Анализ крови на аллоиммунные антитела
Метод определения
Метод агглютинации + гель-фильтрации (карточки).
Инкубация стандартных типированных эритроцитов с исследуемой сывороткой и фильтрация путём центрифугирования смеси через гель, импрегнированный полиспецифическим антиглобилиновым реагентом. Агглютинированные эритроциты выявляются на поверхности геля или в его толще.
В методе используются суспензии эритроцитов доноров группы 0(1), типированные по антигенам эритроцитов RH1(D), RH2(C), RH8(Cw), RH3(E), RH4(c), RH5(e), KEL1(K), KEL2(k), FY1(Fy a) FY2(Fy b), JK(Jk a), JK2(Jk b), LU1(Lu a), LU2(LU b), LE1(LE a), LE2(LE b), MNS1(M), MNS2(N), MNS3 (S), MNS4(s), P1 (P).
Исследуемый материал
Цельная кровь (с ЭДТА)
Антитела к клинически наиболее важным эритроцитарным антигенам, в первую очередь резус-фактору, свидетельствующие о сенсибилизации организма к этим антигенам. Резус-антитела относятся к так называемым аллоиммунным антителам.
Аллоиммунные антиэритроцитарные антитела (к резус-фактору или другим эритроцитарным антигенам) появляются в крови при особых условиях — после переливания иммунологически несовместимой донорской крови или при беременности, когда эритроциты плода, несущие иммунологически чужеродные для матери отцовские антигены, проникают через плаценту в кровь женщины. У неиммунных резус-отрицательных людей антител к резус-фактору нет.
В системе резус различают 5 основных антигенов, основным (наиболее иммуногенным) является антиген D (Rh), который обычно подразумевают под названием резус-фактор. Помимо антигенов системы резус есть ещё ряд клинически важных эритроцитарных антигенов, к которым может возникать сенсибилизация, вызывающая осложнения при переливании крови.
Метод скринингового исследования крови на присутствие аллоиммунных антиэритроцитарных антител, использующийся в Независимой лаборатории ИНВИТРО, позволяет, помимо антител к резус-фактору RH1(D), выявить в исследуемой сыворотке аллоиммунные антитела и к другим эритроцитарным антигенам. Ген, кодирующий резус-фактор D (Rh), является доминантным, аллельный ему ген d — рецессивным (резус-положительные люди могут иметь генотип DD или Dd, резус-отрицательные — только генотип dd).
Во время беременности резус-отрицательной женщины резус-положительным плодом возможно развитие иммунологического конфликта матери и плода по резус-фактору. Резус-конфликт может привести к выкидышу или развитию гемолитической болезни плода и новорожденных. Поэтому определение группы крови, резус-фактора, а также наличия аллоиммунных антиэритроцитарных антител должно проводиться при планировании или во время беременности для выявления вероятности иммунологического конфликта матери и ребёнка. Возникновение резус-конфликта и развитие гемолитической болезни новорожденных возможно в том случае, если беременная резус-отрицательна, а плод — резус-положителен. В случае, если у матери резус-антиген положительный, а у плода отрицательный, конфликт по резус-фактору не развивается. Частота развития резус-несовместимости составляет 1 случай на 200 — 250 родов.
Гемолитическая болезнь плода и новорождённых — гемолитическая желтуха новорожденных, обусловленная иммунологическим конфликтом между матерью и плодом из-за несовместимости по эритроцитарным антигенам. Болезнь обусловлена несовместимостью плода и матери по D-резус- или АВО- (групповым) антигенам, реже имеет место несовместимость по другим резус- (С, Е, с, d, e) или М-, М-, Kell-, Duffy-, Kidd-антигенам. Любой из указанных антигенов (чаще D-резус-антиген), проникая в кровь резус-отрицательной матери, вызывает образование в её организме специфических антител. Проникновению антигенов в материнский кровоток способствуют инфекционные факторы, повышающие проницаемость плаценты, мелкие травмы, кровоизлияния и другие повреждения плаценты. Последние через плаценту поступают в кровь плода, где разрушают соответствующие антигенсодержащие эритроциты.
Предрасполагают к развитию гемолитической болезни новорожденных нарушение проницаемости плаценты, повторные беременности и переливания крови женщине без учёта резус-фактора и др. При раннем проявлении заболевания иммунологический конфликт может быть причиной преждевременных родов или выкидышей. Во время первой беременности резус-положительным плодом у беременной с Rh «-» риск развития резус-конфликта составляет 10 — 15%. Происходит первая встреча организма матери с чужеродным антигеном, накопление антител происходит постепенно, начиная, приблизительно с 7 — 8 недели беременности. Риск несовместимости возрастает с каждой последующей беременностью резус-положительным плодом, независимо от того, чем она закончилась (искусственным абортом, выкидышем или родами, операцией при внематочной беременности), при кровотечениях во время первой беременности, при ручном отделении плаценты, а также если роды проводятся путём кесарева сечения или сопровождаются значительной кровопотерей при переливании резус-положительной крови (в том случае, если они проводились даже в детском возрасте).
