Анализ крови на антинуклеарные антитела
Синонимы: АНА, антинуклеарные антитела, антинуклеарный фактор, АНФ, антиядерные антитела, antinuclear antibodies, ANAs, Fluorescent Antinuclear Antibody, Antinuclear factor, ANF
Научный редактор: М. Меркушева, ПСПбГМУ им. акад. Павлова, лечебное дело.
Аутоиммунные заболевания, когда иммунная система атакует собственные ткани организма, считаются одними из самых опасных. Большинство аутоиммунных патологий относятся к хроническим и могут вызывать серьезные нарушения в работе внутренних органов и систем.
Одним из наиболее распространенных тестов, применяемых в диагностике аутоиммунных состояний, является обследование на антинуклеарные антитела (АНА), который проводится тремя способами:
- методом иммуноферментного анализа ИФА (определяется общий уровень ANA),
- методом реакции непрямой иммунофлуоресценции РНИФ (выявляется до 15 разновидностей ANA)
- методом иммуноблоттинга.
Общие сведения
Антинуклеарные (антиядерные) антитела представляют собой группу аутоантител, которые, вступая в реакцию с ядрами собственных клеток организма, разрушают их. Поэтому анализ на АНА считается достаточно чувствительным маркером в диагностике именно аутоиммунных нарушений, большая часть из которых сопровождается поражением соединительной ткани. Однако некоторые из видов антинуклеарных антител обнаруживаются и при заболеваниях не иммунной этиологии: воспалительных, инфекционных, злокачественных и пр.
Наиболее специфичны антинуклеарные антитела к следующим заболеваниям:
- системная красная волчанка (СКВ) – заболевание кожи и соединительной ткани;
- дерматомиозит – поражение кожи, мышц, скелетной ткани и т.д.;
- узелковый периартериит – воспаление артериальной сосудистой стенки;
- склеродермия – уплотнение и затвердение соединительной ткани;
- ревматоидный артрит – поражение соединительной ткани суставов;
- болезнь Шегрена – поражение ткани с железистыми проявлениями (снижение секрета слезных и слюнных желез).
Антинуклеарные антитела могут обнаруживаться более чем у 1/3 больных хроническим рецидивирующим гепатитом. Также уровень АНА может возрастать в случае:
- инфекционного мононуклеоза (вирусное заболевание, сопровождается массовым поражением внутренних органов);
- лейкоза (злокачественное заболевание крови) в острой и хронической форме;
- гемолитической анемии (малокровие в результате разрушения эритроцитов);
- болезни Вальденстрема (поражение костного мозга);
- цирроза печени (хроническое заболевание, связанное с изменением структуры печеночной ткани);
- малярии;
- лепры (инфекционное поражение кожи);
- хронической почечной недостаточности;
- тромбоцитопении (снижение выработки тромбоцитов);
- лимфопролиферативных патологий (опухоли лимфатической системы);
- миастении (патологическая утомляемость мышц);
- тимомы (опухоль из вилочковой железы).
Одновременно с определением антинуклеарных антител в процессе иммуноферментного анализа оценивается концентрация иммуноглобулинов: IgA, IgM, IgG. Обнаружение этих компонентов в крови может свидетельствовать о высокой вероятности развития ревматических заболеваний и коллагенозов.
В случае, когда связь между концентрацией антител и симптоматикой у больного не обнаруживается, само присутствие антиядерных антител в крови является диагностическим критерием и может повлиять на выбор лечения. Сохранение высокого уровня антинуклеарных антител при продолжительном курсе терапии свидетельствует о неблагоприятном прогнозе заболевания. Снижение значений АНА на фоне проводимого лечения может указывать на ремиссию (чаще) или приближающийся летальный исход (реже).
Также антинуклеарные антитела могут быть обнаружены у здоровых людей до 65 лет (3-5% случаев), после 65 (до 37%).
