Анализ крови на энцефалит в екатеринбурге
Метод определения
Иммуноанализ.
Исследуемый материал
Сыворотка крови
Маркёр острой инфекции вирусом клещевого энцефалита.
Вирус клещевого энцефалита – РНК-содержащий вирус семейства Flaviviridae. Он входит в группу арбовирусов, то есть вирусов, передающихся насекомыми. Переносчики заболевания и резервуар вируса клещевого энцефалита в природных условиях — иксодовые клещи. Дополнительный резервуар — связанные с клещами птицы, грызуны, хищники. Основной путь инфицирования человека — укус клеща. Возможна также передача инфекции при употреблении сырого молока от инфицированных этим вирусом коз и коров.
Вирус является возбудителем клещевого энцефалита – острого заболевания, поражающего центральную нервную систему. Заболевание встречается в таёжной и лесостепной местности, характерна выраженная весенне-летняя сезонность. Попадая в кровь, способен проникать в центральную нервную систему, размножаться и повреждать нервные клетки, вызывая парезы и параличи.
Инкубационный период длится от 8 до 23 дней (чаще 10 — 12 дней). В симптоматике выделяют 3 основных синдрома: общий инфекционный, менингеальный и очаговых поражений нервной системы. Заболевание начинается остро. Характерны скоропреходящая слабость в конечностях, мышцах шеи, онемение кожи лица и шеи. Наблюдается общее недомогание, головная боль, тошнота, разбитость, нарушения сна. У детей может возникнуть эпилептический припадок. Температура быстро (за 1 — 2 дня) достигает 39 — 40°С. Лихорадка продолжается от 2 до 10 дней. Для острого периода характерны гиперемия кожи лица, шеи и груди, слизистой оболочки ротоглотки, инъекция склер и конъюнктив. Беспокоят боли во всем теле и конечностях. Мучительны мышечные боли. Возможны нарушения сознания (от лёгкой оглушённости до комы). Наиболее типичны вялые параличи и парезы шейно-плечевой мускулатуры (симптом «свисания головы»), поражения черепных нервов и менингеальные признаки (резкая головная боль, ригидность мышц).
Особый клинический вариант представляет вирусный клещевой энцефалит с двухволновым течением, при котором через 1 — 2 недели после прекращения первой волны лихорадки следует вторая волна заболевания, которая протекает тяжелее и длится дольше, чем первая. Болезнь может протекать только с общетоксическими проявлениями или как менингоэнцефалит или с лёгкими общими инфекционными симптомами без значительных очаговых поражений. При тяжёлой энцефалитной форме с очаговыми симптомами поражения ЦНС период выздоровления длительный, до 2 лет. Развившиеся атрофические параличи мышц восстанавливаются частично. Иногда заболевание протекает хронически.
Вирусный клещевой энцефалит нередко протекает и в лёгких и стёртых формах с коротким лихорадочным периодом, отсутствием или почти незаметными оболочечными и очаговыми симптомами. Соотношение количества случаев, протекающих без поражения ЦНС к протекающим с поражением ЦНС, оценивается примерно как 3:1, хотя могут быть региональные различия, связанные с вирулентностью различных штаммов вируса.
Лабораторная диагностика. В лабораторной диагностике вирусного клещевого энцефалита используют методы серологического тестирования с определением специфических IgM и IgG антител (в лаборатории ИНВИТРО тесты № 267, № 268). ПЦР-исследований для диагностики этой инфекции нецелесообразно, поскольку в IgM-позитивной фазе заболевания в большинстве случаев оно даёт отрицательный результат. Данные серологического исследования оценивают в комплексе с клиническими и эпидемиологическими критериями, характерными для этого заболевания.
Специфические антитела класса IgG к вирусу клещевого энцефалита обнаруживаются на 10 — 14 день и даже ранее. Высокого уровня они достигают к концу месяца и сохраняются на таком уровне в течение 2 — 6 месяцев после инфицирования. Через 2 — 3 года, даже у людей, перенёсших острую форму заболевания, антитела уже редко выявляются. Специфические IgG антитела выявляются также и после вакцинирования против клещевого энцефалита. Некоторый процент общей популяции здоровых людей может иметь циркулирующие IgG антитела к вирусу клещевого энцефалита вследствие не имевшего существенных клинических проявлений контакта с вирусом в прошлом. Число таких лиц больше в эндемичных областях. В комплексе с обнаружением IgM антител выявление факта сероконверсии IgG (появление в динамике заболевания специфических антител при их первоначальном отсутствии) говорит в пользу подтверждения клинического диагноза вирусного клещевого энцефалита.
Литература
- Казанцев А.П., Матковский В.С. Справочник по инфекционным болезням. М., Медицина, 1986. 320 c.