Если последующая беременность развивается с резус-отрицательным плодом, несовместимость не развивается. Всех беременных женщин с Rh «-» ставят на специальный учёт в женской консультации и проводят динамический контроль над уровнем резус-антител. В первый раз анализ на антитела надо сдать с 8-й до 20-й недели беременности, затем периодически проверять титр антител: 1 раз в месяц до 30-й недели беременности, дважды в месяц до 36-й недели и 1 раз в неделю до 36-й недели. Прерывание беременности на сроке менее 6 — 7 недель может не привести к формированию у матери Rh-антител. В этом случае при последующей беременности, если у плода будет положительный резус-фактор, вероятность развития иммунологической несовместимости вновь будет равна 10 — 15 %. Проведение тестирования на аллоиммунные антиэритроцитарные антитела важно также при общей предоперационной подготовке, особенно для людей, которым ранее уже проводилось переливание крови.
Источник
Что такое аллоиммунные антитела
Условия для резус-конфликта
Аллоиммунные антитела — ответ иммунной системы, образующийся при резус-конфликте. Резус-конфликтные состояния обусловлены проникновением элементов крови с положительным резусом в резус-отрицательную кровяную систему. Чаще всего возникает при беременности женщины с отрицательным резусом, когда её малыш в утробе получает положительный резус от отца. Другая причина — переливание крови резус-отрицательному пациенту от резус-положительного донора.
Кровь каждого человека обладает индивидуальными характеристиками, среди которых важным элементом является резус-фактор. Если эритроцит имеет на своей поверхности антиген D, резус определяется как положительный (Rh+). Если антигена на эритроцитах нет, резус-фактор крови определяется как отрицательный (Rh-). Наличие либо отсутствие резуса никак не влияет на состояние здоровья, важное клиническое значение разница в резусах обретает при смешивании крови Rh- с кровью Rh+.
Система иммунитета человека с Rh- воспринимает антиген D как чужеродного агента и вырабатывает против него аллоиммунные антитела. При беременности такая ситуация может привести к выкидышам, поражению плода либо образованию у ребёнка гемолитической болезни. Но конфликт резусов происходит не всегда, а только при попадании крови малыша в кровеносную систему матери. Это может случиться при отслойке плаценты, инвазивных процедурах, во время родов.
Показания к проведению исследования
Показание для анализа — резус-конфликтные родители
Анализ на наличие аллоиммунных антител в обязательном порядке назначается беременной женщине с Rh-, если второй родитель является резус-положительным.
Современная медицина располагает возможностью узнать резус малыша в утробе матери начиная с 10 недели беременности. Для этого нет необходимости проводить опасные мероприятия, нарушающие целостность плаценты, женщине достаточно сдать анализ крови из вены. Если резус ребёнка определяется как отрицательный, то никаких мер предпринимать не нужно, так как конфликта не произойдёт.
Если же ребёнок присвоил Rh+ второго родителя, что происходит в подавляющем большинстве случаев, то за состоянием беременной будут следить с особой тщательностью. Анализ на образование аллоиммунных тел в этом случае назначается каждый месяц до 28-30 недели беременности, затем каждые 2 недели, а с 36 недели вынашивания диагностика проводится каждую неделю. Это необходимо для своевременного выявления антител и помощи малышу, если аллоиммунные антитела обнаружены.
При первой нормально протекающей беременности появление антител маловероятно, так как кровеносная система малыша не смешивается с материнской. Но при травме живота или последствиях инфекции может произойти проникновение Rh+ в русло крови беременной. Поэтому травмы, падения, заболевания в период вынашивания ребёнка — повод в срочном порядке сдать внеочередной анализ на аллоиммунные антитела. Также анализ назначается при гемолитическом заболевании новорожденного, профилактики резус-конфликтных ситуаций при гемотрансфузиях, планировании зачатия, подготовке к хирургическому вмешательству.
Подготовка к анализу и ход исследования
Анализ на антитела является безопасным для беременной женщины
Особой подготовки не требуется, но рекомендуется соблюдать общие правила при прохождении диагностики крови: сдавать анализ натощак, избегать физического и эмоционального перенапряжения.
