Анализ крови на антигены впг 1 и 2 типа методом пцр

[09-013]
Herpes Simplex Virus 1/2, ДНК [реал-тайм ПЦР]

320 руб.

Исследование для выявления возбудителя герпес-вирусной инфекции 1-го и 2-го типа (Herpes Simplex Virus 1/2), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) вируса простого герпеса.

Синонимы русские

Вирус герпеса, вирус простого герпеса 1-го (HSV-1) и 2-го (HSV-2) типа, определение герпеса по ДНК.

Синонимы английские

Herpes Simplex Virus, Type 1 and Type 2, HSV-1 or HSV-2 IgM or IgG, HSV-1, HSV-2, HHV1, HHV2.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок из зева (ротоглотки), секрет простаты, первую порцию утренней мочи, соскоб из прямой кишки, слюну, соскоб с эрозивно-язвенных элементов, соскоб урогенитальный, эякулят, венозную, капиллярную кровь, ликвор.

Общая информация об исследовании

Методом ПЦР возможно выявить даже небольшое количество вирусных частиц в биологическом материале. Он позволяет идентифицировать вирусы герпеса вне зависимости от срока заражения даже в тот период, когда антитела еще не образовались.

Наиболее распространенными являются 1-й и 2-й типы герпеса. Оба заразные и способствуют появлению на слизистых оболочках маленьких пузырьков (везикул), которые лопаются, образуя открытые ранки. При HSV-1 пузырьки появляются вокруг рта и в ротовой полости, тогда как HSV-2 обычно поражает участки в районе гениталий.

Вирус простого герпеса может передаваться через кожный контакт при наличии на коже везикул, а иногда и при отсутствии на ней видимых поражений. HSV-2 часто относят к болезням, передаваемым половым путем, однако заражение герпесом HSV-1 также может произойти, например, через оральный секс. По данным ВОЗ, от 50  % до 80  % взрослого населения развитых стран инфицировано герпесом 1-го типа и около 20  % – 2-го типа. Поскольку симптомы 2-го типа едва заметны, 90  % инфицированных им могут не подозревать о своей инфекции.

В случае первичного инфицирования на месте заражения через две недели обычно образуются болезненные пузырьки, которые, как правило, проходят через четыре недели. Они появляются на половых органах, вокруг ануса, на ягодицах либо на бедрах, после чего могут лопаться. Кроме того, возможно появление симптомов, напоминающих грипп, например озноба и болей в горле.

Однако пузырьки при герпесе образуются не всегда. Иногда проявления болезни бывают настолько слабыми, что остаются незамеченными либо ошибочно принимаются за что-то другое, например за укусы насекомых или за аллергию. После попадания инфекции в организм и ее распространения вирус герпеса находится в латентной форме. При стрессе или других заболеваниях, приводящих к снижению иммунитета, он может активизироваться заново. В большинстве случаев простой герпес не опасен для здоровья, однако он может вызывать тяжелые заболевания: неонатальный герпес (если ребенок заразится при родах от матери, инфицированной генитальным герпесом) и энцефалит. Они способны привести к серьезным неизлечимым неврологическим заболеваниям и даже к смерти. Риск заражения герпесом повышают следующие факторы:

• болезни, при которых происходит подавление иммунной системы (например, ВИЧ/СПИД),
• трансплантация органов.

В настоящее время излечение от герпеса не представляется возможным, тем не менее существуют противовирусные препараты, которые подавляют его распространение, а также укорачивают продолжительность острой фазы вирусной инфекции и смягчают симптомы болезни.

Для чего используется исследование?

• Для выявления герпес-вирусной инфекции половых органов у мужчин и женщин и контроля за ее лечением.
• Для проверки женщины на герпес до и во время беременности (если существует риск заражения).

Когда назначается исследование?

• При необходимости подтвердить или опровергнуть факт инфицирования герпесом половых органов.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Положительный результат

• Организм поражен вирусом. Результат указывается в крестах в зависимости от количества генетического материала, выявленного при исследовании.

Отрицательный результат

• Чаще всего отсутствие инфицирования половых органов вирусом герпеса.

Что может влиять на результат?

• Противовирусная терапия способна снижать количество вируса в клетках эпителия, однако в силу высокой чувствительности метода ПЦР это редко приводит к ложноотрицательным результатам.
• Ошибки на этапе взятия биологического материала, когда в образец для исследования не попадает достаточное количество инфицированных вирусом клеток, могут вести к ложноотрицательным показателям.



Важные замечания

• Наиболее опасен герпес для новорождённых, которые заразились от матери, и для пациентов с ослабленным иммунитетом.
• Герпес повышает риск заражения ВИЧ-инфекцией. Более того, он может делать ВИЧ-инфицированных пациентов еще более заразными, увеличивая в их крови количество вируса иммунодефицита.
• Вирус простого герпеса в сочетании с вирусом папилломы повышает риск развития рака шейки матки.