- Диагностика клещевого энцефалита. «Новости «Вектор-Бест» (1999), № 11, 4 — 6.
- А.Д. Аммосов. Клещевой энцефалит. Кольцово. 2002 г. www.vector-best.ru
- Günther G. and Lindquist L. Surveillance of tick-borne encephalitis in Europe and case definition. Euro Surveill 2005; 10 (1): 2 — 3.
Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи.
С общими рекомендациями для подготовки к исследованиям можно ознакомиться здесь >>.
- Серологическое подтверждение клинико-эпидемиологических подозрений на вирусный клещевой энцефалит.
Интерпретация результатов
Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.
Единицы измерения в лаборатории ИНВИТРО: тест качественный. Результаты выдаются в терминах «положительно», «отрицательно».
Референсные значения:
- отрицательно;
- сомнительно, рекомендуется повторить через 10-14 дней;
- положительно.
Источник
Метод определения
Метод основан на обратной транскрипции РНК ВКЭ с последующей амплификацией кДНК в ПЦР с детекцией продуктов в режиме «реального времени» и амплификацией искомых фрагментов ДНК B. Burgdorferi, ДНК Borrelia miyamotoi, ДНК Anaplasma phagocytophilum, ДНК Ehrlichia muris и/или Ehrlichia chaffeensis в ПЦР с детекцией продуктов в режиме «реального времени».
Исследуемый материал
Смотрите в описании
(Detection of pathogen RNA/DNA in ticks: Tick-borne encephalitis virus (TBEV), Borrelia burgdorferi s. l., Borrelia miyamotoi, Anaplasma phagocytophilum, Ehrlichia muris, Ehrlichia chaffeеnsis)
Предназначен для качественного дифференциального определения ДНК патогенных для человека видов боррелий комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato (27Д), РНК вируса клещевого энцефалита (35Д), ДНК Borrelia miyamotoi (36Д), ДНК Anaplasma phagocytophilum (34Д), ДНК Ehrlichia muris, Ehrlichia chaffeensis (39Д) в гомогенизате клеща.
Кровососущие иксодовые клещи — переносчики возбудителей многих заболеваний! Любое заболевание, возникшее в результате укуса клеща, следует рассматривать как потенциальную микст-инфекцию. Ранняя диагностика микст-инфекций — важно для выбора правильной стратегии лечения.
Anaplasma phagocytophilum (34Д)
Anaplasma phagocytophilum – грамотрицательная бактерия из рода Anaplasma, семейство Ehrlichiaceae, ряд риккетсий. Так же как большинство риккетсий, не способны существовать и размножаться самостоятельно. Им необходим организм животного-хозяина. В дикой природе таковым для них являются олени. Переносчиком этих бактерий служат иксодовые клещи, таким образом бактерии проникают в кровь человека через кожу со слюной инфицированного клеща. Через кровь бактерии распространяются по всему организму, проникают внутрь гранулоцитарных клеток (нейтрофилов), в которых размножаются, и вызывают гранулоцитарный анаплазмоз человека (ГАЧ).
Первые симптомы появляются через 7-10 дней после заражения. Внешние проявления заболевания неспецифичны: головная боль, озноб, повышенная температура, слабость, мышечная боль. Иногда бывает тошнота и диарея. Кожные высыпания для анаплазмоза нехарактерны и регистрируются в случаях коинфицирования Лайм-боррелиозом. В тяжёлых случаях может отмечаться менингит, менингоэнцефалит, помрачение сознания. Выздоровление обычно наступает даже без лечения. Тем не менее возможен даже летальный исход (в частности, из-за септического шока). Так как Anaplasma phagocytophilum склонен поражать нейтрофилы, в связи с этим угнетаются защитные механизмы организма, что способствует присоединению и развитию грибковых, бактериальных и вирусных инфекций.
Изменяется и клеточный состав крови: снижается количество лейкоцитов и тромбоцитов. В крови можно обнаружить гранулоциты, внутри которых есть специфическое образование – морула. Помимо этого, часто повышается уровень сывороточных трансаминаз.
Внешние проявления гранулоцитарного анаплазмоза не позволяют однозначно поставить диагноз. В частности, практически такие же симптомы характерны для моноцитарного эрлихиоза. Поэтому для диагностики используют лабораторные тесты (в частности, ПЦР и определение антител).
Ранняя антибиотикотерапия позволяет быстро остановить развитие заболевания и предотвратить его осложнения, поэтому так важна ранняя диагностика заболевания.
