Анализ крови кошки на группу крови
| Код | Наименование услуг | Цена, руб. | Доступность экспресс | Ед. измер. | Материалы | Заказать |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 2852 | Группа крови кошек (генетический анализ) | 1 050 p (Время исполнения до 20 раб. дней) | 1 исслед. | I C |
Группа крови – признак, определяемый индивидуальными антигенными характеристиками эритроцитов – красных кровяных телец крови.
В отличие от человека, собаки, лошади и большинства других видов млекопитающих, для домашней кошки описана только одна система группы крови, включающая два основных типа – группу крови А и группу крови B, а также очень редкую группу крови АB (группы крови принято обозначать латинскими буквами).
Большинство кошек имеет группу крови А, но существует ряд пород, в которых группа B также распространена. Например, частота встречаемости группы крови B у британских кошек, корниш и девон рексов достигает от 25 до 50%, в то время как для сиамской и близких ей пород она крайне редка.
Взятие
Кровь (2 мл) в пробирке с антикоагулянтом. (цитрат натрия, К3ЭДТА, К2ЭДТА) , буккальный эпителий
2. Копия родословной (не обязательно)
3. Наличие клейма или чипа ( не обязательно, под ответственность сдающего)
БЕЗ ИДЕНТИФИКАЦИИ, МЫ НЕ НЕСЕМ ОТВЕТСТВЕННОСТИ, ЧТО ПРИСЛАННЫЙ МАТЕРИАЛ ПРИНАДЛЕЖИТ ЖИВОТНОМУ УКАЗАННОМУ В НАПРАВЛЕНИИ.
ВАЖНО для взятия буккального эпителия:
За два часа до проведения процедуры взятия биоматериала животное следует не кормить, желательна изоляция от других животных.
Для щенков и котят как минимум за два часа до взятия биоматериала надо исключить кормление грудным молоком. Рекомендуется промыть ротовую полость водой (для удобства можно использовать шприц).
ЕСЛИ ВЫ ДОСТАВЛЯЕТЕ ТОЛЬКО МАТЕРИАЛ, ОЗНАКОМТЕСЬ С ИНСТРУКЦИЕЙ
Значение
Знание группы крови питомца необходимо в двух случаях:
— при необходимости трансфузии (переливания крови);
— при планировании вязки.
В настоящее время группу крови кошки можно определить ДНК-тестом.
Для обозначения групп крови используют следующую генетическую номенклатуру:
Группа крови
Аллель
Генотип
А
А
A/A, A/a, A/b
АB
а
a/a, a/b
B
b
bb
Группа крови А доминантна по отношению к группе крови B. Генетический тест определяет кошек группы крови B, имеющих две копии аллеля b, и кошек-носителей, у которых только одна копия аллеля b. Во втором случае животное может иметь группу крови А или АB. Т.к. генетический тест не разделяет аллели А и а, для формирования ответа принято использовать условное обозначение «не B» аллель (Non-B или просто «N»)
Результаты ДНК-теста:
енотип
Расшифровка
N/N
— группа крови А или редкая группа АB
N/b
— группа крови А или АB, носитель группы крови B
b/b
— группа крови B
Материал
aМазок в пробирку со средой Кери-Блера
bМазок в пробирку со средой Эймса (Стюарта)
eСмывы со слизистых в пробирку Эппендорфа (с физраствором 0.5 мл)
fКал в контейнере с ложечкой
gСодержимое желудка 10-30 мл
iКровь 2-3 мл. на фильтр-бумаге, высушенная для генетических исследований
kОбразцы тканей не более 2х2 см в контейнере с 10% раствором формалина
lМатериал берется только в лаборатории!
