Анализ крови на антитела к боррелиям это

Анализ крови на антитела к боррелиям это thumbnail

Исследование предназначено для качественного определения антител к антигенам боррелий в сыворотке крови человека для диагностики клещевого боррелиоза (болезни Лайма) и ассоциированных заболеваний: хронической мигрирующей эритемы, доброкачественного кожного лимфаденоза, атрофического хронического акродерматита, артрита, кардита, лимфоцитарного менингорадикулоневрита, нейроборрелиоза. Первыми в крови появляются иммуноглобулины M (IgM). Они выявляются через 2-3 недели после укуса клеща, достигая максимума через 6 недель, затем их уровень постепенно снижается в течение нескольких месяцев и даже лет. Исследование антител IgM оптимально проводить для диагностики недавнего заражения (в течение 1-2 месяцев после первых симптомов).

Синонимы русские

Антитела класса IgM к Borrelia burgdorferi (вестерн-блот), иммуноглобулины класса M к возбудителю боррелиоза (болезни Лайма, клещевого боррелиоза, лайм-боррелиоза).

Синонимы английские

Lyme Disease Antibody (IgM), Western Blot.

Метод исследования

Иммуноблотинг.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Тест выявляет антитела к Borrelia burgdorferi. Эта бактерия относится к группе спирохет и вызывает у человека клещевой боррелиоз (болезнь Лайма).

Человек заражается, если его укусил клещ, который сам был инфицирован B. burgdorferi. Иксодовые клещи, переносчики боррелиоза, – это самая распространенная группа клещей, в умеренном поясе Северного полушария они встречаются повсеместно. Чаще всего заражение людей происходит в период активности клещей – весной и летом.

Инкубационный период боррелиоза составляет несколько недель. На ранних стадиях могут наблюдаться следующие симптомы: усталость, озноб, головные боли. Также при боррелиозе иногда возникает характерная сыпь – мигрирующая эритема (кольцевидное покраснение кожи, которое постепенно расширяется). Если болезнь не лечить, то могут возникнуть серьезные проблемы: боль в суставах, менингит, онемение конечностей, паралич лицевого нерва, расстройства памяти и (в редких случаях) поражения глаз и сердца. Лечение болезни, как правило, эффективно.

При инфицировании лимфоциты человека начинают вырабатывать антитела – специальные белки (иммуноглобулины), которые должны нейтрализовать бактерии. Иммуноглобулины M (IgM) появляются  в крови первыми, через несколько дней после заражения. Однако выявить их удается обычно на более поздних сроках (через 2-3 недели). Примерно через 6 недель концентрация IgM достигает максимума и затем постепенно уменьшается (в течение нескольких месяцев и даже лет).

Антитела другого типа – иммуноглобулины G (IgG) – появляются обычно немного позже и сохраняются в крови дольше. Однако и IgG, и IgM могут присутствовать у человека, который уже выздоровел.

Таким образом, антитела IgM лучше всего подходят для диагностики недавнего заражения (тест на них имеет смысл в течение 1-2 месяцев после первых симптомов).

Анализ на антитела рекомендуется проводить в два этапа. Первый шаг – это определение титра антител IgM и IgG (обычно с помощью ИФА). Второй шаг – белковый иммуноблот (вестерн-блотинг).

Если с помощью ИФА получен отрицательный результат, то его не проверяют, считая достоверным. Если же результат ИФА был  положительный или неточный, то тест проводят еще и с помощью иммуноблота. Иммуноблот более специфичен, чем ИФА, и позволяет отсечь некоторые ложноположительные результаты. Исследование обладает высокой специфичностью (98 %) и чувствительностью (95 %), является более точным по сравнению с ИФА, при тестировании используется рекомбинантный высокоиммуногенный белок VlsE, выделенный из Borrelia burgdorferi, обладающий наибольшей чувствительностью по сравнению с другими антигенами для выявления IgG.

