Анализ крови на ген муковисцидоза

[42-032]
Генетическая диагностика муковисцидоза. Анализ гена CFTR (25 мутаций)

15165 руб.

Комплексное генетическое исследование, которое позволяет выявить 25 наиболее часто встречающихся на территории России мутаций гена CFTR, приводящих к развитию тяжелого наследственного заболевания муковисцидоза.

Метод исследования

БиоЧип.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь, буккальный (щечный) эпителий.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Специальной подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Муковисцидоз (синоним – кистозный фиброз) – одно из наиболее распространенных аутосомно-рецессивных наследственных заболеваний человека. Он характеризуется нарушением функции эпителия дыхательных путей, кишечника, поджелудочной железы, потовых и половых желез.

Причиной развития муковисцидоза являются мутации в гене CFTR (cystic fibrosis transmembrane regulator), кодирующем АТФ-связывающий белок, который формирует канал для ионов хлора в клеточных стенках. Мутации приводят к нарушению транспорта электролитов и ионов хлора через мембраны эпителиальных клеток, что сопровождается усилением секреции густой слизи и закупоркой выводящих протоков различных желез.

Существует несколько форм муковисцидоза:

смешанная (поражаются одновременно органы дыхания и пищеварительный тракт);
бронхолегочная (поражаются преимущественно органы дыхания);
кишечная (поражается преимущественно желудочно-кишечный тракт);
мекониевая непроходимость кишечника;
атипичные формы, связанные с изолированными поражениями отдельных желез внешней секреции.

В настоящее время в РФ диагноз «муковисцидоз» ставится одному из 9 000 новорождённых (для сравнения: в Европе муковисцидоз диагностируется с частотой 1 : 2 000 — 3 000 новорождённых). Однако принятая в России форма массового скрининга новорождённых несовершенна и иногда не позволяет выявить заболевание на доклинической стадии.

В каждой клетке нашего организма имеется две копии гена CFTR. Одна копия достается от отца, а вторая от матери. Заболевание муковисцидоз аутосомно-рецессивное, т. е. развивается оно только при условии, что ребенок получает и от отца, и от матери мутантный ген CFTR. При этом родители, у которых вторые копии гена CFTR нормальные, не страдают муковисцидозом и порой даже не догадываются о его носительстве. По статистике, в европейской популяции носителем мутаций гена CFTR в среднем является каждый 25-й человек.

Насчитывается примерно одна тысяча различных мутаций в гене CFTR. Они встречаются с различной частотой в разных популяциях. Некоторые нарушения в гене могут не иметь никаких проявлений. Но большая часть мутаций вызывает патологический эффект, т. к. приводит к нарушению функционирования белка.

В данное комплексное исследование включен анализ гена CFTR на 25 мутаций, наиболее распространенных на территории РФ, Восточной Европы и Скандинавии и связанных с развитием тяжелых клинических форм муковисцидоза. Исследование позволяет выявлять до 95 % всех возможных больных, что существенно превышает разрешающие способности утвержденного в России скрининга.

Исследование поможет не только подтвердить или опровергнуть диагноз «муковисцидоз», но и выявить носительство мутации у здоровых людей. Особенно важно проводить генетическое тестирование в семьях, в которых есть больные муковисцидозом, поскольку у пары, где оба родителя являются носителями мутаций, вероятность рождения больного ребенка составляет 25 %.

До сих пор муковисцидоз считается неизлечимым заболеванием, но ранняя диагностика и адекватная терапия значительно улучшают прогноз заболевания и продляют пациенту жизнь.

Перечень исследуемых мутаций в гене CFTR:

Dele2-3	R347H	G542X	2184insA	3732delA
G85E	1078delT	G551D	2183AA-G	3821delT
621+1G>T	I507del	R553X	2789+5G>A	3849+10kbC>T
R334W	F508del	1717-1G>A	R1162X	W1282X
R347P	1677delTA	2143delT	S1196X	N1303K

Когда назначается исследование?

Генетическая диагностика в рамках неонатального скрининга
Клиническая молекулярно-генетическая диагностика для подтверждения диагноза, поставленного во взрослом возрасте
Пренатальная диагностика в случае семейного анамнеза заболевания
Определение риска рождения ребенка с муковисцидозом при планировании семьи
Диагностика мужского бесплодия

Что означают результаты?

В ходе анализа проводится исследование 25 значимых генетических маркеров гена CFTR, что позволяет обнаружить наиболее распространенные мутации, приводящие к развитию заболевания.

