Анализ крови льюис что это

В Институте судебной медицины путем иммунизации кроликов и коз мы получили гетероиммунные сыворотки системы Льюис (Судебно-медицинская экспертиза, 1962, № 4.). Одни из них обладали полными, другие — неполными антителами.

Сыворотки с полными антителами (агглютининами) имели более низкие титры, чем сыворотки с неполными антителами. Титр сывороток с полными агглютининами анти-Lea был равен 1:8—1:16, в то время как титр тех же сывороток с неполными антителами достигал 1:64-1:128. Высота титра сывороток анти-Leb колебалась в зависимости от группы системы АВО применяемых эритроцитов.

Сыворотки анти-Leb, содержащие полные антитела, с эритроцитами Le(b+) группы 0 имели титр 1:32, с эритроцитами группы А — 1:8 и с эритроцитами группы В — 1:16. Сыворотки анти-Leb с неполными антителами соответственно обладали более высокими титрами: с эритроцитами Le(b+) группы 0 высота титра достигала 1 : 128, с эритроцитами группы А — 1 : 32 и с эритроцитами группы В — 1:64.

Следовательно, наиболее высокие титры сывороток анти-Ьеь отме­ чены с эритроцитами группы 0 и наиболее низкие — с эритроцитами группы А.

Приведенные данные согласуются с указаниями Диланея, Берд (Dilaney, Bird) и др., которые считают, что сыворотки анти-Leb значительно лучше выявляют агглютиноген Le(b+) в эритроцитах групп 0 и А2 и слабее или вовсе не обнаруживают его в крови группы А. Они считают, что агглютиноген А как бы препятствует развитию агглютиногена Le(b+).

Полученные нами гетероиммунные сыворотки анти-Ьеа и анти-Ьеь имеют ряд преимуществ перед таковыми изо- и изоиммунными. В отличие от последних они обладают более высокими титрами, активны при комнатной температуре и сохраняют свои свойства при 4—8° в течение года (срок наблюдения).

Этими сыворотками исследовали кровь доноров на наличие агглютиногенов системы Льюис.

Определение проводили сыворотками анти-Lea и анти-Leb, содержащими полные и неполные антитела. Для выявления агглютиногенов этой системы в эритроцитах реакцию агглютинации проводили пробирочным методом. К 2 каплям сыворотки добавляли каплю 2% взвеси трипсинизированных или не обработанных трипсином исследуемых эритроцитов: первые — для сывороток с неполными антителами, вторые — с полными. Смесь центрифугировали 4 мин. при 750—1000 об/мин и встряхивали. Реакцию учитывали невооруженным глазом под микроскопом.

Обработку трипсином проводили добавлением к 1 объему трижды отмытых эритроцитов 1,5 объема 0,1% раствора трипсина. Смесь оставляли на 30 мин. в водяной бане при 37°, центрифугировали и после сливания надосадочной жидкости использовали, как указано выше.

Обработанные эритроциты отчетливо агглютинировались при наличии в сыворотках неполных антител.

Всего исследовали кровь 1073 доноров. Выявляли агглютиногены Le(a+) , Le(b+) и группу крови Le(a-b-).

Каждый образец крови испытывали 4 сыворотками: двумя анти-Lea и двумя анти-Leb (с полными и с неполными антителами).

Как правило, реакция агглютинации эритроцитов была выражена значительно сильнее с сыворотками, обладающими неполными антите­ лами, имеющими значительно более высокие титры. В отдельных случаях слабовыраженный агглютиноген Le(b+) в крови группы А не удавалось открыть сывороткой анти-Leb с полными антителами, тогда как сывороткой, содержащей неполные антитела, во всех случаях агглютиноген Le(b+) определялся ясно.

В результате исследования этих образцов крови (см. таблицу) была выявлена группа Le(a+b-) у 146 человек (13,6%), группа Le(a-b+) — у 811 (75,6%) и группа Le(a-b-) — у 116 (10,8%).

Распределение групп системы Лыоис в зависимости от групп изосе­ рологической системы АВО дано в таблице, из которой видно, что наиболее часто агглютиноген Le(a+) наблюдается у лиц с группой крови А (15,9%) и АВ (14,1%), реже он выражен у доноров с группой крови 0 (12,1%).

Обратная картина наблюдается в отношении агглютиногена Le(b+). Наиболее часто он выражен у лиц с группой крови 0 (80,5%), реже встречается в крови доноров, имеющих группу А (70,2%) и АВ (73,8%).

Группа Le(a-b-), по нашим данным, чаще наблюдается среди лиц с группой крови А — в 13,9% и АВ — в 12,1%, тогда как лица с группой крови 0 имеют его лишь в 7,4%.

Распределение групп системы Льюис в зависимости от групп системы АВО

Представленные результаты согласуются с данными зарубежных авторов [Путконен (Putkonen); Сепих (Sepich); Андрезен (Andresen); Грубб (Grubb); Сэнджер (Sanger); Симмонс (Simmons) и др.]. По их данным, агглютиноген Le(a+) у европейцев встречается от 13,7 до 25%. Содержание агглютиногена Le(b+) обнаруживается в 64—74,8% [Андрезен, Брендемен (Brendemoen)] у лиц с группой крови 0 и лишь в 42% у лиц с группой крови А и АВ. Что касается группы Le(a-b-) , то по данным Малассане (Malassanet), она достигает 37% среди населения Франции с группой крови А и 10% — с группой крови 0. По указаниям Андрезена, у датчан группа Le(a-b-) встречается у 6% лиц с группой крови 0.

