Анализ крови ифа на сифилилис
ИФА — иммуноферментный анализ — является одним из самых прогрессивных методов диагностики сифилиса. Он выявляет признаки присутствия возбудителя заболевания на разных стадиях последнего. В основе анализа лежит выявление специфических антител, которые появляются в крови больного при внедрении в организм бледной трепонемы (бактериального возбудителя).
Метод ИФА работает не только для группы заболеваний, передающихся половым путем. В равной степени он применим и для диагностики самых разных болезней инфекционного характера. Принцип проведения анализа был разработан еще в 60-х годах прошлого столетия. Однако активно использоваться он начал только спустя 20 лет.
Сейчас ИФА применяется для диагностики сифилиса, СПИДа, туберкулеза и многих других болезней. Для обнаружения антител используются специально разработанные ферменты, активно реагирующие на специфические белки крови.
В каких случаях назначают ИФА?
Больной может сам прийти в клинику для проведения анализа, если у него присутствуют подозрительные симптомы (характерные высыпания на теле, повышенная температура, боли в мышцах и пр.). Однако на определенных стадиях недуг не проявляется столь явно. Через несколько недель после инфицирования симптомы исчезают, и пациент может ошибочно считать себя выздоровевшим. По этой причине существует ряд случаев, когда анализ ИФА проводится в обязательном порядке:
- При устройстве на работу на предприятия, где есть контакт с большим количеством людей, продуктами питания, детскими и медицинскими товарами.
- При постановке на учет беременной. Болезнь передается от больной матери младенцу, поэтому важно ее вовремя выявить.
- При донорстве крови. Перед тем как сдавать кровь, донор обязан проверить ее на наличие опасных инфекций, в том числе и сифилиса.
- Во время подготовки к операции. Проведение такого рода вмешательств подразумевает прямой контакт с кровью больного. Это может быть небезопасно для медперсонала и других пациентов клиники.
- При обнаружении симптомов у одного из половых партнеров. В этом случае второй партнер также обязан сдать кровь на пробу.
- При прохождении воинской службы, а также в случае тюремного заключения. Обе ситуации предполагают продолжительный контакт с большим количеством людей. Поскольку недуг передается не только половым, но и контактно-бытовым путем, любой человек из окружения инфицированного находится под угрозой.
Как проводится?
Главная особенность ИФА — высокая точность данных. Позволяет не просто обнаружить антитела, но и определить их количественное соотношение.
Это значит, что иммуноферментный анализ позволяет с 99,99%-ной вероятностью выявить болезнь и одновременно определить, на какой стадии развития болезнь в данный момент находится.
При проведении ИФА у пациента берут кровь из вены. Затем ее особым образом подготавливают и размещают на полистироловой панели со множеством лунок. При диагностике в сыворотку крови добавляют специальные ферменты, которые при наличии антител/антигенов недуга образуют с ними прочные соединения.
Результатом образования таких соединений становится изменение цвета плазмы крови в лунке (с бесцветного — на ярко-желтый). Работнику лаборатории достаточно визуально оценить результат, чтобы понять, что на панели — кровь больного.
Трактовка результатов
При ИФА на сифилис оценивают наличие 3 классов антител (иммуноглобулинов): A, M и G. Эти вещества образуются в крови инфицированного человека в строго определенной последовательности:
- Наличие иммуноглобулина A указывает на то, что с момента заражения бледной трепонемой прошло больше месяца.
- Антитела M выявляются при длительном присутствии инфекции в организме. Также они могут быть реакцией на обострение хронической болезни.
- Иммуноглобулин G организм вырабатывает на самом пике заболевания, а также после уже проведенного лечения.
Интенсивность окрашивания плазмы крови в ярко-желтый цвет при проведении ИФА напрямую указывает на количество антител. Если цвет плазмы слегка желтоватый, результаты ставят под сомнение и процедуру повторяют. При отрицательном результате цвет плазмы не меняется и остается прозрачным.
Ложноположительный результат ИФА
На протяжении всей жизни человеку довольно часто приходится делать ИФА на сифилис (перед устройством на работу и пр.). Положительный результат всегда становится стрессом. Однако не стоит паниковать раньше времени! Иногда ИФА может дать ложноположительный результат. В этом случае есть смысл провести повторное обследование.
