Анализ крови методом ифа на антитела к вич
При обследовании крови на ВИЧ у человека проверяют антитела к ВИЧ. Это специальные клетки, которые организм синтезирует в ответ на чужеродное воздействие. Такие клетки строго специфичны и действуют только на одну группу агрессоров. Что значит положительный, отрицательный и сомнительный результат на антитела к ВИЧ? Что такое метод ИФА? В этих вопросах стоит разобраться, чтобы сразу понять результаты и вовремя принять необходимые меры.
Содержание
О чем говорят антитела к ВИЧ в крови
Антицентромерные антитела не могут выработаться в организме без агрессора. Обнаружение таких соединений означает наличие вируса в организме.
Различают две группы белков: антитела к ВИЧ 1 и ВИЧ 2. Эти вирусы разделены территориально: первый – космополит (распространен повсеместно), второй – только в регионах Африки.
По количеству выявляемых антител – вирусной нагрузке – можно диагностировать угнетенность иммунной системы, динамику развития вируса и степень ответной реакции на лечение.
Если вирусный маркер обнаруживает следовое количество вирусных антител, результат объявляется сомнительным.
Причиной такого сбоя может быть:
- Неисправность прибора;
- Лекарственные препараты;
- Плохо промытые пробирки от предыдущего исследования;
- Неправильная калибровка.
Через какое время появляются антитела к ВИЧ
Вирус не сразу активируется в организме. На первых стадиях происходит интеграция вирусной РНК в РНК клетки хозяина, увеличение численности вирусного агента. На этой стадии вирус неактивен, а значит, антиген ВИЧ не раздражает иммунную систему. Инкубационный период может длиться от нескольких недель до одного года. Наиболее подходящий период для выявления заболевания 3 недели.
Совет! Как только появились признаки заражения инфекцией ВИЧ после заражения незащищенного контакта, незамедлительно стоит сдать анализ на ВИЧ, в независимости от того, сколько времени прошло.
Во время активности вируса появляются антитела. Такой защитный процесс вызывает повышение температуры, общую слабость и отсутствие аппетита. Через 4 недели после предполагаемого заражения симптомы могут значительно усилиться. Первую активность вируса организм может подавить. Симптомы заболевания спадают. Но, так как побороть вирус до конца тело не может, через 2 месяца после заражения может произойти ремиссия с более сильными симптомами.
Результатом позднего выявления ВИЧ инфекции является тяжелое течение болезни с большим количеством осложнений.
Важно! Самый достоверный результат на теста ВИЧ можно получить только через 3. Отрицательный тест в более ранний срок может быть ложным, так как данный период – инкубационный.
Показания к выполнению ВИЧ диагностики
В ряде случаев анализ на ВИЧ является обязательным:
- Во время беременности;
- При устройстве в учебные и медицинские учреждения;
- Во время военной службы и др.
Если антитела к ВИЧ не обнаружены, тест повторяют через несколько лет.
В ряде исследований получается сомнительный результат, в этом случае назначается повторный анализ.
Человек может самостоятельно заявить о проведении тестирования после сомнительного полового акта. Проводится тестирование на ВИЧ абсолютно бесплатно.
Подготовка к исследованию
Анализ на ВИЧ проводится по образцу крови в специальном устройстве. В пробу добавляется реактив, который должен проявить антитела за определенный период.
Минусом метода иммуноблота является его чувствительность к другим веществам в крови. Для получения достоверного результата необходимо правильно подготовиться к сдаче анализа:
- Не курить за 3 дня до анализа;
- Не употреблять алкоголь в течение двух недель до сдачи крови;
- Утром не есть сладкое и жирное;
- Перед сдачей крови желательно выспаться.
Со стороны медицинского персонала важно, чтобы правильно подготовили лабораторное оборудование и прибор. В противном случае может произойти загрязнение системы, что приведет к неверному результату.
Материал для исследования
Во время исследования проводится анализ на антитела к вирусу иммунодефицита человека. Для того чтобы получить максимально точные результаты, анализ проводится в нескольких повторностях. Для этого кровь для анализа делят на несколько порций и проверяют каждую отдельно. Для большей точности высчитывают период максимальной активности вируса (предположительно). Чем выше активность вируса, тем выше показатель вирусной нагрузки. От количества обнаруживаемых молекул зависит точность.