N (норма) / N (норма) – мутации не обнаружены.
N / M (мутации) – выявлена гетерозиготная мутация, скрытое носительство.
M (мутация) / M (мутация) – выявлена гомозиготная мутация, подтверждение диагноза «муковисцидоз».

По итогам комплексного исследования выдается заключение врача-генетика с интерпретацией результатов.

Литература

А. Е. Павлов, С. В. Апалько, Е. В. Воробьев. Молекулярно-генетическая диагностика муковисцидоза в формате микрочипа. Лаборатория №4, 2012.
American College of Medical Genetics Laboratory standards and guidelines for CFTR Mutation Testing (2011).

Источник

Муковисцидоз (МВ, синоним – кистофиброз поджелудочной железы)– наследственное заболевание, при котором поражаются экзокринные железы организма. К экзокринным железам относятся железы бронхолегочной системы, поджелудочная железа, печень, потовые, слюнные железы, железы кишечника, половые железы. Симптомы муковисцидоза связаны с тем, что секреты этих желез становятся вязкими, густыми, из-за чего их выделение затруднено. В легких из-за вязкого, часто гнойного секрета (мокроты), трудноотделяемого и скапливающегося в бронхах, довольно быстро (иногда уже в первые месяцы жизни), развиваются воспалительные процессы – повторные бронхиты и/или пневмонии с постепенным формированием хронического бронхолегочного процесса. У детей отмечается постоянный раздражающий (коклюшеподобный) кашель, одышка. Из-за недостатка ферментов поджелудочной железы у детей, больных муковисцидозом плохо переваривается пища, поэтому они отстают в весе, у них обильный, жирный, зловонный стул, плохо смывающийся с пеленок или с горшка. Из-за плохо отделяемой желчи у некоторых детей развивается цирроз печени, могут сформироваться камни в желчном пузыре. Мамы замечают соленый привкус кожи малыша, что связано с повышенной потерей ионов натрия и хлора с потом. Встречаются дети с преимущественным поражением либо легких (легочная форма), либо желудочно-кишечного тракта (кишечная форма), но чаще всего наблюдается смешанная форма муковисцидоза.
Если врач заподозрил муковисцидоз, он направит пациента на потовую пробу – диагностический критерий заболевания, основанный на определении концентрации ионов хлора. У ребенка, больного муковисцидозом, этот показатель обычно в несколько раз выше нормы. При сомнительном результате потовая проба проводится повторно. Кроме этого, возможно проведение генетического анализа. Это важно не только для подтверждения диагноза, но и для дородовой диагностики при последующих беременностях.
Данные о частоте муковисцидоза вариабельны, в среднем она составляет 1: 5000 новорожденных. муковисцидоз наследуется по аутосомно-рецессивному типу. Это означает, что муковисцидоз возникает у ребенка, который получил по гену с мутацией от обоих родителей – и от мамы, и от папы. Муковисцидоз одинаково часто встречается у мальчиков и у девочек.
Муковисцидоз связан с мутацией в гене CFTR (CYSTIC FIBROSIS TRANSMEMBRANE CONDUCTANCE REGULATOR, или МВТР —трансмембранный регулятор муковисцидоза). Этот ген локализован на длинном плече хромосомы 7(7q31.2). В настоящее время описано более полутора тысяч различных мутаций в этом гене, однако лишь несколько из них встречаются с частотой более 1%. Самой распространенной мутацией является Del F508 (делеция 3 нуклеотидов, кодирующих фенилаланин в положении 508). Доля ее в России составляет около 55% среди всех мутаций при муковисцидозе.

В Центре Молекулярной Генетики проводится определение 30 наиболее частых мутаций в гене CFTR: CFTRdele2,3 (del21kb), F508del, I507del, 1677delTA, 2143delT, 2184insA, 394delTT, 3821delT, G542X, W1282X, N1303K, L138ins, R334W, 3849+10kbC>T, 604insA, 3944 delGT, S1196X, 621+1g>t, E92K, 3272-26A>G, 4015delA, 4022insT, W1282R, 2789+5G>A, 3272-16 T>A, S466X, 1898+1 G>A, 3120+1G>A, R347P, S945L.

Также проводится поиск мутаций в кодирующей последовательности гена CFTR методом прямого автоматического секвенирования и поиск крупных делеций/дупликаций в гене методом MLPA.

