Анализ крови на чувствительность к антибиотикам инвитро

Определение этиологии ОКИЗ (острого кишечного инфекционного заболевания) и выбор рациональной антибиотикотерапии.

Рациональная терапия дизентерии основана на идентификации её возбудителя — бактерий рода Shigella.

Шигеллы (по имени японского учёного К. Шиги) грамотрицательные неподвижные неспороносные палочки длиной 23 мкм, шириной 0,6 мкм. По типу обмена аэробы и факультативные анаэробы.Они выделяют токсины, повреждающие эпителий кишечника, усиливают секрецию жидкости и солей в просвет кишки. Шигеллы быстро изменяют свою чувствительность к различным антибактериальным препаратам.

Заражение происходит фекально-оральным путём. Для возникновения заболевания достаточно инфицирование менее чем 100 микробными клетками шигелл. Инкубационный период от одних до 7 суток (в среднем 2 — 3 суток), но может сокращаться до 12 и даже до 2 часов. Заболевание начинается остро. Возникает общая интоксикация, повышается температура тела, появляются схваткообразные боли в животе (тенезмы), усиливающиеся перед дефекацией. В последние годы отмечается резкое увеличение количества больных тяжёлой дизентерией и её хроническими формами. Диагноз хронической дизентерии устанавливается в случае, если заболевание продолжается более 3 месяцев.

Лабораторное подтверждение дизентерии проводится бактериологическим и серологическим методами. Бактериологический метод (высев шигелл из испражнений) при 3-кратном исследовании обеспечивает подтверждение диагноза у большинства больных. Это обеспечивает дифференциальную диагностику с другими острыми диарейными заболеваниями — сальмонеллёзом, эшерихиозом, кишечным иерсиниозом, холерой, амёбиазом.

Сальмонеллы (по имени американского исследователя D. Salmon) – возбудители энтероколитов или пищевой токсикоинфекции, а также генерализованных тифопаратифозных инфекций. Мелкие грамотрицательные палочки, подвижны за счет жгутиков. По типу метаболизма – факультативные анаэробы. Факторы патогенности – термостабильные эндотоксины, термолабильный энтеротоксин, микрокапсулы, белки наружной мембраны клеточной стенки (способствуют адгезии на энтероцитах тонкой кишки). Сальмонеллезы – зоонозно-антропонозные инфекции, могут быть причиной внутрибольничных инфекций. Сальмонеллы могут размножаться при 4-6 град. С и длительно сохраняться в замороженных продуктах. Брюшной тиф и др. сальмонеллезы являются инфекциями с фекально-оральным механизмом передачи, основной путь передачи — пищевой, главным образом через продукты животного происхождения. Заболевание протекает в форме гастроэнтерита, гастроэнтероколита, гастрита (без диареи), тифоподобной форме и септической форме. После перенесенного заболевания в 20% случаев возникает бактерионосительство, которое может продолжаться пожизненно. Лабораторная диагностика сальмонеллеза основана на выделении возбудителя при посеве различных видов биоматериала от больного (фекалии, рвотные массы, желчь, кровь при септических формах) при микробиологическом исследовании.

Выделяемые возбудители: шигеллы, сальмонеллы.

Обращаем внимание на необходимость предварительного приобретения стерильной пробирки с питательной средой, используемой при взятии биоматериала, в любом медицинском офисе ИНВИТРО.

Литература

1. Богомолов Г.И. Дифференциальная диагностика инфекционных болезней. М. 2000. 231 стр.
2. Энциклопедия клинических лабораторных тестов под ред. Н.У. Тица. Издательство «Лабинформ» — М. — 1997 — 942 с.
3. Руководство по медицинской микробиологии под.ред.А.С.Лабинской, Москва, 2010г.
4. Методики клинических лабораторных исследований под ред.В.В.Меньшикова, т.3, Москва, 2009г.
5. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология, Л.Б.Борисов, Москва, 2005г.
6. Gorbach S. Et al./ Infectious Diseases (3rd edition)/2003/ Lippincott Williams & Wilkins/2700 ps.
7. Jacobs D. et al. Laboratory test handbook/ Lexi-Comp./2002 — 1534 p.
   

