Анализ крови методом пцр cmv

Исследование, направленное на обнаружение генетического материала (ДНК) возбудителя цитомегаловирусной инфекции, Cytomegalovirus, методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.

Синонимы русские

Цитомегаловирус; ЦМВ; ДНК [полимеразная цепная реакция в режиме реального времени]; количественный анализ.

Синонимы английские

Cytomegalovirus; CMV; DNA [polymerase chain reaction, real-time PCR]; quantitative.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Амниотическая жидкость, бронхоальвеолярный лаваж, венозная кровь, ликвор, мазок из зева (ротоглотки), первая порция утренней мочи, слюна, биоптат (биоптат лёгких, печени, ЖКТ).

Общая информация об исследовании

Цитомегаловирус (Cytomegalovirus) относится к семейству герпес-вирусов человека, рода Cytomegalovirus, и является возбудителем цитомегаловирусной инфекции. Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) – это широко распространенная инфекция человека, характеризующаяся легким, бессимптомным течением у людей в обычных условиях и с нормально функционирующей иммунной системой. Особое клиническое значение она приобретает у лиц с патологией иммунной системы, иммунодефицитными состояниями и у беременных женщин из-за риска внутриутробного инфицирования плода.

По данным различных исследований, носительство цитомегаловирусной инфекции выявляется у 60-90 % взрослого населения. ЦМВИ также входит в группу TORCH-инфекций (перевод первых букв латинских токсоплазмы — Toxoplasma, краснухи — Rubella, цитомегаловируса — Cytomegalovirus, герпеса — Herpes), — являющихся потенциально опасными для развития плода и вызывающими тяжелые поражения органов у новорождённых детей. Цитомегаловирус является ведущей причиной врождённых инфекций во всем мире и обнаруживается у 0,2-2,2 % новорождённых. У 10 % таких детей развиваются клинические признаки заболевания с рождения, у части в течение первых десяти лет жизни.

Цитомегаловирус является ДНК-содержащим вирусом, обладающим способностью к медленному распространению в культуре инфицированных клеток и приводящим к их изменению и увеличению размера (цитомегалии). Источником инфекции является человек, выделяющий вирус через различные биологические жидкости. К ним относятся кровь, слюна, моча, грудное молоко, цервикальный и вагинальный секрет, семенная жидкость, ликвор, содержимое желудочно-кишечного тракта и прочие секреты. Инфекция передается воздушно-капельным, контактным, половым путем, в результате переливания крови от инфицированного донора. Возможно также заражение при трансплантации органов и вертикальный путь передачи, от инфицированной женщины к ребенку во время беременности или родов. Длительность инкубационного периода заболевания часто установить невозможно, так как большинство клинических случаев не распознается и протекает в латентной, бессимптомной, форме. Также следует отметить, что для ЦМВИ характерна длительная персистенция возбудителя в организме человека. Это приводит к тому, что множество людей является носителями этого вида инфекции на протяжении долгих лет и, возможно, всей жизни. При ослаблении иммунной системы может отмечаться тяжелое течение заболевания.

Различают приобретенную и врождённую формы ЦМВИ. Приобретенная форма инфекции протекает в виде острого локализованного процесса, схожего по клинической симптоматике с острой респираторной вирусной инфекцией или инфекционным мононуклеозом. Отмечается повышение температуры тела, слабость, общее недомогание, боль в горле, миалгии, увеличение шейных лимфатических узлов. В редких случаях отмечаются осложнения в виде артралгий, артритов, пневмонии, цитомегаловирусного гепатита.

У детей до трех месяцев жизни, а также у лиц с патологией иммунной системы (иммунодефицитными состояниями, ВИЧ-инфекцией, после трансплантации органов, лечения иммуносупрессивными препаратами, при злокачественных заболеваниях) ЦМВИ может протекать в тяжелой форме с развитием серьезных осложнений. При этом развиваются тяжелые поражения легких, почек, печени, желудочно-кишечного тракта, нервной системы с развитием вирусного энцефалита.