Обширные делеции (инсерции) составляют 1-3% всех мутаций в гене CFTR. Крупные делеции (инсерции) локализуются в основном в области 2-3 и 20 экзонов, эти перестройки являются редкими, за исключением CFTRdele2,3 (del21kb) – второй по частоте мутации в славянской популяции (регистрация которой проводится среди 30 частых мутаций в гене CFTR). Поиск других крупных перестроек в гене CFTR (анализ числа копий гена CFTR) в Центре Молекулярной Генетики проводится методом количественной мультиплексной лигазной реакции с последующей амплификацией (MLPA-PCR-анализ).

Нами разработаны наборы для ДНК-диагностики муковисцидоза. Наборы предназначены для использования в диагностических лабораториях молекулярно-генетического профиля.

При проведении пренатальной (дородовой) ДНК-диагностики в отношении конкретного заболевания, имеет смысл на уже имеющемся плодном материале провести диагностику частых анеуплоидий (синдромы Дауна, Эдвардса, Шерешевского-Тернера и др), пункт 54.1. Актуальность данного исследования обусловлена высокой суммарной частотой анеуплоидий — около 1 на 300 новорожденных, и отсутствием необходимости повторного забора плодного материала.

Публикации по теме раздела

Муковисцидоз

Источник

Анализ на муковисцидоз Муковисцидоз – сугубо наследственное заболевание. Выявить его можно только путем исследования гена CFTR. Вы можете сделать анализ как во время беременности, так и задолго до её наступления. Патология развивается в том случае, если в генетической матрице соединились два дефектных CFTR-гена – мужской и женский.

В МЖЦ молекулярно-генетический анализ могут сдать беременные – в рамках пренатального скрининга, а также пациенты, достигшие возраста 18 лет.

Стоимость анализа гена CFTR*

Зачем назначают генетический анализ на муковисцидоз

В 25% случаев наличие дефектных CFTR-генов у обоих родителей приводит к рождению детей с муковисцидозом.

Дополнительные 4 причины, по которым стоит провериться на мутации в гене CFTR (трансмембранного регулятора муковисцидоза):

Здоровым людям анализ покажет наличие или отсутствие дефектных генов, связанных с муковисцидозом. Исследование выявляет 25 наиболее распространённых на территории нашей страны мутаций белка МВТР.
Если такая патология есть у родственников, то с помощью молекулярно-генетического анализа определяется, передалась ли патология по наследству.
Сдав анализ по программе пренатального скрининга и получив положительный результат, у семейной пары есть выбор, оставить ребёнка или прервать беременность.
Оценка строения белка CFTR необходима при плохих показателях спермограммы, в рамках неонатального скрининга мальчиков, так как ген является маркером мужского бесплодия. Учёными доказано, что олиго- или азооспермия, полная мужская стерильность развивается как у больных муковисцидозом, так и у носителей дефектного гена.

Как сдают CFTR анализ

Для сдачи анализа на муковисцидоз подготовка не требуется. На исследование берётся венозная кровь или мазок щёчного эпителия. Если речь идёт о медико-генетической диагностике при планировании или во время беременности, то биоматериал должны сдать оба родителя. Для определения дефектов CFTR гена применяется ПЦР и рестрикционный анализ, которые позволяют выявить повреждённые ДНК и определить вид мутации. Срок выполнения – около 15 рабочих дней.

Расшифровка результатов

В результатах указывается один из следующих вариантов диагноза:

N / N – норма, ни одного из 25 видов мутации не обнаружено;
N / M – выявлены две различные формы гена (гетерозиготная мутация), что указывает на скрытое носительство;
M / M – муковисцидоз, обнаружены две дефектные копии гена CFTR (гомозиготная мутация).

Если обнаружена гетерозиготная мутация, то в ДНК присутствует повреждённый ген МВТР, который нейтрализован благодаря здоровой копии. Человек здоров, но его дети могут заболеть муковисцидозом.

Гомозиготная мутация – термин, который обозначает наличие в ДНК двух повреждённых генов. Человек болен и может передать болезнь по наследству.

В последнем случае прогноз лечения непредсказуем. Средняя продолжительность жизни больных муковисцидозом – 25 лет, но при ранней диагностике можно облегчить тяжесть течения заболевания целенаправленной терапией.

Диагностика муковисцидоза в МЖЦ

Пройдите медико-генетическое консультирование и обследование на муковисцидоз в МЖЦ в Москве. Мы имеем 20-летний опыт проведения генетических исследований, проводим анализы на самые распространённые мутации – CFTR, PAN, SMN1, GJB2, которые можно сдать комплексно.

Источник