Анализ крови янус киназа 2
Метод определения
полимеразная цепная реакция (ПЦР) и секвенирование
Исследуемый материал
Цельная кровь (с ЭДТА)
Истинная полицитемия (ИП) – редкое заболевание, в основе патогенеза которого лежит дефект стволовой кроветворной клетки с последующей соматической мутацией в гене янускиназы 2 (JAK2), приводящий к пролиферации миелоидных ростков кроветворения, в большей степени эритроцитарного, с риском развития сосудистых тромбозов и тромбоэмболий. Длительная пролиферация гемопоэтических клеток приводит к фиброзу и замещению деятельного костного мозга волокнами коллагена, развитию вторичного постполицитемического миелофиброза. У части больных может происходить дальнейшее прогрессирование болезни в фазу бластной трансформации. Благодаря достигнутым в последние годы успехам в расшифровке молекулярно-генетических механизмов ИП значительно улучшилась диагностика и создан новый класс лекарственных препаратов, обладающих патогенетическим действием [1].
Все пациенты со стойкими изменениями в клиническом анализе крови в виде высоких показателей гемоглобина, гематокрита и эритроцитозом, сохраняющихся более 2 месяцев, должны быть обследованы для исключения миелопролиферативного заболевания. Диагноз ИП должен быть установлен в соответствии с критериями ВОЗ на основании комплексной оценки клинической картины и лабораторных показателей. Большими диагностическими критериями ИП являются:
- Гемоглобин более 185г/л для мужчин и 165 г/л для женщин или другие признаки повышения объема циркулирующих эритроцитов.
- Мутация гена JAK2 V617F или в 12 экзоне (4, 5).
Определяющим при ИП является обнаружение точечной мутации в 14 экзоне гена JAK2 V617F (встречается у около 95% больных). Если мутация JAK2V617F не найдена, то рекомендуется осуществить молекулярную диагностику мутаций в 12 экзоне гена JAK2 (около 4%) [2, 3].
Методы генетической диагностики онкогематологических заболеваний
Литература
- Абдулкадыров К. М., Шуваев В.А., Мартынкевич И.С. Современные представления о диагностике и лечении истинной полицитемии. Вестник гематологии, 2015; 11(1): 4-46.
- Абдулкадыров К. М., Шуваев В. А., Мартынкевич И. С. Что нам известно об истинной полицитемии (обзор литературы и собственные данные). Онкогематология, 2015; 3(10): 28-42.
- Arber D.A., Orazi A., Hasserjian R. The 2016 revision to the World Health Organization classification of myeloid neoplasms and acute leukemia. Blood 2016; 127(10): 2391-2405.
- Клинические рекомендации по диагностике и терапии Ph-негативных миелопролиферативных заболеваний (истинная полицитемия, эссенциальная тромбоцитемия, первичный миелофиброз). Национальное гематологическое общество. 2014. https://docplayer.ru/40035289-Rossiyskie-rekomendacii-po-diagnostike-i-terapii-ph-otricatelnyh-mieloproliferativnyh-zabolevaniy-istinnaya-policitemiya-essencialnaya.html
- Ковригина А. М., Байков В.В. Истинная полицитемия: новая концепция диагностики и клинические формы. Клиническая онкогематология. Фундаментальные исследования и клиническая практика. Том: 9, Номер: 2, Год: 2016 Страницы: 115-122. DOI:10.21320/2500-2139-2016-9-2-115-122. https://elibrary.ru/item.asp?id=26323243
специальной подготовки не требуется.
- постановка или подтверждение диагноза истинной полицитемии.
Интерпретация результатов
Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.
Форма выдачи результата: качественный анализ.
JAK-2 (мутации 12 экзона) обнаружена;
JAK-2 (мутации 12 экзона) не обнаружена.
Артикул:
777738
Срок исполнения:
до 23 рабочих дней ?
