Анализ крови методом ифа вгс
Иммуноферментный анализ – это метод диагностики вирусных заболеваний. ИФА на гепатит С показывает реакцию иммунной системы на действие патогенных микроорганизмов. Для процедуры используют венозную кровь и ищут в ней антитела к вирусу гепатита. Иммуноферментный анализ недорогой, выполняется быстро, но требует подтверждения повторным ИФА или более дорогим ПЦР.
Сущность и достоверность метода
Метод основан на способности антител (клеток иммунной системы) образовывать комплексы с частицами вируса гепатита (антигенами). Для определения этих комплексов пользуются специальными маркерными ферментами. Анализ дает возможность выявить количество антител к вирусу в первые 6-12 недель болезни.
Подготовка к ИФА включает:
- исключение физических нагрузок за сутки до исследования;
- запрет на употребление алкогольных напитков, табачных изделий и жирной пищи;
- временное прекращение приема лекарственных препаратов и оральных контрацептивов.
Кровь для иммуноферментного анализа на гепатит берут утром натощак. Достоверность данного метода повышается при повторном проведении ИФА спустя 2 недели после процедуры.
Результат анализа показывает:
- уровень эффективности работы иммунной системы при борьбе с вирусом;
- стадию заболевания;
- течение – острый или хронический гепатит.
Женщинам в период беременности необходимо сдать кровь на ИФА минимум два раза:
- на ранних сроках (4-5 недель);
- перед родами;
Преимущества ИФА заключаются в:
- доступной стоимости анализа для всего населения;
- полной автоматизации процесса, исключающей ошибку человека;
- быстром получении результата анализа;
- возможности выявить инфекционное заболевание на ранних этапах;
- высокой точности.
Показания к ИФА на гепатит С
Гепатит С – опасное вирусное заболевание, которое передается через кровь и разрушает клетки печени.
Показания к анализу крови на ВГС:
- наличие ВИЧ-инфекции;
- симптомы острого гепатита: рвота, вялость, чувство горечи во рту, отсутствие аппетита, желтушный цвет кожных покровов и др.;
- хронический гепатит;
- наличие в биохимическом анализе крови повышенного билирубина и изменение коэффициента де Ритиса (указывают на нарушения работы печени);
- принадлежность к группе риска (врачи, медсестры, наркозависимые);
- наркотическая и алкогольная зависимость.
Проверку на гепатит С обязаны проходить военные, сотрудники правоохранительных органов, работники общепита и социальных служб.
Какие антитела обнаруживает тест
Анализ на гепатит С, проведенный методом ИФА, способен обнаружить антитела двух типов:
- IgM;
- IgG.
IgM – иммуноглобулин, имеющий самую крупную молекулярную массу и неспособный проникать через плацентарный барьер. Антитела класса IgM вырабатываются в организме первыми – спустя 6 недель после заражения. Через полгода уровень иммуноглобулинов типа М снижается и остается таким до следующего рецидива болезни (при хроническом гепатите). Иммуноглобулины M являются основой первичного иммунного ответа зараженного организма.
IgG – основной иммуноглобулин сыворотки крови, является вторичным иммунным ответом. Обеспечивает иммунитет ребенка, рожденного от инфицированной матери. Иммуноглобулины G вырабатываются спустя 3 месяца после возникновения заболевания, достигают максимальной концентрации на пятом месяце и остаются в этом количестве на протяжении многих лет.
В периоде острого вирусного гепатита есть две стадии. На первой происходит активация и выделение IgM, на второй – IgG. В острой фазе болезни IgM и IgG образуются к нуклеокапсидному белку вируса Core. При латентном (скрытом) течении вырабатываются IgG к белку core и неструктурному белку NS.
Способы проведения
Диагностика гепатита включает два способа проведения ИФА – прямой и непрямой.
Прямой
Прямой метод ИФА на антитела к гепатиту С основан на образовании комплексов антиген-антитело.