Выявление аллоиммунных антител осуществляется при помощи пробы Кумбса на основе реакции агглютинации. Сыворотку крови разводят специальным раствором в определённых пропорциях и помещают в отдельные ёмкости. К каждой ёмкости добавляют эритроциты с D антигеном, а затем антиглобулиновую сыворотку.
Если в крови пациента присутствуют аллоиммунные антитела, происходит слипание и выпадение в осадок эритроцитов, то есть реакция агглютинации. Показатели титров аллоиммунных антител определяются на основе пропорции разведённого раствора.
Интерпретация результатов
Иммуноглобулин как профилактика невынашивания беременности
Результат может быть представлен в 2 видах:
- Отрицательный. Антитела не выявлены. Если подобный результат сопровождает всю беременность, инъекции антирезус-иммуноглобулина женщине вводят уже после родов. Но часто для профилактики, даже при отсутствии в анализе антител, врач назначает введение иммуноглобулина на 24-28 неделе беременности.
- Положительный. На бланке анализа помимо знака «+» указаны титры антител, например 1:8. Врач будет наблюдать за количественным изменением антител при помощи последующих исследований крови. Критическим является уровень 1:32, но и при невысоких титрах могут развиваться тяжёлые осложнения для плода. Для устранения последствий выработки антител проводится ряд медицинских мероприятий.
Последствия образования аллоиммунных антител для матери и плода
Гемолитическая болезнь новорожденного при резус-конфликте
Аллоиммунные антитела вызывают распад эритроцитов плода, что приводит к повреждению почек и головного мозга малыша. Организм ребёнка начинает усиленную выработку эритроцитов взамен погибших, чтобы восстановить уровень кислорода. При этом увеличивается в размерах печень и селезёнка малыша, что является важным диагностическим показателем, который определяют внутриутробно при помощи УЗИ. При наличии этих специфичных признаков, а также при исследовании количества околоплодных вод, толщины плаценты, размеров вены пуповины может быть поставлен диагноз — гемолитическая болезнь плода.
Гемолитическая болезнь — опасное для малыша состояние, при несвоевременном выявлении может привести к гибели плода и, соответственно, тяжёлых осложнениях для матери ребёнка. После постановки диагноза беременную помещают в стационар, где в качестве первой помощи вводят антирезус-иммуноглобулин, а также проводят меры по укреплению плацентарного барьера при помощи глюкозы, витаминов и аскорбиновой кислоты. В тяжёлых случаях беременной назначается внутриутробное переливание резус-отрицательной крови ребёнку. Если улучшение не наступает, требуется провести досрочное родоразрешение.
Беременность должна протекать под наблюдением доктора
Женщина с Rh- должна знать, что последующие беременности с Rh+ плодом с большой вероятностью приводят к конфликтам резусов, так как при первом вынашивании малыша антитела образуются если не в течение беременности, то во время родоразрешения. В редких исключениях все беременности проходят без резусных конфликтов, но следить за возможным образованием антител следует постоянно. Это касается не только выношенной беременности, но и абортов, так как в крови матери могут образоваться антитела на маленьких сроках. При последующей беременности эти антитела начнут атаковать плод.
В наши дни резус-конфликт с образованием аллоиммунных антител поддаётся коррекции при своевременном выявлении, поэтому женщине, планирующей стать матерью либо уже зачавшей малыша, не стоит переживать, но тщательно следить за течением беременности, избегать возможности заражения инфекциями, полноценно питаться и наблюдаться у специалиста.
Источник
Метод определения
Метод агглютинации + гель-фильтрации (карточки).
Инкубация стандартных типированных эритроцитов с исследуемой сывороткой и фильтрация путём центрифугирования смеси через гель, импрегнированный полиспецифическим антиглобилиновым реагентом. Агглютинированные эритроциты выявляются на поверхности геля или в его толще.
В методе используются суспензии эритроцитов доноров группы 0(1), типированные по антигенам эритроцитов RH1(D), RH2(C), RH8(Cw), RH3(E), RH4(c), RH5(e), KEL1(K), KEL2(k), FY1(Fy a) FY2(Fy b), JK(Jk a), JK2(Jk b), LU1(Lu a), LU2(LU b), LE1(LE a), LE2(LE b), MNS1(M), MNS2(N), MNS3 (S), MNS4(s), P1 (P).
Исследуемый материал
Цельная кровь (с ЭДТА)
Антитела к клинически наиболее важным эритроцитарным антигенам, в первую очередь резус-фактору, свидетельствующие о сенсибилизации организма к этим антигенам. Резус-антитела относятся к так называемым аллоиммунным антителам.