Показания
Исследовать антинуклеарный фактор целесообразно в следующих случаях:
- Диагностика аутоиммунных и некоторых других системных заболеваний без ярко выраженной симптоматики;
- Комплексная диагностика системной красной волчанки, ее формы и стадии, а также выбор тактики лечения и составление прогноза;
- Диагностика лекарственной волчанки;
- Профилактическое обследование пациентов с диагнозом красная волчанка;
- Наличие специфических симптомов: продолжительная лихорадка без установленной причины, боли и ломота в суставах, мышцах, кожные высыпания, повышенная утомляемость и т.д.;
- Наличие симптомов системных заболеваний: поражение кожи или внутренних органов (почки, сердце), артрит, эпилептические припадки и судороги, лихорадка, беспричинное повышение температуры и т.д.;
- Назначение лекарственной терапии дизопирамидом, гидралазином, пропафеноном, прокаинамидом, ингибиторами АПФ, бета-блокаторами, пропилтиоурацилом, хлорпромазином, литием, карбамазепином, фенитоином, изониазидом, миноциклином, гидрохлортиазидом, статинами, поскольку есть риск развития лекарственной красной волчанки.
Кто дает направление
Помимо врача общей практики, направляют на анализ такие узкие специалисты, как
- ревматолог,
- дерматовенеролог,
- нефролог,
- педиатр.
Норма для АНА и факторы влияния
В норме антинуклеарные антител в плазме отсутствуют или определяются в небольшом количестве. Результат зависит от способа выполнения теста:
1. Тест делался методом ИФА
- менее 0,9 пунктов – отрицательно (норма);
- от 0,9 до 1,1 пунктов – сомнительно (рекомендуется сделать повторный тест через 7-14 дней);
- более 1,1 пункта – положительно.
2. Для количественного анализа РНИФ нормой считается титр менее 1:160.
3. Иммуноблоттинг – норма «не обнаружено» (общее заключение / напротив каждого вида антител).
Что может повлиять на результат
- нарушение правил подготовки пациентом или алгоритма венепункции медработником;
- прием лекарственных препаратов (карбамазепин, метилдопа, пеницилламин, токаинид, нифедилин и др.);
- наличие у пациента уремии (отравление продуктами белкового обмена) может дать ложноотрицательный результат.
Важно! Интерпретация результатов всегда проводится комплексно. Поставить точный диагноз на основании только одного анализа невозможно.
Антинуклеарные антитела в крови (результат положительный)
Обнаружение антинуклеарных антител может указывать на следующие заболевания:
- системная красная волчанка;
- панкреатит (воспаление поджелудочной железы) аутоиммунной природы;
- сахарный диабет I типа;
- аутоиммунные поражения щитовидной железы;
- злокачественные поражения внутренних органов;
- дерматомиозит;
- аутоиммунный гепатит;
- заболевания соединительной ткани;
- болезнь Шегрена;
- миастения;
- склеродермия;
- ревматоидный артрит;
- диффузный интерстициальный фиброз (поражение легочной ткани в хронической форме);
- синдром Рейно (ишемия мелких концевых артерий) и т.д.
Повышение титра АНА при количественном иммуноферментном анализе (РНИФ) говорит о:
- Системной красной волчанке в активной стадии – титр повышен до 98%;
- Болезни Крона (гранулематозное поражение пищеварительного тракта) – около 15%;
- язвенном колите (воспаление слизистой толстой кишки) – от 50 до 80%;
- склеродермии;
- болезни Шегрена;
- Болезни Рейно – до 20%;
- синдроме Шарпа (смешанное заболевание соединительной ткани);
- лекарственной волчанке.
Важно! При расшифровке анализа важно понимать, что отрицательный результат не исключает наличия аутоиммунных нарушений у пациентов с характерной симптоматикой. Положительный результат без клинической картины аутоиммунного процесса необходимо интерпретировать с учетом данных других лабораторных анализов.
Подготовка
Биоматериал для проведения ИФА на антинуклеарный фактор – сыворотка венозной крови.