Специалисты не советуют беспокоиться после первого же положительного результата ИФА, поскольку это исследование направлено на выявление не самой бледной трепонемы, а антител, которые организм вырабатывает в ответ на атаку патогенных бактерий. ИФА — анализ с высокой точностью (вероятность погрешности меньше 1%). При наличии сомнений врачи не ставят диагноз сразу же, а предлагают пациенту сдать кровь еще раз.
Ложноположительный ответ ИФА возможен при болезнях:
- соединительной ткани, суставов (васкулит, ревматоидный артрит и пр.);
- сердца (главным образом это касается воспалительных заболеваний: миокардита, эндокардита);
- эндокринной системы (диабет);
- инфекционных (гепатит, туберкулез и пр.).
Ложноположительный результат может быть при беременности или в том случае, если незадолго до ИФА пациенту была проведена вакцинация. Изменить итоги анализа не в лучшую сторону способно и употребление алкоголя, наркотиков.
В достаточно большом количестве случаев положительную реакцию дает проверка крови пациентов, которые уже прошли лечение. У 10% излеченных положительная реакция остается на всю жизнь, поскольку в крови постоянно циркулирует определенное количество антител как иммунный ответ на возникшее однажды заболевание.
Ложноотрицательный результат
Наряду с ложноположительным возможна и ложноотрицательная реакция. В самом начале болезни, когда трепонема только попала в организм, антитела вырабатываются в недостаточном для выявления количестве. Ферменты могут их не зафиксировать, поэтому итоги ИФА оказываются отрицательными.
При наличии подозрений на сифилис (пациент имел незащищенный половой акт, тем или иным образом контактировал с возможными больными и пр.) проводится повторный анализ.
Обследование контактных лиц
Существует определенный протокол действий на тот случай, если у пациента со 100%-ной достоверностью был выявлен недуг. В первую очередь обследование проходит его половой партнер: муж, жена, другие лица, вступавшие с зараженным в интимную связь. В этом плане медики категоричны. Обследование сексуальных партнеров является обязательным во избежание распространения опасного заболевания.
Лечение проходят все члены семьи больного, даже если их анализы показали отрицательный результат. Помним: сифилис — острозаразная болезнь, передающаяся контактно-бытовым путем. Дети и другие члены семьи могут получить трепонему во время пользования санузлом, общими полотенцами, посудой.
Действия после подтверждения диагноза
Как только данные ИФА на сифилис подтвердились, инфицированный и контактировавшие с ним лица проходят терапию антибиотиками. Все рекомендации врача — дозировку, периодичность приема лекарств — необходимо соблюдать в точности!
На время лечения работающим гражданам выдается справка с зашифрованным согласно МКБ-10 диагнозом. После полного излечения медицинская книжка продлевается. Выздоровевший работник может приступать к своим непосредственным обязанностям. Работодатель не вправе отказать ему в восстановлении на рабочем месте.
Таковы основные данные по проведению ИФА. Заразившимся нужно помнить: постановка диагноза не ставит крест на всей последующей жизни больного. Сейчас существуют эффективные препараты, позволяющие надежно излечивать это заболевание. Вовремя проведенные обследование и лечение позволяют избежать самых опасных последствий недуга и защитить от него других членов общества.
Источник
Что такое ИФА на сифилис
ИФА на сифилис — доступный и высоко информативный тест
ИФА — это иммуноферментный анализ, применяющийся в качестве высокочувствительного теста в диагностике различных патологий, в том числе сифилиса. Позволяет выявить заболевание и максимально точно определить его стадию.
Сифилис зарождается при проникновении в организм бактерии Treponema pallidum (Трепонема бледная). Через 2 — 4 недели на кожных покровах образуется твёрдый шанкр в локализации, где произошло внедрение, чаще всего характерная для сифилиса папула образуется на половых органах, что означает начальный этап первичного сифилиса. По мере развития заболевания папулы преобразуются в язвы, а затем в большинстве случаев исчезают, что даёт пациенту ложную надежду на самоизлечение. Но латентный период переходит в стадию вторичного сифилиса, при этом трепонемы распространяются уже по всему организму, проникая в ткани и органы. На коже и слизистых оболочках образуются множественные высыпания. При отсутствии лечения наступает следующий этап — третичный сифилис с формированием гумм и поражением ЦНС, сердца, костной ткани, ЖКТ, ротовой полости и других органов.