Указанный срок не включает день взятия биоматериала
Цена:
4 290 руб
В этом разделе вы можете узнать, сколько стоит выполнение данного исследования в вашем городе, ознакомиться с описанием теста и таблицей интерпретации результатов. Выбирая, где сдать анализ «Анализ мутаций в 12 экзоне JAK2 гена (ПЦР, кач.) Analysis of JAK2 Exon 12 mutations (PCR qualitative)» в Москве и других городах России, не забывайте, что цена анализа, стоимость процедуры взятия биоматериала, методы и сроки выполнения исследований в региональных медицинских офисах могут отличаться.
Источник
Уважаемые пациенты! Каталог анализов в настоящее время находится в стадии наполнения информацией и содержит в себе далеко не все выполняемые нашим центром исследования. Филиалами Центра эндокринологии проводится более 700 видов лабораторных анализов. С их полным списком Вы можете ознакомиться здесь.
Пожалуйста, уточняйте информацию о стоимости услуг и подготовке к анализам по телефонам (812) 344-0-344, +7 953 360 96 11. При сдаче анализов крови, пожалуйста, учитывайте стоимость забора биоматериала.
Готово к оформлению: 0 анализов
|
Синонимы
JAK2 V617F G>T
Описание
Янус киназа 2 (или JAK2) является членом так называемого семейства цитоплазматических тирозин киназ. JAK2 принимает участие в ряде внутриклеточных сигнальных путей. Янус киназа 2 имеет важное значение в пролиферативном, антиапоптотическом действии разнообразных цитокинов, активирующих данные пути.
Эта мутация возникает в так называемых гемопоэтических стволовых клетках, обусловливая развитие различных миелопролиферативных заболеваний — к ним, например, относятся эссенциальная тромбоцитемия, истинная полицитемия, хронический миелолейкоз, первичный миелофиброз.
В структуре описываемого гена JAK2 было обнаружено своеобразное хрупкое место (или «fragile point») — место, где может формироваться точковая соматическая мутация. Было показано, что в последовательности ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты) гуанин заменяется тимином, и, как результат, при трансляции остаток аминокислоты валина в определенном положении заменяется на фенилаланин. Как следствие отмечается нарушение взаимодействия между JH2 (псевдокиназным доменом) и JH1 (киназным доменом). При имеющейся мутации, JAK2 фосфорилирована, активна, и, в свою очередь, активирует нижележащие сигнальные пути. Те клетки, которые несут мутацию, становятся цитокин-независимыми, возникает избыточное размножение клеток-предшественниц миелопоэза.
Подготовка
Исследование может выполняться без специальной подготовки. Кровь из вены можно забирать в любое время.
Показания
Приведены лишь некоторые процессы, состояния и заболевания, при которых целесообразно назначение данного анализа.
Исследование гена янус киназы 2 может проводиться при различных миелопролиферативных патологиях — например при полицитемии, тромбоцитемии, миелолейкозе, миелофиброзе, нарушениях формулы крови.
Интерпретация результатов
Следует помнить, что результат исследования может не всегда являться достаточно специфичным и достаточным критерием для формирования заключения. Представленная информация никоим образом не служит целям самодиагностики и самолечения. Окончательный диагноз устанавливается только врачом при сочетании полученных данных с результатами других методов исследования.
Поскольку мутация гена JAK2 (V617F G>T), в отличие от большей части одиночных нуклеотидных полиморфизмов, имеет место в соматических клетках, не нося наследственного характера, исследование может только выявить наличие или же отсутствие данного нарушения.
Возможны два варианта ответа: GG — нарушения не обнаружено, а также GT — выявлено наличие мутации.
Хотя выявленная мутация возникает большей частью спонтанно, с целью исключения наследственного характера патологии желательно выполнить аналогичное исследование у прямых родственников (кровных). Также рекомендуется консультация гематолога.
Источник
Полиморфизм Val617Phe
Физиология и генетика. JAK — тирозин-киназы, фосфорилирующие STAT-факторы (Janus kinase, названы так благодаря присутствию в одной молекуле двух киназных доменов) ассоциированы с рецепторами цитокинов, но неактивны пока рецепторы не агрегируют под действием цитокинов (аналогично рецепторам факторов роста). После агрегации происходит активация Jak за счет их трансфосфорилирования. Активированные Jak фосфорилируют множество тирозинов в цитоплазматической части рецепторов. К этим фосфотирозинам присоединяются молекулы белков, известных под общим названием белки STAT (signal transducers and activators of transcription). Белки STAT димеризуются и проникают в ядро. Там они сами или с участием других белковых факторов индуцируют транскрипцию тех или иных генов.
