-отрицательные мамочки могут столкнуться с некоторыми вопросами, касающихся их резус-отрицательной крови и здоровья своего малыша.

Антиэритроцитарные антитела — что это?

Анализ крови на эритроцитарные антитела

Резус-положительный и резус-отрицательный эритроциты

Антитела представляют собой белковые соединения плазмы крови, которые вырабатываются в ответ на наличие какого-то определенного антигена. Взаимодействуя, антитело и антиген образуют вместе иммунный комплекс, который запускает в иммунной системе организма определенные реакции. Если мы говорим об антиэритроцитарных антителах, то имеем в виду белковые соединения, которые вырабатываются в ответ на антигены на поверхности эритроцитов. Чаще всего в роли эритроцитарных антигенов выступает резус-фактор, который по своей сути является белком на мембране эритроцита. Отсюда можно сделать простой и понятный вывод, кто же такие резус-отрицательные и резус-положительные пациенты. Резус-положительные пациенты имеют на поверхности эритроцитов белок, у резус-отрицательных такой белок отсутствует.

Когда образуются антитела?

Анализ крови на эритроцитарные антитела

Гемотрансфузия может послужить причиной выработки антител

Если обратиться к иммунологии, то становится известным, что антитела образуются после того, как лимфоциты встретили попавшие в организм чужеродные антигены. Образование таких чужеродных антигенов возможно в следующих случаях:

Переливание крови или гемотрансфузия. Попадая в организм пациента, нуждающегося в переливании крови (реципиента), эритроциты донора распознаются иммунной системой как чужеродные антигены (агенты). В ответ на них начинаются вырабатываться антиэритроцитарные антитела.
Беременность. Во время беременности резус-положительные эритроциты плода могут проникать в кровоток резус-отрицательной матери через плаценту. Ее организм распознает этот белок на поверхности эритроцитов ребенка как чужеродный антиген и нарабатывает в ответ антирезусные антитела.

Как при гемотрансфузии, так и при первой беременности количество синтезируемых антител невелико, поэтому они не могут оказать повреждающего действия на организм. Однако иммунная система обладает своего рода «памятью» благодаря В-лимфоцитам. Поэтому вторая беременность или очередная гемотрансфузия не проходят бесследно. В ответ на указанные обстоятельства начинает синтезироваться огромное количество антител, которое способно привести к опасным изменениям в организме человека. В случае с беременностью это может быть ее невынашивание.

Виды антител

Механизм образования иммунных антиэритроцитарных антител

Различают два вида антиэритроцитарных антител — естественные и иммунные.

Естественные (регулярные) антиэритроцитарные антитела образуются всегда и являются врожденными и образуются в ответ на антиэритроцитарные антигены из системы АВО.
Иммунные (нерегулярные) антитела в отличие от первых нарабатываются тогда, когда в организм поступает чужеродный агент — указанные выше случаи с беременностью и переливанием крови. Другое название таких белковых соединений — аллоиммунные или изоиммунные. Эти антитела вступают в реакцию не со своими, а с чужими антигенами, поступающими в организм человека. Кроме указанных выше есть понятие и фиксированных антител или аутоантител. Из последнего слова понятно, что данные антитела вырабатываются к антигенам собственных эритроцитов под влиянием определенных факторов. Подобная ситуация может наблюдаться при гемолитической болезни новорожденных, аутоиммуной лекарственной анемии и др.

Всего на поверхности эритроцитов содержится около 100 антигенов, которые представляют 19 отдельных систем. Резус-фактор является самым иммуногенным. То есть в ответ на него реакция иммунной системы наиболее выражена.

Тест на определение антител

Анализ крови на эритроцитарные антитела

Суть реакции агглютинации

В основе теста на определение антител лежит реакция агглютинации. Она характеризуется образованием хлопьев или осадка, который представляет собой прореагировавшие антитела с антигенами. Для исследования производится забор венозной крови. Тест на определение антиэритроцитарных антител показан в следующих случаях:

определение совместимости донора и реципиента перед проведением гемотрансфузии;
выявление возможного резус-конфликта у матери и плода.