Врождённая форма ЦМВИ возникает в результате трансплацентарной передачи инфекции от матери плоду при инфицировании женщины на ранних сроках беременности, особенно при первичном инфицировании. Последнее очень опасно в связи с тем, что предполагает отсутствие у женщины предварительного иммунитета к цитомегаловирусу и, следовательно, незащищенность здоровья ребенка. При этом развивается острая врождённая ЦМВИ, приводящая к самопроизвольному аборту или гибели эмбриона. При поражении плода на более поздних сроках беременности развивается геморрагический синдром с кровоизлияниями в кожу, внутренние органы, головной мозг. Отмечается энцефаломаляция, церебральная кальцификация, увеличение селезёнки, печени, гепатит. Возможно также заражение ребенка во время родов при прохождении родовых путей. При хронической врождённой ЦМВИ возникает фиброз внутренних органов и пороки развития: гидроцефалия, микроцефалия, увеит, слепота, пороки сердца, нейросенсорная потеря слуха и другие неврологические нарушения. Отмечается отставание и в неврологическом и психическом развитии.

В связи с тем что клиническая диагностика ЦМВИ в большинстве случаев затруднена, лабораторная диагностика очень важна. Современным методом диагностики ЦМВИ является полимеразная цепная реакция в режиме реального времени. Это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять генетический материал возбудителя на ранних этапах заболевания. Он характеризуется высокими показателями диагностической чувствительности и специфичности, быстротой получения конечного результата и доступностью. Особенностью метода является возможность выявлять ДНК (дезоксирибонуклеиновую кислоту) цитомегаловируса даже при малом содержании её в исследуемом биологическом материале. Метод основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК. Он позволяет определять ДНК цитомегаловируса в случае подозрения на острую, текущую ЦМВИ у детей и взрослых, у людей с патологией иммунной системы, у беременных женщин. Преимуществом метода является возможность его использования для диагностики заболевания на ранних стадиях, при латентной и персистирующих формах инфекции. Возможно проведение исследования в биоматериале, взятом у новорождённых детей в случае подозрения на врождённую форму ЦМВИ или при инфицировании матери. Используется для дифференциальной диагностики инфекции, вызванной цитомегаловирусом, и других вирусных инфекций. Рекомендуется также для оценки эффективности проводимой терапии.

Для чего используется исследование?

• Для подтверждения ЦМВИ.
• Для диагностики острой или текущей ЦМВИ.
• Для диагностики первичной инфекции и/или активной формы ЦМВИ в период реактивации (обострения) персистентной инфекции.
• Для диагностики латентной формы ЦМВИ.
• Для диагностики персистентной формы ЦМВИ.

Когда назначается исследование?

• При подозрении на ЦМВИ и ее клинических проявлениях.
• При подозрении на латентную и персистентную формы ЦМВИ.
• При клинических проявлениях ЦМВИ у лиц с иммунодефицитными состояниями, ВИЧ-инфекцией, после трансплантации органов, лечения иммуносупрессивными препаратами, при злокачественных заболеваниях.
• При поражении легких, желудочно-кишечного тракта, нервной системы, почек, печени предположительно цитомегаловирусной этиологии.
• При атипичном течении заболеваний бронхо-легочной системы у детей, при пневмонии.
• Во время беременности (при симптомах заболевания, при подозрении на нарушения развития плода, для скрининга ЦМВИ).
• Женщинам при патологии беременности: невынашивание беременности, замершая беременность, самопроизвольные аборты, гибель эмбриона.
• Обследование плода при инфицировании беременной женщины во время беременности, признаках внутриутробной инфекции.
• Новорождённым детям: если его мать перенесла первичную цитомегаловирусную инфекцию во время беременности; если у ребенка есть симптомы врождённой инфекции: анемия, геморрагия, гепатит, микроцефалия, увеличение селезенки и/или печени, нарушение слуха, зрения, пороки сердца, неврологические нарушения (задержка умственного развития, конвульсии).
• При оценке контроля проведенного лечения против ЦМВИ.

