Анализ крови методом пцр при укусе клеща
[40-176]
ПЦР-диагностика «клещевых» инфекций
1870 руб.
Комплексное исследование крови, в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) выявляют возбудителей боррелиоза (Borrelia burgdorferi), моноцитарного эрлихиоза человека (Ehrlichia chaffeensis) и анаплазмоза человека (Anaplasma phagocytophilum).
Синонимы русские
ПЦР-диагностика боррелиоза, эрлихиоза и анаплазмоза.
Синонимы английские
Tick-borne diseases, polymerase chain reaction, PCR, Lyme disease, Human ehrlichiosis, Human anaplasmosis.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Клещевые инфекции представляют серьезную проблему для здоровья человека. Наибольшее значение имеют следующие клещевые инфекции:
- болезнь Лайма (клещевой боррелиоз), возбудителем заболевания является спирохета Borrelia burgdorferi;
- анаплазмоз, ранее известный как гранулоцитарный эрлихиоз, возбудителем заболевания является α-протеобактерия Anaplasma phagocytophilum.
В обоих случаях переносчиком инфекции являются иксодовые клещи Ixodess capularis, I. ricinus, I. pacificus и I. persulcatus. В России наибольшее значение имеют виды I. ricinus и I. persulcatus.
- моноцитарный эрлихиоз, возбудителем заболевания является α-протеобактерия Ehrlichia chaffeensis. Переносчик инфекции – иксодовые клещи Amblyomma americanum.
Клещевые инфекции обладают рядом общих свойств:
- Клиническая картина клещевых инфекций имеет много общих черт и неспецифична. Как правило, заболевание манифестирует в виде гриппоподобного синдрома с лихорадкой, головной болью, миалгией и артралгией. Дифференцировать клещевые инфекции между собой и с другими острыми инфекционными на основании только лишь клинической картины заболевания невозможно.
- Некоторые иксодовые клещи инфицированы сразу двумя (реже тремя) патогенами (коинфекция) и могут приводить к развитию у одного и того же человека сочетанной инфекции. Чаще описаны случаи сочетанного боррелиоза и анаплазмоза.
Учитывая эти особенности, при подозрении на клещевую инфекцию необходимо комплексное лабораторное исследование, включающее анализы на все значимые возбудители клещевых инфекций.
Для лабораторной диагностики клещевых инфекций могут применяться несколько методов, в том числе серологические тесты, анализ окрашенного мазка крови, бактериологический посев, иммуногистохимический анализ и методы молекулярной диагностики. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это один из методов молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в крови) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. Исследование обладает целым рядом преимуществ по сравнению с другими методами идентификации клещевых инфекций:
- Быстрота получения результата. ПЦР – это один из самых быстрых на сегодняшний день методов идентификации возбудителя. Благодаря этому, метод ПЦР считается самым опитмальным способом диагностики острой инфекции.
- Высокая чувствительность метода. Другой «быстрый» метод диагностики эрлихиоза – это окраска мазков крови по Гимзе. Обнаружение в мазках крови так называемых морул (скоплений микроорганизмов внутри лейкоцитов) – это характерный признак эрлихиоза и анаплазмоза. Морулы, однако, удается выявить не всегда: лишь в 3 % случаев моноцитарного эрлихиоза и 25-75 % случаев анаплазмоза. Чувствительность же ПЦР анализа достигает 85 % в отношении E. chaffeensis и 90 % в отношении A. phagocytophilum, что позволяет считать ПЦР самым точным среди быстрых методов диагностики клещевых инфекций.
- Высокая специфичность (60-85 %). Специфичность метода особенно важна для дифференциальной диагностики клещевых инфекций. Известно, что, например, серологические тесты на клещевые инфекции часто дают ложноположительный результат из-за наличия перекрестных реакций, обусловленных общими антигенными свойствами указанных микроорганизмов. Так как в ПЦР используются специфические для каждого из микроорганизмов праймеры, вероятность ложноположительного результата гораздо ниже.
Следует отметить ограничения метода ПЦР:
- Так как в реакции определяется ДНК как живых, так и погибших микроорганизмов, метод ПЦР не предназначен для оценки эффективности лечения: результат будет оставаться положительным еще в течение некоторого времени после начала эффективного лечения.
- Чувствительность ПЦР в меньшей степени, чем других методов идентификации возбудителя, зависит от приема антибиотиков. Наиболее точный результат, однако, будет получен при взятии образца биоматериала до начала лечения антибактериальными препаратами.