Стадии проведения:
- В специальную таблицу с лунками заносят биологический материал пациента (кровь) и оставляют на 30 минут. Важные элементы приклеиваются ко дну лунок.
- Добавляют специальные меченые антитела. Они прикрепляются к антителам исследуемой крови (если такие есть). Здесь выжидают несколько часов.
- Содержимое лунок сливают и промывают от лишних веществ.
- В каждую лунку добавляют ферменты, которые распознают добавленные ранее антитела. Ферменты связаны со специальным маркером.
- При положительной реакции маркерное вещество становится окрашенным.
Эта методика включает несколько простых шагов и обеспечивает достоверный результат.
Непрямой
Непрямой метод ИФА отличается тем, что в системе участвуют не два, а три компонента.
Он включает два варианта:
- Конкурирующий: в исследуемую систему добавляют антигены, кровь пациента, в которой предполагается наличие иммуноглобулинов, и антитела, помеченные ферментом. Две группы антител вступают в борьбу за образование комплексов с антигеном. Положительной реакция считается при максимальном количестве антител первой группы и минимальном – второй группы.
- Сэндвич-ИФА: в лунки заносят антитела к исследуемому антигену, после чего добавляют кровь и новые антитела. Исследуемый антиген оказывается между двумя молекулами иммуноглобулинов. Этот «сэндвич» виден визуально или при подсвечивании специальным спектром.
Расшифровка анализа
Существует четыре варианта расшифровки анализа:
- Положительный результат. В исследуемом материале обнаружены IgM и IgG к вирусу гепатита – означает, что человек заражен давно (более 3 месяцев назад). Если обнаружены только IgM, то инфекция попала в кровь месяц назад, если только IgG – произошло выздоровление или хронизация гепатита.
- Отрицательный результат. Иммуноглобулинов в исследуемой крови не обнаружено. Человек полностью здоров.
- Ложноположительный результат. ИФА всегда нужно проверять полимеразной цепной реакцией (выявляет сам вирус в крови или печеночной ткани). Если ПЦР дает отрицательный результат, то ИФА следует провести заново.
- Сомнительный результат. Если прошло очень мало времени после рискованной ситуации, ИФА может не выявить наличия антител. Для подтверждения результата необходимо провести повторный анализ через две недели.
Ложноположительный и ложноотрицательный результаты ИФА могут возникнуть вследствие ошибки в лаборатории или неправильной подготовке к анализу. У беременных ложные результаты встречаются чаще, чем у остальных людей.
Почему ИФА положительный, а ПЦР отрицательная
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – дополнительный метод диагностики вирусных заболеваний. Выявляет РНК вируса, то есть его генетическую информацию, применяется для подтверждения диагноза. В некоторых случаях ПЦР дает отрицательный результат при положительном показателе ИФА.
Почему так происходит:
- Выздоровление: ПЦР реагирует только на РНК вируса гепатита, а ИФА может дать положительный результат и после выздоровления, ведь он выявляет клетки иммунной системы, которые сохраняются в крови на несколько лет.
- Разный исследуемый материал: при заборе из разной локализации может возникнуть несоответствие результатов. Так, для ПЦР берут не только кровь, но и кусочек ткани печени.
- Разные тестовые системы.
Что покажет ИФА после лечения гепатита
После пройденной терапии против гепатита С необходимо еще раз сдать кровь на ИФА.
Иммуноглобулины G сохраняются в организме несколько лет после выздоровления, поэтому повторный анализ на гепатит может быть положительным. В этом случае необходимо дополнительно сдать кровь на ПЦР. Отрицательный результат ПЦР на гепатит будет свидетельством того, что человек здоров, а положительный – подтвердит ИФА и укажет на некачественное лечение.
Отрицательный результат повторного ИФА является подтверждением выздоровления.
ИФА относится к лабораторным методам высокой точности и позволяет выявить заболевание на ранних сроках. При первых симптомах гепатита нужно срочно обратиться к врачу, который назначит необходимые анализы для подтверждения диагноза.