Миелопролиферативные заболевания (МПЗ) – заболевания, характеризующиеся избыточной пролиферацией (выработкой клеток) одного или нескольких ростков кроветворения. Нарушения возникают на уровне стволовых клеток, вследствие чего может развиваться эритремия, сублейкемический миелоз, тромбоцитемия и хронический миелолейкоз.
Показания к анализу
• Установка или подтверждение диагноза истинной полицитемии, эссенциальной тромбоцитемии или идиопатического миелофиброза.
• Дифференциальная диагностика истинной полицитемии и вторичного эритроцитоза.
• Дифференциальная диагностика эссенциальной тромбоцитемии и реактивного тромбоцитоза.
• Определение риска развития тромбозов.
• Определение риска прерывания беременности.
• Дополнительная дифференциальная диагностика идиопатического миелофиброза и атипичных форм МПЗ.
• Дополнение к цитогенетическому и гистологическому исследованию костного мозга.
Клинические данные. Недавние исследования обнаружили связь мутации V617F в гене JAK2 с классическими bcr/abl-негативными МПЗ: истинной полицитемией (болезнь Вакеза), эссенциальной тромбоцитемией (ЭТ) и идиопатическим миелофиброзом (ИМ). Кроме того, данная мутация в редких случаях встречается при атипичных МПЗ и миелодиспластических синдромах.
Соматическая мутация V617F приводит к усилению сигнала от JAK2, ведущую к избыточной пролиферации того или иного ростка клеток. В исследовании E Joanna Baxter et al. [15781101] было продемонстрировано, что мутация V617F встречается в 97% при истинной полицитемии, в 57% при эссенциальной тромбоцитемии и в 50% при идиопатическом миелофиброзе.
Полученные результаты согласуются с исследованиями, проведенными другими группами авторов: 65-97% при истинной полицитемии, 23-57% при эссенциальной тромбоцитемии и 35-95% при идиопатическом миелофиброзе.
Peter J Campbell et al. [16325696] проанализировал взаимосвязь полиморфизма V617F с различными показателями крови у пациентов с эссенциальной тромбоцитемией. В работе приняли участие 806 пациентов. Авторы отметили увеличение уровня гемоглобина (в среднем на 9.6 г/л; 95% CI, 7.6–11.6 г/л; Р=0.0001) и нейтрофилов (на 1.1×109/л; 95% CI, 0.7–1.5х109/л; Р=0.0001), а также уменьшение сывороточного эритропоэтина (на 13.8 Ед/л; 95% CI, 10.8–16.9 Ед/л; Р=0.0001) и ферритина (n=182; 58 против 91 г/л; Р=0.01) у пациентов с изучаемым полиморфизмом.
Миелопролиферативные заболевания способствуют развитию венозных тромбозов. Так, Colaizzo D. et al. [17059429] проанализировали истории болезни 99 пациентов с тромбозами воротной (портальной) вены (ТВВ) и тромбозами мезентериальных сосудов. Мутация гена JAK2 V617F обнаружилась у 17 человек (17,2%). Ни у одного из этих пациентов не выявлялись врожденные факторы риска к тромбофилии. 7 из 17 больных с мутацией JAK2 V617F (43,8%) и еще 2 человека (2,4%) без мутации JAK2 V617F на момент первого эпизода венозного тромбоза имели диагноз МПЗ. За период наблюдения, который составил в среднем 41 месяц, еще у 3 пациентов с мутацией JAK2 V617F обнаружились миелопролиферативные процессы. Ученые пришли к выводу, что изучаемый полиморфизм является маркером венозных тромбозов, а также необходим для более тщательного обследования пациентов на предмет развития миелопролиферативных заболеваний.