При проведении иммуноблота выявляются антитела к нескольким разным белкам B. burgdorferi. Результат этого теста – качественный, то есть он должен быть однозначным: либо антитела есть, либо их нет. Однако распространена ситуация, когда некоторые белки связались с антителами, а некоторые нет. В таком случае интерпретация результатов исследования зависит от того, какую именно тест-систему используют в диагностической лаборатории. Дело в том, что набор белков для иммуноблота может быть разным. Поэтому каждая фирма-производитель предлагает свои критерии оценки (например, результат считается положительным, если 2 из 3 важнейших белков связались с антителами). Поэтому интерпретацию результатов теста проводят сотрудники диагностической лаборатории, которые знают, какую именно методику использовать, и они же делают окончательный вывод, заражен ли пациент боррелиозом.

Для чего используется исследование?

  • Чтобы проверить положительный результат ИФА (или др. серологических методов) для подтверждения диагноза «клещевой боррелиоз».

Когда назначается исследование?

  • Когда первый тест (обычно ИФА) выявил антитела против B. burgdorferi;
  • когда результаты первого теста (ИФА) были неоднозначные (например, титр антител был очень низким);
  • при симптомах клещевого боррелиоза: мигрирующая эритема, повышенная температура, озноб, головная боль, тошнота, повышенная утомляемость, периодическая боль в суставах, костях и мышцах, менингит, паралич лицевого нерва, онемение конечностей, расстройства памяти, поражения глаз и сердца (в редких случаях);
  • для оценки эффективности лечения клещевого боррелиоза.

* Перед анализом после укуса клеща должно пройти более 2 недель.

Что означают результаты?

Референсные значения

Экспрессир. белково-подобн. посл-ть

не обнаружено

Белок мембранных везикул, p83

не обнаружено

BmpA, p39

не обнаружено

Osp, p31

не обнаружено

p30

не обнаружено

OspC, p25

не обнаружено

p21

не обнаружено

p19

не обнаружено

p17

не обнаружено

Причины отрицательного результата (антитела IgM не обнаружены)

  • Боррелиоза нет. Инфекция отсутствует.
  • Недавняя инфекция. Если заражение произошло меньше 2-3 недель назад, то уровень антител может быть еще слишком низким и их не удается обнаружить. Это маловероятно, поскольку иммуноблот проводится после того, как получен положительный результат с помощью ИФА. Если существует серьезное подозрение на боррелиоз, то необходимо сдать анализ еще раз, позже.

Причины положительного результата (антитела IgM обнаружены)

  • Боррелиоз.
  • Ложноположительный результат. Вероятность такого результата меньше, чем в случае ИФА.

Антитела IgМ к Borrelia, сформированные в ранней фазе боррелиозной инфекции, обычно направлены против антигена OspC (p25) – наружный поверхностный белок С — маркер свежей инфекции. Обнаружение IgM-антител против других специфичных антигенов боррелий при отсутствии антител к OspC не считается достаточным указанием на недавно возникшую инфекцию.

Отрицательный результат по IgM-антителам не исключает наличия свежей инфекции, поскольку при повторном заражении могут формироваться только антитела класса IgG.

Ложноположительный результат по IgM-антителам на поздней стадии заболевания может быть связан с инфекционным мононуклеозом, герпес-вирусной инфекцией или аутоиммунными заболеваниями.

Для установления диагноза свежей боррелиозной инфекции полученный положительный результат по антителам класса IgM должен быть обязательно подтвержден через 3-6 недель положительным результатом по антителам класса IgG на свежем образце крови.

 Что может влиять на результат?

  • Другие заболевания, например инфекции, вызванные родственными бактериями (спирохетами). Хотя на иммуноблот они влияют меньше, чем на ИФА.
  • Ошибка при интерпретации (например, учет неспецифического связывания).



Важные замечания

  • Если результат ИФА будет отрицательным, иммуноблот, возможно, не понадобится вообще.
  • Надежность иммуноблота высокая, но не абсолютная. Поэтому для уверенности в результате нужно использовать двойное тестирование (вначале ИФА, затем иммуноблот для подтверждения).