Также рекомендуется

• Herpes Simplex Virus 1/2, IgM
• Herpes Simplex Virus 1/2, IgG, титр
• Herpes Simplex Virus 1/2, ДНК [реал-тайм ПЦР]
• Herpes Simplex Virus 1/2, иммунофлюоресценция
• Human Papillomavirus высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59), ДНК генотипирование [реал-тайм ПЦР]

Кто назначает исследование?

Гинеколог, уролог, дерматолог, инфекционист, педиатр.

После заражения герпетической инфекцией вирус встраивается в структуру ДНК нервной системы. В отсутствии заболеваний и иных факторов, ослабляющих иммунитет, возбудитель не несёт опасности для организма. Однако перед беременностью, а также лицам с иммунодефицитом, необходимо провести анализ на ВПГ (вирус простого герпеса). В первом случае возбудитель способен нарушить внутриутробное развитие ребёнка, во втором — вызвать тяжёлые болезни внутренних органов.

Показания к сдаче анализа

Анализ на вирус простого герпеса 1 и 2 типа (HSV 1 и 2) проводится несколькими способами. К подобным исследованиям прибегают в следующих случаях:

• заболевание протекает без выраженных признаков (особенно важно проводить диагностику инфекций, когда идёт развитие генитального герпеса);
• у женщин, планирующих беременность, ранее не проявлялись признаки герпеса на слизистой оболочке половых органов или на других участках тела;
• частые рецидивы герпеса;
• частые обострения хронических заболеваний;
• бесплодие и иные болезни органов репродуктивной системы неустановленной этиологии.

Анализ на HSV 1 и 2 также рекомендован лицам, у которых повышен риск развития герпеса: пациенты, перенёсшие операцию по пересадке органов, химиотерапию. Не менее важно пройти процедуру больным ВИЧ и аутоиммунными патологиями.

Сдать анализ на антитела к ВПГ 1 и 2 потребуется в обязательном порядке как до, так и после зачатия. Объясняется это тем, что в отсутствии вируса в организме контакт с носителем возбудителя болезни приводит к заражению не только матери, но и будущего ребёнка. Первичная инфекция во время беременности провоцирует нарушения в развитии или гибель плода. Кроме того, чтобы избежать заражения новорождённого во время родов, рекомендуется провести анализ крови на ВПГ 2. В случае если результаты исследования покажут наличие герпеса этого типа, нередко назначают кесарево сечение.

Обнаружить ВПГ можно с помощью следующих методов:

1. Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Этот анализ крови на вирус герпеса 1 и 2 типа способен выявить наличие ДНК вируса в организме человека.
2. Иммуноферментный анализ (ИФА). Метод основан на выявлении иммуноглобулинов, которые организм вырабатывает после заражения ВПГ. ИФА помогает диагностировать вирус, даже если инфицирование было давно.

В случае если проведённый анализ на герпес 1 и 2 типа не дал точного результата, применяется реакция иммунофлюоресценции (РИФ). Данный метод также предусматривает исследование крови, взятой у пациента.

Если герпес часто проявляется на губах, необходимо оценить состояние иммунной защиты, для чего назначается иммунограмма. В тяжёлых ситуациях применяется биохимический анализ крови, с помощью которого выявляются нарушения в работе внутренних органов. Этот метод особенно актуален в случаях обострения генитальной инфекции.

Полимеразная цепная реакция

ПЦР-диагностика проводится с помощью жидкости, взятой из пузырьковой сыпи, или соскобов со слизистых оболочек. Это исследование наиболее результативно непосредственно после инфицирования. Определение ДНК методом ПЦР проводится с целью диагностирования типа вируса.

Эффективность полимеразной цепной реакции объясняется тем, что организм после заражения вырабатывает антигены к ВПГ, которые выявляются в исследуемом материале.

Подготовка к процедуре

Диагностику инфекций проводят в лаборатории. Прежде чем сдать материал на ПЦР, пациенту необходимо:

• в течение 3-4 дней избегать половых контактов;
• за неделю отказаться от спринцевания и использования вагинальных свечей;
• отказаться от посещения бань, саун, бассейнов;
• не потреблять алкогольные напитки, жареные и солёные продукты;
• по возможности ограничить приём медикаментов.

Полимеразная цепная реакция не проводится в период острого течения инфекционных заболеваний, после сильного переутомления или стресса. Каждый из приведённых факторов может повлиять на результаты исследования.

Результаты

Анализ на выявление антигенов вируса простого герпеса позволяет оценить концентрацию частицы возбудителя во взятом материале. В случае если исследование дало положительный результат, говорят о наличии инфекции в организме. В подобных ситуациях назначается лечение противовирусными препаратами либо корректируется проводимая терапия.

Когда исследование даёт результат с отрицательным значением, то процедуру необходимо повторить. Если и следующий анализ не выявил наличие антигенной нагрузки, то противовирусное лечение не проводится.

