Анализ крови на денатурированную днк
Исследование для выявления в крови антител к одноцепочечной (денатурированной) ДНК, которое может быть использовано для диагностики и оценки активности очаговой склеродермии.
Синонимы русские
Антитела к односпиральной ДНК, иммуноглобулины класса G;
Антитела к денатурированной ДНК;
Анти-ДНК.
Синонимы английские
Antibody to ss-DNA;
Denatured single-stranded DNA antibody;
Anti-DNA;
Single stranded DNA antibody.
Метод исследования
Иммуноферментный анализ (ИФА).
Единицы измерения
Ед/мл (единица на миллилитр).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Антитела к одноцепочечной ДНК (анти-ssDNA) относятся к группе антинуклеарных антител, то есть аутоантител, направленных против компонентов собственных ядер. Антигенами для анти-ssDNA являются азотистые основания, нуклеотиды и нуклеозиды в составе одноцепочечной ДНК. В крови большинства людей удается обнаружить анти-ssDNA, относящиеся к классу иммуноглобулинов IgM. Анти-ssDNA класса IgM не имеют самостоятельного диагностического значения. Напротив, анти-ssDNA класса IgG характерны для многих системных заболеваний соединительной ткани, таких как системная красная волчанка, ревматоидный артрит, полимиозит/дерматомиозит и др. Наиболее часто анти-ssDNA наблюдаются у пациентов с очаговой склеродермией. Эти антитела следует отличать от антител к двуспиральной, нативной ДНК (анти dsDNA), которые связывают пары оснований, нуклеотиды и нуклеозиды в составе двуцепочечной ДНК.
Анти-ssDNA выявляются у 50 % пациентов с разными формами очаговой склеродермии. Очаговая склеродермия характеризуется ограниченным фиброзом кожи и подкожной жировой ткани, но может иногда вовлекать мышечную и костную ткань. В отличие от системной склеродермии, прогноз заболевания благоприятный, так как при очаговой склеродермии никогда не поражаются внутренние органы и не наблюдается феномен Рейно. Для дифференциальной диагностики очаговой и системной склеродермии можно исследовать концентрацию анти-ssDNA. Эти антитела более характерны для локализованной, очаговой склеродермии. Специфическим признаком системного склероза является наличие анти-Scl-70. Важно отметить, что отрицательный результат исследования анти-ssDNA не позволяет полностью исключить диагноз «очаговая склеродермия».
Исследование анти-ssDNA имеет наибольшее диагностическое значение в детской дерматологии. Самой частой формой очаговой склеродермии у детей является линейная склеродермия (en coup de sabre). При этом фиброз возникает линейно по длине конечности, в лобной области или по ходу сосудисто-нервного пучка. При развитии глубокой атрофии с вовлечением мышечных структур заболевание принимает инвалидизирующий характер. Показано, что у пациентов с линейной формой склеродермии высокая концентрация анти-ssDNA связана с вовлечением подлежащей мышечной ткани, поэтому исследование концентрации этих аутоантител может быть использовано для оценки прогноза заболевания.
Уровень анти-ssDNA отражает активность очаговой склеродермии. Наиболее высокая концентрация этих аутоантител обнаруживается при генерализованной форме очаговой склеродермии. При достижении ремиссии заболевания концентрация антител снижается и результат анализа может стать отрицательным. По этой причине исследование концентрации анти-ssDNA может быть использовано для контроля лечения заболевания.
Следует отметить, что наличие анти-ssDNA не является строго специфичным признаком очаговой склеродермии. Кроме того, эти аутоантитела могут быть обнаружены в крови здоровых людей. По этой причине положительный результат анализа не всегда означает наличие заболевания. Интерпретацию анализа проводят с учетом дополнительных клинических, лабораторных и инструментальных данных.
Для чего используется исследование?
- Для дифференциальной диагностики очаговой и системной склеродермии;
- для оценки активности и прогноза очаговой склеродермии.