Что означают результаты?

Референсные значения: не обнаружено.

Причины повышения:

• инфицирование цитомегаловирусом;
• острая, текущая, персистентная, латентная формы ЦМВИ.

Причины понижения:

• отсутствие инфицирования цитомегаловирусом.



Важные замечания

• Диагностика ЦМВИ является комплексной и основана на сочетании анамнестических, клинических данных и результатах лабораторных исследований.
• Метод ПЦР в режиме реального времени позволяет выявлять части и молекулу ДНК цитомегаловируса при любых формах ЦМВИ. Преимуществом метода является возможность его использования для диагностики заболевания на ранних стадиях, при латентной и персистирующих формах инфекции. Важно отметить, что с помощью данного метода невозможно проводить дифференциальную диагностику форм ЦМВИ, так как генетический материал вируса может быть обнаружен и при латентной форме инфекции.

Также рекомендуется

[07-016] Cytomegalovirus предранний белок IEA, IgM, IgG

[07-017] Cytomegalovirus, IgG

[07-018] Cytomegalovirus, IgM

[09-003] Cytomegalovirus, ДНК [реал-тайм ПЦР]

[40-129] Антитела к Cytomegalovirus (IgG) с определением авидности

Кто назначает исследование?

Терапевт, врач общей практики, инфекционист, акушер-гинеколог, неонатолог, педиатр, уролог, хирург.

Литература

1. Wang L, Xu X, Zhang H, Qian J, Zhu J. Dried blood spots PCR assays to screen congenital cytomegalovirus infection: a meta-analysis / Virol J. 2015 Apr 14;12:60.
2. Liu Z, Zhang P, Tang S, He X, Zhang R, Wang X, Yuan Z, Tan J, Peng B, Liu E, Fu Z, Zou L. Urine real-time polymerase chain reaction detection for children virus pneumonia with acute human cytomegalovirus infection / BMC Infect Dis. 2014 May 8;14:245.
3. Ross SA, Ahmed A, Palmer AL, Michaels MG, Sánchez PJ, Bernstein DI, Tolan RW Jr, Novak Z, Chowdhury N, Fowler KB, Boppana SB; National Institute on Deafness and Other Communication Disorders CHIMES Study. Detection of congenital cytomegalovirus infection by real-time polymerase chain reaction analysis of saliva or urine specimens / J Infect Dis. 2014 Nov 1;210(9):1415-8.
4. Gaytant M A, Steegers E A P, Semmekrot B A, Merkus H M M W, Galama J M D. Congenital cytomegalovirus infection: Review of the epidemiology and outcome. Obstet Gynecol Surv 2002; 57: 245-256.

ПЦР цитомегаловирус – один из самых эффективных современных методов диагностики. Данная техника позволяет с высокой степенью определять наличие или отсутствие инфекции в организме, а также уточнять степень ее развития.

Что такое ПЦР-анализ на цитомегаловирус и в каких случаях назначается?

ПЦР, или полимеразная цепная реакция, была разработана американским ученым Кэри Муллисом в 1983 г. Метод получил всеобщее признание, и в 1993 г. принес своему автору Нобелевскую премию в области достижений по химии.

В основе ПЦР – выявление ДНК возбудителя инфекционного заболевания. Данная техника считается особенно информативной в отношении цитомегаловируса (ЦМВ), принадлежащего к ДНК-содержащим разновидностям болезнетворных микроорганизмов.

К проведению исследования методом ПЦР прибегают в следующих ситуациях:

1. На этапе планирования беременности.
2. При наличии фетоплацентарной недостаточности.
3. У пациентов с неопластическими заболеваниями, ВИЧ-инфекцией.
4. В период приема цитостатиков.
5. При клиническом проявлении патологии на фоне отсутствия возбудителя.
6. В период приема противораковых лекарственных препаратов.
7. При повышении температуры тела без видимой причины.
8. Перед процедурой сдачи крови у доноров.
9. При длительном течении воспалительных процессов у детей и взрослых.