Подготовка теста не является особенной и состоит из следующих нехитрых рекомендаций, выполнить которые несложно. Вот на что необходимо обратить внимание:

Сдавать кровь необходимо утром и натощак. Именно таким образом тест можно провести на фоне ограниченного приема жидкости. Последний прием пищи должен быть не позднее восьми часов до начала теста.
Не рекомендуется накануне есть жареные или острые блюда, употреблять спиртные напитки.
Накануне рекомендовано исключить любые физические нагрузки. Хотя бы полчаса перед проведением теста пациенты должны провести в покое. Это означает, что необходимо прийти немного раньше назначенного времени и посидеть.
Исключить курение в последние 30 минут перед сдачей теста.

Проведение и интерпретация теста

Анализ крови на эритроцитарные антитела

Расшифровка теста агглютинации

Первый этап: в одну пробирку вносятся донорские эритроциты и сыворотка реципиента (пациента). Если антитела присутствуют, то они фиксируются на поверхности эритроцитов.
Второй этап: Прореагировавшие или непрореагировавшие эритроциты переносятся на стекло. Сюда же добавляется стандартная антиглобулиновая сыворотка с антителами к человеческому иммуноглобулину. Если антитела зафиксировались на эритроцитах, наблюдается положительная реакция агглютинации — осадок или хлопья. В противном случае реакция расценивается как отрицательная.

В зависимости от силы реакции агглютинации выделяют следующие результаты:

сильноположительный или 4 плюса,
положительный или 3 плюса,
слабоположительный — 2 плюса,
очень слабоположительный — 1 плюс,
отрицательный — минус.

Есть ли в норме антиэритроцитаные антитела? Да, есть, но очень малых количествах, которые не поддаются определению с помощью обычных методов. Перед интерпретацией теста важно помнить, что положительным может оказаться тест, если инъекция антирезусного иимуноглобулина была сделана женщине в последние 6 месяцев. Кроме того, отрицательный результат у ребенка может наблюдаться и тогда, когда реакция положительная.

Источник

Метод определения
Метод агглютинации + гель-фильтрации (карточки).

Инкубация стандартных типированных эритроцитов с исследуемой сывороткой и фильтрация путём центрифугирования смеси через гель, импрегнированный полиспецифическим антиглобилиновым реагентом. Агглютинированные эритроциты выявляются на поверхности геля или в его толще.

В методе используются суспензии эритроцитов доноров группы 0(1), типированные по антигенам эритроцитов RH1(D), RH2(C), RH8(Cw), RH3(E), RH4(c), RH5(e), KEL1(K), KEL2(k), FY1(Fy a) FY2(Fy b), JK(Jk a), JK2(Jk b), LU1(Lu a), LU2(LU b), LE1(LE a), LE2(LE b), MNS1(M), MNS2(N), MNS3 (S), MNS4(s), P1 (P).

Исследуемый материал
Цельная кровь (с ЭДТА)

Антитела к клинически наиболее важным эритроцитарным антигенам, в первую очередь резус-фактору, свидетельствующие о сенсибилизации организма к этим антигенам. Резус-антитела относятся к так называемым аллоиммунным антителам.

Аллоиммунные антиэритроцитарные антитела (к резус-фактору или другим эритроцитарным антигенам) появляются в крови при особых условиях — после переливания иммунологически несовместимой донорской крови или при беременности, когда эритроциты плода, несущие иммунологически чужеродные для матери отцовские антигены, проникают через плаценту в кровь женщины. У неиммунных резус-отрицательных людей антител к резус-фактору нет.

В системе резус различают 5 основных антигенов, основным (наиболее иммуногенным) является антиген D (Rh), который обычно подразумевают под названием резус-фактор. Помимо антигенов системы резус есть ещё ряд клинически важных эритроцитарных антигенов, к которым может возникать сенсибилизация, вызывающая осложнения при переливании крови.

