Анализ крови эритроциты мазок крови
Микроскопия мазка крови – исследование под микроскопом препарата, приготовленного из капли крови.
Выполнение микроскопии мазка крови является опциональной частью общего анализа крови или лейкоцитарной формулы и отдельно не производится.
Синонимы русские
Микроскопическое исследование мазка крови, мазок крови, микроскопия крови, ручной подсчет лейкоцитарной формулы, мазок периферической крови.
Синонимы английские
Blood Smear, Peripheral smear, Manual differential, Red blood cell morphology, White Blood cell morphology, Peripheral blood smear, Blood Film Examination, Blood Film
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную или капиллярную кровь.
Общая информация об исследовании
Исследование позволяет морфологически оценить клетки (форменные элементы) крови, а также выполнить их подсчет. Клетки крови образуются и созревают в красном костном мозге и затем выбрасываются в общий кровоток. У каждой разновидности клеток свои функции. В физиологических условиях количество и морфологические признаки клеток крови стабильны и не выходят за рамки референсных значений. При различных заболеваниях количество и свойства (форма, объем, цвет, наличие включений, их количество и пр.) закономерно изменяется. По этой причине оценка клеточных элементов в мазке крови является универсальным тестом при диагностике многих патологических состояний и широко применяется в практике врача практически любой специализации.
Мазок периферической крови – это «моментальный снимок» клеток крови в том виде, в каком они находятся в момент взятия образца. Для выполнения исследования венозную или капиллярную кровь помещают на предметное стекло, которое должно быть тщательно обезжирено. Затем другое стекло ставят на предметное стекло под углом 45′ и проводят вдоль капли крови так, чтобы она растеклась тонким слоем по ширине шлифованного стекла. Затем мазок фиксируют, чтобы форменные элементы крови были более устойчивы. После этого мазок окрашивают специальным красителем, который делает клетки и их элементы более яркими, и высушивают. После чего врач в лаборатории изучает мазок под микроскопом.
Для чего используется исследование?
Пока не появились автоматические анализаторы, каждый раз, когда выполнялся общий анализ крови, проводилось микроскопическое исследование мазка крови, так как определить процентное соотношение различных форм лейкоцитов (лейкоцитарную формулу) по-другому было нельзя. В современных анализаторах подсчет лейкоцитарной формулы осуществляется автоматически. Однако при подозрении на наличие патологических форменных элементов крови микроскопия мазка крови опытным врачом по-прежнему является лучшим способом выявления и оценки атипичных и незрелых клеток.
Когда назначается исследование?
Существует достаточно широкий круг заболеваний и расстройств, при которых могут изменяться свойства клеток, циркулирующих в кровяном русле. В норме в кровь из костного мозга попадают только зрелые клетки, однако при ряде заболеваний, например при лейкозах, в кровь могут попадать незрелые клетки – бласты. При некоторых состояниях, например при массивной инфекции, в лейкоцитах могут появляться характерные примеси, сами клетки могут становиться атипичными, как при инфекционном мононуклеозе. Обнаружение в мазке патологических клеток в большом количестве позволяет заподозрить вызвавшее их заболевание и назначить дополнительное обследование.
Мазок крови может регулярно назначаться пациентам с онкологическими заболеваниями костного мозга, лимфоузлов для наблюдения за динамикой состояния и контроля за эффективностью лечения.
Что означают результаты?
Референсные значения
Нейтрофилы — палочк.: 0 — 5 %.
Нейтрофилы — сегмент.