Анализ на ПЦР на цитомегаловирус показан при проведении обследования новорожденных младенцев. У грудничков биоматериал берут не позже 10-14 дня после появления на свет.

Метод также используют в педиатрии во время проведения диагностики у детей с нетипичным течением пневмонии. В гинекологии он актуален для женщин при невынашивании беременности, или подозрении на внутриутробное инфицирование плода.

Помимо медицины ПЦР нашел свое применение в других сферах. Криминалисты с его помощью выявляют «хозяина» обнаруженного на месте преступления биоматериала. Иногда ПЦР используют при определении отцовства или проведении экспериментов с мутациями ДНК.

Материалы для исследования

Методика полимеразной цепной реакции предусматривает работу с различными жидкими средами:

• кровью;
• мочой;
• выделениями из половых органов;
• спинномозговой жидкостью;
• мокротой;
• слюной;
• мазками из горла;
• околоплодными водами;
• соскобом клеток эпителия;
• грудным молоком;
• биоптатами желудка и 12-перстной кишки.

Выявление цитомегаловируса в имеющемся биоматериале осуществляется в лабораторных условиях с применением высокоточной современной техники. Для этих целей предназначен специальный реактор, работающий на молекулярно-генетическом уровне.

В случаях, когда другие диагностические методы не способны предоставить нужную информацию относительно развития вируса в организме пациента, ПЦР становится единственным безошибочным способом определения инфекции.

Подготовка к анализу ПЦР

Чтобы получить достоверные результаты обследования, накануне проведения процедуры потребуется соблюдать нижеприведенные правила для пациентов:

1. За 6-8 часов до сдачи крови отказаться от употребления любых продуктов питания.
2. В течение 24-х часов, предшествующих забору биоматериала, исключить прием алкогольных напитков, физическую активность.
3. За сутки до обследования избегать любых форм сексуальной близости.
4. В течение 2-3 часов до взятия мазка из половых путей следует воздерживаться от мочеиспускания, курения.
5. За неделю до сдачи анализа прекратить прием каких-либо лекарственных препаратов (в первую очередь антибиотиков).

Если сдача крови предстоит грудничку или ребенку постарше, родителям потребуется обеспечить его достаточным количеством питья. За 30 минут до процедуры следует давать малышу достаточное количество кипяченой воды.

Анализ

Чаще всего для проведения ПЦР берется кровь из вены. Такой способ диагностики наиболее удобен, так как не вызывает существенного дискомфорта, может применяться для обследования пациентов любого возраста и пола. Манипуляции выполняются стерильными одноразовыми инструментами, в ранние утренние часы, натощак.

Взятие мазка на цитомегаловирус у женщин также позволяет быстро выявить наличие вируса в организме. Пациентка в этот момент находится в гинекологическом кресле, а врач выполняет забор биоматериала из влагалища и шейки матки. Для этого специалист использует маточное зеркало и тампон-зонд. У девушек, не живущих половой жизнью, зеркало не используется.

Чтобы взять мазок у мужчины, уролог использует стерильный ватный тампон. Доктор вводит его в уретру, затем вращательными движениями извлекает. Процедура часто вызывает дискомфорт, однако болезненные ощущения отсутствуют.

Вид биоматериала определяется специалистом, исходя из индивидуальных особенностей обследуемого. При отсутствии следов вируса в крови или мазках часто проводятся дополнительные тесты.

Расшифровка результатов

Проведение диагностики цитомегаловируса методом полимеразной цепной реакции позволяет быстро получить однозначный результат – отрицательный/положительный. В первом случае бланк с информацией относительно проведенного обследования содержит словесную формулировку «не обнаружено», что означает отсутствие следов искомой инфекции в биоматериале. В случае наличия жалоб проводится дополнительная диагностика с целью выявления других видов возбудителей.