Когда назначается исследование?
- При наличии симптомов очаговой склеродермии: ограниченных высыпаний в виде плотных на ощупь бляшек или участков атрофии кожи, сопровождающихся потерей всех видов чувствительности в пределах очага.
Что означают результаты?
Референсные значения: 0 — 20 Ед/мл.
В данном исследовании определяется концентрация антител. Если она меньше 20 Ед/мл, то выдается результат «норма», если больше – выдается результат «повышенное содержание».
Повышенное содержание:
- очаговая склеродермия;
- системная красная волчанка;
- лекарственная волчанка;
- ревматоидный артрит;
- дерматомиозит/полимиозит;
- синдром Шегрена;
- аскулиты;
- неспецифический язвенный колит и болезнь Крона;
- смешанное заболевание соединительной ткани.
Норма:
- норма;
- ремиссия заболевания.
Что может влиять на результат?
- Эффективная терапия и достижение ремиссии заболевания ассоциированы с низким титром анти-ssDNA.
Важные замечания
- Отрицательный результат исследования не позволяет исключить диагноз «очаговая склеродермия»;
- анти-ssDNA могут наблюдаться у здоровых людей;
- интерпретацию результата исследования следует проводить с учетом дополнительных клинических и лабораторных данных.
Также рекомендуется
[13-007] Антитела к двухцепочечной ДНК (анти dsDNA), скрининг
[13-046] Антитела к экстрагируемому ядерному антигену (ENA-скрин)
[13-015] Антитела к ядерным антигенам (ANA), скрининг
[13-063] Антинуклеарные антитела, IgG (анти-Sm, RNP, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENT-B, Jo-1, гистонов, нуклеосом, RiboP, AMA-M2), иммуноблот
[13-045] Антинуклеарный фактор на HEp-2-клетках
[13-077] Иммуноблот при полимиозите (Мi2b, Ku, Pm-Scl100, PM-Scl75, Jo-1, SRP, PL-7, PL-12 EJ, OJ, Ro-52)
[13-019] Антифосфолипидные антитела IgG
[13-013] Антифосфолипидные антитела IgM
[13-059] Скрининг болезней соединительной ткани
[13-061] Диагностика антифосфолипидного синдрома (АФС)
[13-060] Диагностика системной красной волчанки
Кто назначает исследование?
Дерматовенеролог, ревматолог, педиатр, врач общей практики.
Литература
- Hahn BH. Antibodies to DNA. N Engl J Med. 1998 May 7;338(19):1359-68.
- Takehara K, Sato S. Localized scleroderma is an autoimmune disorder. Rheumatology (Oxford). 2005 Mar;44(3):274-9.
- Kavanaugh A, Tomar R, Reveille J, Solomon DH, Homburger HA. Guidelines for clinical use of the antinuclear antibody test and tests for specific autoantibodies tonuclear antigens. American College of Pathologists. Arch Pathol Lab Med. 2000 Jan;124(1):71-81.
- Mutasim DF, Adams BB. A practical guide for serologic evaluation of autoimmune connective tissue diseases. J Am Acad Dermatol. 2000 Feb;42(2 Pt 1):159-74;quiz 174-6.
Источник
Антитела к двуспиральной ДНК: что это такое, причины появления
Антитела к ДНК
Антитела к двуспиральной ДНК (a-dsDNA) — белковые соединения крови, разрушающие ДНК собственных клеток организма. Они относятся к группе антител, направленных на разрушение ядер своих здоровых клеток — антинуклеарных антител, сопровождающих различные патологии. Характерной особенностью a-dsDNA является то, что их повышенное значение отражает наличие системной красной волчанки.
Системная красная волчанка (СКВ) — одно из самых тяжелых заболеваний, при котором аутоиммунные процессы воздействуют на различные органы, повреждая соединительную ткань всего организма. Современная медицина располагает инструментами для поддержания жизнеспособности пациентов с диагнозом СКВ, но болезнь по-прежнему остаётся неизлечимой.