- Венепункция выполняется в утреннее время и натощак (с момента последнего приема пищи должно пройти минимум 8 часов). Пить чистую негазированную воду можно;
- Непосредственно перед забором крови (за 2-3 часа) не рекомендуется курить и пользоваться никотинозаменителями (пластырь, спрей, жевательная резинка);
- Накануне и в день процедуры нельзя употреблять алкогольные и энергетические напитки, волноваться и заниматься тяжелой физической работой;
- За 15 дней до теста по согласованию с лечащим врачом отменяется прием лекарственных препаратов (антибиотики, противовирусные, гормоны и др.);
- Для получения достоверного результата анализ желательно повторить через 2 недели.
Ответ ИФА можно ожидать в течение 1 суток после венепункции, а в экстренных ситуациях, когда обследование проводится по «cito» – около 3 часов.
Источники:
- Информация с сайтов лаборатории Инвитро и Хеликс;
- Данные Национальной медицинской библиотеки США PubMed.
Другие анализы ревматологического скрининга
- АСЛ-О (Анти-стрептолизин-О)
- СРБ (С-реактивный белок)
- РФ (Ревматоидный фактор)
Источник
Что такое антинуклеарные антитела
Свечение антител в микроскопе
Антинуклеарные антитела — это патологические компоненты иммунной системы, ведущие к возникновению аутоиммунных заболеваний соединительной ткани, таких как системная красная волчанка, синдром и болезнь Шегрена, системная склеродермия.
Антинуклеарные антитела представляют из себя белки-иммуноглобулины, вырабатываемые защитными клетками человеческого тела (лимфоцитами). Из-за сбоя в работе иммунной системы ядра собственных клеток распознаются ею как чужеродные и вредные, что приводит к ошибочной выработке антител к разным компонентам клеточных ядер.
Всего выявлено более 190 компонентов ядра, к которым может вырабатываться патологический иммунный ответ, однако диагностическое значение имеют около 20 из них. К наиболее важным относят антитела к одно- и двуспиральной ДНК, гистонам, нуклеосомам и рибосомальному P-протеину.
Ядро содержится практически в любой клетке человеческого тела, за исключением некоторых кровяных. Оно находится внутри клетки и защищено собственной оболочкой, цитозолем и внешней клеточной мембраной. Антитела находятся во внеклеточной среде и чаще всего не могут напрямую контактировать с ядром, повреждая его. Однако при любом нарушении целостности клеточных оболочек антинуклеарные антитела, если они имеются в организме, способны связываться с компонентами ядра, образуя нерастворимые комплексы. Именно они и являются причиной возникновения разнообразных аутоиммунных заболеваний соединительной ткани.
Механизм образования
Антинуклеарные антитела и рецепторы
В норме собственные клетки организма даже в разрушенном состоянии иммунного ответа не вызывают. Однако сбои в работе иммунной системы наблюдаются постоянно даже у здоровых лиц, и при неблагоприятном стечении обстоятельств иммунитет может сформироваться на любой из компонентов клетки. В организме предусмотрена своеобразная система «отбраковки» патологических антител, в большинстве случаев она срабатывает, антитела уничтожаются, не вызывая болезнь.
Однако в некоторых случаях антинуклеарные антитела возникают в больших количествах и оказываются вовремя не распознаны организмом как патологические. Чаще всего это бывает при обширных солнечных ожогах, когда миллионы клеток кожи оказываются повреждены ультрафиолетом. Ядра погибших клеток оказываются непосредственно во внутренней межклеточной среде организма, где их встречают иммунные клетки — лимфоциты и макрофаги.
ДНК из ядер, гистоновые белки и другие белковые и нуклеиновые компоненты могут быть настолько повреждены ультрафиолетовым излучением, что в некоторых случаях изменяются до неузнаваемости. Именно это и провоцирует иммунные клетки вырабатывать против них антитела, как против чужеродных веществ.
Нормальные значения АНА
Отсутствие антител — вариант нормы
Нормальным значением является полное отсутствие антинуклеарных антител. При скрининговом ИФА-исследовании отрицательный ответ чаще всего записывается с указанием титра (разведения), пример: «Отрицательно, < 1:160». При развернутом иммуноблот-исследовании на антитела к разным компонентам ядра клетки, ответ зачастую записывается для каждого вида антител по отдельности. Например: «АТ к двуспиральной ДНК — отрицательно; АТ к PCNA — отрицательно; АТ к Scl-70 – отрицательно».