Интерпретация результатов

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Даётся информация:

• об отсутствии или наличии роста;
• о количестве выросших в посеве лактобактерий, условно-патогенных микроорганизмов, грибов;
• о роде и виде всех представителей, в том числе грибов;
• о чувствительности возбудителей к антибиотикам (если количество > 104 кое/тамп.);
• описательная картина микроскопии (бактериоскопии) мазка.

Внимание! При обнаружении роста нормальной, сопутствующей и условно-патогенной флоры в низком титре и не имеющей диагностического значения определение чувствительности к антибиотикам не проводится.

Интерпретация результата

Всегда проводится лечащим доктором с учётом клинических проявлений и анамнеза заболевания. С лабораторной точки зрения можно условно выделить различные состояния дисбиотического процесса во влагалище.

Нормоценоз общая обсемененность 106 — 108 кое/тамп., абсолютно преобладают лактобациллы, УПМ в низком титре (менее 104) или отсутствуют. При микроскопии вагинальный эпителий представлен клетками поверхностных слоёв и редко встречаются клетки промежуточного слоя, иногда встречаются «ложноключевые клетки», лейкоцитарная реакция отсутствует или слабо выражена ед. в поле зрения, микрофлора в умеренном или большом количестве, представлена лактоморфотипами, другие морфотипы бактерий отсутствуют или ед. в редких п/зр.

Бактериальный вагиноз — при использовании аэробных условий рост микроорганизмов отсутствует или присутствует рост УПМ в низком титре, рост лактобацилл отсутствует или титр их резко снижен (менее 104 кое/тампон). При микроскопии вагинальный эпителий представлен клетками поверхностных слоёв, встречаются «ключевые клетки», лейкоцитарная реакция отсутствует, микрофлора в массивном количестве, представлена морфотипами строгих анаэробов и гарднерелл, лактоморфотипы отсутствуют или в скудном количестве.

Вагинальный кандидоз в зависимости от количества грибов и выросших УПМ различают следующие состояния: 

— кандидозный вагинит в посеве общее количество МО не превышает 108 кое/тамп., грибы в титре > 104 кое/тамп., лактобациллы в титре > 106 кое/тамп., при микроскопии вагинальный эпителий разных слоёв, лейкоциты от 10 — 15 до 30 — 50 в п/зр. и более, преобладают лактоморфотипы, присутствуют бластоспоры и фрагменты псевдомицелия дрожжеподобных грибов; 

— сочетание бактериального вагиноза и кандидозного вагинита в посеве рост лактобацилл отсутствует или титр резко снижен, присутствует рост грибов в титре 104 — 107, при микроскопии клетки вагинального эпителия разных слоёв, присутствуют «ключевые клетки», лейкоцитов от 10 до 50 и более в поле зрения, общее количество бактерий массивное или большое, доминируют морфотипы анаэробов и гарднерелл, лактоморфотипы отсутствуют или в скудном количестве; 

— бессимптомное носительство грибов в посеве определяется рост лактобацилл в достаточном количестве, рост грибов в низком титре, при микроскопии клетки вагинального эпителия поверхностных слоёв, лейкоцитарная реакция отсутствует или невыраженная, лактоморфотипы в умеренном или большом количестве, клетки дрожжеподобных грибов или не определяются или ед. в редких п/зр.

Неспецифический вагинит в посеве доминирует рост чаще одного представителя УПМ в диагностически значимом титре, рост лактобацилл отсутствует или количество их резко снижено, при микроскопии встречаются вагинальные клетки разных слоёв, лейкоцитарная реакция разная от умеренной до выраженной, микрофлора представлена морфотипами УПМ: грам (+) кокками или колиморфными палочками, лактоморфотипы или отсутствуют или ед. в редких поле зрения.

Цитолитический вагиноз в посеве присутствует рост только лактобацилл в высоком титре (более 108 кое/тамп.), рост других МО отсутствует, при микроскопии много клеток вагинального эпителия в распавшемся виде, обнажённые ядра, детрит, лейкоцитарная реакция отсутствует, лактоморфотипы в массивном количестве.

Промежуточный вариант микроценоза в посеве титр лактобацилл снижен, но незначительно, в аэробных условиях рост другой флоры отсутствует, при микроскопии мазка вагинальный эпителий преимущественно поверхностного слоя, встречаются единичные «ключевые клетки», лейкоцитов не более 10 в п/зр., микрофлора в умеренном или большом количестве (но не массивном), преобладают морфотипы гарднерелл и строгих анаэробов, количество лактоморфотипов снижено.