Интересное наблюдение представили Stefano et al. [17263783] Они определяли мутацию в гене JAK2 V617F у 139 взрослых больных (старше 18 лет) с или без хронического МПЗ с тромбозами печеночных вен (15 человек), внепеченочных ТВВ и/или мезентериальных вен (79 человек) и церебральных вен (45 человек). Только 19 пациентов полностью соответствовали критериям истинной полицитемии (8 человек) или эссенциальной тромбоцитемии (11 человек) на момент возникновения тромбоза: у 4 больных развился тромбоз печеночных вен, у 11 – ТВВ и/или тромбоз мезентериальных вен, у 4 больных – тромбоз церебральных вен. Мутация в гене JAK2 V617F обнаруживалась у 94,7% больных с хроническим МПЗ, у 21,5% больных с тромбозами абдоминальных сосудов без МПЗ и у 4,8% больных с тромбозами церебральных вен без МПЗ. Среди пациентов без МПЗ и без тромбофилий, но с неспровоцированным тромбозом, 29,4% имели тромбоз вен внутренних органов, 42,8% имели ТВВ – одновременно с присутствием мутации гена JAK2 V617F. Таким образом, даже при отсутствии признаков явного МПЗ значительная часть больных с ТВВ и тромбозами сосудов головного мозга несет мутацию JAK2 V617F и имеет высокий риск повторных тромбозов.
Mercier et al. (2007) [17989398] исследовали наличие мутации V617F гена JAK2 у 3496 женщин в связи с риском невынашиваемости беременности. Исследователи обнаружили, что соматическая мутация в значительной степени ассоциирована с потерей плода «fetal loss» (OR=4.63; Р = 0.002) и потерей эмбриона «embryonic loss» (OR=7.20; Р = 0.009). Авторы отмечают, что риск выкидыша у исследованных женщин при наличии мутации увеличивался независимо от генотипов 1691A фактора Ляйдена и 20210A протромбина.
Важное замечание: мутация V617F является соматической, т. е:
1. Возникает у человека спонтанно, а не передается по наследству от родителей.
2. Мутантный аллель выявляется в основном в виде гетерозиготного генотипа.
3. Возможно возникновение мутации через несколько лет после проведения данного анализа, следовательно, при необходимости целесообразно повторное проведение анализа.
Источник
анонимно, Женщина, 30 лет
дравствуйте, подскажите пожалуйста может ли быть такое что у человека показало положительный анализ Jak2 V617F 2.34% может ли человек быть здоров? Или это уже точно миелопролиферативное заболевание как и ставят? Мне интересно у здоровых людей это могут обнаруживать? Из симптомов у меня ломота в руках (от локтя к кисти) и ногах (икрах- голени) — ломота не в костях! А как будто в чем то мягком связки может, мышцы. И некритично но повышены тромбоцыты самое большое было 450. Советуют сделать трепанбиопсию- но я очень боюсь. Скажите она точно может поставить диагноз и сказать что у меня есть или нет, или просто расковыряют а толку мало? И вообще что ждать? Это рак?Заранее благодарю за ответ!
гематолог, гемостазиолог, сексолог
мутация JAK- 2 киназы отвечает риск развития эссенциального тромбцитоза, При налиии гетерозиготной мутации — особенно можно не беспокоиться, риск повышения тромбоцитов умеренный. А вот при гомозиготной мутации — это критерий диагоноза — эссенциальный тромбоцитоз и такие пациенты нуждаются в применении гидроксикарбамида или интерферона альфа. Однако циторедукционная терапия назначается, если уровень ТР более 700-750 тыс.
анонимно
Мне уже наговорил что это онкология,что мне теперь всю жизнь нужно наблюдаться и лечиться,что это тип рака крови….а у меня детей то ещё даже нет:( и никто не говорит что это точно, сколько с этим живут? Я же в анализах не разбираюсь…в какой форме у меня мутация? Заранее спасибо…
это не рак крови, а повышение уровня тромбоцитов, с этим живут долго, мутация JAK-2 в гетерозиготной форме
Консультация на тему «Мутация Jak2» дается исключительно в справочных целях. По итогам полученной консультации, пожалуйста, обратитесь к врачу, в том числе для выявления возможных противопоказаний.