Выявление антител подтверждает инфицирование
ИФА определяет первичный, вторичный, третичный (чаще всего только на начальном этапе), врождённый, рецидивный и латентный сифилис. Суть метода заключается в обнаружении антител, которые организм вырабатывает в ответ на внедрение трепонемы. На начальном этапе болезни образуются антитела класса М, через несколько недель к ним присоединяются иммуноглобулины класса G. Концентрация тех или иных антител меняется в зависимости от этапа развития сифилиса, что позволяет определить стадию болезни. При выполнении ИФА используется истинная трепонема бледная либо её антигены, поэтому тест относится к трепонемным анализам.
В отличие от нетрепонемных тестов, в которых в качестве антигенов выступают аналоги трепонемы, ИФА обладает минимальным количеством ложных результатов.
Преимущества и недостатки метода
Любой метод исследования не лишен недостатков
Ранее в диагностике сифилиса применялись различные методы, такие как: РПГА (реакция пассивной гемагглютинации), RW (реакция Вассермана), МР (микрореакция преципитации), РСК (реакция связывания комплемента) и другие тесты. Разнообразие анализов в качестве отборочных тестов и отсутствие единой системы нередко приводило к путанице, а в результате — к негативным последствиям, например, когда донор с ложноотрицательным результатом становился посредником в заражении реципиентов. С 2006 года тестирование стало более стандартизированным, ИФА был признан одним из наиболее эффективных методов диагностики и используется в настоящее время в качестве проверочного теста при обнаружении положительного результата нетрепонемного анализа.
Нетрепонемные тесты являются скриннинговыми
Теперь нетрепонемные анализы используются для выявления возможного заражения сифилисом у всех групп населения, то есть являются скрининг-тестами. При сомнительном либо положительном результате назначается ИФА либо иной трепонемный анализ. ИФА стал одним из ведущих тестов на сифилис благодаря своим преимуществам:
- высокая чувствительность, позволяющая выявить антитела к трепонеме в очень низкой концентрации;
- высокая специфичность достигается за счёт использования антигенов трепонемы бледной;
- объективность результатов благодаря автоматическому учёту;
- лёгкость постановки реакции осуществляется благодаря полной комплектации наборов для диагностики;
- универсальность теста: может применяться для профилактического обследования населения, для диагностики всех стадий болезни и проверки сомнительных результатов.
Антитела к Treponema pallidum схожи на некоторые виды иммуноглобулинов, образующихся при иных видах инфекции, поэтому несмотря на специфичность ИФА ложноположительные результаты могут выявляться в небольшом количестве. Ещё один недостаток ИФА заключается в том, что по мере развития болезни число антител снижается, что может привести к ложноотрицательному результату.
Также результат ИФА не может выступать в качестве единого показателя для диагностики сифилиса, а используется в комплексе с иными исследованиями, что не позволяет назвать его точным маркером заболевания.
К минусам теста можно отнести и его относительную дороговизну.
Показания к проведению исследования.
Период беременности — показание для проведения анализа
ИФА проводится как подтверждающий тест после нетрепонемного анализа, но может выступать и в качестве отборочного анализа. Назначается в следующих случаях:
- плановое тестирование при устройстве на некоторые виды работ;
- плановое выявление риска инфицирования;
- госпитализация, предоперационный период;
- донорство;
- беременность;
- обследование при симптомах сифилиса.
Заподозрить сифилис можно по специфичному признаку — образованию твёрдого шанкра, а также болевым ощущениям в суставах и костях, отёчности половых органов, повышению температуры тела до 38 °С, увеличению лимфоузлов. В качестве профилактики рекомендуется проходить исследование регулярно при активной сексуальной жизни со сменой партнёров.
Подготовка к исследованию
В лихорадочный период стоит воздержаться от теста
Для минимизации риска получения ложного результата следует выполнять правила.
