Анализ крови на днк cmv
Цитомегаловирус, ДНК CMV в крови, качественный — определение ДНК цитомегаловируса в крови, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».
Метод ПЦР позволяет идентифицировать в биологическом материале искомый участок генетического материала и обнаружить единичные молекулы ДНК вируса, не выявляемые другими методами. Принцип метода основан на многократном увеличении числа копий, специфичных для данного возбудителя участка ДНК.
С помощью ПЦР-анализа можно диагностировать инфекцию в остром периоде и выявлять случаи носительства.
Цитомегаловирус (ЦМВ) — это разновидность из группы герпесвирусов (Herpesvirus), относящаяся к роду Cytomegalovirus подсемейства 3-herpesviridae. Встречается везде. Статистика частоты встречаемости очень вариативна — вероятно, из-за того, что у значительной массы носителей вируса заболевание протекает бессимптомно. Способов полного излечения от герпеса пока нет, т.е. заражённый человек остаётся носителем возбудителя на всю жизнь.
ЦМВ — это инфекция, сходная с герпесом или ветрянкой, только с гораздо более серьёзными и неожиданными последствиями — от повреждения внутренних органов до необратимых изменений ЦНС. Передача вируса возможна только от человека человеку — через предметы или животных заражение произойти не может. Определить данное заболевание на ранних стадиях проблематично, его точный инкубационный период пока неизвестен. Проявления инфекции могут быть приняты за воспаление органов мочеполовой системы, обычные недомогания типа ОРВИ (острая респираторная вирусная инфекция) и прочие обычные болезни. Весьма часто ЦМВ приводит к возникновению многочисленных воспалений сразу в нескольких внутренних органах.
CMV у лиц с ослабленным иммунитетом
При беременности вирус не всегда передаётся от больной матери ребёнку. Но если инфицирование ЦМВ произошло в период беременности или болезнь усилилась, то вероятность передачи заболевания плоду значительно возрастает.
Возникший иммунодефицит может спровоцировать активизацию болезни. Возбудитель может содержать моча, слюнная или семенная жидкость, молоко или секрет шейки матки. Мать может заразить ребёнка как внутриутробно, так и при родах или при кормлении. Подростки часто заражаются при поцелуях, половых контактах и т.д.
Передача возбудителя возможна посредством цельной крови или её препаратов, содержащих красные кровяные тельца, либо во время пересадки органов. При нормальном иммунитете заболевание может никак себя не проявлять даже в течение всей жизни.
Основное средство профилактики ЦМВ — это поддержание сильного иммунитета, систематический прием иммуностимуляторов и витаминов. В противном случае даже при небольших проблемах с иммунитетом вирус способен стать причиной многих инфекционных болезней. Он довольно устойчив к противовирусным средствам, особенно при острой форме. Инкубационный период цитомегаловирусной инфекции обычно длится от 20 до 60 дней. Во время острой фазы болезни, которая продолжается от 2 до 6 недель, появляются признаки общей интоксикации организма: озноб, головная боль, боли в мышцах, наблюдается общая слабость и повышение температуры тела. На фоне первичного внедрения инфекции перестраивается иммунная система организма. В течение нескольких недель после острой фазы сохраняется слабость, могут возникать вегетативно-сосудистые расстройства.
Клинические признаки инфекции, вызванной CMV
Наиболее часто цитомегаловирусная инфекция проявляется как острая респираторно-вирусная инфекция. От больных поступают жалобы на общее недомогание, насморк, быструю утомляемость. Происходит увеличение и воспаление слюнных желёз, сопровождающееся беловатым налётом на языке и дёснах, а также обильным выделением слюны.
При генерализованной форме ЦМВ-инфекции наблюдается поражение паренхиматозных (внутренних) органов. Воспаляются почки, поджелудочная железа, печёночная ткань, селезёнка, надпочечники. Это сопровождается «беспричинными», на первый взгляд, бронхитами и пневмониями, которые плохо поддаются лечению антибиотиками. У больных снижается иммунный статус, в периферической крови становится меньше тромбоцитов. Довольно часто наблюдаются поражения стенок кишечника, периферических нервов, сосудов глаз и головного мозга. Увеличиваются подчелюстные и околоушные слюнные железы, воспаляются суставы. Могут появиться высыпания на коже.
У женщин и мужчин поражение мочеполовой системы даёт симптомы хронического неспецифического воспаления. В этом случае, если не обнаружена вирусная природа патологии, лечение заболевания при помощи антибиотиков будет малоэффективно.