анонимно (Женщина, 31 год)
Добрый день. Первая беременность — замершая. Сейчас вторая, спустя 2 года, срок 13-14 недель. В ЖК сделали гемостаз. Волчаночный антикоагулянт 46,2 (норма 28-42), Д-димер 2,38 (норма 0,05-0,5). Отправили к гематологу….
анонимно (Женщина, 28 лет)
Доброе утро Мне назначили анализ Выявление мутаций в генах свертывающей системы по 5 параметрам Можно ли сдать его на 8 день цикла или нужно строго на 5-7?
анонимно (Мужчина, 33 года)
андролог выписал сдать анализ на кариотип и CFTR, а на сколько мутаций не сказал. Стоимость анализа зависит от количества мутаций. Подскажите на сколько мутаций и какие необходимо сдавать этот анализ…
анонимно (Женщина, 29 лет)
Здравствуйте! Во время обследования по поводу замершей беременности меня отправили на анализ полиформизмов генов гемостаза и нарушений фолатного цикла, так как предполагают, что у меня есть данные мутации, из-за чего…
анонимно (Мужчина, 42 года)
Добрый день! Скажите пожалуйста по поводу анализа azf y хромосомы, так ли он необходим при повторных заключениях спермограммы олигоастенозооспермия(мужу 42года)?За последние 8 лет было: выкидыш и две замершие беременности на…
анонимно
Здравствуйте! После неудачных беременностей (2) сдала гемостаз, мутации. Начала планировать. Гомоцистеин 10,9 ( 4,6-12.44 норма). антитромбин III 82,38 (83-128 норма) плазминоген 62,5 (75-140норма) рфмк 3,5 (0-4 норма) мутация редуктазы метионинсинтазы…
Юля Васильева
Добрый день! У меня беременность 13 недель, по узи в 11 недель вроде бы все в норме. Получила результаты анализов на риск привычного невынашиваниябеременности и развития венозных тромбозов. Есть проблемы…
Источник
Метод определения
Real-Тime PCR.
Исследуемый материал
Цельная кровь (с ЭДТА)
Диагностический критерий Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) для ХМПЗ. Молекулярно-генетическая диагностика. Количественное определение является важным для оценки ответа больных на терапию, для мониторинга динамики заболевания.
Миелопролиферативные заболевания (МПЗ) – заболевания, характеризующиеся избыточной пролиферацией (выработкой клеток) одного или нескольких ростков кроветворения. Нарушения возникают на уровне стволовых клеток. Классические Ph’-негативные ХМПЗ – группа болезней, включающая в себя эритремию (истинную полицитемию, ИП), эссенциальную тромбоцитемию (ЭТ) и идиопатический миелофиброз (ИМФ). Это хронические лейкозы с поражением на уровне клетки-предшественницы гемопоэза с характерной для опухоли неограниченной пролиферацией этой клетки, потомки которой дифференцируются по всем росткам кроветворения. При этом для эритремии свойственно преобладание красного ростка, для эссенциальной тромбоцитемии – мегакариоцитов и тромбоцитов. Классические ХМПЗ и некоторые другие менее распространенные миелопролиферативные заболевания чаще всего являются приобретенными, спорадическими нарушениями гемопоэза.
Молекулярные события, лежащие в основе патогенеза ХМПЗ, связаны с дефектами генов, которые кодируют белки, ответственные за нормальное поддержание миелопоэза. Для всех ХМПЗ характерна аномальная тирозинкиназная активность.
Белок JAK2 принадлежит семейству нерецепторных тирозинкиназ (Janus-киназ), которое включает в себя четыре белка: JAK1, JAK2, JAK3 и TYK2. Для гемопоэза особое значение среди них имеет киназа JAK2, которая осуществляет передачу сигнала не только от эритропоэтина, но и от тромбопоэтина и колониестимулирующего фактора гранулоцитов (G-CSF). Функция белков JAK заключается в том, что они служат промежуточным звеном между рецепторами на мембране клетки и сигнальными молекулами (цитокинами, факторами роста и пр.). Эти молекулы, связываясь с рецепторами JAK-киназ на поверхности клетки, активируют их, что приводит к активации сигнальных путей с участием ряда белков, которые передают сигналы для транскрипции, пролиферации и дифференцировки бластных предшественников.