В остром периоде инфекции отмечается лейкопения, палочкоядерный сдвиг лейкоцитарной формулы влево, лимфопения, тромбоцитопения, анемия, увеличение СОЭ. На второй неделе заболевания возможен острый безжелтушный гепатит с повышением печеночных трансаминаз и нефропатия с изменениями в клиническом анализе мочи (гипоизостенурия, протеинурия, эритроцитурией), повышением уровня креатинина и мочевины в крови.
Ehrlichia chaffeensis, E. muris, (39Д)
Возбудители относятся к семейству Rickettsiaceae. Эрлихии являются внутриклеточными паразитами, не растут на искусственных питательных средах, грамотрицательные. Цикл развития эрлихий (в моноцитах) напоминает цикл развития хламидий. После проникновения в моноцит (путем фагоцитоза) начинается деление, образуется вначале инициальное тельце, которое затем превращается в морулу (скопление элементарных телец внутри клетки). После разрушения клетки микроорганизмы выходят из клетки и могут инфицировать другие, еще не пораженные.
Эрлихиоз — острое инфекционное заболевание, характеризующееся лихорадкой, общей интоксикацией, головной болью, миалгией и артралгией и появлением сыпи у части больных. Относится к зоонозам. Воротами инфекции служит кожа в месте укуса клеща, где может быть первичный аффект. По лимфатическим путям эрлихии проникают в кровь; размножение происходит внутриклеточно в эндотелии сосудов, возможно в моноцитах, поражаются различные органы (кожа, печень, центральная нервная система, костный мозг), где развиваются инфекционные гранулемы. После перенесенного заболевания появляются и длительно сохраняются специфические антитела. Иммунитет стойкий. Не исключается возможность длительного персистирования эрлихии в организме человека и хроническое течение заболевания (у животных такие формы наблюдаются).
Заболевание начинается остро. У больных появляется сильная головная боль, боли в мышцах, общая слабость, у части больных тошнота и рвота, часто беспокоят боли в суставах. С ознобом повышается температура тела (до 38-40°С). При осмотре лицо гиперемировано, сосуды склер инъецированы, у части больных можно обнаружить первичный аффект (вначале в виде везикулы, затем образуется небольшая язвочка, покрытая темной коркой). Сыпь отмечается лишь у 20% больных, она носит макулопапулезный характер, отдельные элементы сыпи могут сливаться в эритематозные поля. Печень и селезенка увеличены, у отдельных больных может быть субиктеричность склер. При исследовании крови отмечается лейкопения (у 64%), анемия (у 57%), почти у всех больных (92%) выявляется значительная тромбоцитопения, повышается активность АлАТ, АсАТ, щелочной фосфатазы, лактатдегидрогеназы.
Материал для исследования.
Материалом для исследования служит клещ.
При обнаружении клеща на теле необходимо его как можно быстрее удалить. Для этого перехватить тельце насекомого поближе к хоботку и осторожно повернуть его. Не стоит давить на клеща, так как возможно инфицирование при попадании фекалий клеща на кожу, с последующим их втиранием при расчесах. Снятого клеща необходимо поместить в плотно закрывающуюся емкость с влажным ватно-марлевым тампоном.
В работу идут и живые и мертвые клещи.
Для предотвращения деградации нуклеиновых кислот, выделяемых из клеща, следует до доставки в лабораторию хранить их в холодном месте при температуре плюс 4 – 8ºС (холодильник, термос со льдом и т. п.).
Прием материала от пациента – контейнер с клещом (банка, пробирка и прочее).
Аналитические характеристики:
- аналитическая чувствительность 100 ГЭ/пробу
- специфичность – 100%
Источник
Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме реального времени. Метод основан на амплификации искомых фрагментов ДНК Anaplasma phagocytophilum, ДНК Ehrlichia muris и/или Ehrlichia chaffeensis с детекцией в режиме реального времени.
Исследуемый материал
Клещ
Тест предназначен для качественного дифференциального определения ДНК патогенных для человека видов Anaplasma phagocytophilum, Ehrlichia muris и Ehrlichia chaffeensis в гомогенизате клеща.
Кровососущие иксодовые клещи являются переносчиками возбудителей многих заболеваний. Любое заболевание, возникшее в результате укуса клеща, следует рассматривать как потенциальную микст-инфекцию. Ранняя диагностика микст-инфекций важна для выбора правильной стратегии лечения.
Anaplasma phagocytophilum
Anaplasma phagocytophilum – грамотрицательная бактерия из рода Anaplasma, семейства Ehrlichiaceae, ряда риккетсий. Как большинство риккетсий, Anaplasma phagocytophilum способна существовать и размножаться только в организме животного-хозяина. В дикой природе таковыми являются олени, а переносчиками бактерий служат иксодовые клещи. Попадая в кровь человека через кожу со слюной инфицированного клеща, бактерии распространяются по всему организму и проникают внутрь гранулоцитарных клеток (нейтрофилов), в которых размножаются, вызывая гранулоцитарный анаплазмоз человека (ГАЧ).