Метод скринингового исследования крови на присутствие аллоиммунных антиэритроцитарных антител, использующийся в Независимой лаборатории ИНВИТРО, позволяет, помимо антител к резус-фактору RH1(D), выявить в исследуемой сыворотке аллоиммунные антитела и к другим эритроцитарным антигенам. Ген, кодирующий резус-фактор D (Rh), является доминантным, аллельный ему ген d — рецессивным (резус-положительные люди могут иметь генотип DD или Dd, резус-отрицательные — только генотип dd).

Во время беременности резус-отрицательной женщины резус-положительным плодом возможно развитие иммунологического конфликта матери и плода по резус-фактору. Резус-конфликт может привести к выкидышу или развитию гемолитической болезни плода и новорожденных. Поэтому определение группы крови, резус-фактора, а также наличия аллоиммунных антиэритроцитарных антител должно проводиться при планировании или во время беременности для выявления вероятности иммунологического конфликта матери и ребёнка. Возникновение резус-конфликта и развитие гемолитической болезни новорожденных возможно в том случае, если беременная резус-отрицательна, а плод — резус-положителен. В случае, если у матери резус-антиген положительный, а у плода отрицательный, конфликт по резус-фактору не развивается. Частота развития резус-несовместимости составляет 1 случай на 200 — 250 родов.

Гемолитическая болезнь плода и новорождённых — гемолитическая желтуха новорожденных, обусловленная иммунологическим конфликтом между матерью и плодом из-за несовместимости по эритроцитарным антигенам. Болезнь обусловлена несовместимостью плода и матери по D-резус- или АВО- (групповым) антигенам, реже имеет место несовместимость по другим резус- (С, Е, с, d, e) или М-, М-, Kell-, Duffy-, Kidd-антигенам. Любой из указанных антигенов (чаще D-резус-антиген), проникая в кровь резус-отрицательной матери, вызывает образование в её организме специфических антител. Проникновению антигенов в материнский кровоток способствуют инфекционные факторы, повышающие проницаемость плаценты, мелкие травмы, кровоизлияния и другие повреждения плаценты. Последние через плаценту поступают в кровь плода, где разрушают соответствующие антигенсодержащие эритроциты.

Предрасполагают к развитию гемолитической болезни новорожденных нарушение проницаемости плаценты, повторные беременности и переливания крови женщине без учёта резус-фактора и др. При раннем проявлении заболевания иммунологический конфликт может быть причиной преждевременных родов или выкидышей. Во время первой беременности резус-положительным плодом у беременной с Rh «-» риск развития резус-конфликта составляет 10 — 15%. Происходит первая встреча организма матери с чужеродным антигеном, накопление антител происходит постепенно, начиная, приблизительно с 7 — 8 недели беременности. Риск несовместимости возрастает с каждой последующей беременностью резус-положительным плодом, независимо от того, чем она закончилась (искусственным абортом, выкидышем или родами, операцией при внематочной беременности), при кровотечениях во время первой беременности, при ручном отделении плаценты, а также если роды проводятся путём кесарева сечения или сопровождаются значительной кровопотерей при переливании резус-положительной крови (в том случае, если они проводились даже в детском возрасте).

Если последующая беременность развивается с резус-отрицательным плодом, несовместимость не развивается. Всех беременных женщин с Rh «-» ставят на специальный учёт в женской консультации и проводят динамический контроль над уровнем резус-антител. В первый раз анализ на антитела надо сдать с 8-й до 20-й недели беременности, затем периодически проверять титр антител: 1 раз в месяц до 30-й недели беременности, дважды в месяц до 36-й недели и 1 раз в неделю до 36-й недели. Прерывание беременности на сроке менее 6 — 7 недель может не привести к формированию у матери Rh-антител. В этом случае при последующей беременности, если у плода будет положительный резус-фактор, вероятность развития иммунологической несовместимости вновь будет равна 10 — 15 %. Проведение тестирования на аллоиммунные антиэритроцитарные антитела важно также при общей предоперационной подготовке, особенно для людей, которым ранее уже проводилось переливание крови.

Источник