ИФА первый этап диагностики
ИФА исследование состоит из трех этапов:
- Скрининговый;
- Референтный;
- Экспертный.
На первом этапе проводится основной анализ на антитела к ВИЧ, проверка результата в той же тест-системе. Если результат на антигены к ВИЧ отрицательный, дальнейшие стадии не проводятся. Это связано с тем, что процедура является дорогостоящей. Ее используют только для уточнения положительных значений. Если при повторе получены результаты, которые определяются как положительные, образец крови передается на дальнейший анализ.
Подтверждающий тест второй этап диагностики
На втором этапе диагностики антиген Р24 ВИЧ выявляется с помощью двух разных групп реактивов. Это связано с возможностью получения недостоверного результата при наличии вещества, реагирующего с одним из реактивов.
Если хотя бы в одном из тестов проявляется положительный результат, исследование продолжается.
При неявном результате анализа назначается повторное исследование.
Расшифровка полученных результатов
В результате анализа может быть три варианта результатов:
- Положительный;
- Отрицательный;
- Сомнительный.
Первый вариант указывает на то, что в крови были обнаружены антицентромерные антитела.
При отсутствии исследуемых молекул, результат отрицательный.
Сомнительное значение обозначает, что обнаружены тела, на которые сработал реактив, но результат настолько слабый, что дать положительный вердикт нельзя.
Причиной последнего могут быть ошибки при анализе:
- Следовое количество обнаруживаемого белка в реакционной колбе от предыдущего исследования;
- Неправильная калибровка прибора и т.д.
В результате указывается не просто один пункт, а наличие белков gp160, gp120, gp41. Каждый из них отвечает за определенную разновидность вируса.
Таким образом, можно обнаружить не только наличие заболевание, но и его разновидность. От последних данных зависит особенность лечения.
Особенности анализа
Анализ крови на ВИЧ проводится от трех до шести недель. За это время появляются антитела к вирусу. Это снижает вероятность получения отрицательного результата при наличии заболевания.
Специфика исследования связана с особенностями вирусной клетки. За пределами клетки иммунной системы она не проявляет никакой активности и признаков жизни. Поэтому ее нельзя обнаружить вне клетки человека.
Анализ ИФА направлен на обнаружение Т лимфоцитов, для активации которых необходимо определенное время.
Как осуществляется изучение антител на ВИЧ
В последнее время используются реактивы третьего и четвертого поколений. Они способны обнаружить сразу несколько белков в результате скрининга: белки АГ (р24), АТ и ИБ.
Иммуноферментный анализ антитела ВИЧ основан на принципе антиген – антитело. В кровь добавляются антигены, которые должны быть связаны антителами. Если этого не происходит, результат теста отрицательный.
Совет! Результат может оказаться ложноположительным, если человек болеет или в организме идет воспалительный процесс любой природы. При плохом самочувствии и повышении температуры тест стоит отложить, чтобы не получать ложные положительные данные.
Может ли наличие антител показать на ошибку
В случае положительной реакции первого реактива, проводится повторный анализ сначала в той же системе, а потом с другими реактивами. Если все варианты дают один и тот же результат, тест считается достоверным. В случае, когда хотя бы один вариант отличается от остальных, данные считаются ложными или сомнительными. Такая кровь подвергается повторному исследованию.
Причины отклонения могут быть связаны с неправильной подготовкой лабораторного оборудования или крови для анализа.
В некоторых случаях антитела не вступают в реакцию с просроченными реактивами. При обнаружении такой ошибки на лечебное учреждение накладываются штрафные санкции вплоть до увольнения ответственных за реактивы сотрудников.
У кого обязательно берут кровь на ВИЧ
Кровь на ВИЧ обязательно берут в тех случаях, когда человек связан с факторами риска заражения других людей. К таким случаям относятся:
- Беременность (обязательно нужно обследоваться, так как можно заразить ребенка);
- При помещении в стационар и выписке из больницы (для исключения контакта с ВИЧ инфицированным);
- При устройстве в учебные и медицинские учреждения (диагностика, профилактика проводится за счет работодателя);
В случае обнаружения заболевания у педагогического или медицинского работника, он увольняется с работы или переводится в отдел, не связанный напрямую с работой с людьми или оборудованием.