В диагностике клещевых инфекций также могут помочь дополнительные лабораторные исследования. Так, характерной чертой эрлихиозов является панцитопения и умеренное повышение печеночных трансаминаз. При тяжелом течении заболевания могу наблюдаться гипонатриемия, гипокальциемия, гипомагниемия, повышение креатинина и мочевины и признаки ДВС-синдрома.
Следует отметить, что иксодовые клещи также являются переносчиками вируса клещевого энцефалита. При необходимости это комплексное ПЦР-исследование может быть дополнено исследованием на вирус клещевого энцефалита.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики боррелиоза, моноцитарного эрлихиоза и анаплазмоза.
Когда назначается исследование?
- При наличии у пациента гриппоподобного синдрома (лихорадки, головной боли, миалгии и артралгии) в сочетании с указанием на укус клеща;
- при обнаружении у пациента с лихорадкой «лабораторных» признаков клещевых инфекций: панцитопения, повышение уровня печеночных трансаминаз.
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Положительный результат:
- боррелиоз (Borrelia burgdorferi), моноцитарный эрлихиоз человека (Ehrlichia chaffeensis) и/или анаплазмоз человека (Anaplasma phagocytophilum).
Отрицательный результат:
- норма.
Важные замечания
- Исследование не предназначено для оценки эффективности лечения заболевания.
Также рекомендуется
[02-029] Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой и СОЭ
[06-010] Аспартатаминотрансфераза (АСТ)
[06-003] Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
[07-092] Вирус клещевого энцефалита, IgM
[07-095] Вирус клещевого энцефалита, антиген (в ликворе)
Инфекционист, терапевт, врач общей практики.
Литература
- Ismail N, Bloch KC, McBride JW. Human ehrlichiosis and anaplasmosis. Clin Lab Med. 2010 Mar;30(1):261-92.
- Swanson SJ, Neitzel D, Reed KD, Belongia EA. Coinfections acquired from ixodes ticks. Clin Microbiol Rev. 2006 Oct;19(4):708-27.
Источник
В весенне-летний период появляется много опасных насекомых. В их число входит клещ. Вредитель может укусить человека и заразить инфекцией. Чтобы предотвратить распространение заболевания, нужно сдавать кровь после укуса клеща в лабораторию. По результатам будет ясно, нужно ли проводить лечение.
Какие исследования необходимы
Для обнаружения инфекции делают забор крови. Исследования может проводиться одним из следующих методов:
- Иммуноферментный анализ. Это вид обнаружения в крови антител к вирусу. У пациента проводят забор венозной крови. Если организм вырабатывает защитные клетки, человек заражен. Сдать кровь на анализ после укуса клеща необходимо не ранее, чем через 10 дней со дня инцидента. Иммуноферментный анализ наиболее информативен на 3–4 неделе заражения, когда количество антител достигает пика. Он считается особо точным методом. Но все же при положительном ответе рекомендуется провести дополнительные тесты для исключения ложного результата.
- Иммунофлюоресцентный анализ. Для исследования могут использовать сыворотку крови, а также внутрисуставную жидкость. Антитела, вырабатываемые иммунитетом для защиты от инфекций, окрашиваются специальным красителем. После биологический материал изучается под микроскопом. Метод не требует сложного оборудования, поэтому является одним из самых дешевых. Но в точности уступает другим видам проверок.
- ПЦР – метод полимеразной цепной реакции. Исследования проводятся при изучении крови, мочи, суставной или спинномозговой жидкости. Таким способом обнаруживаются в крови инородные ДНК и РНК. Анализ ПЦР после укуса клеща у человека проводится не ранее, чем на 10-й день.
- Вестерн-блот. Специальный тест считается самым точным методом для обнаружения иммунологических проблем. Для анализа проводят забор венозной крови. Биологический материал тестируется на наличие антител к вирусам. Исследование проводится на 10-й день после укуса клеща.
Кроме сдачи крови на обследование, можно предоставить на анализ самого клеща. При этом не придется ждать несколько недель. В течение суток в организации определят, заражено ли насекомое.
Правила транспортировки клеща
Извлечь паразита из тела для исследования лучше всего в медицинском учреждении. Так намного больше шансов избежать заражения. Если самостоятельно доставать насекомое, можно сильно повредить тельце взрослого насекомого, и он еще глубже войдет под кожу. Также в больнице смогут сразу определить, опасен ли паразит.