При появлении соматической мутации1 JAK2 (1849G/T (617V/F)) эти сигналы активируются автономно, независимо от связывания цитокина со своим рецептором, что приводит к избыточной пролиферации того или иного ростка клеток.
Ген JAK2 расположен в локусе 9р24.1. Соматическая мутация 1849G/T (617V/F) выражается в замене нуклеотида G→T в позиции 1849 (четырнадцатый экзон), которая в свою очередь приводит к замене фенилаланина (F) на валин (V) в 617 позиции аминокислотной последовательности белка.
JAK2 1849G/T (617V/F) является соматической мутацией, возникающей в гемопоэтических клетках-предшественницах. Она встречается у подавляющего большинства больных ХМПЗ, что делает эту мутацию очень удобным диагностическим маркером. Наличие точечной мутации JAK2 1849G/T (617V/F) – феномен, характерный исключительно для поражений миелоидного ростка, и не описан ни для солидных опухолей, ни для опухолей лимфоидного происхождения.
______________________________________________
1Мутация 1849G/T (617V/F) является соматической, т. е.:
- Возникает у человека спонтанно, а не передается по наследству от родителей.
- Мутантный аллель выявляется в основном в виде гетерозиготного генотипа.
- Возможно возникновение мутации через несколько лет после проведения данного анализа, следовательно, при необходимости целесообразно повторное проведение анализа.
Таблица 1. Молекулярные аномалии, связанные с «классическими» миелопролиферативными заболеваниями
| Генетическая аномалия | Нозология | Частота, % |
| JAK2 1849G/T (617V/F) | Истинная полицитемия | > 95 |
| Эссенциальная тромбоцитемия | 50-70 | |
| Первичный миелофиброз | 40-50 |
Мутация JAK2 1849G/T (617V/F) – диагностический маркер, при помощи которого можно проводить первичную и дифференциальную диагностику ХМПЗ, а также молекулярный мониторинг минимальной остаточной болезни (количественный тест).
Алгоритм проведения молекулярной диагностики МПЗ (рис. 1)
Определение химерного онкогена BCR/ABL позволяет провести дифференциальный анализ хронического миелоидного лейкоза (ХМЛ) и Ph’-негативных МПЗ. Если в случае Ph’-негативных МПЗ мутация JAK2 1849G/T (617V/F) не найдена, то в случае ИП следует осуществить поиск мутаций в двенадцатом экзоне гена JAK2, а в случае ЭТ и ИМФ – мутаций MPL W515L/K. В случае отрицательного результата следует исключить возможность наследственных дефектов генов VHL, EPO-R, PHD2, THPO, MPL и генов глобинов. При редких видах МПЗ, негативных по JAK2 V617F, целесообразно осуществить поиск химерных онкотирозинкиназ.
Сейчас молекулярное исследование входит в диагностические критерии ВОЗ 2008 г., а тест на наличие мутации JAK2 стал стандартным методом диагностики ХМПЗ. Выявление мутации указывает на наличие клонального ХМПЗ и исключает возможность реактивного эритроцитоза, тромбоцитоза или миелофиброза.
Таблица 2. Диагностические критерии ВОЗ для ХМПЗ (2008)
В настоящее время исследование на наличие мутации JAK2 1849G/T (617V/F) – необходимое условие для установления правильного диагноза и определения дальнейшей тактики ведения пациента.
Литература
- Абдулкадыров К.М., Шуваев В.А., Мартынкевич И.С. Критерии диагностики и современные методы лечения первичного миелофиброза. Вестник гематологии. — М. 2013;3(9):44-78.
- Мисюрин А.В. Молекулярный патогенез миелопролиферативных заболеваний. Клиническая онкогематология. — М. 2009;3(2):211-220.
- Саврилова А.М., Костерина А.В., Ахмадеев А.Р. Выявление мутации JAK2 V617F при хронических Ph-негативных заболеваниях. Генетика, Практическая Медицина. Инновационные Технологии в Медицине. — М. 2014;4(14):100-102.
- Материалы фирмы-производителя тест-системы.
Источник