nМолоко в контейнере 10-30 мл
pКровь в пробирку с К3ЭДТА (К2ЭДТА)
sКровь в пробирку для получения сыворотки/сыворотка
tКлещ (не > 2 шт.), плотно закрытая сухая пробирка типа Эппендорф
uМоча во флаконе 3 — 10 мл
vВыпоты или биологические жидкости в контейнере или в шприце
wВолос (шерсть) в пробирке Эппендорфа
xСмывы буккального эпителия
zБиопсийный эндоскопический материал в 10% растворе формалина. До 10 фрагментов с одной локации.
rРектальный смыв в пробирку Эппендорфа (с физрастворм 0,5 мл)
оМазок-отпечаток на стекло
c Паренхиматозные органы в герметичном пакете
hКровь в пробирку для определения гемостаза (цитрат Na 3,8%)
jЭякулят в стерильном контейнере
qБронхо-альвеолярный лаваж в контейнере или шприце (5-10 мл)
yБиоптат слизистой желудка в пробирку Эппендорфа (с физраствором 0.5 мл)
смотри специальные условия на сайте
Источник
Группа крови – признак, определяемый индивидуальными антигенными характеристиками эритроцитов – красных кровяных телец крови.
В отличие от человека, собаки, лошади и большинства других видов млекопитающих, для домашней кошки описана только одна система группы крови, включающая два основных типа – группу крови А и группу крови B, а также очень редкую группу крови АB (группы крови принято обозначать латинскими буквами).
Большинство кошек имеет группу крови А, но существует ряд пород, в которых группа B также распространена. Например, частота встречаемости группы крови B у британских кошек, корниш и девон рексов достигает от 25 до 50%, в то время как для сиамской и близких ей пород она крайне редка.
Знание группы крови питомца, как правило, важно в двух случаях:
— при необходимости трансфузии (переливания крови);
— при планировании вязки.
Подобно человеческой АB0 системе группы крови, у кошек одной группы в крови присутствуют антитела к другой. Однако антитела разных групп крови проявляют разную активность. Так антитела кошек с группой крови B активно связывают чужеродные эритроциты, содержащиеся в крови кошки с группой А, и уничтожают их, в то время как антитела, циркулирующие в крови кошки группы крови А, проявляют значительно меньшую активность. Интересно отметить, что кошки группы крови АB являются универсальными реципиентами, т.е. не проявляют реакции «отторжения» крови других типов, что связано с отсутствием антител к другим группам.
Котят, родившихся от пары, где кошка имеет группу крови B, а кот – А, может ждать печальная участь – «Синдром внезапной смерти котят». Котята нормально развиваются в утробе матери, но вскоре после рождения умирают.
Первое время иммунная система котенка очень слаба, и мать вместе с молоком передает ему свои антитела, которые всасываются через стенку кишечника малыша и попадают в его кровоток. В случае несовместимости группы крови кошки и котенка (у кошки группа крови B, у котенка — А), антитела матери атакуют эритроциты котенка, вызывая их агглютинацию, т.е. разрушение. В результате у малыша наступают анемия и нарушение обмена веществ, что может привести к смерти.
В некоторых случаях, несмотря на несовместимость, котята выживают. Это связано с индивидуальными особенностями организма, такими как, например, низкая всасываемость стенками кишечника в первые дни после рождения.
В настоящее время группу крови кошки можно определить ДНК-тестом.
Для обозначения групп крови используют следующую генетическую номенклатуру:
Группа крови | Аллель | Генотип |
А | А | A/A, A/aab, A/b |
АB | аab | aab/aab, aab/b |
B | b | b/b |
Аллель группы крови А доминантен по отношению к аллелям aabи b, аллель aabдоминирует над аллелем b (А>aab>b). Генетический тест определяет кошек группы крови B, имеющих две копии аллеля b, и кошек-носителей, у которых только одна копия аллеля b. Во втором случае животное может иметь группу крови А или АB. Т.к. генетический тест не разделяет аллели А и aab, для формирования ответа принято использовать условное обозначение «не B» аллель (Non—B или просто «N»)
Результаты ДНК-теста:
Генотип | Расшифровка |
A/A | — группа крови А или редкая группа АB |
A/b | — группа крови А или АB, носитель группы крови B |
b/b | — группа крови B |
Правильно подобрав пару, можно избежать проблемы гемолиза у потомства. В таблице представлены возможные варианты генотипов котят в зависимости от генотипов родителей.