Первые симптомы анаплазмоза появляются через 7-10 дней после заражения. Внешние проявления заболевания неспецифичны: головная боль, озноб, повышенная температура, слабость, мышечная боль. Иногда отмечаются тошнота и диарея. Кожные высыпания для анаплазмоза нехарактерны и регистрируются при коинфицировании лайм-боррелиозом. В случаях тяжелого течения болезни могут наблюдаться менингит, менингоэнцефалит, помрачение сознания. Anaplasma phagocytophilum поражает нейтрофилы, в связи с этим угнетаются защитные механизмы организма, что способствует присоединению и развитию грибковых, бактериальных и вирусных инфекций. Отмечается изменение клеточного состава крови: снижается количество лейкоцитов и тромбоцитов. В крови можно обнаружить гранулоциты, внутри которых имеются специфические образования – морулы.
В остром периоде инфекции отмечаются лейкопения, сдвиг лейкоцитарной формулы влево, лимфопения, тромбоцитопения, анемия, увеличение СОЭ. На второй неделе заболевания возможны острый безжелтушный гепатит с повышением печеночных трансаминаз, нефропатия с изменениями в клиническом анализе мочи (гипоизостенурией, протеинурией, эритроцитурией), повышение уровня креатинина и мочевины в крови.
Выздоровление обычно наступает без лечения. Однако возможен летальный исход (в частности, из-за септического шока).
Внешние проявления гранулоцитарного анаплазмоза не позволяют однозначно поставить диагноз. Аналогичные симптомы характерны для моноцитарного эрлихиоза. Поэтому для диагностики ГАЧ используют лабораторные тесты (в частности, ПЦР и определение антител в сыворотке крови).
Своевременная интенсивная антибиотикотерапия позволяет быстро остановить развитие болезни и предотвратить осложнения. Именно поэтому так важна ранняя диагностика заболевания.
Ehrlichia chaffeensis, Ehrlichia muris
Возбудители Ehrlichia chaffeensis и Ehrlichia muris – грамотрицательные внутриклеточные паразиты, относящиеся к семейству Rickettsiaceae. Особенностью эрлихий является то, что они не растут на искусственных питательных средах. Цикл развития этих бактерий проходит в моноцитах и напоминает цикл развития хламидий. После проникновения в моноцит путем фагоцитоза начинается деление. Сначала образуется инициальное тельце, которое затем превращается в морулу (скопление элементарных телец внутри клетки). После разрушения моноцита микроорганизмы выходят в окружающее их внеклеточное пространство и могут инфицировать другие, еще не пораженные клетки.
Эрлихиоз – острое инфекционное заболевание, характеризующееся лихорадкой, общей интоксикацией, головной болью, миалгией и артралгией, появлением сыпи у части больных. Относится к зоонозам. Воротами инфекции служит кожа в месте укуса клеща, где возникает первичный аффект. По лимфатическим путям эрлихии проникают в кровь; размножение бактерий происходит внутриклеточно в эндотелии сосудов, возможно, в моноцитах. При этом поражаются различные органы и системы (кожа, печень, костный мозг, центральная нервная система), в которых развиваются инфекционные гранулемы.
Заболевание начинается остро. У больных появляется сильная головная боль, боли в мышцах, общая слабость, у части пациентов выражены тошнота и рвота, часто беспокоят боли в суставах. С ознобом повышается температура тела (до 38-40°С). При осмотре отмечается гиперемия лица, сосуды склер инъецированы, у части больных можно обнаружить первичный аффект (вначале в виде везикулы, затем образуется небольшая язвочка, покрытая темной коркой). Сыпь наблюдается лишь у 20% инфицированных, носит макулопапулезный характер, отдельные элементы сыпи могут сливаться в эритематозные поля. Печень и селезенка увеличены, у отдельных больных обнаруживается субиктеричность склер. При исследовании крови отмечаются лейкопения (у 64% заболевших), анемия (у 57% пациентов), почти у всех (92%) больных выявляется значительная тромбоцитопения, повышается активность АлАТ, АсАТ, щелочной фосфатазы, лактатдегидрогеназы.
После перенесенного заболевания в крови появляются и сохраняются в течение длительного времени специфические антитела, обеспечивающие стойкий иммунитет. Не исключается возможность длительного персистирования эрлихий в организме человека и хроническое течение заболевания (подобные процессы наблюдаются у животных).
Аналитические показатели: чувствительность – 100 ГЭ/пробу; специфичность определения – 100%.
Источник