Если заразное насекомое удалось достать самостоятельно, его рекомендуется отнести в лабораторию. Правила транспортировки клеща:
- После извлечения насекомое помещается в среду с температурой от 2°С до 8°С. До транспортировки лучше всего положить жука в холодильник. Насекомое нельзя замораживать. Если поместить его в морозильную камеру, в лаборатории не смогут проверить паразита на наличие вируса.
- Насекомое переносится в банке. В жаркую погоду можно положить к нему кубик льда.
- После смерти клещ высыхает, а бактерии стремительно гибнут. Если он умер, его нужно держать в емкости с жидкостью. Подойдет мокрый кусочек материи или смоченная вата. Бактерии не погибнут во влажной среде.
- Анализ проводится в первые 48 часов после извлечения клеща. При большом сроке информативность тестов падает и возможны ложные результаты.
Если жука получилось извлечь по частям, его можно предоставить для исследования методом ПЦР. Хватит небольшого кусочка биологического материала.
Когда проводится анализ
Если на теле обнаружен клещ, проверка на инфекционные заболевания обязательна. Насекомое можно отнести в лабораторию в день заражения. Если такой возможности нет, стоит обратиться к врачу и сдать кровь не менее чем через неделю после укуса. Оптимальный срок – с 11-ого по 14-й день.
Стоит обязательно обратиться к врачу раньше срока, если есть следующие симптомы:
- головная боль;
- быстрая утомляемость;
- боль в мышцах;
- светобоязнь;
- снижение или увеличение температуры тела;
- тошнота и рвота;
- затруднения в дыхании;
- галлюцинации.
Такими симптомами проявляется энцефалит. При ослабленном иммунитете организма признаки болезни могут проявиться еще в первую неделю после укуса. В этом случае риск осложнений особенно велик.
Нужно вовремя показать врачу ребенка, которого укусил клещ. У детей слабая иммунная система, которая может не справиться с вирусом.
Куда обратиться для обследования
При обнаружении на теле клеща можно позвонить в Скорую помощь. Сотрудники службы проинформируют, по какому ближайшему адресу можно обратиться. Также помощь окажут в районной поликлинике, травмпункте или ближайшей больнице.
Клеща на наличие вирусов могут проверить на месте в большинстве этих учреждений. Если такой возможности нет, медработники направят в лабораторию инфекционной больницы или СЭС.
Сдать анализ крови на платной основе можно в частных клиниках. Также соответствующие лаборатории есть в инфекционных больницах.
Сколько времени ждать результаты анализов
На исследование крови уходит от трех до пяти дней. Стоит учитывать, что во время выходных и праздничных дней срок исследований может увеличиться.
При положительном результате проводится повторный тест. Между двумя исследованиями должно пройти от двух до четырех недель.
Цена анализа на вирусы
Некоторые страховые полисы покрывают стоимость исследований в лаборатории. Но чаще всего исследование проводится на платных условиях.
Стоимость услуги зависит от типа заведения. В государственных учреждениях цена исследования около 300–400 рублей. В частных клиниках она в диапазоне 400–600 рублей. Это стоимость анализа на выявление одного вируса. Клещи могут переносить несколько заболеваний – энцефалит, боррелиоз и ряд других. Поэтому комплексное обследование обойдется в 800–1 200 рублей.
Клещи переносят смертельно опасные заболевания, которые быстро заражают кровь и требуют оперативного лечения. Если вовремя сдать анализы, можно вовремя получить квалифицированную помощь и перенести болезнь в легкой форме.
Источник
Укусы клещей совсем не безобидны для человека. Дело в том, что эти паукообразные являются переносчиками многих опасных инфекционных заболеваний. Среди них клещевой энцефалит, боррелиоз и мн. др. Поэтому после нападения клеща обязательно нужно понять, не инфицирован ли паразит каким-либо вирусом? Как узнать об этом? Отличный вариант – сдать анализ крови. Нелишним будет и отвезти самого клеща на исследование специалистам. Только так можно определить, произошло ли заражение после контакта с кровососом.
Что делать при укусе клеща?
Вот вы, к большому сожалению, обнаружили присосавшегося к телу паразита. Что же нужно предпринять в таком случае?
- Первым делом не паникуйте. Успокойтесь. Затем удалите клеща одним из известных способов.
- Обработайте место укуса. Подойдёт йод, спирт, раствор бриллиантового зелёного и пр.
- Не выбрасывайте клеща (даже мёртвого)! Поместите его в закрытую герметичную ёмкость (банка, бутылка, флакон от лекарств, коробок спичек и т. п.). Паразита нужно будет отдать в специальное учреждение, где определят, является ли он переносчиком опасных заболеваний.