Аллоиммунные антиэритроцитарные антитела (к резус-фактору или другим эритроцитарным антигенам) появляются в крови при особых условиях — после переливания иммунологически несовместимой донорской крови или при беременности, когда эритроциты плода, несущие иммунологически чужеродные для матери отцовские антигены, проникают через плаценту в кровь женщины. У неиммунных резус-отрицательных людей антител к резус-фактору нет.
В системе резус различают 5 основных антигенов, основным (наиболее иммуногенным) является антиген D (Rh), который обычно подразумевают под названием резус-фактор. Помимо антигенов системы резус есть ещё ряд клинически важных эритроцитарных антигенов, к которым может возникать сенсибилизация, вызывающая осложнения при переливании крови.
Метод скринингового исследования крови на присутствие аллоиммунных антиэритроцитарных антител, использующийся в Независимой лаборатории ИНВИТРО, позволяет, помимо антител к резус-фактору RH1(D), выявить в исследуемой сыворотке аллоиммунные антитела и к другим эритроцитарным антигенам. Ген, кодирующий резус-фактор D (Rh), является доминантным, аллельный ему ген d — рецессивным (резус-положительные люди могут иметь генотип DD или Dd, резус-отрицательные — только генотип dd).
Во время беременности резус-отрицательной женщины резус-положительным плодом возможно развитие иммунологического конфликта матери и плода по резус-фактору. Резус-конфликт может привести к выкидышу или развитию гемолитической болезни плода и новорожденных. Поэтому определение группы крови, резус-фактора, а также наличия аллоиммунных антиэритроцитарных антител должно проводиться при планировании или во время беременности для выявления вероятности иммунологического конфликта матери и ребёнка. Возникновение резус-конфликта и развитие гемолитической болезни новорожденных возможно в том случае, если беременная резус-отрицательна, а плод — резус-положителен. В случае, если у матери резус-антиген положительный, а у плода отрицательный, конфликт по резус-фактору не развивается. Частота развития резус-несовместимости составляет 1 случай на 200 — 250 родов.
Гемолитическая болезнь плода и новорождённых — гемолитическая желтуха новорожденных, обусловленная иммунологическим конфликтом между матерью и плодом из-за несовместимости по эритроцитарным антигенам. Болезнь обусловлена несовместимостью плода и матери по D-резус- или АВО- (групповым) антигенам, реже имеет место несовместимость по другим резус- (С, Е, с, d, e) или М-, М-, Kell-, Duffy-, Kidd-антигенам. Любой из указанных антигенов (чаще D-резус-антиген), проникая в кровь резус-отрицательной матери, вызывает образование в её организме специфических антител. Проникновению антигенов в материнский кровоток способствуют инфекционные факторы, повышающие проницаемость плаценты, мелкие травмы, кровоизлияния и другие повреждения плаценты. Последние через плаценту поступают в кровь плода, где разрушают соответствующие антигенсодержащие эритроциты.
Предрасполагают к развитию гемолитической болезни новорожденных нарушение проницаемости плаценты, повторные беременности и переливания крови женщине без учёта резус-фактора и др. При раннем проявлении заболевания иммунологический конфликт может быть причиной преждевременных родов или выкидышей. Во время первой беременности резус-положительным плодом у беременной с Rh «-» риск развития резус-конфликта составляет 10 — 15%. Происходит первая встреча организма матери с чужеродным антигеном, накопление антител происходит постепенно, начиная, приблизительно с 7 — 8 недели беременности. Риск несовместимости возрастает с каждой последующей беременностью резус-положительным плодом, независимо от того, чем она закончилась (искусственным абортом, выкидышем или родами, операцией при внематочной беременности), при кровотечениях во время первой беременности, при ручном отделении плаценты, а также если роды проводятся путём кесарева сечения или сопровождаются значительной кровопотерей при переливании резус-положительной крови (в том случае, если они проводились даже в детском возрасте).
Если последующая беременность развивается с резус-отрицательным плодом, несовместимость не развивается. Всех беременных женщин с Rh «-» ставят на специальный учёт в женской консультации и проводят динамический контроль над уровнем резус-антител. В первый раз анализ на антитела надо сдать с 8-й до 20-й недели беременности, затем периодически проверять титр антител: 1 раз в месяц до 30-й недели беременности, дважды в месяц до 36-й недели и 1 раз в неделю до 36-й недели. Прерывание беременности на сроке менее 6 — 7 недель может не привести к формированию у матери Rh-антител. В этом случае при последующей беременности, если у плода будет положительный резус-фактор, вероятность развития иммунологической несовместимости вновь будет равна 10 — 15 %. Проведение тестирования на аллоиммунные антиэритроцитарные антитела важно также при общей предоперационной подготовке, особенно для людей, которым ранее уже проводилось переливание крови.
Источник