Также рекомендуется

[02-029] Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоцитарная формула, СОЭ (с микроскопией мазка крови при выявлении патологических изменений)

[09-039] Borrelia burgdorferi s.l., ДНК [реал-тайм ПЦР]

Кто назначает исследование?

Врач общей практики, терапевт, инфекционист, невропатолог, ревматолог.

Литература

  • Allen C. S. et al. Prospective Study of Serologic Tests for Lyme Disease. Clin Infect Dis. 2008; 47(2): 188-195.
  • Goldman’s Cecil Medicine. 24th ed. Goldman L, Schafer A.I., eds. Saunders Elsevier; 2011.

Источник

[07-064]
Borrelia burgdorferi, IgG, титр

860 руб.

Тест выявляет титр антител IgG против бактерии Borrelia burgdorferi, которая вызывает клещевой боррелиоз (болезнь Лайма).

Синонимы русские

Антитела класса IgG к Borrelia burgdorferi, иммуноглобулины класса G к возбудителю боррелиоза (болезни Лайма, клещевого боррелиоза, лайм-боррелиоза).

Синонимы английские

Anti-Borrelia burgdorferi IgG, Borrelia burgdorferi antibodies (IgG), Lyme Disease antibodies (IgG).

Метод исследования

Иммуноферментный анализ (ИФА).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Этот тест выявляет антитела к Borrelia burgdorferi, которые вырабатываются организмом в ответ на заражение. То есть их наличие означает, что человек был инфицирован этими бактериями.

B. burgdorferi относится к группе спирохет и вызывает клещевой боррелиоз (болезнь Лайма).

Человек заражается, если его укусил клещ, который сам был инфицирован B. burgdorferi.

Иксодовые клещи, переносчики боррелиоза, очень распространены, в умеренном поясе Северного полушария они встречаются повсеместно. Чаще всего заражение людей происходит в период активности клещей – весной и летом.

Инкубационный период боррелиоза составляет несколько недель. На ранних стадиях могут наблюдаться следующие симптомы: усталость, озноб, головные боли. Также при боррелиозе иногда возникает характерная сыпь – мигрирующая эритема (кольцевидное покраснение кожи, которое постепенно расширяется). Если болезнь не лечить, то возможны серьезные проблемы: боль в суставах, менингит, онемение конечностей, паралич лицевого нерва, расстройства памяти и (в редких случаях) поражения глаз и сердца. Терапия болезни, как правило, эффективна.

При инфицировании лимфоциты человека начинают вырабатывать антитела – специальные белки (иммуноглобулины), которые должны нейтрализовать бактерии. Первыми в крови появляются иммуноглобулины M (IgM), но постепенно их концентрация уменьшается. Через некоторое время возникают антитела другого типа  –  иммуноглобулины G (IgG). Их можно выявить через несколько недель после инфицирования, а максимального уровня они достигают через 4-6 месяцев. Таким образом, антитела IgM указывают на недавнее заражение, а иммуноглобулины G подходят для более поздней диагностики.

Количество антител выражают в виде титра. Титр – это максимальное разбавление раствора, при котором в нем еще обнаруживаются антитела. Например, титр 1:16 означает, что, если сыворотку крови разбавить в 16 раз, в ней еще можно обнаружить антитела (а если разбавить сильнее – антитела уже не детектируются).

Титр называют высоким (например, 1:612) или низким (например, 1:4), конкретное его значение зависит от чувствительности метода.

Высокий титр с большей вероятностью указывает на заболевание, которое протекает в настоящее время (а не то, которое было в прошлом). Важно помнить, что титр не пропорционален тяжести заболевания, ведь речь идет не о количестве бактерий, а о количестве антител против них.

Выявление антител рекомендуется проводить в два этапа. Первый шаг – это измерение титра антител IgM и IgG. Если результат положительный или неоднозначный, то нужно сдать еще один анализ – иммуноблот.

Для чего используется исследование?