- Сдайте анализы крови на боррелиоз, клещевой энцефалит и пр.
- Обратитесь к врачу (в приоритете инфекционист или паразитолог) и пройдите обследование, после которого вам могут назначить приём лекарственных препаратов. Их действие будет направлено на быстрое подавление инфекционного заболевания, переданного человеку этим паукообразным.
- Пристально наблюдайте за своим самочувствием в течение 4 недель после укуса клеща. Причём даже если паразит оказался не инфицированным. Если же анализ вашей крови или самого клеща на вирусы будет положительным, то готовьтесь к лечению в стационаре и длительной медикаментозной терапии.
Нередко бывает так, что человек просто не замечает паразита на своем теле. Лишь спустя время он обнаруживает место укуса и чувствует сильный зуд. Хотя сам кровосос уже отвалился и уполз. Однако от этого риск заразиться опасной болезнью не уменьшается. Поэтому и после такого контакта с клещом нужно сдавать анализы.
Какие анализы сдавать, если укусил клещ?
После укуса клеща медлить нельзя. Конечно, счет не идёт на минуты или часы. Но и затягивать с обращением в медучреждение не стоит (тем более что многие стационары ведут круглосуточный приём тех лиц, которые потенциально могут быть заражены боррелиозом, клещевым энцефалитом и пр.). Дело в том, что уже в течение первых пяти суток возможно появление симптомов заболевания, а через 7-10 дней (если организм ослаблен) могут начаться и осложнения.
При этом важно помнить, что сразу после укуса членистоногого сдавать анализ крови не имеет смысла. Объясняется это тем, что результат такого исследования будет недостоверным. Ведь в человеческом организме в качестве ответа на вирус должны образоваться специфические антитела (противовирусные белки-иммуноглобулины), которые и выявляет анализ. А для этого нужно время – до 10 дней, а то и больше. Поэтому многие врачи рекомендуют делать анализ крови на клещевые инфекции лишь на 11-14 сутки после укуса.
Намного эффективнее в данной ситуации привезти и сдать на исследование самого клеща. В таком случае уже буквально в первые сутки можно будет определить, был ли он заражён какой-то опасной инфекцией и есть ли риск жизни и здоровью человека.
Что касается самих анализов, то для определения скрытых инфекций после укуса клеща используется широкий круг лабораторных тестов. Конкретный способ диагностики выбирает сам врач с учётом:
- возраста пациента;
- состояния его иммунной системы;
- того, проводилась ли вакцинация;
- времени, которое прошло после укуса;
- принимал ли обследуемый антибиотики и прочие препараты.
- Не ранее чем через 10 дней после укуса можно сдать кровь на выявление клещевого энцефалита и боррелиоза методом ПЦР. Это довольно эффективный способ определения присутствия молекул чужеродных ДНК или РНК в биоматериале: самом клеще, крови, кожном биопате, моче, спинномозговой и суставной жидкости. Одновременно с этим ПЦР является и достаточно сложным методом. Поэтому специалисты редко отдают ему предпочтение.
- Более распространены анализы методом ИФА (иммуноферментный анализ) и вестерн-блоттингом. Они направлены на выявление антител класса lgM и lgG, которые начинают активно вырабатываться в организме человека спустя 10 дней после укуса заражённого клеща. Материалом исследования при этом является венозная кровь. Преимущества обоих методов – высокая информативность и точность.
- Наиболее доступный и дешевый метод – иммунофлюоресцентный анализ. Применяется в большинстве медицинских учреждений (так как требуется минимум оборудования и средств). Исследуют при нём в основном сыворотку крови, ликвор, внутрисуставную жидкость. При этом в ходе анализа специфические антитела помечаются флюоресцентным красителем, что позволяет легко увидеть их в люминесцентный микроскоп. Несколько проигрывает в плане точности всем вышеперечисленным методам исследования.
Результат диагностики на большинство инфекционных заболеваний, передающихся человеку через укус клеща, обычно выдаётся на 3-5 день после забора крови. Если он положительный, то спустя 2-4 недели анализ сдаётся повторно.
В некоторых городах, не имеющих частых случаев заражением боррелиозом или клещевым энцефалитом, сдать кровь после укуса клеща на данные инфекции невозможно. В таком случае может понадобиться поездка в соседний населённый пункт или обращение в частную клинику. Иногда на помощь могут прийти и специалисты санитарно-эпидемиологической станции (СЭС).
Сколько стоит исследование на клещевые инфекции?