Одной из отправных точек заболевания служит активизация В-лимфоцитов против собственных клеток организма, которая запускает цепь реакций, последовательно травмирующих ткани органов. Природа этого процесса в большинстве случаев неизвестна, но наиболее вероятными причинами, запускающими аутоиммунный ответ, называют совокупность факторов, включающих:
- наследственную предрасположенность;
- воздействие ультрафиолетовых лучей;
- вирусные инфекции (Эпштейн-Барр, цитомегаловирус, парвовирус);
- приём медицинских препаратов (Изониазид, Прокаинамид, Гидралазин, Хлорпромазин);
- гормональные нарушения (выделяют влияние эстрогена);
- курение и стрессы оказывают провоцирующую роль при наличии иных факторов.
Показания и подготовка к анализу
Боли в суставах — показание для проведения анализа
Выявление антител к двуспиральной ДНК проводится на основе высокочувствительного метода лабораторной диагностики — иммуноферментного анализа. Особых требований к подготовке перед изъятием образца крови нет, необходимо воздержаться от курения за 1 час и от принятия пищи за 4 часа до процедуры.
Назначение на проведение анализа выдаётся при подозрении на СКВ и контроле над состоянием пациента с СКВ. Врач может предполагать развитие заболевания при обнаружении косвенных признаков в других диагностических тестах и наличии симптомов у пациента. Признаки патологии могут проявляться не сразу, зачастую на начальных этапах ощущается лишь головная боль и слабость, повышается температура тела. Более специфичные характеристики:
- Высыпания на кожных покровах начинаются с переносицы, распространяясь на область щёк. Образуется типичная для СКВ форма «бабочки», дальше сыпь может перейти на зону декольте, руки и другие участки тела.
- Суставная боль, ощущение ломоты в теле. Кожа в области повреждённых суставов обычно покрасневшая и опухшая, температура этих участков выше, чем общая температура тела. У мужчин болевые ощущения могут сосредоточиться в нижней части спины.
- В ротовой полости образуются язвочки, ногти и волосы становятся ломкими, происходит очаговое выпадение волос. На коже головы появляются плотные бляшки, подобная сыпь может локализоваться на открытых участках тела.
- Широкий спектр нейропсихиатрических патологий может проявляться двигательными нарушениями, снижением когнитивных функций, спутанностью сознания, тревожными расстройствами и другими явлениями.
- Обнаружение крови в моче как следствие распространённого симптома СКВ — поражении почечной ткани.
- Повышенная чувствительность к солнечному свету, выражающаяся в обострении кожных воспалений.
- Нарушения сердечной ритмичности, болевые ощущения в грудной клетке сопровождают ряд заболеваний сердечно-сосудистой системы, развивающихся при СКВ.
При выявлении СКВ анализ на a-dsDNA является точным маркером, но помимо этого проводится целый комплекс исследований, включающих более 10 видов различных показателей.
Что влияет на результат анализа?
Ряд препаратов способны повышать уровень антител
На показатели a-dsDNA могут повлиять следующие факторы:
- Приём лекарственных средств (антиаритмических, антигипертензивных, антибактериальных и др.). При отмене медицинских препаратов уровень антител обычно падает, такую волчанку называют лекарственной.
- Ряд заболеваний сопровождается незначительным образованием a-dsDNA: синдром Шегрена, первичный холангит, гепатит В и С, болезнь Филатова.
- Низкие показатели отражаются при достижении стадии ремиссии, как результат оптимально подобранного лечения.
- Высокие значения в результатах определяются при стадиях обострения СКВ, часто сопровождающиеся развитием патологии почек.