  • Чтобы установить, был ли человек инфицирован бактериями Borrelia burgdorferiЭто позволяет подтвердить диагноз «клещевой боррелиоз».
  • Чтобы контролировать эффективность лечения.

Когда назначается исследование?

Тест назначается при симптомах клещевого боррелиоза. На ранних стадиях могут отмечаться:

  • мигрирующая эритема,
  • повышенная температура, озноб,
  • головная боль,
  • быстрая утомляемость,
  • тошнота.

Дополнительным показанием к анализу является укус клеща (за несколько дней или недель до появления первых симптомов). В ряде случаев даже удается проверить на B. burgdorferi самого клещаЕсли результат положителен (т. е. клещ является переносчиком боррелиоза), то укушенному человеку следует сдать анализ самому (обнаружить антитела можно будет через несколько недель).

Симптомы боррелиоза на более поздних стадиях:

  • периодическая боль в суставах, костях и мышцах,
  • менингит,
  • паралич лицевого нерва,
  • онемение конечностей,
  • расстройства памяти,
  • поражения глаз и сердца (в редких случаях).

Кроме того, анализ назначается при необходимости убедиться в успешности лечения.

Что означают результаты?

Референсные значения

Результат: отрицательный.

КП (коэффициент позитивности): 0 — 0,89.

Отрицательный результат

  • Боррелиоза нет. Инфекция отсутствует.
  • Недавняя инфекция. Если заражение произошло недавно, то уровень антител может быть еще слишком низким, так что его не удалось обнаружить. При серьезном подозрении на боррелиоз необходимо провести дополнительные исследования.

Положительный результат

  • Боррелиоз. Возможное наличие инфекции B. burgdorferi в данный момент.
  • Боррелиоз в прошлом. Вероятно, у человека в настоящее время нет клещевого боррелиоза. Однако он перенес это заболевание когда-то в прошлом, и с тех пор в крови сохранились антитела против B. burgdorferi.

Высокий титр антител указывает на первый вариант (т. е. подтверждает диагноз «боррелиоз»). Низкий титр характерен для боррелиоза в прошлом.

Определение титра IgG обычно используют в комплексе с другими тестами на антитела. Интерпретировать результаты следует в совокупности.

Результат теста

Интерпретация

Borrelia burgdorferi, титр IgM

Borrelia burgdorferi, титр IgG

Borrelia burgdorferi, иммуноблот (IgM и IgG)

Положительный

Положительный

Положительный

Весьма вероятно, боррелиоз

Отрицательный

Положительный

Положительный

Инфекция на поздней стадии или в прошлом

Отрицательный

Отрицательный

Отрицательный

Инфекции нет или же уровень антител еще слишком низкий

Что может влиять на результат?

  • Другие инфекции: сифилис, лептоспироз, возвратный тиф, ВИЧ-инфекция, мононуклеоз и аутоиммунные расстройства.
  • Применение антибиотиков. В этом случае перед сдачей анализа следует проконсультироваться с врачом.



Важные замечания

  • Титр антител может «отставать» от самой болезни. Например, человек прошел курс лечения и выздоровел (т. е. все боррелии в организме погибли). Однако титр антител иногда остается высоким еще некоторое время. Постепенно он снизится, но, возможно, и не достигнет «нулевого» уровня.
  • Укус клеща еще не означает боррелиоз. Во-первых, не все клещи инфицированы. Во-вторых, если присосавшийся клещ был быстро удален, то B. burgdorferi не успевает попасть к человеку (для этого нужно от 24 до 72 часов контакта с клещом).

Также рекомендуется

  • Borrelia burgdorferi, IgM, титр
  • Borrelia burgdorferi s.l., ДНК [ПЦР]

Кто назначает исследование?

Врач общей практики, терапевт, инфекционист, невропатолог, ревматолог.

Источник

Метод определения
Хемилюминесцентный иммуноанализ.

Исследуемый материал
Сыворотка крови

Специфические антитела к возбудителю боррелиоза (болезни Лайма, Lyme Disease), свидетельствующие о текущей или перенесённой в прошлом инфекции.