Вагинальная атрофия в посеве общая обсемененность в сниженном титре (102 — 104), лактобациллы и УПМ также в сниженном титре или отсутствуют. При микроскопии мазка эпителий представлен клетками промежуточного, парабазального и базального слоёв, в зависимости от выраженности атрофии. Лейкоцитов до 10 — 15 в поле зрения, микрофлора или отсутствует или встречаются единичные в редких п/зр. лактоморфотипы или морфотипы условно-патогенных микроорганизмов.

Интерпретация результатов

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Ограничение метода

При исследовании биологических жидкостей (семенной, плевральной, перитонеальной, эякулята и др.) основной целью исследования является выявление бактерий. Из-за того, что в большинстве случаев данные виды материала бедны по клеточному составу, мазки на стекле плохо держатся и фиксируются, в процессе окраски возможна потеря части мазка, что приводит к малой информативности описания клеточного состава.

ВНИМАНИЕ: данный вид микроскопического исследования не заменяет общеклинический анализ, основной целью которого является микроскопическое исследование клеточного состава, проводимое строго в жидком (нативном) материале.

При просмотре мазка обращается внимание на:

• наличие и вид эпителиальных клеток, присутствующих в мазке;
• наличие клеточного детрита и слизи; 
• количество лейкоцитов, определяемых в одном поле зрения; 
• наличие определенных морфологических типов (морфотипов) бактерий и элементов грибов, их отношение к красителям (при окраске по Граму), а также на их относительное количество.

Типы бактерий, которые могут встретиться в мазках:

• грамположительные и грамотрицательные кокки, расположенные вне- и внутриклеточно, парами, группами, цепочками;
• грамотрицательные колиформные бактерии;
• лактоморфотипы (тип лактобактерий);
• морфотипы дифтероидов или коринебактерий;
• морфотипы строгих анаэробных бактерий (мобилункус, пептострептококки, фузобактерии, бактероиды)

Интерпретация микроспической картины мазков:

• оценивается общее количество материала на стекле.
• оценивается состояние эпителия, присутствие ключевых клеток. Количество эпителиальных клеток не учитывается, т. к. не имеет диагностической значимости (справедливо для гинекологических мазков).

Оценка лейкоцитарной реакции:

• лейкоциты отсутствуют, ед. в п/зр.;
• до 10 в п/зр. — небольшое количество;
• 10 — 15 в п/зр. — умеренное количество;
• 30 — 50 в п/зр. и более — большое количество;
• умеренное и большое количество оцениваются как этиологически значимые для воспалительной реакции.

Количественная оценка микрофлоры:

• + или до 10 в п/зр. незначительное/скудное количество;
• ++ или 11 — 100 в п/зр. умеренное количество;
• +++ или 100 — 1000 в п/зр. большое количество/значительное;
• ++++ или более 1000 в п/зр. массивное количество.

Посев рекомендован:

• в случае умеренной и большой лейкоцитарной реакции при отсутствии в мазке микробов (т. к. микроскопический метод имеет нижний предел выявляемости > 105 КОЕ/мл, а патогенные потенции условно-патогенных микроорганизмов могут проявляться в небольшом количестве (на уровне 104 — 105 КОЕ/мл); 
• в случае если морфотипы УПМ обнаруживаются при микроскопии даже как единичные в поле зрения для определения рода и вида микроорганизма, постановки чувствительности к антибиотикам и оценки количества для выявления этиологической значимости; 
• для дифференцированной диагностики лактобацилл, клостридий, эубактерий, пропионобактерий и др., т. к. они представлены единым морфотипом; 
• для определения вида грибов и определения их чувствительности к антимикотическим препаратам; 
• в случае бактериального вагиноза, если он сочетается с неспецифическим воспалительным процессом, сопровождаемым умеренно выраженной лейкоцитарной реакцией.

Посев не рекомендован (или не обязателен):

• в случае бактериального вагиноза, если он не сочетается с УПМ; 
• в случае цитолитического вагиноза; 
• в случае промежуточной формы микроценоза; 
• в случае вагинальной атрофии.