Возраст | Референсные значения |
До 1 года | 16 — 45 % |
1-2 года | 28 — 48 % |
2-5 лет | 32 — 55 % |
5-7 лет | 38 — 58 % |
7-8 лет | 41 — 60 % |
8-12 лет | 43 — 60 % |
12-16 лет | 45 — 60 % |
Больше 16 лет | 47 — 72 % |
Лимфоциты, %
Возраст | Референсные значения |
До 1 года | 45 — 75 % |
1-2 года | 37 — 60 % |
2-4 года | 33 — 55 % |
4-6 лет | 33 — 50 % |
6-8 лет | 30 — 50 % |
8-10 лет | 30 — 46 % |
10-16 лет | 40 — 45 % |
Больше 16 лет | 19 — 37 % |
Моноциты, %
Возраст | Референсные значения |
До 1 года | 4 — 10 % |
1-2 года | 3 — 10 % |
Больше 2 лет | 3 — 12 % |
Эозинофилы, %
Возраст | Референсные значения |
До 1 года | 1 — 6 % |
1-2 года | 1 — 7 % |
2-4 года | 1 — 6 % |
Больше 4 лет | 1 — 5 % |
Базофилы, %: 0 — 1 %.
Причины изменения показателей
Изменения в мазке крови не всегда позволяют поставить диагноз. Как правило, они указывает на наличие некоего заболевания, что предполагает дальнейшее обследование в целях постановки точного диагноза.
Также рекомендуется
- Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоцитарная формула, СОЭ (с микроскопией мазка крови при выявлении патологических изменений)
- Гематокрит
- Эритроцитарные индексы
- Ретикулоциты
- Эритропоэтин
- Эритроциты
- Гемоглобин
Кто назначает исследование?
Врач общего профиля, терапевт, хирург, инфекционист, гематолог.
Источник
Н. Пулетти
Оценка состояния эритроцитов — важный этап в исследовании мазков крови. При системном подходе она даёт исследователю много информации.
Микроскопия эритроцитов является дополнительным анализом при подсчёте количества клеток и формулы крови, который важно учитывать при постановке диагноза. В определённых случаях одна только оценка эритроцитов позволяет поставить конкретный диагноз.
Распределение эритроцитов оценивается в тонком слое мазка крови (таблица). В этой зоне клетки наиболее часто располагаются изолированно, что позволяет легко уточнить плотность их распределения. У животного с умеренной или тяжёлой анемией в сравнении со здоровым плотность распределения эритроцитов в тонком слое, как правило, чётко снижена (большое пространство между клетками) (фото 1а и 1б). В этой зоне мазка могут выявляться агглютинированные эритроциты и «монетные столбики» (фото 2 и 3). Очень важно дифференцировать «монетные столбики» от агглютинации, потому что их значимость сильно различается. Агглютинация объясняется присутствием иммуноглобулинов (в основном IgM), связанных с поверхностью эритроцитов и преимущественно персистирующих во время гемолитической анемии, опосредованной иммунным ответом (иммунная гемолитическая анемия — ИГА) (D.J. Weiss, 2000). Образование «монетных столбиков» обычно вторично и связано с увеличением концентрации белков, в частности глобулинов, встречаемом при воспалительных процессах (инфекционном перитоните у кошки, эрлихиозе и т. д.) или при неоплазии (множественная миелома или лимфома). Для дифференциации используется солевой тест (приложение). У кошек формирование «монетных столбиков» преимущественно физиологично, тогда как у собак оно чаще всего свидетельствует о наличии патологии.
Таблица. Исследование эритроцитов: оценка, распределение их размера, их формы и окраски
Плотность | Размер | Форма | Цвет | Включения, паразиты |
| Снижение: анемия | Макроцитоз: регенеративная анемия, лейкоз кошки и т.д.Микроцитоз: дефицит по содержанию железа, порто-системное шунтирование | Акантоциты, шизоциты, кератоциты: гемангио-саркома, ДВС* синдром и т.д.Сфероциты: гемолиз опосре-дованный иммунной реакцией Эхиноциты: часто артефакт | Гипохромия: дефицит железа | Тельца Гейнца, эксцентро- циты: окислительное повреждениеТельца Говелла-Жолли: регенеративная анемия и т.д. Паразиты: |
| *ДВС — диссеминированное внутрисосудистое свёртывание | ||||
|
| Фото 1а и 1б. Считывание мазков крови под микроскопом (× 500). Тонкий слой мазка у здоровой собаки. 1а — сопоставимый с анемичной собакой. 1б — во втором мазке количество эритроцитов менее выраженное |
 | |
| Фото 2. Считывание мазка крови под микроскопом (× 500) у собаки, подверженной гемолитической анемии, опосредованной иммунной реакцией. Следует обратить внимание на агглютинацию эритроцитов | Фото 3. Считывание мазка крови под микроскопом (× 1000) у здоровой собаки. Эритроциты представлены в форме монетных столбиков |
Размер
Увеличение размера
Макроциты — эритроциты большого размера, превышающего размер зрелых эритроцитов. Макроциты, обычно с наличием полихроматофилии, обнаруживают при регенеративной анемии (вариацию объёма эритроцитов называют анизоцитозом).