КОТ | ||||
A/A | A/b | b/b | ||
КОШКА | A/A | A/A | A/A, A/b | A/b |
A/b | A/A, A/b | A/A, A/b, b/b | A/b, b/b | |
b/b | A/b | A/b, b/b | b/b | |
Прим.: голубым цветом выделены генотипы кота, розовым – генотипы кошки, зеленым – генотипы котят. Красным выделены генотипы котят группы риска.
Источник
| Код | Наименование услуг | Цена, руб. | Доступность экспресс | Ед. измер. | Материалы | Заказать |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 204 | Определение групп крови кошек (серологический анализ) | 1 800 p (Время исполнения 1 час) | в филиалах на НАГОРНОЙ, Юго-западный (ул.Рябиновая), на ПЕРВОМАЙСКОЙ и в г.Апрелевка | 1 исслед. | P C |
ВНИМАНИЕ! АНАЛИЗ доступен только в филиалах на НАГОРНОЙ, Юго-западный (ул.Рябиновая) и ПЕРВОМАЙСКОЙ
В результате исследования могут быть выявлены группы: А, В или АВ.
Знание группы крови питомца необходимо в двух случаях:
— при необходимости трансфузии (переливания крови)
— при планировании вязки рекомендуем определять группу методом генетической экспертизы
Взятие
Внимание!
Животные (собаки, кошки), которым проводилась гемотрансфузия (переливание крови) за 3 мес и менее до исследования, не подлежат тестированию на определение группы крови данным методом!
— Кровь пробирке с антикоагулянтом (К2 или К3 ЭДТА) (пробирка с зеленой или сиреневой крышкой), минимальный объем — 1.0 мл
— при взятии пробы необходимо выбрать пробирку с ЭДТА, расчитанную на забираемый объем крови; при нарушении соотношения кровь:антикоагулянт результаты исследования у животных с выраженной анемией могут быть некорректны или трудно интерпретируемы
Значение
У кошек три группы крови : А, В и редкий тип АВ. Кошка с группой А могуть быть гомозиготной (А/А) или гетерозиготной (А/В). Животные с группой В всегда гомозиготны по аллелю В (В/В). Процент кошек с группой В внутри породы варьирует между 0,3% и 59% в зависимости от конкретной породы.
Материал
aМазок в пробирку со средой Кери-Блера
bМазок в пробирку со средой Эймса (Стюарта)
eСмывы со слизистых в пробирку Эппендорфа (с физраствором 0.5 мл)
fКал в контейнере с ложечкой
gСодержимое желудка 10-30 мл
iКровь 2-3 мл. на фильтр-бумаге, высушенная для генетических исследований
kОбразцы тканей не более 2х2 см в контейнере с 10% раствором формалина
lМатериал берется только в лаборатории!
nМолоко в контейнере 10-30 мл
pКровь в пробирку с К3ЭДТА (К2ЭДТА)
sКровь в пробирку для получения сыворотки/сыворотка
tКлещ (не > 2 шт.), плотно закрытая сухая пробирка типа Эппендорф
uМоча во флаконе 3 — 10 мл
vВыпоты или биологические жидкости в контейнере или в шприце
wВолос (шерсть) в пробирке Эппендорфа
xСмывы буккального эпителия
zБиопсийный эндоскопический материал в 10% растворе формалина. До 10 фрагментов с одной локации.
rРектальный смыв в пробирку Эппендорфа (с физрастворм 0,5 мл)
оМазок-отпечаток на стекло
c Паренхиматозные органы в герметичном пакете
hКровь в пробирку для определения гемостаза (цитрат Na 3,8%)
jЭякулят в стерильном контейнере
qБронхо-альвеолярный лаваж в контейнере или шприце (5-10 мл)
yБиоптат слизистой желудка в пробирку Эппендорфа (с физраствором 0.5 мл)
смотри специальные условия на сайте
Источник
Все мы еще со школы знаем, что у людей кровь бывает разных групп. Мало кто задумывается, что животные в этом плане от нас совсем не отличаются. У наших питомцев также встречаются разные группы крови. Что же такое «группа крови»?