Иногда у здоровых лиц обнаруживаются AHA в небольших количествах (слабоположительный результат), что может свидетельствовать о генетической предрасположенности к аутоиммунным заболеваниям. Результат анализа «Сомнительно» может быть вызван наличием антител в очень низкой концентрации, которая находится около пороговых значений чувствительности медицинской тест-системы для анализа. Чаще всего после получения результата «Сомнительно» анализ рекомендуется повторить через 4-5 недель.
Причины повышения ANA
Повышение антител при системной склеродермии
Положительный результат анализа может свидетельствовать о наличии одного или нескольких следующих заболеваний:
- системная красная волчанка,
- лекарственная волчанка,
- синдром или болезнь Шегрена,
- системная склеродермия,
- синдром Шарпа.
Гепатит может стать причиной слабоположительного результата
Слабоположительный результат может быть вызван как наличием вышеперечисленных заболеваний, так и заболеваниями, не связанными с системой иммунитета. Перечислим основные болезни, которые могут его вызвать:
- ревматоидный артрит, в том числе ювенильный (детский),
- первичная легочная гипертензия,
- идиопатический легочной фиброз,
- синдром Рейно (дигитальный васкулит),
- болезнь Крона,
- узелковый периартериит,
- гепатиты различной природы,
- злокачественные новообразования (опухоли),
- некоторые инфекционные болезни (туберкулез, шистосомоз, малярия).
Слабоположительный результат анализа иногда выявляется у здоровых лиц, чаще у женщин в возрасте старше 60 лет.
Показания к исследованию
Показанием для проведения анализа могут быть боли в суставах
Исследование показано при симптомах, не исключающих аутоиммунную патологию соединительной ткани:
- длительно сохраняющаяся повышенная температура тела;
- беспричинное снижение массы тела;
- уменьшение регионарных лимфатических узлов;
- болезненность и скованность в суставах, когда не установлена иная причина патологии;
- боли в мышцах;
- кожная сыпь, особенно на лице в виде «красной бабочки» (нос и щеки рядом с крыльями носа);
- перикардит и плеврит неясной причины;
- изменения в общем и биохимическом анализе крови, когда исключены другие виды патологии.
Также анализ назначается при имеющемся аутоиммунном заболевании для контроля за эффективностью лекарственной терапии.
Подготовка к анализу и методика проведения исследования
Определение антител может быть выполнено в нескольких вариантах
Анализ сдается утром натощак либо в другое время, однако не ранее 5-6 часов после последнего приема пищи. Также желательно не принимать никакие лекарственные средства до взятия крови на исследование.
Существует несколько вариантов проведения анализа, отличающихся по своей точности и возможности количественной оценки концентрации антител.
Скрининговое ИФА-исследование (иммуноферментный анализ) позволяет выявить наличие суммарных антинуклеарных антител и их титра. К плюсам метода относится его относительная дешевизна и возможность выяснить, необходимы ли расширенные исследования. При отрицательном результате анализа дальнейшие исследования чаще не показаны.
Непрямая флуоресцентная микроскопия — это метод, основанный на окрашивании антител специальными веществами, дающими под ультрафиолетовым светом зеленое свечение. Тип и характер свечения позволяет врачу лабораторной диагностики определить, с какими компонентами клетки связались антитела, а также примерно узнать их количество.
Иммуноблот-исследование позволяет определить наличие каждого типа антинуклеарных антител по отдельности. Чаще всего этот анализ назначается после положительного результата другого исследования для уточнения диагноза.
Факторы, влияющие на результат
Лекарственные препараты способны искажать результат
Ложноположительный результат анализа может быть вызван приемом некоторых групп лекарственных препаратов:
- антидепрессанты;
- антиаритмики (бисопролол, биосотал);
- противосудорожные препараты (карбамазепин, фенитоин);
- препараты для лечения атеросклероза (ловастатин, аторвастатин);
- средства для понижения артериального давления.
Прием лекарственных средств желательно ограничить за 1-2 дня до анализа в строгом соответствии с рекомендациями лечащего врача.