Полихроматофилы распознают по слегка базофильному цвету, что объясняется наличием рибосом, окрашивающихся в голубой цвет (фото 5) (N.C. Lain, 1993). С практической точки зрения у собаки или кошки, страдающих анемией, независимо от степени её выраженности, обнаружение двух четвертей полихроматофилов в поле зрения микроскопа (х1000) можно считать признаком регенерации. Подсчёт ретикулоцитов (эритроциты характерной окраски при окрашивании новым метиленовым синим c присутствием агрегированных или изолированных темно-голубых включений в их цитоплазме) считается стандартным методом на определение регенеративной анемии (фото 6). Однако в системе гемоциркуляции и здоровых собак и кошек выявляется небольшое количество этих клеток, соответствующее приблизительно одному полихроматофилу на 100–200 эритроцитов. Макроцитоз может проявляться не только при регенеративной анемии. Но в этих случаях при анизоцитозе полихроматофилии не обнаруживают. У кошек, заражённых вирусом лейкоза (FeLV), часто отмечают персистенцию вторичных макроцитов с дисэритропоэзом, который провоцируется вирусом. Это вирусное заболевание может сопровождать анемия, регенеративная или нет (в зависимости от стадии развития заболевания). Описаны случаи физиологического макроцитоза у борзых и некоторых миниатюрных пуделей (C.J. Kociba, 2000).
Снижение размеров
Микроциты (эритроциты малого размера) выявляют при анемии, вызванной дефицитом железа (алиментарный дефицит, хронические кровотечения), секвестрации железа в крови (при синдроме воспаления, впрочем, секвестрация железа часто ведёт к нормоцитарной нормохромной анемии), портосистемном шунтировании и, что наиболее странно, могут быть вариантом нормы у некоторых пород собак, таких как акита-ину (J.W. Harvey, 2000).
Форма
Сфероциты
Сфероциты — это эритроциты малого размера, которые при сравнении их в тонком слое мазка с другими эритроцитами имеют более интенсивную окраску без признаков просветления в центре (фото 7). Эритроциты у основания мазка крови, естественно, более плотные и без признаков просветления в центральной их части, можно спутать со сфероцитами.
У собак сфероциты, часто в сочетании с агглютинацией, обычно обнаруживают при иммунной гемолитической анемии (более чем у 80% больных собак присутствует выраженный сфероцитоз и более чем у 30% при этом отмечается агглютинация). О сфероцитозе в основном говорят, когда в поле зрения микроскопа отмечают более 20% сфероцитов.
У кошки, несмотря на то что иммунная гемолитическая анемия встречается очень редко, сфероциты трудно дифференцировать от эритроцитов, потому как, последние в центральной их части не имеют просветления.
Акантоциты
Акантоциты — эритроциты, которые при анализе их под световым микроскопом имеют плотную цитоплазму, а также неодинаковую по длине и ширине поверхность мембраны (фото 8). Их формирование может иметь вторичную природу в связи с увеличением соотношения в мембране холестерина к фосфолипидам при гиперхолестеринемии, липидозе печени или при холангиогепатите у кошек, а также в случае портосистемного шунтирования у собак. Формирование акантоцитов может также вызвать микроангиопатия, провоцирующая нарушение эритроцитов (ДВС-синдром, гемангиосаркома, гломерулонефрит и т. д.) (D.J. Weiss, 2000).