Если у вас так же обнаружен РНК гепатита С в крови (вирусная нагрузка), рекомендуем ознакомиться с материалом по расшифровке анализов при гепатите С.
Источник
Гепатит С (ВГС, HCV) – инфекционное заболевание с гемоконтактным путем заражения, характеризующееся обширным воспалением печени. Вызывается РНК-содержащим вирусом рода Hepacivirus, который обладает высокой мутагенностью. В 2/3 случаев заболевание протекает в бессимптомной форме. При хронизации воспаления проявляется тошнотой, болями в эпигастрии, отрыжкой, расстройством стула, потемнением мочи. Для выявления ВГС назначают скрининговое обследование – ИФА и ПЦР.
Что скрывается под аббревиатурой ВГС
Вирус гепатита С (ВГС) – гепатотропный вирус из семейства Flaviviridae, провоцирующий воспаление печеночной ткани (паренхимы). Геном представлен однонитевой молекулой РНК, которая состоит из 10000 нуклеотидных оснований. Они формируют области, которые кодируют:
- структурные белки – С, Е1, Е2;
- неструктурные белки – NS2, NS3, NS4, NS5.
Особенность ВГС заключается в его умении мутировать. При самокопировании (репликации) РНК наблюдаются многочисленные ошибки, поэтому генетический материал дочерних вирионов может отличаться. Из-за многообразия вариантов гепатита пока не удается разработать вакцину от инфекции.
Вирусный гепатит С передается парентерально и инструментально через инфицированные биологические жидкости:
- кровь (основной источник заражения);
- влагалищные выделения;
- слюну;
- семенную жидкость;
- мочу.
Максимальная концентрация ВГС достигается в крови, поэтому в 95% случаев инфицирование происходит гемоконтактным путем:
- искусственным – при нанесении татуировок, операциях, переливании крови, гемодиализе, лечении зубов;
- вертикальным – от матери к плоду во время беременности или родоразрешения;
- половым – при попадании вируса в повреждения на слизистой половых органов.
Возбудитель гепатита сохраняет жизнеспособность в засохшей капли крови от 2 суток до 2 недель. Его устойчивость во внешней среде зависит от температуры и влажности воздуха. ВГС погибает при воздействии УФ-лучей и нагреве до 50-55°C.
У большинства пациентов гепатит С протекает в субклинической (бессимптомной) форме. Если его не лечить более 6 месяцев, то он переходит в хроническую форму. Вялотекущее воспаление печени чревато серьезными осложнениями – фиброзом, циррозом и раком печени.
Как выявляют возбудителя
Для выявления ВГС прибегают к лабораторной диагностике. Она основана на выявлении маркеров инфицирования – антител (anti-HCV) и вирусной РНК (RNA HCV). Для проведения анализа используются чувствительные тест-системы, благодаря которым удается выявить инфекцию спустя 1-2 недели после заражения.
Анализ на анти-ВГС
Иммуноферментный анализ на ВГС – серологическое исследование крови, в рамках которого определяют антитела против вируса гепатита. Спустя 4-8 недель после инфицирования в крови синтезируются иммуноглобулины к белкам возбудителя:
- IgG;
- IgM.
Острый гепатит часто не сопровождается выраженной клинической картиной. Но врач может заподозрить инфекцию при:
- увеличении печени;
- повышении активности трансаминаз (печеночных ферментов в биохимическом анализе крови);
- жалобах на расстройства пищеварения.
ИФА назначается всем людям из группы риска:
- детям, рожденным от матерей с гепатитом С;
- медработникам, контактирующим с кровью;
- инъекционным наркоманам;
- пациентам после операции, гемодиализа или переливания крови.
Положительные результаты серологического исследования указывают только на контакт организма с ВГС. Наличие IgG и IgM в крови свидетельствует о заражении или перенесенной инфекции.