Результаты обследования на ВИЧ являются конфиденциальными данными. Человек имеет право не разглашать свой ВИЧ-статус всем, кроме работодателя, если профессия требует отсутствия заболевания.
Сокрытие заболевания в течение нескольких лет сопровождается уголовной и административной ответственность, вплоть до лишения свободы, если это привело к инфицированию других людей.
При наличии 2-х параллельных серьёзных заболеваний человек имеет право получить инвалидность.
Анализ на ВИЧ анонимно
При желании можно сдать анализ кровь на ВИЧ анонимно. Такой способ имеет ряд особенностей. Как правило, анонимный анализ является платным.
Можно сдать анализ в домашних условиях. Экспресс-тесты для такой проверки продаются в аптеках. Они имеют короткий срок исполнения анализа, но более низкую достоверность, чем другие виды тестов.
Самотестирование
Если проведение тестирования для пациента неудобно. Нет возможности ждать результатов или присутствует стеснение, тест можно сделать дома. Во время проведения анализа важно учитывать стадии ВИЧ инфекции. От правильных расчетов зависит правильность определения ВИЧ.
Важно! Достоверность домашних тестов очень низкая. Слабый иммунный ответ экспресс-тестами не регистрируется, поэтому важно учитывать риск ложного результата.
При обнаружении этого вируса дома, необходимо сообщить врачу и повторить тест в лаборатории.
Когда ставят диагноз СПИД
Диагноз СПИД ставят при получении нескольких положительных результатов анализа на ВИЧ.
После обследования человеку назначают курс антиретровирусной терапии. Он призвать снизить уровень иммуноглобулина при ВИЧ.
Если процедура не дает положительного результата, необходимо проконсультироваться с врачом.
Человек не может сам, без анализа, поставить себе диагноз. Симптомы СПИДА неспецифичны. Они присущи многим заболеваниям.
Важно! Человек не может заразиться СПИДом при бытовом общении с больными ВИЧ.
О достоверном результате анализа можно говорить только после получения заключения центра СПИД.
Профилактика заболевания
К профилактике ВИЧ относится:
- Воздержание от многочисленных половых контактов;
- Использование контрацепции;
- Обращение в лицензированные медицинские учреждения и тату-салоны.
Источник
ВИЧ – бич нашего поколения. Какие существуют методы для диагностики ВИЧ, углубленная информация о ИФА-тесте на ВИЧ. Как сдавать, как трактовать результаты анализа.
ВИЧ. Причины и последствия
Вирус иммунодефицита человека – одна из самых страшных инфекций для нашего поколения.
ВИЧ деструктивно влияет на нашу иммунную систему, и если вовремя не остановить прогресс заболевания, он может трансформироваться в синдром приобретенного иммунодефицита. ВИЧ распространяется через непосредственный контакт партнеров при сексуальном акте через мужские и женские половые органы. Еще одной причиной заражения может стать попадание вируса через кровь. Это происходит вследствие использования нестерильных инструментов, переливанием зараженной крови и даже через поколения: ребенку от инфицированной матери при кормление грудью.
До сих пор ученые по всему миру ломают голову над созданием лекарства нового поколения, способного излечить от СПИДа, однако, несмотря на большие темпы научного прогресса, вирус иммунодефицита человека продолжает распространяться по планете.
ИФА – метод диагностики ВИЧ
Учеными поколения 20-го века разработано несколько методов диагностики ВИЧ, важнейшим из которых считают иммуноферментный анализ. ИФА на ВИЧ стали проводить относительно недавно – в начале девяностых годов. С течением времени метод оттачивался, приобретал новые детали. Теперь достоверность метода ИФА одна из самых высоких – около 98%. Соответственно, такой метод проводится все чаще.