Кератоциты и шизоциты
Кератоциты — это эритроциты, которые имеют две проекции острых конвергентных (встречающихся) краёв, соединяющихся на одном конце клетки (фото 9). Шизоциты имеют сильно повреждённую структуру и появляются в виде фрагментов эритроцитов с острыми краями. Как и акантоциты, шизоциты наблюдают преимущественно при микроангиопатии (J.W. Harvey, 2000).
Эхиноциты
Эхиноциты — это шестерёнчатые (щетинистые) эритроциты с проецированием тонких и коротких острых кончиков одинаковой длины, распространяющихся одинаково по поверхности мембраны (фото 10). Обычно их присутствие является вторичным морфологическим артефактом, обусловленным избыточным введением ЭДТА и продолжительной экспозицией с момента забора крови до нанесения её на предметное стекло. Следовательно, присутствие эхиноцитов не является признаком какого-либо заболевания.
Так или иначе, число их может возрасти при определённых патологических состояниях, например в случае азотемии (J.W. Harvey, 2000).
Цвет
Полихроматофилы и условия их появления обусловлены регенеративной анемией.
В центре гипохромных зрелых эритроцитов имеется более выраженное просветление (бледность), потому что в отличие от нормы они располагают более низкой концентрацией гемоглобина (фото 11). Их присутствие ассоциируется в основном с железодефицитной анемией (например, при хронических наружных кровотечениях) (J.W. Harvey, 2000).
Нарушенные структуры и эритробласты
Нарушенные структуры. Тельца Гейнца и эксцентроциты
Тельца Гейнца (ТГ), как и эксцентроциты, образуются вследствие окислительного повреждения эритроцитов.
ТГ проявляются в виде розовой протуберанции (выступа) или бледного включения возле мембраны (фото 12). Эксцентроциты — это эритроциты уродливой формы с наличием светлой «растущей» структуры, находящейся сбоку мембраны (фото 13).
У собаки и кошки причина анемии с присутствием ТГ и эксцентроцитов имеет алиментарную природу (например, при поедании лука), а также медикаментозную (парацетамол и т. д.) или токсическую (цинк и т. д.) (M. Desnoyers, 2000; J.W. Harvey, 2000). У здоровой кошки редко встречаются эритроциты, которые могут иметь ТГ (до 5%). Их число может возрасти у больной сахарным диабетом кошки, не страдающей анемией, гипотиреоидозом и лимфомой.
Тельца Говелла-Жолли
Тельца Говелла-Жолли — это фрагменты ядер, которые не элиминировались из эритроцитов, и встречаются при регенеративной анемии или в результате проведения спленэктомии. Их также наблюдают иногда в нормальном состоянии, в основном у кошек (J.W. Harvey, 2000).
Паразиты
В эритроцитах можно обнаружить персистенцию паразитов. Два встречаются часто: Babesia canis у собак и Mycoplasma haemofelis (старое название: Hemobartonella felis) у кошек (фото 14 и 15). Первый имеет форму груши, часто бывает парным и при окрашивании по Романовскому-Гимзе имеет цвет от прозрачного до бледно-голубого с красным пурпурным ядром. Второй, Mycoplasma haemofelis, прикрепляется к поверхности эритроцитов, окрашивается в темно-голубой цвет (окраска по Романовскому-Гимзе) и может иметь форму кокка, кольца или палочки.
Эритробласты
Эритробласты — это ядросодержащие эритроциты, в стадии неполной зрелости. В основном они высвобождаются из костного мозга при достаточно выраженной регенерации у анемичных животных. Их появление в кровеносном русле также может указывать на нарушение костного мозга или на патологию селезёнки (фото 16) (J.W. Harvey, 2000; N.C. Jan, 1993).
Исследование эритроцитов позволяет дать серьёзную информацию, которая необходима для постановки диагноза. Например, выявление гипохромной анемии, которая чаще всего развивается при дефиците железа, позволяет задуматься о хроническом наружном кровотечении. Наличие акантоцитов в системе гемоциркуляции указывает на механическое повреждение эритроцитов, ассоциируемое с гемангиосаркомой, а также почечной гипертензией и т. д. Таким же образом иногда может быть поставлен окончательный диагноз. Так, регенеративная анемия в сочетании со сфероцитозом и агглютинацией, позволяет установить иммунную гемолитическую анемию.