На поверхности красных кровяных телец, эритроцитов, есть специальные белки-антигены. У обладателей разных групп крови эти белки отличаются. По ним организм распознает, свой это объект или чужой. В плазме крови содержатся антитела к чужим антигенам, ответственные за их уничтожение. Эритроциты с чужими белками уничтожаются, поэтому переливание крови не той группы приводит к осложнениям, а иногда и гибели.
Какие группы крови есть у кошек?
В настоящее время у кошек выделяют 3 группы крови: А, В и АВ. Чаще всего встречаются кошки с группой крови А, реже – В, и уж совсем редко АВ. Распространенность разных групп различается в разных породах и в разных местах проживания. Так, например, среди представителей британской короткошерстной породы или корниш-рекс и девон-рекс группа В встречается довольно часто, а все сиамские кошки – обладатели группы А.
Зачем знать группу крови кошки?
Каждый владелец кошки может столкнуться с ситуацией, когда его питомцу будет необходимо срочное переливание крови. В таком случае знание группы крови кошки-реципиента упростит поиск доноров. Особенно это актуально для владельцев нескольких кошек, ведь если мы знаем группы крови всех своих питомцев, то также знаем, кто из них при необходимости может спасти жизнь другому.
Осведомленность о группах крови кошек необходимо заводчикам, особенно тех пород, для которых распространенность группы крови В велика. В случае вязки кошки с группой крови В с котом с группой крови А котята, родившиеся от такой пары и унаследовавшие группу крови отца, скорее всего погибнут. Это связано с тем, что с молозивом от кошки котята получают антитела против эритроцитов, несущих антигены А-группы. Полученные антитела активно разрушают эритроциты котенка, и здоровый крепкий новорожденный котенок погибает неожиданно для заводчика через 2-3 дня после рождения от гемолитической анемии. Избежать гибели котят можно, заранее подбирая кошке с группой крови В такого же кота либо вовсе избегая использования таких кошек в разведении. Если же вязка кошки с группой крови В и кота с группой крови А произошла, то котята от такой пары должны быть отняты от матери сразу после рождения и 72 часа вскармливаться искусственно. Через 3 дня после рождения кишечник котенка уже не пропустит материнские антитела, и котят можно будет безбоязненно вернуть матери.
Как легко и быстро узнать группу крови кошки?
Еще совсем недавно точное определение группы крови у кошки было довольно непростым делом. В настоящее время есть специальные моментальные тесты для определения групп крови. Достаточно поместить пластинку экспресс-теста в небольшое количество крови кошки, и уже через пару минут по месторасположению проявившихся полосок станет понятно, обладателем какой группы крови является кошка.
Здоровья Вам и Вашим питомцам!
© 2020 Команда «ЗООВЕТ»
Мы всегда рады Вам помочь!
Круглосуточная консультация:
+7 (495) 775-94-24
Запись на прием
clients@zoovet.ru
Вернуться к списку
Источник
В связи с тем, что практика ветеринарной гемотрансфузиологии за последние годы пережила период значительного роста, возросла значимость определения групп крови у кошек. В частности, растет необходимость в определении групп крови, поскольку только при предварительном определении группы крови у реципиента при переливании крови возможно избежать потенциально опасных для жизни ошибок при переливании.