Роль антител к нативной ДНК в развитии красной волчанки
Системная красная волчанка
Антитела к нативной ДНК играют ключевую роль в патогенезе СКВ. Процесс разрушения соединительной ткани запускается аутоантителами, атакующими ядерные компоненты клеток. В результате их взаимодействия образуются циркулирующие иммунные комплексы, которые накапливаются в тканях и провоцируют воспалительные реакции.
В-лимфоциты, производящие a-dsDNA, характеризуются нарушением не только своих защитных свойств, но и целым комплексом патологических изменений. Клетки отличаются гиперактивностью, спонтанностью действий, дефектами в восприятии регуляторных сигналов. Но не только В-лимфоциты кардинально меняют свои особенности. При СКВ все элементы иммунной системы приобретают дефекты различного характера.
Макрофаги не корректно выполняют свои функции по очистке крови от погибших клеток, засоряя, таким образом, внутреннюю среду организма, что провоцирует повышенный ответ иммунной системы — ещё большего производства a-dsDNA. Между тем клеточная гибель происходит в ускоренном режиме, характерной особенностью СКВ является повышенный уровень апоптоза.
Нарушение свойств наблюдается у NK-киллеров, Т- хелперов, пептидных информационных молекул, гормонов тимуса, пролиферации стволовых клеток и так далее. Связь между взаимодействием некоторых элементов иммунной системы удалось понять, но большинство механизмов патологических изменений остаются загадкой.
Что делать при положительном результате анализа
Правильная интерпретация результатов — за специалистом
Наличие a-dsDNA при невысоких значениях не означает развитие заболевания, так как антитела могут присутствовать и у здорового человека. При диагностике важна количественная составляющая показателя.
- Менее 4 Ед/мл — отрицательный результат;
- От 4 до 10 Ед/мл — сомнительный результат;
- Более 10 Ед/мл — положительный результат.
При получении положительного результата необходимо исключить факторы, влияющие на показатель (медицинские препараты и ряд заболеваний). Для этого проводятся дополнительные исследования. Если показатели a-dsDNA не относятся к иным факторам, но симптоматика СКВ отсутствует, заболевание не диагностируется. Такой пациент относится к группе риска, ему необходимо будет наблюдаться у ревматолога и периодически обследоваться.
При наличии симптомов и показателях a-dsDNA > 10Ед/мл однозначно ставится диагноз СКВ. На сегодняшний день существует множество препаратов, способствующих достижению глубокой ремиссии. Каждому пациенту необходим индивидуальный подход, так как болезнь отличается высокой вариабельностью своих проявлений. Важной составляющей является не только медицинская, но и психологическая поддержка, которую можно найти в общественных объединениях пациентов, страдающих системной красной волчанкой.
Источник
При большинстве ревматических заболеваний в ходе лабораторной диагностики обнаруживается не один вид антител. Данное исследование является одним из точных иммуноферментных методов, обладающих высокой чувствительностью и специфичностью. Для установления достоверной клинической картины оцениваются титр, уровень концентрации и стойкость продуцирования.
Общая информация
Возникновение в организме клеток, атакующих собственные антигены, свидетельствует о развитии аутоиммунной патологии. Как правило, это хронический системный процесс, постепенно разрушающий органы и ткани. Участвуют в этих реакциях белки, фосфолипиды, иммуноглобулины, нуклеиновые кислоты. Их действие направлено против клеточных ядер, поэтому обобщающим названием для этой группы веществ является антинуклеарные антитела (АЯА). Выделают две основные разновидности: реагирующие с двухспиральной ДНК и с односпиральной (ssДНК).
Высокое содержание антител к односпиральной (ssДНК) может быть вызвано приемом сердечно-сосудистых препаратов, таких как метилдофа, прокаинамид и пр. Повышенная концентрация наблюдается при склеродермии (уплотнение и рубцевание стенок внутренних органов). При ревматоидном артрите атака направлена на мембраны клеток суставов, что вызывает их постоянную ломоту, отеки, скованность движений. Дисфункция слезных и слюнных желез вызывает синдром Шегрена, который проявляется постоянной сухостью во рту, резью в глазах и суставными болями. Все эти состояния маркируются повышенным уровнем аnti-ssDNA.