ИФА – первый анализ, с которым сталкивается пациент при обследовании на ВИЧ. Метод ИФА определяет наличие в крови антител. Если тест находит присутствие антител в крови, значит, и вирус присутствует. Однако, информацию по этому тесту необходимо подкреплять и другими анализами, такими как иммунный блоттинг (ИБ) и метод последнего поколения – полимеразная цепная реакция (ПЦР).
Антитела – специальные белковые соединения, которые продуцируют плазматические клетки после как реакцию на попадание в организм инфекции (антитела начинают образовываться через 1-2 месяца с момента заражения).
Причины возникновения ВИЧ
Врач выпишет вам направление на анализ, если вы контактировали с человеком, зараженным ВИЧ либо существует опасность инфицирования. К группе опасности заражения ВИЧ относят поколения людей:
- проходящих в течение месяца курс инъекционного лечения;
- имеющих сексуальные отношения без специальных средств предохранения;
- переносчиков инфекций, передающихся во время сексуального контакта;
- пациентам после прохождения процедуры переливания крови либо укола обнаружения причины свертывания крови в восьмидесятые годы.
Если у вас есть сомнения относительно вашего ВИЧ-статуса и опасения, связанные с возможностью заражения, рекомендуется незамедлительно обратиться за помощью в любое медицинское учреждение нашей страны для проведения комплексного обследования на ВИЧ. Результат на анализы получают в течение месяца. Людям в группе риска по ВИЧ рекомендуется проходить обследование через каждые 4 месяца.
Как сдать анализ
Какой-то особенной подготовки к сдаче анализа крови на ВИЧ не требуется, однако лучше придерживаться простейших правил:
- лучше не кушать с вечера, а сдавать анализ натощак утром;
- не советуют загружать организм физической работой;
- употреблять здоровую пищу, воздержаться на некоторое время от сигарет и алкоголя;
- для исключения ложных показателей теста не стоит сдавать анализ после лечения серьезных заболеваний.
Сама процедура сдачи анализа осуществляется довольно быстро, а вот исследование образца и определение показателей проходит от нескольких дней до половины месяца. В случае, если у вас есть боязнь уколов или вы склонны к головокружениям от вида крови, стоит заблаговременно известить об этом медперсонал.
Суть проведения анализа
Обычно перед сдачей анализа медицинский работник просит заполнить анкету, в которой вы подписываете пункт о согласии на проведение процедуры. Специалист предлагает брошюры для ознакомления, объясняет основные принципы проведения теста:
- Кожный покров локтевого сустава пациента обрабатывается обеззараживающей жидкостью;
- Пережимают локтевую вену специальной повязкой, ограничивая отток крови;
- С помощью шприца производят забор материала из вены пациента, обычно 5 мл;
- Использованный шприц выбрасывают, пациенту обрабатывают место инъекции и просят согнуть руку в локте, чтобы уменьшить кровотечение;
Вы, возможно, будете ощущать некоторый дискомфорт при проведении анализа и даже болезненные ощущения при использовании шприца. Дрожь в руке после забора крови – нормальное явление. Дышите ровно, не стоит волноваться – дискомфорт быстро исчезнет.
Проба материала подвергается тщательному лабораторному исследованию: в специальном медицинском приборе – чашке Петри находится жидкость с антигеном. Антиген – чужеродный микроорганизм, провоцирующий защитную реакцию организма. Испытуемую пробу крови смешивают с жидкостью в чашке Петри. Антитела, содержащиеся в крови, образуют соединения с антигеном, а специалист визуально фиксирует изменение окраски вещества. То есть результат теста положительный, антитела найдены, значит, инфекция есть в организме. Результат анализа действителен 4 месяца.
Осложнения при анализах
Как правило, проведение анализов не представляет опасности для здоровья, тем не менее, редкие случаи осложнений имеют место быть:
- Обморочное состояние, если пациент слишком эмоционально переживает процедуру;
- Образование гематомы на месте инъекции;
- Попадание инфекции при инъекции;
- Плохая свертываемость крови.
Если пациент подвержен этим рискам, болен гемофилией или испытывает другие проблемы, препятствующие нормальному проведению анализа, необходимо в первую очередь сообщить об этом врачу.