Лечение отклонений от нормы
Диагноз и лечение определяет врач
Для лечения аутоиммунных заболеваний соединительной ткани применяются следующие группы препаратов:
- кортикостероиды (позволяют уменьшить иммунный ответ организма и снизить концентрацию патологических антител);
- антифиброзные препараты (уменьшаю явления склерозирования соединительной ткани);
- иммуносупрессивные средства;
- ангиопротекторы (препараты, защищающие сосуды);
- нестероидные противовоспалительные средства.
Стоит заметить, что диагностика данной группы заболеваний сложна и требует ряда дополнительных исследований, кроме выявления антинуклеарных антител и их вида. Диагноз чаще всего не может быть установлен после однократного исследования крови.
Источник
Интерпретация результатов
Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.
Единицы измерения: титр.
Интерпретация результатов
Результатом определения АНФ является титр, представляющий собой значение конечного разведения сыворотки, при котором сохраняется значимая флюоресценция ядра. Чем выше знаменатель дроби, тем больше разведение сыворотки, тем больше антител в сыворотке больного. Высокие титры разведения сыворотки отражают высокую аффинность и концентрацию аутоантител.
Выявление высоких тиров (1/640 и выше) указывает на высокую вероятность системного ревматического заболевания или аутоиммунного заболевания печени и требует внимательного клинического, лабораторного и инструментального обследования. Отсутствие повышенных титров антинуклеарного фактора значительно снижает вероятность системных аутоиммунных заболеваний.
В низких титрах (до 1/160) антинуклеарный фактор может отмечаться у 1-2% здоровых лиц и родственников больных с системными заболеваниями. Частота положительных титров в популяции несколько увеличивается с возрастом. Низкие титры антинуклеарных антител могут встречаться при многих аутоиммунных, инфекционных и онкологических заболеваниях. Отсутствие высоких титров антинуклеарных антител значительно снижает вероятность системного ревматического процесса и может использоваться скорее для исключения, чем подтверждения диагноза.
Повышение титров АНФ в динамике указывает на обострение системного заболевания, так при СКВ титр коррелирует с тяжестью процесса и снижается при эффективной терапии.
Кроме титра сыворотки, при положительном результате анализа описывается тип свечения ядра. Он обусловлен широким спектром антител, которые находят свои мишени внутри клетки. Описано более 20 типов свечения, однако в клинической практике используется 8 из них:
Референсные значения: < 1:160
| Тип свечения | Мишени антител (примеры) | Заболевания |
| Гомогенный | Хроматин (дсДНК, гистоны) | СКВ, склеродермия |
Гранулярный (мелко- ; крупно-) | Нуклеопротеины (RNP, Sm, SS-A, SS-B) | СКВ, смешанное заболевание соединительной ткани, дискоидная и подострая кожная красная волчанка, ревматоидный артрит, ювенильный ревматоидный артрит, синдром Шегрена |
| Ядрышковый | Антигены ядрышка (фибриллярин) | Диффузная склеродермия |
| Центромерный | Центромера в хромосоме (CENT-B) | Склеродермия |
| Цитоплазматический | Антигены цитоплазмы (тРНК-синтетазы, рибосомы, органеллы) | Аутоиммунные заболевание печени, системная красная волчанка, полимиозит |
| Цитоплазматический (митохондриальный) | Антигены митохондрий (антигены пируват-декарбоксилазного комплекса) | Первичный билиарный цирроз |
| Точки в ядре | Нуклеопротеины | Аутоиммунные заболевание печени |
Иногда могут быть описаны 2 типа свечения, при котором один в низких титрах маскирует другой. При выявлении положительного результата АНФ необходимо постараться установить антигенные мишени антинуклеарных антител, с помощью тестов выявления антител к двуспиральной ДНК (№126) и антител к нуклеосомам (№956), иммуноблота антинуклеарных антител (№827), иммуноблота антител при склеродермии (№826), иммуноблота антител при полимиозите (№ 939) и определения антител к кардиолипину (№№ 967- 969, 997).
Источник