Положительная реакция на АЯА возможна не только в случае аутоиммунных нарушений. Однако в 99% она свидетельствует о наличии системных патологий соединительной ткани, в 93% – об СКВ, и в 40% является маркером ревматоидного артрита.
Показания для проведения анализа на антитела к односпиральной (денатурированной) ДНК
Необходимо пройти данное обследование при таких симптомах:
- боли и воспаление мышц, суставов;
- увеличение лимфатических узлов;
- появление темной сыпи на кожных покровах, изменение пигментации;
- быстрая утомляемость, расстройства памяти;
- боли в глазах, повышение светочувствительности;
- сухость во рту, кровотечение десен;
- слабость, анемии;
- повышение СОЭ в крови, снижение концентрации лейкоцитов и тромбоцитов по неустановленной причине;
- для оценки эффективности лечения установленной СКВ.
Как проводится анализ на антитела к односпиральной (денатурированной) ДНК
Исследование проводится утром натощак. Последний прием пищи – за 12 часов. Пить воду разрешается. За два часа до сдачи следует отказаться от курения, накануне избегать тяжелых физических нагрузок.
Два наиболее часто применяемых метода исследования – иммуноферментный и иммунофлюоресцентный.
При расшифровке результатов нормой считается осадок 10-20% ДНК. Значения выше нормы свидетельствуют о тяжелой стадии СКФ или наличии волчаночного нефрита.
Срок выполнения анализа на антитела к односпиральной (денатурированной) ДНК
Результаты будут готовы в течение 1-7 рабочих дней.
Цены и клиники
Вы можете узнать всю необходимую информацию о том, в каких клиниках Москвы предоставляется данная услуга, на медицинском портале medbooking.com
Источник
При нарушении иммунной регуляции в организме возникают сбои. Ранняя диагностика состояния организма, имеет важное значение, выявляя изменения в крови, следует учитывать разновидность инородных тел и динамику их роста. Они направлены против ДНК, собственное ядро молекулы сдвигается к периферии, и данные исследования ведутся для определения недуга.
Обнаружение изменения молекул
Антитела к нативной ДНК можно обнаружить различными методами степени распространенности, она составляет большой процент. Обнаруживаются у страдающих, пораженных инфекционными заболеваниями. Иногда встречаются, на первый взгляд, у здоровых людей, но отягощенных наследственностью, развиваются часто в молодом возрасте. Поражается ядра клетки, образуется нуклеиновая кислота. После обнаружения изменений структуры молекулы здоровых людей, по истечении пяти лет, как правило, развивается красная волчанка. Происходят изменения на кожном покрове, и нарушается функция почек. Выявление в сыворотке, связано с активностью процесса или может предполагать врачебный прогноз. Положительный результат подтверждается данными обследования.
Действие лекарственных препаратов является побочным эффектом лекарственно-индуцированной волчанки. Синдромы могут провоцировать лекарства, на фоне приема фенитоина, такие препараты как хинидин, хлорпромазин, гидралазин. Отменяя прием препарата, уровень инородных тел снижается. На протяжении, шести месяцев происходит полное исчезновение из сыворотки.
При системных сбоях организма, вырабатываются антитела, направленные на нативную двухспиральную ДНК. При этом ухудшается иммунитет, страдает работа почек, мозга, воспаляются и повреждаются кровеносные сосуды. Поражение сосудов, непосредственно связано, с непременным присутствием поражения соединительной ткани, ему подвержены пожилые люди, возможно при сенсорных невропатиях.