В литературе мы не нашли указания о распределении групп системы Льюис у населения СССР.

Выводы

Полученные нами гетероиммунные сыворотки анти-Lea и анти-Le(b хорошо выявляют агглютиногены системы Льюис в жидкой крови, выворотки с неполными антителами, имеющими более высокие титры, дают более сильную реакцию, чем сыворотки с полными антителами. Последние в единичных случаях не выявляют слабовыраженные агглютиногены системы Льюис.

Изосерологическая система Льюис может быть использована для судебно-медицинских целей (за исключением разрешения вопроса о спорном отцовстве, спорном материнстве и принадлежности ребенка тем или иным родителям, поскольку группы системы Льюис пока не поддаются генетическому анализу), при переливании крови и в антропологии.

Система Р используется также для определения групповой принадлежности крови. Антиген Р недостаточно устойчив к воздействию факторов внешней среды и присутствует в эритроцитах примерно у 70—80 % европейского населения. У разных людей антиген Р имеет различную силу выраженности — сильную, умеренную и слабую. Слабый антиген может не выявляться в следах крови либо обнаруживаться лишь в очень свежих пятнах. Сильный антиген Р выявляется в следах значительной давности — от 4—5 мес. Для определения групповой принадлежности следов крови по системе Р требуется 40—50 мг пятна крови. При этом обязательно учитывается сила выраженности антигена Р в крови проходящих по делу лиц, для чего исследуются образцы их жидкой крови. Значение имеет лишь обнаружение антигена Р в пятне крови (установление Р-положительной крови). Невыявление антигена Р в исследуемом пятне может быть как результатом Р-отрицательной крови, так и возможного разрушения антигена Р-положительной крови.

Система Льюис (Le) характеризуется четырьмя антигенами— Le (a), Le (b), Le (с), Le (d), причем в крови каждого человека обязательно содержится один из этих антигенов, что обусловливает наличие в этой системе четырех групп крови Le (а + ), Le (b+), Le (c+), Le (d+) со средней частотой встречаемости соответственно 25, 60, 12 и 3%.

В качестве особенности этой системы следует отметить ее связь с явлением выделительства групповых антигенов системы АВ0(Н).

Примерно 85 % людей являются выделителями своих групповых антигенов системы АВ0 (Н), в 15% — невыделители. Это значит, что во всех выделениях (сперма, слюна, пот, выделения влагалища, моча) человека, являющегося выделителем, содержится групповой антиген системы АВ0, соответствующий его крови, например антиген А при группе крови А (II). В выделениях человека с этой же группой А (II) крови, но относящегося к невыделителям, антиген А будет отсутствовать либо будет выражен слабо. Деление людей на выделителей и невыделителей групповых антигенов в системе АВ0(Н) позволяет дифференцировать происхождение пятна спермы от двух лиц с одинаковой группой крови, но различающихся по категории выделительства — обнаружение в пятне спермы антигена системы АВО(Н) позволит исключить его происхождение от лица, являющегося невыделителем группового антигена.

У живых лиц категорию выделительства обычно определяют по выраженности групповых антигенов системы АВ0(Н) в образцах их слюны. У трупов она определяется по трупной крови посредством выделения в ней групповых антигенов системы Льюис. Установлено, что лица с группами Le (b+) и Le (d+) всегда являются выделителями групповых антигенов системы АВО(Н), а с группами Le (a+) и Le (с + ) — невыделителями.

Группы системы Льюис в эритроцитах крови человека формируются довольно поздно, к 6—7 годам. В крови новорожденных и детей первых дней жизни часто содержатся два антигена этой системы — Le (а) и Le (b), что может быть использовано для дифференциации крови взрослого человека и новорожденного (плода) в экспертизах, проводимых в связи с криминальным абортом, детоубийством и др. В эритроцитах крови беременных женщин наблюдается резкое ослабление выраженности антигенов Льюис. Об этом надо помнить в случаях, когда по обстоятельствам дела допускается возможность происхождения следов крови на вещественных доказательствах от беременной женщины или родильницы. Устойчивость антигенов Льюис к воздействию факторов внешней среды позволяет определять группы этой системы в пятнах крови значительной давности — до года и выше. Выявление их производится как методом количественной абсорбции агглютининов, так и методом абсорбции-элюции.

Система резус содержит семь наследуемых антигенов: D, С, Cw, Е, d, с, е. Ее антигены в различных сочетаниях образуют около 100 возможных групп крови. В крови резус-положительных людей содержится хотя бы один из антигенов D, С, Cw, Е. Резус-отрицательные люди не содержат в крови ни одного из указанных четырех антигенов. Около 85 % всех людей являются резус-положительными и около 15% — резус-отрицательными.

В следах крови антигены системы резус выявлять сложно из-за малой их устойчивости и отсутствия высокочувствительных сывороток, специфически открывающих определенный антиген. Наиболее устойчивым является антиген D, в связи с чем диагностика групп резус в следах практически сводится в настоящее время к выявлению лишь этого антигена методом абсорбции-элюции.