Можно ли надеяться, что в каком-то учреждении вам сделают бесплатный анализ крови на клещевой энцефалит и прочие инфекции, передающиеся с укусом этого паразита? Едва ли. Если только ваша медицинская страховка включает данную услугу.
Какова же средняя стоимость исследований крови на клещевые инфекции? Примерно 400-600 рублей в коммерческих организациях. При этом за эту сумму вам проведут анализ на наличие одного вида возбудителей вируса – например, на энцефалит или боррелиоз. Соответственно, стоимость комплексного исследования может обойтись в 1000–2000 рублей. В государственных учреждениях тарифы обычно ниже примерно на 30-40%.
Опасны клещи и для домашних животных. Особенно для собак, в которых эти паразиты обычно впиваются во время прогулок по лесу или парку. Поэтому если ваш питомец чувствует себя неважно или вы нашли на его теле клеща, то сразу же обратитесь в ветеринарную клинику и сдайте анализ крови на пироплазмоз. Ведь без своевременного лечения смертность среди собак от этого заболевания достигает 98 %.
Куда можно сдать клеща?
Обычно анализом этого вида распространителей болезней занимаются специализированные частные и государственные учреждения. Есть они в большинстве населенных пунктах – городах, деревнях, посёлках городского типа и пр. Но на некоторых территориях подобных лабораторий может не оказаться. Так что рекомендуем вам заранее узнать, в какой организации в вашем месте проживания возможна сдача укусившего насекомого для дальнейших исследований.
В основном в число таких учреждений (куда имеет смысл нести клеща) входит:
- СЭС;
- Частные клиники;
- Государственные медицинские учреждения – травмпункт, больница, поликлиника и т. д. Обычно в таких заведениях есть лабораторный кабинет, позволяющий исследовать клеща для выявления возбудителей инфекций, которых он может передать человеку.
Если у вас в городе есть инфекционная больница, то опасного членистоногого можно отнести сюда. К примеру, в то же отделение паразитологии, где проведут анализ клеща на энцефалит и пр. заболевания.
При этом когда решитесь отвезти клеща на исследование, не забудьте взять с собой деньги. Дело в том, что услуга эта в основном предоставляется платно. Сколько же берут за определение того, инфицировано членистоногое либо нет?
Стоимость анализа клеща на наличие в нем возбудителя той или иной болезни в государственных медицинских учреждениях РФ примерно одинаковая. Как правило, достаточно заплатить 500-600 рублей, чтобы провели исследование членистоногого на боррелиоз или энцефалит. В частных медицинских центрах и лабораториях проверка клеща на имеющиеся в нём вирусы обойдётся примерно в два раза дороже. Например, популярная сегодня в России сеть лабораторий «Гемотест» оценивает комплексное исследование клеща в 2050 рублей, а делается оно 2 дня. При этом в подобных заведениях можно заказать и экспресс-анализ, который будет готов через несколько часов.
Как сохранить и правильно транспортировать клеща для анализа?
Многие важные моменты мы уже прояснили. Хотя некоторые вопросы ещё остались. Касаются они того, как «обходиться» с клещом – как правильно его сохранить и в чём лучше перемещать?
- Во-первых, после отделения членистоногого от места укуса рекомендуется сразу поместить его в холод. Только не в морозильную камеру! Замораживать паразита нельзя! Оптимальные условия для его хранения и транспортировки – +2–8 °C. Если на улице жара, то можете даже добавить в банку с этим паразитом кусочек льда.
- Во-вторых, если клещ умер, то чтобы сохранить вирусы, нужно положить в ёмкость с членистоногим ватку или тряпочку, смоченную водой. Влага не даст бактериям погибнуть, что повысит достоверность лабораторного исследования.
- В-третьих, бывает так, что при вытаскивании клеща из ранки на месте укуса голова или челюсти паразита остаются под кожей. Причём сам кровосос разрывается на части. Что делать в такой ситуации? Можно ли сдать на анализ нецелого клеща, а лишь его часть? Ответ – да. Современная диагностика позволяет проводить ПЦР-исследование, даже если в качестве материала – лишь фрагмент тела этого мелкого, но опасного животного.
- В-четвёртых, отнести клеща на анализ нужно в течение двух суток. Большие сроки чреваты тем, что возрастает риск получить ложноположительные или ложноотрицательные результаты. В свою очередь, это грозит неправильным лечением или вовсе его отсутствием. В обоих случаях это легко приводит к серьёзным осложнениям и даже смерти.
Источник