- Образец крови сдаётся на голодный желудок, в зависимости от лаборатории период голода должен составлять от 4 до 12 часов.
- В предыдущие сутки исключается алкоголь и жирная пища, курение ограничивается минимум за час до исследования.
- Накануне анализа пить можно только чистую воду, не допускается употребление соков, кофе, лекарственных препаратов.
- Все иные исследования и медицинские манипуляции проводятся после сдачи теста.
- Не следует сдавать анализ, если в предыдущие дни отмечалось лихорадочное состояние либо проводилась вакцинация.
- Женщинам не рекомендуется проходить тест в период менструации.
Расшифровка результатов
Положительный результат свидетельствует о наличии вируса
Положительный результат:
- наличие инфицирования трепонемой бледной;
- ложноположительный результат при наличии иных факторов;
- последствия вылеченного ранее сифилиса.
Отрицательный результат:
- отсутствие заражения;
- инкубационный (ранний первичный) период сифилиса;
- поздний период, в том числе поздние этапы развития третичного сифилиса.
Ложноположительный результат и его причины
Ложноположительный тест может быть при сахарном диабете
Treponema pallidum является спирохетой, содержащей 42 семейства генов, 17% из них аналогичны белкам иных видов бактерий, что провоцирует в небольшом количестве случаев положительный результат при наличии заражения другими микроорганизмами. Например, при ряде аутоиммунных заболеваний выявляются антифосфолипидные антитела, схожие с антителами при сифилисе. На рубеже XXI века было установлено, что в данном случае разница между антителами заключается в факторе зависимости, при аутоиммунных болезнях антитела зависимы от p2-гликопротеина-1, при сифилисе — не зависимы. Но на сегодняшний день вопрос о возникновении ложноположительных реакций остаётся открытым, так как причина таких результатов не всегда ясна.
Некоторые ложные показатели являются хроническими и могут сопровождать человека на протяжении десятилетий.
По статистике чаще всего ложноположительные результаты проявляются в следующих случаях:
- гепатиты;
- лепра;
- инфаркт миокарда;
- интоксикация;
- заболевания соединительной ткани;
- аутоиммунные патологии;
- сахарный диабет;
- беременность;
- период менструации;
- поствакцинальный период.
Трепонема имеет сходство с другими возбудителями
Treponema pallidum является не единственным видом трепанем, к патогенным возбудителям относятся и другие спирохеты: Treponema pertenue (возбудитель явса), Treponema bejel (возбудитель беджеля), Treponema carateum (возбудитель пинты) и многие другие. При микроскопическом осмотре они мало отличаются от бледной трепонемы, а антитела против них схожи на иммуноглобулины при сифилисе.
Положительный результат может отражать наличие болезни в прошлом, так как иммуноглобулины класса G способны задерживаться в кровотоке годами.
Ложноотрицательный результат и его причины.
В инкубационном периоде результат может быть отрицательным
На начальном этапе болезни ИФА показывает отрицательный результат, этот период является инкубационным, когда первичный сифилис ещё не наступил, и отсутствуют характерные признаки болезни. Инкубационный период по сравнению с данными по инфицированию сифилисом середины XX века увеличился на 7 — 10 дней, в настоящее время составляет около 3 недель. Это означает, что после проникновения трепонемы в организм, ложноотрицательный результат будет выявляться на протяжении 3-х, а иногда и более недель.
Третичный сифилис при отсутствии терапии обычно развивается через 3 — 5 лет с момента инфицирования, в некоторых случаях болезнь может проявиться через 10 — 15 лет на фоне бессимптомного протекания и перехода сифилиса из одной стадии в другую. К этому времени число антител значительно снижается или они отсутствуют вовсе, что приводит к ложноотрицательному результату. По некоторым данным на некорректный ложный итог могут повлиять различные инфекционные заболевания, сахарный диабет, приём некоторых антибиотиков.
Несоблюдение правил подготовки к анализу, например, употребление спиртного накануне исследования, может привести как к ложноположительному, так и ложноотрицательному результату.