ПЦР-тестирование
Качественная ПЦР – это молекулярно-биологическое исследование, нацеленное на выявление генетического материала возбудителя. Тестирование выполняется при:
- сомнительных результатах ИФА;
- дифференциальной диагностике гепатита;
- симптомах вирусного поражения печени;
- скрининговом обследовании контактных лиц.
В ряде случаев отсутствие антител к ВГС не исключает HCV-инфекцию. У 5% пациентов иммуноглобулины не синтезируются в крови годами даже в разгар гепатита. ПЦР считается золотым стандартом в диагностике вирусных патологий печени. Наличие в крови РНК HCV свидетельствует о заражении.
При подтверждении диагноза выполняются дополнительные анализы:
- Количественная ПЦР – подсчет концентрации возбудителя в плазме крови. Если 1 мл биоматериала обнаруживается не более 400 000 вирионов, это свидетельствует о низкой вирусной нагрузке. Дозировку противовирусных лекарств определяют с учетом уровня виремии. Чем она выше, тем больше доза препарата.
- Генотипирование – уточнение генотипа возбудителя. На территории РФ чаще встречаются первые 4 генотипа ВГС. От штамма вируса зависят схема и прогноз терапии.
Для оценки состояния печени при гепатите выполняют инструментальное обследование – УЗИ, МРТ, фибросканирование, КТ.
Что делать при положительных результатах анализа на ВГС
Если результат ИФА и ПЦР положительный, назначают противовирусную терапию (ПВТ). В соответствии с рекомендациями ВОЗ и EASL, лечение гепатита проводят медикаментами прямого противовирусного действия (ППД). Они нарушают синтез неструктурных белков ВГС, что препятствует сборке дочерних вирионов.
Препараты ППД для терапии гепатита С:
- Симепревир;
- Даклатасвир;
- Гразопревир;
- Софосбувир;
- Омбитасвир;
- Ледипасвир;
- Дасабувир;
- Элбасвир.
Чтобы добиться устойчивого вирусологического ответа (УВО), применяют разные комбинации лекарств. Продолжительность курса зависит от генотипа ВГС, осложнений, вирусной нагрузки.
Своевременная терапия ведет к эрадикации вируса гепатита в 96-100% случаев. При циррозе и печеночно-клеточном раке уничтожение ВГС не приводит к выздоровлению. Чтобы его добиться, выполняют операцию по трансплантации донорской печени.
Источник
Вирусный гепатит С остается одним из самых опасных заболеваний и в наши дни. Эта болезнь, прозванная «тихим убийцей», зачастую характеризуется хроническим течением. Это означает, что болезненное состояние никак не проявляется, и пациент может даже не подозревать о своем опасном положении. Печень быстро разрушается, и состояние больного становится критическим.
Нередко ВГС обнаруживается только в процессе сдачи анализов. Но если антитела к ВГС обнаружены — что это значит? Означает ли это, что инфицирование произошло? Бывают ли ложные положительные антитела на гепатит С? Ответы на все эти вопросы вы найдете в нашей статье.
Что такое антитела к гепатиту С?
После того, как в организм человека проникают инородные микроорганизмы и вирусы, иммунная система начинает вырабатывать особые белковые ферменты – иммуноглобулины. Появление специфических фракций белка свидетельствует об ответе иммунитета на сторонние раздражители. Именно эти фракции и являются антагонистами по отношению к антигенам патогена. Их наличие является маркером заражения определенным вирусом.
Но антитела гепатита С — что это такое? Это – иммуноглобулины, противостоящие именно антигенам ВГС. Антитела гепатита (АТ к ВГС) присутствуют в крови пациента. Именно поэтому основным методом диагностики гепатовируса является сдача образцов крови на специфическое обследование. Результаты анализов расшифровывают работники медицинских лабораторий и лечащий врач-гепатолог.
Статья опубликована при поддержке исследовательского института индийского фармацевтического производителя Zydus Heptiza. Официальный сайт в России Zydus.ru
О чем говорят положительные антитела на гепатит С?