Боррелиоз или болезнь Лайма (по названию местечка, в котором в 1975 г. было впервые выявлено заболевание) – распространённая, переносимая клещами инфекция. Возбудитель – очень маленькая спирохета Borrelia burgdorferi, единственная из всех боррелий патогенная для человека. Хозяевами являются многие позвоночные животные: собаки, овцы, птицы, коровы и лошади, но основной хозяин и переносчик – иксодовые клещи, у которых инфекция длится на протяжении всей жизни клеща. В России — это I.ricinus и I.persulcatus. Заболевание характерно для весенне-летнего периода. Чаще наблюдается в Московской, Ленинградской, Тверской и других, преимущественно северных областях, а также в Прибалтике.

Заболевание системное, имеющее 3 стадии

  • I стадия возникает через одну неделю после укуса клеща и длится от 3 до 33 дней. Для неё характерна лихорадка и мигрирующая эритема. Если терапию начинают в этой стадии, то дальнейшее развитие заболевание удаётся предотвратить.
  • Через 4 недели после укуса развивается II стадия. Для неё характерны поражение сердца и неврологическая «триада»: асептический менингит, паралич лицевого нерва и периферические невропатии.
  • Через 6 недель, а иногда через несколько лет у нелеченных больных развиваются тяжёлые поражения суставов.

Лабораторная диагностика. При классической картине мигрирующей эритемы диагноз ставится по клиническим признакам, в остальных случаях его подтверждают лабораторными методами. Посев, выявление антигена возбудителя и гистологическое исследование кожи недостаточно чувствительны и специфичны, гистологическое исследование, кроме того, инвазивно. Поэтому диагноз подтверждают, в основном, серологическими методами — выявлением в крови специфических IgG и IgM антител к возбудителю (в лаборатории ИНВИТРО, соответственно, тесты № 243 и № 244).

ПЦР-тестирование на наличие генетического материала возбудителя в данном случае малоэффективно, но используется при необходимости у пациентов с отрицательными результатами серологических тестов, но вескими клиническими подозрениями на инфицирование, а также у пациентов с иммунодефицитом.

Специфические антитела к Borrelia burgdorferi начинают обнаруживаться  на 2-4 неделе после начала инфекции (сначала IgM,  потом IgG), максимальное количество IgG синтезируется через 1,5 — 3 месяца после инфицирования. Антитела к Borrelia burgdorferi часто не выявляются на ранней, локализованной стадии заболевания или при рано назначенной антимикробной терапии.

Таким образом, отрицательный результат серологических тестов на ранних стадиях инфекции не является подтверждением её отсутствия и требует перепроверки в динамике через 2 — 4 недели. На диссеминированной и хронической стадиях специфические антитела к возбудителю имеются практически всегда. Антитела класса IgG циркулируют в крови длительный срок (от нескольких месяцев до нескольких лет), даже после успешной антимикробной терапии и излечения инфекции. Поэтому по присутствию и титру антител об успехе лечения судить нельзя. Иммунитет против Borrelia burgdorferi не является стерильным. У переболевших людей возможно повторное заражение через несколько лет. Выявление антител к Borrelia burgdorferi не всегда сопровождается клиническими признаками болезни Лайма.

По оценкам, специфичность ИФА тестирования антител к Borrelia burgdorferi в настоящее время достигает 95% (т. е. неспецифические реакции, перекрёстное реагирование с антигенами других бактерий могут примерно в 5% случаев давать ложноположительные результаты).

В сомнительных случаях для подтверждения результатов ИФА-тестов используют иммуноблот.

Литература

  1. Инфекционные болезни у детей. Ред. Д. Марри. М. Практика, 2006. 928 с.
  2. В.И. Офицеров. Лайм-боррелиоз и его диагностика. Новости «Вектор-Бест» N 2 (28).

    Июнь 2003.
  3. Tietz Clinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B.- USA,W.B Sounders Company, 2006. 1798 p.

Источник