Источник
Тест ИФА на сифилис является одним из методов подтверждения, что человек инфицирован бледными трепонемами. Его проводят при условии, что какой-то из ранее сделанных анализов показал наличие инфекции в организме. Также его рекомендуют при появлении симптомов сифилиса. Тест позволяет лабораторно подтвердить диагноз.
Преимущества и недостатки исследования крови на сифилис методом ИФА
Иммуноферментный анализ относится к высокоспецифичным и надежным трепонемным анализам. Тест является обязательным в случаях, когда необходимо подтвердить диагноз. С помощью сдачи крови на сифилис методом ИФА можно выявить заболевание на любой из стадий. Его назначают не только для первичной диагностики, но и для контроля после проведенного лечения.
К основным преимуществам иммуноферментного теста относятся:
- возможность автоматизации исследования (благодаря этому вероятность влияния человеческого фактора минимальна);
- получение информации о наличии либо отсутствии трепонем в короткие сроки;
- невысокая стоимость;
- возможность определения стадии заболевания по количеству антител IgG и IgM.
Чувствительность анализа составляет 98-100%, а специфичность – 96-100%. Иммуноферментный тест считается универсальным методом обследования.
К недостаткам метода относят возможность получения ложноположительного результата. Если иммуноферментный анализ показал, что есть трепонемы в организме, то необходимо пройти еще одно исследование. Врачи рекомендуют комбинированную сдачу анализов на сифилис ИФА и РМП. Одновременное проведение исследования трепонемным и нетрепонемным методами позволяет подтвердить диагноз.
Через сколько сдавать ИФА на сифилис
Иммуноферментный анализ крови человека, зараженного сифилисом, покажет положительный результат, если появились внешние проявления болезни. Сразу после полового контакта с зараженным партнером тест будет недостоверным.
На протяжении инкубационного периода, который длится в среднем 3 недели, в организм зараженного пациента внедряются от 500 до 1000 трепонем. С этого момента начинается первичный период сифилиса. Но антитела к патогенным микроорганизмам формируются не сразу. На это уходит от 7 до 28 дней после того, как образуется шанкр на поверхности кожи или слизистой оболочки. Сдавать иммуноферментный тест на сифилис лучше в конце 3 или в течение 4 недели после заражения и возникновения внешних проявлений.
Иммуноферментный тест считается одним из самых точных анализов, он позволяет выявить сифилис на любой из стадий, в том числе и скрытую форму инфекции
Подготовка к анализу на сифилис методом ИФА
Специальная подготовка к проведению иммуноферментного исследования не нужна. Но сдавать кровь следует в утренние часы только натощак. Например, в лаборатории Гемотест ИФА на сифилис делают, если перерыв между последним приемом пищи и забором материала для обследования был не менее 8-12 часов.
Анализ необходимо сдавать до начала антибактериальной терапии. В экстренных случаях допускается проведение исследования в любое время суток при условии, что период голода был не менее 6 часов и пациент не ел жирную пищу. В ином случае кровь может свернуться.
Как проводится анализ крови на сифилис методом ИФА
Чаще всего в лабораториях делают тест ИФА непрямым способом. Для проведения исследования на твердофазные носители прикрепляют антигены, к ним добавляют кровь обследуемого пациента. Если в организме человека есть антитела к трепонемам, то они образуют нерушимую связку с антигенами – АГ-АТ. При положительной реакции присоединенный к объединению антигена и антитела фермент провоцирует окрашивание разной интенсивности.
Для выявления трепонем используют и прямой тест ИФА. При его проведении кровь обследуемого пациента на 30 минут помещают в чистые лунки. Этого времени достаточно для приклеивания антител к их поверхности. После этого к пробе добавляют антигены в избыточном количестве. При наличии антител они связываются в комплекс АГ-АТ.
Процесс объединения при проведении прямой реакции длится от 30 минут до 5 часов. После этого содержимое лунок выливают или декантинируют. Связанные антигены и антитела остаются прикрепленными. Для их выявления проводят ферментативную реакцию. В зависимости от полученного окраса определяют концентрацию антигенов.
Снизить вероятность ошибки из-за человеческого фактора позволяет использование инструментальных методов оценки результата. При их применении определяются цифровые показатели оптической плотности. Одновременно рассчитывается коэффициент позитивности. Для его определения оптическую плотность испытуемого образца делят на критическую.