Основные положения
— Тест на солевой раствор позволяет дифференцировать агглютинацию от образования «монетных столбиков».
— Регенеративная анемия характеризуется присутствием множества полихроматофилов в мазке крови.
— Присутствие сфероцитов и агглютинация являются характерным признаком иммунной гемолитической анемии у собак.
— Присутствие эхиноцитов часто является артефактом при подготовке мазка.
СВМ № 5/2010
Источник
Исследование эритроцитов в мазке крови — характеристикаЧтобы мазок крови получил качественное микроскопическое определение, необходимое постановке точного диагноза, его следует правильно приготовить и окрасить, также систематически и полностью исследовать. Мазок считается правильно приготовленным когда: Чаще применяется паноптическая окраска по Май-Грюнвальд-Гимза (МГГ), делающая возможным хроматическое исследование и выявление всех структурных подробностей составных частей клеток, по которым они отождествляются. Макроскопическое исследование преследует определение:
Микроскопическое исследование исходно проводится сухим объективом, оно носит ориентировочный характер и преследует: Объектив с погружением используется при подробном исследовании патологических характеристик и сдвигов всех кровяных хлеток. Исследование эритроцитовВ то время как правильное определение гемоглобина и гематокрита указывают на наличие анемии, аспект эритроцитов на мазке способствует уточнению вида анемии. Хотя по расчету постоянных эритроцита получаются точные данные о величине эритроцитов и содержания в них гемоглобина, тем не менее в текущей практике исследование мазка представляет более быструю и реальную информацию. Граница между средней и терминальной третью мазка составляет оптимальную зону идеальной толщины для исследования эритроцитов. По величине определяется нормоцитный, микроцитный или макроцитный характер. Лишь небольшие отклонения от нормы не подлежат определению, в связи с чем требуется какой-либо стандарт для сравнения или прямое измерение, с помощью окулярного микрометра. В отношении формы определяются: сфероцит, овалоцит, «звездочкообразный», «капельный», дробленный эритроцит или шизоцит, серповидный и пр. эритроциты. Степень колебания величины (анизоцитоз) и формы (пойкилоцитоз) выражаются +, + +, + + + или + + + +. Однако для постановки диагноза подробное описание этих колебаний представляет большую ценность, чем общий термин анизоцитоз или пойкилоцитоз. Колебания содержания гемоглобина по сравнению с нормой (нормохромия) вызывают различную интенсивность цвета (анизохромию). Распространение бледного участка, в центре эритроцита, указывает на уменьшение содержания в нем гемоглобина (гипохромию), резкий характер этого явления отражается в анулоцитозе. Резко и однородно окрашенные эритроциты, в которых отсутствует бледная центральная зона (гипохромные) появляются либо за счет увеличения объема — макроциты, мегалоциты, либо по причине утолщения — сфероциты. Необходимо отмечать и другие аномалии эритроцитов, такие как: полихроматофилия, базофильноточечный аспект, кольца Кабо, тельца Жолли, эритробласты, мегалобласты, эритроциты с паразитами или расположение эритроцитов валиками. В любом случае число полихроматофильных эритроцитов должно соответствовать числу ретикулоцитов, выявленных на суправитальных препаратах. Когда на мазке число эритробластов невелико они выражаются из расчета на 100 лейкоцитов, когда же их количество большее счисление делается на 1000 эритроцитов и цифра выводится на мм3. В таком случае необходимо внести поправку показателя лейкоцитов вычитанием эритробластов из общего количества ядерных клеток, выявленных при счислении в камере. Поскольку наличие эритробластов в периферической крови всегда носит патологический характер, их следует тщательно отличать от мелких лимфоцитов. Число эритробластов отражает, в частности, степень реактивности костного мозга и лишь в меньшей мере тяжесть анемии. — Также рекомендуем «Исследование лейкоцитов в мазке крови — характеристика» Оглавление темы «Методы исследования в гематологии»:
|
Источник