Положительный анализ на антитела гепатит С у многих пациентов вызывает панику. Им кажется, что страшный диагноз уже подтвержден, и впереди их ожидает длительное лечение сильнодействующими препаратами. Однако это не всегда так.
Если результат анализа на антитела на гепатит С положительный — что это значит? Результат расшифровки зависит от того, какие именно группы иммуноглобулинов удалось обнаружить:
- Anti—HVC IgG – проявляются одними из первых при заражении гепатовирусом. Фракции белков, говорящие об инфицировании пациента;
- Anti—HCV core IgM – второй тип антител гепатита С, свидетельствующий о заражении организма на ранних стадиях. Сохраняется в крови до полного выздоровления пациента;
- Белок NS3 – АТ к ВГС, наличие которого в плазме основной жидкости человеческого организма говорит о возможном переходе острой формы заболевания в хроническую;
- Белковые фракции NS4 и NS5 – соединения, свидетельствующие о развитии тяжелых осложнений текущего заболевания. Таковыми может быть фиброз, цирроз печени и даже онкологическая опухоль.
Если анализ на гепатит С антитела положительный, это еще не приговор. Обычно для однозначной постановки диагноза проводятся дополнительные обследования.
В противоположном случае возникает вопрос – если антитела к вирусу гепатита С не обнаружены, что это значит? К сожалению, это не является гарантией отсутствия гепатовируса в крови. Возможно, концентрация патогена настолько мала, что в настоящий момент его попросту невозможно выявить.
Что делать, если антитела к гепатиту С положительные?
Получив на руки документ с результатами анализов, пациенты могут задаваться вопросом – «Антитела к гепатиту С обнаружены — что это, и как теперь поступить?». Самое правильное, что он может сделать в подобной ситуации – обратиться к опытному врачу.
Вероятнее всего, гепатолог даст направления на дополнительные обследования. Таковыми являются:
- Дополнительный анализ венозной крови пациента на определение генотипа вируса;
- Ультразвуковое обследование (УЗИ) поврежденного заболеванием органа с целью получения максимально подробной картины о масштабах поражения печени вирусом.
Все эти обследования необходимы для разработки будущего механизма лечения гепатовируса и подходящей терапевтической схемы. Также от результатов тестирований напрямую зависит длительность курса лечения и то, какие именно лекарства будут при этом использоваться.
Схемы лечения гепатовируса
Если в наличии такого диагноза, как ВГС, не возникает сомнений, больному назначается определенная схема лечения, которая зависит от следующих факторов:
- Возраст больного (к примеру, противовирусные препараты не рекомендуются детям до 12 лет);
- Общее состояние организма пациента, наличие других хронических болезней;
- Течение заболевания, наличие осложнений.
До недавнего времени использовалась только одна схема лечения гепатовируса – Рибавирин в совокупности с Интерфероном-альфа. У этого метода есть масса недостатков, в числе которых – множество серьезных побочных эффектов и слабая эффективность. Кроме того, из-за длительности терапии может возникнуть почечная недостаточность, а само сочетание лекарственных средств негативно сказывается на биохимии крови. Если резко повышается уровень лейкоцитов, лечение следует прекратить.
Схема Интерферон + Рибавирин значительно устарела, и используется только в тех случаях, когда лечение другими препаратами не допускается. Чаще всего при лечении вирусного заболевания рассматриваемого типа используются инновационные антивирусные лекарственные препараты индийского производства на основе оригинальной американской рецептуры.
В современных антивирусных схемах лечения обязательно присутствует Софосбувир – ингибитор вирусной РНК-полимеразы, и вещество, ингибирующее патогенный белок NS5A, в зависимости от генотипа ВГС:
- Ледипасвир – при 1, 4, 5 и 6 генотипах гепатовируса;
- Даклатасвир – применяется при 1, 2, 3 и 4 генотипах. Наиболее эффективен при терапии gen 3;
- Велпатасвир – универсальное вещество, которое применяется при лечении абсолютно всех генотипов патогена.