Исследования молекул
Антитела к нативной ДНК можно определить, проведя диагностику СКВ необходимо сделать иммуноферментный анализ, сдают его в один рабочий день. Исследование проводится 2, 5 часа. Подготовка проведения анализа не требуется, забирается на голодный желудок, особенного ограничения в режиме питания не требуется. После венепунктуации набирают кровь в стеклянную пробирку. Анализ проводится с сывороткой венозной крови, которая очищается от пептидов и белков. Проводится твердофазный иммуноферментный анализ.
Если в сыворотке повышенное содержание посторонних включений, то это указывает на волчаночный нефрит. Положительное исследование, является основанием постановки диагноза СКВ. Важным считается установление постороннего включения, которые говорят о нарушении в работе ДНК. Для подтверждения положительного результата, проводятся дополнительные изучения. Серийное назначение анализов, проводят для оценки лечения. Назначает исследование врач дерматолог, нефролог, дерматовенеролог.
Разновидность диагностики
Нуклеосома образуется соединением нити ДНК с гистоновыми белками, является частью хромосомы. Нуклесом обнаруживается при септических состояниях, онкологических заболеваниях и больных СКВ. При апоптозе эндонуклеозы разрывают ДНК и нуклеосомы попадают в кровеносную систему.
Положительные результаты анализа присутствуют у большинства больных волчанкой и пациентов страдающих нефритами. Они взаимодействуют с белком циклином, который разрушается после деления клетки. У 3% болеющих красной волчанкой обнаруживаются изменения. Специфичность аутоантител к PCNA для СКВ составляют 99%. У страдающих волчанкой обнаруживается поражение ЦНС и тромбоцитопения.
Аутоантитела к рибосомальным белкам высокоспецифичны для СКВ. Встречается у пациентов с гепатитом, с нарушением ЦНС, у пациентов с психозами.
Антитела к рибонуклеопротеинам – подсемейство АНА, они часто встречаются при СКВ. 
При более агрессивном течении болезни волчаночных психозов, поражения ЦНС обнаруживают наличие Sm-антител. Распространенность от 5 до 40%.
Треть больных с признаками прогрессирующего склероза или полимиозита, встречаются антитела к U1-nRNP. Заболевание носит название синдром Шарпа.
При СКВ аутоантитела к SS бывают с выраженной симптоматикой кожных проявлений. Такие больные фоточувствительны излучению ультрафиолетовых волн. Для пациентов характерна длительность излечения болезни.
При диффузной склеродермии встречаются антитела к топоизомеразе. Антицентромерные включения не проявляются у здоровых людей, при обнаружении таких антител развивается синдром Рейно.
Пациенты с антителами к PM-Scl, требуют особого внимания к работе легких — фиброзе легкого и фиброзном альвеолите. Антимитохондриальные антитела М2 присутствуют у страдающих билиарным цирозом.
У пациентов страдающих склеродермией, ревматическими заболеваниями присутствуют антитела к Ro-52.
Учитывая разновидность исследований, история заболеваний строится на основе полученных результатов. Иммунные нарушения влияют на поражения кожи, кровеносной системы, соединительной ткани, почек, суставов и других органов. Фракции волчаночного антикоагулянта могут спровоцировать прогресс геморрагического синдрома. Присутствие инородных тел в крови, меняется с течением болезни. Большое количество свидетельствует о прогрессирующем недуге. Но, такая последовательность происходит не всегда. Повышенный уровень характерен для лекарственной волчанки, заражениях гепатитом В и С.
На результат активно влияет эффективная терапия, потеря контроля за ходом лечением. Важно подчеркнуть, что обнаружение отрицательного результата, не гарантирует диагностику СКВ. Обнаружение посторонних микрочастиц, без клинических изменений, не является основанием для вынесения диагноза. Необходимо внимательно относится к состоянию здоровья, проводить иммунологическое обследование. Есть много нарушений организма, которые никак не проявляют себя, иногда оказывается, что лечить их поздно. Для поддержания здорового духа и здорового тела, врачи рекомендуют проходить ежегодно медицинские обследования.
Источник