Расшифровка результатов ИФА
Как правило, положительный результат теста ИФА указывает на присутствие инфекции ВИЧ в организме. Реже случается, что тест дал ложноположительный результат, то есть при показаниях теста о наличии вируса, на самом деле вируса в организме нет. В таких случаях требуется пройти другие анализы, чтобы подтвердить достоверность анализа. Исходя из практики, ложноположительный результат на заражение ВИЧ может показать тест ИФА при болезни волчанки, сифилиса, болезни Лайма или других серьезных заболеваний нашего поколения.
Достоверность теста ИБ довольно высока – около 98%. Положительный результат на иммунный блоттинг в совокупности с положительным результатом теста ИФА с минимальной долей погрешности свидетельствует об инфицировании ВИЧ.
На начальном этапе инфицирования, когда антитела к вирусу еще не выработались или выработались в недостаточном для идентификации количестве (в так называемый период окна), результат анализа может быть ложноотрицательным. Как и при ложноположительном результате, анализ необходимо подтвердить другими тестами на ВИЧ. Медицинские исследования фиксируют стандартную длительность периода окна около месяца – от 14 до 56 дней. Очень редкими бывают случаи, когда антитела начинают продуцироваться через пол года с момента инфицирования.
Источник
Инфекция, вызванная вирусом иммунодефицита человека, – серьезный диагноз. Ошибки при диагностике могут привести к плачевным последствиям. Анализ ИФА на ВИЧ – наиболее доступный метод исследования, но не во всех случаях он информативен.
Что такое ИФА
ИФА – иммуноферментный анализ. Задача метода ИФА – выявление антител к вирусу иммунодефицита в биологическом материале. С помощью метода можно отследить присутствие в жидкости не самих вирусов, но только антител, вырабатывающихся в ответ на их присутствие. Иммуноферментный анализ широко используется при диагностике ЗППП. Он помогает выявить ВИЧ и другие инфекции, передающиеся половым путем.
Существует несколько видов ИФА: прямой вариант, косвенный вариант, метод «сэндвича». В любом случае методика основана на определении наличия антител, которые служат индикатором проникновения чужеродного агента. Чтобы выявить эти «метки», биологический компонент обрабатывают ферментами.
Иммуноферментный анализ определяет антитела с точностью 96 – 98%, погрешность незначительна. Она составляет 2 – 4%.
ИФА – метод диагностики ВИЧ
ИФА анализ на ВИЧ – это первый этап диагностики. Антигенами вируса иммунодефицита являются протеины p24, p15, p17, p31 и гликопротеины gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160.
Чтобы обнаружить вирусный белок, берут порцию крови из вены. Образец, направленный на исследование крови ИФА, обрабатывают иммуноферментными реагентами. Из крови выделяют сыворотку. Если в ходе исследования обнаруживаются антитела к ВИЧ, значит, в крови уже присутствует вирус.
Кровь сдают строго натощак. За 2 дня до анализа не рекомендуется есть жирную пищу и употреблять алкоголь. Следует за 14 дней прекратить прием противовирусных препаратов.
Преимущества метода:
- сравнительно небольшая стоимость;
- высокая стабильность реагентов;
- высокая чувствительность;
- короткий срок проведения;
- минимальное влияние человеческого фактора.
Современные тест-системы для ИФА производят по мировым стандартам. Это повышает точность метода.
Иммуноферментный анализ не всегда дает достоверные результаты. После попадания вируса в кровь начинается латентная (скрытая) стадия развития. Период, пока вирусы не начали размножаться, и антитела еще не сформированы, называется «время серонегативного окна». Делать ИФА на этом этапе бессмысленно. Если заражение произошло, результат будет ложноотрицательным. Как быстро вирус себя обнаружит, зависит от того, какое количество опасных клеток попало в организм. При незащищенном половом акте или переливании зараженной крови этот срок будет минимальным.
Для высокой достоверности ИФА на ВИЧ исследование проводят трижды. Сроки сдачи ИФА на вирус иммунодефицита человека:
- через 6 недель после вероятного контакта,
- через 3 месяца,
- спустя полгода.