Биопсия как дополнение ПЦР

Важная особенность ПЦР заключается в том, что результаты анализов на герпес 1 и 2 типов будут положительны при условии наличия вируса в собранном материале. Однако со временем концентрация возбудителя в отделяемых жидкостях снижается. При этом сохраняется воспаление тканей органов репродуктивной системы.

Этот процесс развивается из-за того, что вирус герпеса меняет иммунный ответ, и организм начинает атаковать собственные клетки. В итоге полимеразная цепная реакция не даёт положительный результат при хроническом течении заболевания. В подобных обстоятельствах менее информативным становится анализ на антитела класса М и G к вирусу простого герпеса (ИФА).

В таких условиях назначается провокационный тест, в рамках которого пациенту назначается приём «Пирогенала» или других препаратов, после чего исследуется кровь на предмет обнаружения частиц возбудителя.

Дополнительно проводится биопсия тканей органов, которые, как предполагает врач, поражены герпесом. Материал забирается из полости матки, предстательной железы или других отделов репродуктивной системы.

Цитопатические изменения клеток герпес определяются посредством обработки взятых образцов формалином и парафином. Вирус, встраиваясь в организм, повреждает ткани изнутри. Поэтому, если в ходе исследования выявляются изменённые ядра и цитоплазма клеток, диагностируется наличие герперовируса. Кроме того, соответствие норме лейкоцитов в мазке также указывает на инфицирование данным возбудителем.

Иммуноферментный анализ

После заражения герперовирусом организм человека вырабатывает особые белки (антитела), которые подавляют активность инфекции. Эти иммуноглобулины разносятся по телу и начинают бороться с возбудителем в зонах, в которые тот «спускается».

Выделяют несколько классов антител, которые выявляются с помощью иммуноферментного анализа:

1. IgM. Антитела этого типа формируются в течение первых двух недель после заражения. В случае если ИФА покажет наличие IgM в крови, то говорят о недавнем инфицировании либо об обострении герпеса. Со временем концентрация этих антител постепенно снижается.
2. IgG. Антитела появляются спустя некоторое время после заражения (примерно на 12-16 день). Как и в случае с IgM концентрация IgG повышается при рецидивах заболевания.
3. IgG к предранним белкам герперовируса. Эти антитела также возникают во время обострения болезни.

В рамках иммуноферментного анализа оценивается авидность иммуноглобулинов IgG. Данный показатель определяет способность антител связываться с вирусными частицами. При обострении болезни авидность низкая. По мере прогрессирования герпеса показатель постепенно повышается. Авидность помогает уточнить, когда произошел рецидив.

Расшифровка

В расшифровке анализа крови на герпес 1 и 2 типа указывают обычно herpes simplex титр. Исследование даёт следующие результаты:

1. Отсутствие антител IgG и IgM. Пациент не является носителем герпеса.
2. Отсутствие IgM и наличие ранних и поздних IgG. Результат свидетельствует о недавнем заражении (подтверждается с помощью ПЦР) или рецидиве болезни.
3. Наличие только поздних IgG. Результат анализа показывает наличие вируса в организме в латентном состоянии.
4. Наличие IgM и IgG (в том числе и поздних). Результат анализа сообщает о недавнем обострении или заражении.
5. Результаты анализа на авидность расшифровываются следующим образом:
6. 50-60%. Такой результат требует повторного проведения иммуноферментного анализа через 2 недели.
7. Ниже 50%. Показатель свидетельствует о недавнем заражении.
8. Выше 60%. Выявлен хронический герпес.

В случае если результат исследования окажется положительным, то пациенту необходимо обратиться к терапевту (дерматологу) при герпесе, локализующемся на теле, или гинекологу (урологу) — на половых органах.

Реакция иммунофлюоресценции

Эффективность РИФ напрямую зависит от уровня концентрации вируса в собранном материале. Суть метода сводится к следующему: в кровь вводятся специальные красящие вещества, в состав которых включают антитела к герпесу. В случае если в организме присутствует возбудитель, последний вступает в химическую реакцию. Красящие вещества подсвечивают вирусные частицы под микроскопом.

РИФ для выявления герпеса применяется редко. Объясняется это высокой чувствительностью метода к различным инфекциям. Поэтому, если в организме человека присутствуют другие вирусные частицы, результат РИФ окажется ложноположительным.

Другие методики

Иногда для выявления герпеса в организме применяется культуральный метод, в рамках которого производится забор клеток. Последние затем заражаются вирусными частицами, после чего оценивается характер протекающих процессов.

При необходимости назначаются аллергопробы, которые исключают или подтверждают наличие у пациента повышенной чувствительности к определённым раздражителям. Данная процедура проводится в случаях, когда не удаётся дифференцировать по внешним признакам аллергическую реакцию и обострение герпеса из-за схожести в симптомах.

Список анализов, необходимых для постановки диагноза, составляется индивидуально для каждого пациента. Герперовирусы 1 и 2 типов не создают угрозы для организма. При этом частые проявления инфекции свидетельствуют о резком ослаблении иммунитета. В подобных случаях нужно обращаться к иммунологу.