Положительный результат говорит о факте заражения цитомегаловирусом, его пребывании в организме пациента в пассивной форме, или выделении в небольших количествах. После получения такого ответа обязательным становится проведение адекватной терапии. Нередко назначаются дополнительные исследования (анализ на антитела), позволяющие определить изменения, вызванные жизнедеятельностью вируса в теле пациента.

Метод ПЦР также способен показывать количество присутствующих микроорганизмов. Количественный анализ ПЦР становится особенно важным при выборе эффективной терапевтической тактики.

Существует так называемое «здоровое носительство», при котором ПЦР демонстрирует положительный результат, однако активная форма инфекции не наблюдается. В таких случаях отсутствует типичная симптоматика, лечение не проводится, однако пациенту рекомендовано наблюдаться у врача.

Где и как сдавать анализ на ПЦР на ЦМВ

Сдавать анализы на ПЦР на ЦМВ можно на усмотрение пациента – как в государственном медицинском учреждении, так и в частной клинике. Обязательными условиями успешного проведения обследования являются:

• наличие в учреждении необходимого диагностического оборудования;
• высокий профессионализм медицинского персонала;
• добросовестная подготовка пациента к процедуре.

При необходимости прохождения повторного исследования на ЦМВ следует обращаться в заведение, в котором проводились предыдущие процедуры. Это позволит получить максимально точные результаты, т. к. показатели, соответствующие норме, могут отличаться в каждой диагностической лаборатории. Осуществление ПЦР-диагностики строится на реализации высоких требований в процессе проведения исследования.

Сдавать подобный анализ рекомендуется только в профессиональных лабораториях, имеющих проверенную репутацию и компетентных сотрудников, внедряющих строгие системы контроля за качеством медицинской практики (Инвитро, Гемотест и др.)

ПЦР на цитомегаловирус при беременности

Обследование женщин на наличие цитомегаловируса проводится как на этапе планирования беременности, так и во время вынашивания малыша. Своевременное выявление инфекции и прохождение соответствующего лечения невероятно важны, так как позволяют избежать выкидыша в первом триместре, или развития у плода необратимых патологий в более позднем сроке вынашивания (поражений ЦНС, ухудшения слуха или зрения).

ПЦР у пациенток, находящихся в «интересном» положении, позволяет обнаруживать даже незначительное присутствие вируса в исследуемом биоматериале. Таковым в период беременности становится кровь, урина, выделения из влагалища, содержимое цервикального канала, цереброспинальная жидкость, слюна, амниотическая (околоплодная) жидкость.

Обследование на наличие цитомегаловируса методом ПЦР у беременных пациенток проводится на бесплатной основе. Такая услуга предоставляется в государственных медицинских учреждениях после предъявления страхового полиса.

Сроки готовности ПЦР-анализа

Для проведения анализа ПЦР требуется временной промежуток в пределах 24-х часов. Окончательный результат предоставляется по истечении 1,5-2 дней.

В случае необходимости процедура выявления цитомегаловируса может быть проведена за несколько часов. Достоверность результатов при этом остается на уровне 99-100 %.

Некоторые специалисты рассматривают в качестве минуса метода ПЦР неспособность определять характер инфекции – первичный или повторный. Кроме этого в случае с ЦМВИ и другими патологиями данная техника не позволяет обнаруживать отличия между активным и «спящим» вирусом.

Стоимость процедуры

Стоимость проведения диагностики методом ПЦР в различных лабораториях варьируется в незначительных пределах, определяется разновидностью и сроком исследования биоматериала. Средняя цена обычной диагностики составляет от 6, 95 $ до 15 $. Ускоренное проведение обследования предусматривает двукратное увеличение стоимости услуги.

Для пациентов, желающих сэкономить материальные средства, существует специальный фиксированный пакет анализов.

Такая услуга предоставляется большинством частных клиник, проводящих обследования с использованием методики ПЦР.