У кошек система групповых антигенов крови описана как состоящая из двух антигенов, выраженных либо одиночно, либо в сочетании: А группа, В группа и АВ группа. Антигены неродственны человеческим А В О-антигенам и определяются по аллоиммунным сывороткам кошачьих. Встречаемость группы крови варьируется в зависимости от породы. Группы крови у кошек передаются по наследству как простые аутосомные признаки, при этом А группа доминирует над В группой. Большинство кошек обладают антигеном А, и около одной трети из них имеют природное анти-В антитело с низким титром. Кошки с В группой все имеют природное анти-А антитело с высоким титром.
Инструкция
Анализ на определение группы крови RapidVet
Для проведения в лабораторных условиях Feline
Описание и использование: В связи с тем, что практика ветеринарной гемотрансфузиологии за последние годы пережила период значительного роста, возросла значимость определения групп крови у кошек. В частно-сти, растет необходимость в определении групп крови, поскольку только при предварительном определении группы крови у реципиента при переливании крови возможно избежать потенциально опасных для жизни ошибок при переливании.
У кошек система групповых антигенов крови описана как состоящая из двух антигенов, выраженных либо одиночно, либо в сочетании: А группа, В группа и АВ группа. Антигены неродственны человеческим А В О-антигенам и определяются по аллоиммунным сывороткам кошачьих. Встречаемость группы крови варьирует-ся в зависимости от породы. Группы крови у кошек передаются по наследству как простые аутосомные призна-ки, при этом А группа доминирует над В группой. Большинство кошек обладают антигеном А, и около одной трети из них имеют природное анти-В антитело с низким титром. Кошки с В группой все имеют природное анти-А антитело с высоким титром. Недавно проведенное в Соединенных Штатах исследование показало, что процент кошек с В антигеном варьируется от 0,3% до 59% в зависимости от породы. Ниже приводятся породы с высокой частотностью В группы крови: Кошки с АВ группой встречаются редко, и поскольку у таких кошек имеются и А и В антигены на мембране эритроцитов, то они не имеют либо не вырабатывают анти-А или анти-В антитела.
Определение группы крови у кошек важно в ветеринарной медицинской практике для предотвращения трансфузионных реакций у кошек с А или В эритроцитами. У кошек с эритроцитами В при переливании крови А группы сразу же проявляется катастрофическая системная анафилаксия (пониженное давление, брадикардия, одышка, мочеиспускание, стул, рвота и сильное неврологическое угнетение), а также гемолитические признаки (гемоглобинемия и гемоглобинурия) в связи с природным мощным анти-А антителом. У кошек с эритроцитами А и природным слабым анти-В антителом умеренное проявление реакции при поступлении крови В, но даже в таком случае возможно различие в воспроизводимости в медицинских условиях, поскольку эритроциты при переливании обладают коротким жизненным циклом. У остальных кошек с эритроцитами А при первичном переливании крови В группы реакция не проявляется, но в результате развиваются умеренные титры анти-В антитела, что может привести к серьезной реакции при последующем переливании несовместимой крови. Определение группы крови у кошек также важно при принятии решений о скрещивании и при выявлении медицинских проблем у котят.
При несовместимости материнской и фетальной крови возможно возникновение гемолитической болезни новорожденных. Так как у кошек со В группой в природе встречается анти-А антитела с высоким титром, то у котят с А группой может возникнуть гемолитическая болезнь новорожденных в результате скрещивания самки с В группой и самца со А группой. Антитело против А группы материнского происхождения появляется в молози-ве, откуда передается новорожденному котенку, и, следовательно, может разрушить его эритроциты. Клиниче-ски котенок при рождении может считаться нормальным, но признаки проявляются после кормления, происходит увядание и смерть наступает в течение первых дней жизни. Определение групп крови самки и самца до скрещивания, в сочетании с соответствующим генетическим консультированием, может свести гемолитическую болезнь новорожденных к минимуму.
Предназначение RapidVet-H (для кошачьих) – использование с целью классификации кошек по группам крови – А, В, АВ.