ИФА 4 поколения на ВИЧ – метод, наиболее информативный на ранних сроках заражения. Его можно проводить уже через 1 месяц после предполагаемого инфицирования. Тест на ВИЧ 4 поколения является дорогостоящим по сравнению с аналогом 3-го поколения. Поэтому в государственных медучреждениях он используется как дополнительный метод диагностики. Бесплатно проводится тест 3. Если по его итогам однозначного ответа дать нельзя, пациента направляют на ИФА 4 поколения.
Важно! Сразу после инфицирования человек становится заразным. Он опасен для окружающих, даже когда еще не знает о своем диагнозе!
Если при ИФА выявлены антитела к антигенам ВИЧ, необходимо проводить дополнительные исследования. К таким относится полимеразная цепная реакция (ПЦР). Достоверность этого метода – 80%. С помощью ПЦР исследуют кровь, сперму и влагалищные выделения. Биологическую жидкость расщепляют в медицинском реакторе, затем подвергают обработке ферментами. В итоге получают данные о том, какова концентрация клеток ВИЧ в жидкой среде. Из-за большой погрешности (20%) при положительном результате дополнительно проводят иммунный блоттинг.
Следующий этап диагностики – тест Комбо (или иммунный блоттинг). Это высокочувствительное исследование (98% достоверности), которое проводят, если через 6 месяцев результаты ИФА неоднозначны.
Расшифровка результатов ИФА
Время расшифровки составляет от 24 до 48 часов. Если необходимо получить информацию срочно (требуется хирургическое вмешательство), расшифровку проводят за 2 часа. В провинциальных медицинских пунктах не всегда есть необходимые реагенты. Пробу берут по месту обращения, затем ее передают в областной центр. При таких обстоятельствах итог можно узнать через 1- 2 недели.
Результат иммуноферментного анализа может быть либо положительным, либо отрицательным; других вариантов нет.
Даже если при первичном и повторных ИФА итог был положительным, пациента нельзя признать ВИЧ-инфицированным. Возможна погрешность. Причины ложноположительного результата:
- хронические заболевания;
- длительные инфекционные заболевания;
- беременность.
Поэтому результат анализа должен быть уточнен дополнительными исследованиями.
Если при проведении иммуноблоттинга на ВИЧ результат положительный (реактивный), человек считается ВИЧ-инфицированным, а отрицательный тест значит, что он здоров.
Проводится еще тест на вирусную нагрузку. Этот показатель при ВИЧ характеризуется количеством вирусных частиц в единице крови (анализ определяет РНК-частицы вируса). Нормой считается количество от 5000 до 15000 клеток вируса в единице крови.
Если цифра находится в этих пределах, либо меньше, вирус неактивен. Даже в случае дальнейшего подтверждения позитивного ВИЧ-статуса человек не заметит перемен в состоянии здоровья долгое время (10 – 15 лет). Если нагрузка менее 20000 клеток, это близко к норме. Когда число вирусных клеток увеличивается, следует незамедлительно начинать противовирусную терапию.
Что делать при положительном ИФА
Отрицательный иммуноферментный анализ 3-го и 4-го поколения показывает с высокой достоверностью (98%), что человек здоров. Для подтверждения положительного ВИЧ-статуса проведения ИФА недостаточно.
Если при первом и повторных тестах в крови обнаружены антигены ВИЧ, человек получает направление на иммуноблоттинг. Когда в ходе исследований выясняется, что человек имеет ВИЧ-позитивный статус, ему следует обратиться к врачу. Он определит вирусную нагрузку и назначит терапию.
Клетки вируса со временем адаптируются к назначенным препаратам. Чтобы контролировать эффективность лечения, тест ИФА периодически повторяют.
Иногда иммуноблоттинг показывает ложноотрицательный результат. Крайне редко вирус иммунодефицита 6 месяцев (и более) не проявляет себя. Это возможно, если в кровь попало незначительное количество клеток вируса. В 0,5% от общего числа случаев диагностировать заражение удается лишь через год. В 99,5% в течение полугода после инфицирования при проведении ИФА получится достоверный результат.
Даже при проведении высокоточных исследований остается вероятность ошибки, составляющая 2%. Не следует забывать о человеческом факторе. Чтобы исключить вероятность ошибки, тест можно провести в 2-х разных учреждениях.
Источник