Осложнения CMV
Самые серьёзные и опасные осложнения цитомегаловируса — это патология беременности, плода и новорождённого. Если произошло инфицирование плода во время беременности, то риск развития этой патологии будет максимальным. Однако, не стоит забывать, что проблемы могут возникнуть также у беременных при активации латентной ЦМВ-инфекции, когда вирус попадает в кровь, впоследствии заражая плод. Согласно статистике, ЦМВ является наиболее частой причиной невынашивания беременности. Внутриутробная цитомегаловирусная инфекция является причиной поражений центральной нервной системы (тугоухость и отставание в умственном развитии). 20–30% случаев заканчиваются смертью ребёнка.
Лечение CMV-инфекции
Лечение ЦМВ-инфекции является комплексным. Оно включает в себя противовирусную и иммунную терапию. Стоит помнить, что ЦМВ довольно быстро покидает периферию и не выделяется из биологических жидкостей (грудное молоко, слюна и кровь). Таким образом, наступает латентная фаза инфекции. Очень важно вовремя и качественно провести иммунотерапию, чтобы активировать защитные механизмы организма для контроля активации латентной ЦМВ-инфекции.
Показания:
- подготовка к беременности;
- признаки внутриутробной инфекции, фетоплацентарная недостаточность;
- состояние иммуносупрессии при ВИЧ-инфекции, неопластических заболеваниях, приёме цитостатических препаратов и т.д;
- клиническая картина инфекционного мононуклеоза в отсутствии инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барра;
- гепато-спленомегалия неясной природы;
- лихорадка неясной этиологии;
- повышение уровня печёночных трансаминаз, гамма-ГТ, ЩФ в отсутствии маркёров вирусных гепатитов;
- атипичное течение пневмонии у детей;
- невынашивание беременности (замершая беременность, привычные выкидыши).
Подготовка
Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приёма пищи.
Забор крови производится в соответствующую пробирку строго до метки.
Сразу после заполнения и извлечения пробирки из держателя её нужно аккуратно перевернуть 5–10 раз на 180° для смешивания пробы с наполнителем. Не встряхивать!
Интерпретация результатов
Ответ выдаётся в качественном формате: «обнаружено» или «не обнаружено».
«Обнаружено»:
- в анализируемом образце биологического материала обнаружены фрагменты ДНК, специфичные для цитомегаловируса: инфицирование цитомегаловирусом.
«Не обнаружено»:
- в анализируемом образце биологического материала не обнаружены фрагменты ДНК, специфичные для цитомегаловируса, или концентрация возбудителей в образце ниже границы чувствительности теста.
Источник
Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме «реального времени».
Исследуемый материал
Сыворотка крови
Цитомегаловирус – широко распространенный вирус семейства герпесвирусов. После окончания острого периода инфекция цитомегаловирусом обычно переходит в латентную форму, из которой может реактивироваться. Цитомегаловирус относят к так называемым оппортунистическим инфекциям: выраженные клинические проявления ЦМВ-инфекции отмечаются чаще всего у пациентов с врожденными или приобретенными иммунодефицитами (в том числе вследствие ВИЧ-инфекции, применения иммунодепрессантов при трансплантации органов и др.), а также на фоне физиологических иммунодефицитных состояний (дети первых 3-5 лет жизни, беременные).
Первичная инфекция или (в меньшей степени) ее реактивации в период беременности связаны с риском внутриутробной передачи вируса, опасной для развития плода. Наличие ДНК ЦМВ в лейкоцитах крови беременной является достоверным признаком активной репликации ЦМВ и служит важным маркером высокого риска антенатального заражения вирусом плода. При первичном инфицировании в стадии «серологического окна» до начала синтеза антител выявление ДНК ЦМВ в крови является единственным показателем активной репликации вируса. Положительное прогностическое значение обнаружения ДНК ЦМВ в клетках крови (вероятность заражения плода) составляет 50-60%. Отрицательное прогностическое значение точно не установлено. ДНК ЦМВ в крови выявляется лишь у 50% беременных с острой ЦМВИ. Частота выявления ДНК ЦМВ составляет 80-100% в первый месяц развития острой ЦМВИ, но существенно снижается через 30 дней от момента ее выявления.
Проявления инфекции зависят от особенностей иммунитета матери, вирулентности и локализации вируса. В целях выявления возможной инфицированности организма цитомегаловирусом, оценки риска возникновения острой инфекции, распознавания первичной инфекции целесообразно использование тестов: аnti-CMV-IgG и аnti-CMV-IgM в сыворотке крови, выявление вирусной ДНК методом ПЦР.