В обоих случаях титры иммунных сывороток, лиофилизированных на тестовой плате, восстанавливаются и хорошо смешиваются с цельной кровью пациента. Все эритроциты А группы реагируют со своими специфиче-скими титрами иммунных сывороток, вызывая агглютинацию; все эритроциты В группы реагируют подобным образом; все эритроциты АВ группы реагируют с обоими титрами иммунных сывороток, вызывая агглютинацию во всех случаях. Результаты определяются визуально. Агглютинация в лунках «А» и в лунках «В» значительно различается в связи с разной природой используемых титров иммунных сывороток.
Оговорка: у некоторых кошачьих происходит аутоагглютинация различной степени в связи с сывороточными факторами, вызывающими агглютинацию собственных эритроцитов пациента. Если такое явление проявляет-ся в условиях проведения испытания, то определение группы у данного пациента невозможно без отделения сыворотки и последовательного промывания оставшихся эритроцитов перед проведением теста. В комплекте RapidVet-H (для кошачьих) имеется лунка, предназначенная для проведения скрининга таких пациентов.
Принцип и интерпретация анализа: Анализ RapidVet-H (для кошачьих) основан на реакции агглютинации, которая происходит, когда эритроцит, содержащий антиген А, В либо АВ группы на поверхности мембраны, взаимодействует с лиофилизированными титрами иммунной сыворотки, специфичной для конкретного антигена.
Лиофилизированный материал трудно визуально различить на тестовой плате.
Эритроциты А группы характеризуются формой NeuGc2GD3 гликолипидного антигена на поверхности мембраны.
В RapidVet-H (для кошачьих) используется крысиное моноклональное антитело, с доказанной специфичностью к этому антигену, лиофилизированному на тестовой плате. Молекула антитела придает ему способность сшивания и агглютинации антигенов, специфичных для А группы крови.
Эритроциты В группы характеризуются формой NeuАc2GD3 нейраминовой кислоты, содержащейся в ганглиози-де, и нехваткой NeuGc, содержащегося в эритроцитах В группы. Установлена связующая особенность данной формы с лектином из пшеницы обыкновенной. В RapidVet-H (для кошачьих) используется лектин из пшеницы обыкновенной для определения наличия В группы крови.
Реагенты и материалы:Хранить в вертикальном положении.
Данный комплект для проведения теста содержит следующие реагенты и материалы: Тестовые платы для агглютинации.В каждой плате имеется 3 зрительно различимых лунки. Одна лунка обозначена как «Соляной скрининг на аутоагглютинацию», и 2 лунки обозначены как «Проба пациента» — одна на А группу и одна – на В группу. Платы запакованы в индивидуальную упаковку с герметичным полиэтилено-вым клапаном, в каждой содержится пакет с осушителем. Платы хранить в холодильнике при 2-7°С.
1 бутылка с разбавителем.Прозрачная пластиковая бутылка содержит 0,02 моль/л фосфатно-буферный солевой раствор (ФСБ) с рН 7,4. Капельный наконечник дозирует точно 40 μл. Хранить в холодном месте (2-7°С).
Пипетки и мешалки.Каждый полиэтиленовый пакет содержит 2 пластиковые пипетки и 3 мешалки.
Необходимые, но не предоставленные материалы:нет. Приготовление реагента:нет.
Хранение и стабильность:
1. Тестовые платы на агглютинацию стабильны в течение 18 месяцев с даты производства при хранении в холодном месте. На каждой тестовой плате нанесена маркировка с указанием истечения срока годности. Перед использованием тестовой платы нет необходимости выдерживать ее при комнатной температуре.
2. Разбавитель стабилен в течение 18 месяцев с даты производства при хранении в холодном месте (2-7°С). На каждой бутылке с разбавителем нанесена маркировка с указанием истечения срока годности.