Курс лечения зависит от тяжести заболевания. Если течение болезни стандартное, терапевтический курс длится не более 12 недель. При повторной терапии, а также при наличии тяжелых осложнений, может назначаться 24-недельная терапевтическая схема. В этом случае к основным лекарствам могут прибавиться Рибавирин и различные гепатопротекторы.
Бывают ли ложноположительные результаты?
При получении положительного результата анализа на иммуноглобулины также следует учесть, что результат может быть ложноположительным. Подобное явление наблюдается в следующих случаях:
- Беременность на любом сроке из-за иммунных сбоев, характерных для данного периода жизни женщины;
- Формирование злокачественных и доброкачественных новообразований в печени и других органах пациента;
- Угнетение функций печени со значительным понижением АсТ и АлТ;
- Наличие других вирусно-инфекционных заболеваний (например, инфекции ВИЧ);
- Лечение препаратами из групп интерферонов и иммунодепрессантов;
- Неверная подготовка к сдаче анализов на обнаружение в крови антител гепатита С.
Таким образом, если белковые маркеры к ВГС положительные, это не всегда означает, что человек болен ВГС. Для подтверждения диагноза следует пройти ряд дополнительных обследований.
Какой анализ нужно сдавать на антитела гепатита?
Итак, ответ на вопрос «Антитела гепатита С — что это значит?» уже найден. Но какой нужно сдать анализ, чтобы выяснить наличие или отсутствие данных маркеров заболевания? На настоящий момент самым объективным обследованием является ПЦР. Изучение образца крови пациента производится на специфической аппаратуре в лабораторных условиях. ПЦР включает в себя 2 метода изучения образцов биологических жидкостей:
- Качественный – позволяет выявить наличие или отсутствие иммуноглобулинов различных типов. В этом случае, если антитела ВГС обнаружены, в большинстве случаев можно говорить о заражении данного человека гепатовирусом;
- Количественный – тест, позволяющий выяснить уровень вирусной нагрузки на организм больного. Это тестирование проводится в том случае, если патоген ранее уже был обнаружен.
Анализ на белковые маркеры гепатовируса требует соблюдения особых нюансов, в частности:
- Полного отказа от жирной и перегружающей печень еды за 24 часа до обследования;
- Воздержание от употребления алкоголя и табакокурения за сутки до сдачи анализа;
- За 8 часов до явки в лабораторию не следует принимать пищу;
- Лучшее время для сдачи образцов крови – 8 часов утра.
Недостатком анализа ПЦР на АТ к ВГС является невозможность определения иммуноглобулинов при слишком низкой вирусной нагрузке. Но если антитела к вирусу гепатита С не обнаружены — что это значит? Это может означать, что человек полностью здоров. Однако отсутствие результата обследования на белковые маркеры ВГС положительного еще не говорит об отсутствии патогена в организме. Возможно, его концентрация слишком мала, что нередко наблюдается на начальных стадиях заболевания, либо при хроническом течении недуга.
Обнаруживаются ли маркеры ВГС после терапии?
Современные методы лечения ВГС являются весьма действенными. Но если после полноценного курса терапии обнаруживаются антитела гепатита С в крови — что это может обозначать? Далеко не всегда наличие иммуноглобулинов говорит о тщетности проведенных терапевтических манипуляций.
После медикаментозного курса у пациента в крови антитела гепатита С типа IgG являются нормой. Эти маркеры заболевания могут оставаться в организме пациента еще несколько лет. При чем, каждый случай индивидуален. Пациенту следует регулярно сдавать анализ крови и следить за количеством иммуноглобулинов. Если не появятся Anti—HCV core IgM, а уровень Anti—HCV core IgG начнет постепенно снижаться, болезнь можно считать побежденной.
Но если со временем терапии прошло достаточно много времени, а результат анализа на антитела на гепатит С положительный, что это значит? В этом случае велика вероятность рецидивного возвращения недуга.
Оцените статью:
| Всего голосов: 2 Средняя оценка: 4
Источник