Результаты количественной ПЦР предназначены для определения степени репликативной активности ЦМВ и обоснования наличия манифестной инфекции – поражение органа ЦМВИ (выявление ДНК ЦМВ в сыворотке крови).
Аналитические показатели:
- определяемый фрагмент – специфичный участок ДНК цитомегаловируса;
- специфичность определения – 100%;
- чувствительность определения – 240 МЕ/мл.
Литература
- Хунафина Д.Х., Галиева А.Т., Агадуллина Э.Я. Цитомегаловирусная инфекция. Медицинский вестник. 2011;128-130.
- Цитомегаловирусная инфекция у взрослых (исключая больных ВИЧ-инфекцией). Клинические рекомендации. — М. 2014:63.
- Шахгильдян В.И. Клиническое значение, подходы к диагностике и лечению активной цитомегаловирусной инфекции у беременных и новорожденных. Медицинский совет. — М. 2016;12:62-72.
- Jonathan C.G., Frederick S.N. Quantitative Nucleic Acid Amplification Methods for Viral Infections. Clinical Chemistry. 2014;61(1):72-78.
- Tanimura К., Yamada Н. Potential Biomarkers for Predicting Congenital Cytomegalovirus Infection. International Journal of Molecular Sciences. 2018;19(12):3760.
Источник
Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме «реального времени».
Исследуемый материал
Сыворотка крови
Цитомегаловирус – широко распространенный вирус семейства герпесвирусов. После окончания острого периода инфекция цитомегаловирусом обычно переходит в латентную форму, из которой может реактивироваться. Цитомегаловирус относят к так называемым оппортунистическим инфекциям: выраженные клинические проявления ЦМВ-инфекции отмечаются чаще всего у пациентов с врожденными или приобретенными иммунодефицитами (в том числе вследствие ВИЧ-инфекции, применения иммунодепрессантов при трансплантации органов и др.), а также на фоне физиологических иммунодефицитных состояний (дети первых 3-5 лет жизни, беременные).
Первичная инфекция или (в меньшей степени) ее реактивации в период беременности связаны с риском внутриутробной передачи вируса, опасной для развития плода. Наличие ДНК ЦМВ в лейкоцитах крови беременной является достоверным признаком активной репликации ЦМВ и служит важным маркером высокого риска антенатального заражения вирусом плода. При первичном инфицировании в стадии «серологического окна» до начала синтеза антител выявление ДНК ЦМВ в крови является единственным показателем активной репликации вируса. Положительное прогностическое значение обнаружения ДНК ЦМВ в клетках крови (вероятность заражения плода) составляет 50-60%. Отрицательное прогностическое значение точно не установлено. ДНК ЦМВ в крови выявляется лишь у 50% беременных с острой ЦМВИ. Частота выявления ДНК ЦМВ составляет 80-100% в первый месяц развития острой ЦМВИ, но существенно снижается через 30 дней от момента ее выявления.
Проявления инфекции зависят от особенностей иммунитета матери, вирулентности и локализации вируса. В целях выявления возможной инфицированности организма цитомегаловирусом, оценки риска возникновения острой инфекции, распознавания первичной инфекции целесообразно использование тестов: аnti-CMV-IgG и аnti-CMV-IgM в сыворотке крови, выявление вирусной ДНК методом ПЦР.
Результаты количественной ПЦР предназначены для определения степени репликативной активности ЦМВ и обоснования наличия манифестной инфекции – поражение органа ЦМВИ (выявление ДНК ЦМВ в сыворотке крови).
Аналитические показатели:
- определяемый фрагмент – специфичный участок ДНК цитомегаловируса;
- специфичность определения – 100%;
- чувствительность определения – 240 МЕ/мл.
Литература
- Хунафина Д.Х., Галиева А.Т., Агадуллина Э.Я. Цитомегаловирусная инфекция. Медицинский вестник. 2011;128-130.
- Цитомегаловирусная инфекция у взрослых (исключая больных ВИЧ-инфекцией). Клинические рекомендации. — М. 2014:63.
- Шахгильдян В.И. Клиническое значение, подходы к диагностике и лечению активной цитомегаловирусной инфекции у беременных и новорожденных. Медицинский совет. — М. 2016;12:62-72.
- Jonathan C.G., Frederick S.N. Quantitative Nucleic Acid Amplification Methods for Viral Infections. Clinical Chemistry. 2014;61(1):72-78.
- Tanimura К., Yamada Н. Potential Biomarkers for Predicting Congenital Cytomegalovirus Infection. International Journal of Molecular Sciences. 2018;19(12):3760.
Источник