3. При правильном проведении теста агглютинация наблюдается как минимум в одной из лунок, обозначенных «Проба пациента». Тем самым, производится авто-контроль теста. ПРИМЕЧАНИЕ: На каждом комплекте RapidVet-H (для кошачьих) отпечатана дата истечения срока годности, представляющая собой ближайшую дату истечения срока годности одного из компонентов комплекта. Не смотря на то, что у остальных компонентов комплекта в отдельности может быть более продолжительный срок годности, их использование с другими компонентами из других комплектов не рекомендуется.
МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ТЕСТИРОВАНИЯ:
1. ЗАБОРкрови у пациента в шприц либо в пробирку, покрытую либо с содержанием ЭДТА в качестве антикоагулянта. Для анализа требуется только 150 μл цельной крови, но пробирка должна быть полной, либо шприц должен быть заполнен так, чтобы была соответствующая концентрация ЭДТА. Если не планируется определять группу сразу же, то не следует добавлять такие нутриенты как CPDA
2. ИЗВЛЕЧЕНИЕтестовой платы из пластиковой упаковки. Пластиковую упаковку сохранить, пакет с осушите-лем отложить.
3. ПОДПИСАТЬна плате имя/номер кошки и дату проведения тестирования.
4. ПОМЕСТИТЬтестовую плату на плоскую поверхность.
5. ДОЗИРОВАТЬ1 каплю разбавителя (40 μл) из капельной бутылки в лунку с обозначением «Соляной скрининг на аутоагглютинацию».
6. ВЫТЯНУТЬнебольшое количество пробы пациента в пипетку и дозировать 1 каплю (50 μл) в лунку с обозначением ««Соляной скрининг на аутоагглютинацию». С помощью мешалки распределить и переме-шать материалы в ПРЕДЕЛАХданной лунки в течение примерно 10 секунд, АКТИВНО НАГНЕТАЯ ПО НАПРАВЛЕНИЮ ВНИЗ. (См. Примечание 1 по правильному использованию пипетки).
7. Аутоагглютинация происходит у небольшого процента больных кошек и здоровых кошек. Если наблюдается агглютинация, ОСТАНОВИТЬпроведение тестирования, и перед тем, как продолжить, провести процедуру промывания нормальных клеток.
8. ДОЗИРОВАТЬ1 каплю разбавителя (40 μл) из капельной бутылки в каждуюиз оставшихся лунок. Разбави-тель помогает восстановлению лиофилизированного материала.
9. Аккуратно взболтатьпробирку, содержащую пробу пациента для восстановления любого твердого вещества
10. ВЫТЯНУТЬнебольшое количество пробы пациента в пипетку и дозировать 1 каплю (50 μл) в каждую из 2 лунок с обозначением «Проба пациента». С помощью мешалки распределить и перемешать материалы в ПРЕДЕЛАХодной лунки в течение примерно 10 секунд, АКТИВНО НАГНЕТАЯ ПО НАПРАВЛЕНИЮ ВНИЗ. Взять новую мешалку и таким же образом распределить и перемешать материалы в ПРЕДЕЛАХдругой лунки в течение примерно 10 секунд. НОВОЕ11. ДОБАВИТЬ ВТОРУЮ КАПЛЮ РАЗБАВИТЕЛЯ В ЛУНКУ, ОБОЗНАЧЕННУЮ «А ГРУППА (ТИП А)».
НЕ ПЕРЕМЕШИВАТЬ МЕШАЛКОЙ.
12. ВСТРЯХИВАТЬплату поперечным движением в течение 2 минут, убедившись, что материалы в каждой лунке смешиваются и «создается завихрение». Избегать перекрестной контаминации.
13. УСТАНОВИТЬплату под углом 10 — 20°, чтобы избыток крови сбежал на дно лунок. Для этого можно поместить верхнюю часть платы на пакет с осушителем.
14. СЧИТАТЬ результаты и отметить лунки, в которых произошла агглютинация.
15. После высыхания материалов на плате ЗАМЕНИТЬплату в пластиковой упаковке для постоянной регистрации.
ПРИМЕЧАНИЕ 1 К МЕТОДИКЕ: Использование пипетки: Удерживать пластиковую пробирку большим и указательным пальцами у плоского уплотненного конца, плотно сжать и не снижать давление. Удерживать пробирку с образцом вертикально и разместить открытый конец пластиковой пробирки ниже поверхности образца. Ослабить давление пальцев и забрать пробу.
Далее, удерживать пипетку перпендикулярно, непосредственно над лункой, в которую помещается проба.
Аккуратно сжать и осуществить свободное падение одной капли в лунку (50μл). Каждая пипетка спроектиро-вана с учетом выпуска немного более чем 50 μл для компенсации того количества образца, которое остает-ся на мешалке.
Повторить со второй лункой.
Каждую пипетку использовать только для одной пробы пациента, затем выбросить. Пипетку ни при каких обстоятельствах нельзя использовать более чем для одной пробы во избежание перекрестной контамина-ции и неточности в результатах.
Результаты: При правильном проведении теста агглютинация наблюдается как минимум в одной из лунок, обозначенных «Проба пациента».
Если проба пациента показывает агглютинацию в лунке, обозначенной А группа (тип А), то у протестированной кошки кровь А группы. Если проба пациента показывает агглютинацию в лунке, обозначенной В группа (тип В), то у протестированной кошки кровь В группы. Если проба пациента показывает агглютинацию в обеих лунках, то у протестированной кошки кровь АВ группы.
Любое мелкое, зерненое проявление, возникающее спустя 2 минуты, не учитывается при определении результа-тов. Характер агглютинации в лунке с А группой отличается от агглютинации в лунке с В группой. Агглютинация в лунке с В группой обычно представлена небольшим количеством крупных амёбовидных шариков. Агглютина-ция в лунке с А группой обычно бывает в виде большого количества разобщенных мелких скоплений, каждое как головка мелкой булавки.
Если пациент очень анемичен, если у него А группа, зоны антигена могут быть насыщены связанным антителом, предотвращая сшивание и агглютинацию. Это связано со стерическим препятствием анти-А антитела. Если у пациента малый объем глобулярной массы, либо нет реакции, но при использовании дополнительного контроля он проводится нормально, то провести тест без использования PBS в лунках пациента.
Ограничительные условия:
1. Для получения точных результатов важно точно следовать методике.
2. Для каждого образца всегда использовать новую дозировочную пипетку и новую мешалку – для каждой лунки. Повторное использование любого приспособления вызовет перекрестную контаминацию и неточные результаты.
3. Стабильность отдельных компонентов комплекта варьируется. Хранить компоненты в соответствии с указаниями на упаковке. Не использовать компоненты после истечения указанного срока годности. Исполь-зованием материалов с истекшим сроком годности может привести к ненадежным результатам.
4. Разбавитель поставляется в бутылке с завинчивающейся пробкой во избежание непреднамеренного бактериального либо иного загрязнения. В лаборатории нельзя использовать разбавитель из других источников.
5. Для получения правильных результатов крайне важна физическая целостность пробы пациента.
6. Всегда набирать полный шприц либо пробирку, содержащую ЭДТА. Меньшее количество крови приведет к высокой концентрации ЭДТА в тестируемом образце.
Известные мешающие вещества: нет.
Показатели: С помощью анализа RapidVet-H (для кошачьих) в целом протестировано 2116 проб кошачьих эритроцитов с использованием анти-А моноклонального антитела. Из них определено 2075 – A группы, 31 — В группы и 10 – АВ группы. Данные результаты соответствуют результатам, полученным при пробе крови на перекрестную совместимость с известными титрами иммунной сыворотки и при других стандартных методах.
Утилизация: утилизировать все биологические материалы, пипетки и мешалки безопасным и утвержденным способом.
Проверка качества: качество всех реагентов и материалов, входящих в данный комплект, проверено в соответствии с порядком проведения стандартных испытаний в ходе производства с использованием определенной программы контроля качества
Источник