Внимание! Помимо классических методов ИФА используют также «ловушки». Они позволяют выявить антитела разных классов и суммарные показатели.
Тесты, которые определяют общий уровень IgG-IgM, могут подтвердить диагноз после появления первых клинических симптомов. Хотя у некоторых результаты суммарных показателей остаются положительными и после излечения. Они свидетельствуют о перенесенной ранее инфекции.
Сколько делается ИФА на сифилис
Для проведения иммуноферментного теста в лаборатории требуется несколько часов. Если исследование проводят в том же месте, где и забор материала, время на транспортировку не нужно. В таком случае результаты можно получить в тот же или на следующий день.
Тест ИФА считается одним из самых быстрых анализов, получить информацию о наличии либо отсутствии сифилитической инфекции можно в течение суток после сдачи
В некоторых лабораториях указывают максимально возможный срок проведения исследования – 3 дня. Чаще всего пациентам удается узнать, отрицательный или положительный тест ИФА на сифилис, в течение суток.
Расшифровка анализа ИФА на сифилис
В зависимости от методов, которые использует выбранная лаборатория, тест дает качественный либо количественный результат. В первом случае указывается наличие или отсутствие инфекции, во втором – титр антител с указанием коэффициента позитивности.
Тест, проведенный качественным методом, может дать положительный, отрицательный или сомнительный результаты. В последнем случае говорят о том, что не удалось достоверно определить, есть ли в организме бледные трепонемы. Врач может рекомендовать пройти повторное обследование. Если есть клинические признаки болезни, то сразу назначается лечение.
По титрам каждого из антител можно определить стадию заболевания. Уровень IgM снижается естественным путем в течение года от момента инфицирования. Поэтому данный показатель нужен для диагностики первичного сифилиса. Он является индикатором активности проходящего в организме инфекционного процесса. При проведении успешного лечения уровень IgM снижается в 2-4 раза на протяжении месяца.
Синтез антител IgG увеличивается при вторичном или рецидивном сифилисе. По динамике изменения количества антител судят об успехе проводимой терапии. У некоторых пациентов даже после успешного излечения на протяжении 3-4 лет, а у некоторых в течение всей жизни, при проведении ИФА на сифилис могут быть обнаружены антитела G.
Достоверность ИФА на сифилис
Несмотря на высокую чувствительность и специфичность иммуноферментный тест может давать как ложноположительные, так и ложноотрицательные результаты. Поэтому при подозрении на заражение желательно сдавать анализы несколькими методами.
Получив положительный ИФА на сифилис, а РМП отрицательный, можно пройти обследование методом РИФ, РПГА или ПЦР. При оценке результата каждого теста врач обращает внимание на то, есть ли клинические признаки болезни. При их наличии и получении хотя бы 1 положительного анализа назначают лечение.
Важно! Отсутствие симптомов при лабораторном подтверждении заболевания трепонемными и нетрепонемными методами свидетельствует о протекании инфекции в скрытой форме. В такой ситуации необходима антибиотикотерапия с последующим контролем состояния.
Ложноположительный ИФА на сифилис
У некоторых пациентов суммарный тест ИФА на сифилис может дать положительный результат, даже если в организме отсутствуют бледные трепонемы. Такая реакция возможна у беременных женщин.
При беременности существует риск ложноположительного ИФА, поэтому диагностику лучше проводить несколькими методами одновременно
Также существует вероятность появления ложноположительного результата теста у пациентов, страдающих от:
- сахарного диабета;
- туберкулеза;
- онкологических заболеваний;
- аутоиммунных поражений;
- подагры;
- алкоголизма;
- инфекционного мононуклеоза;
- энтеровирусной инфекции.
Влияют на показатели ревматоидный фактор, метаболические нарушения, системные заболевания. Ложноположительные результаты теста возможны у пациентов с синдромом поликнональной активации. У них наблюдается неспецифическое нарастание антител одновременно ко многим возбудителям.
Ложноотрицательный ИФА на сифилис
При проведении иммуноферментного теста существует риск получения ложноотрицательного результата. Чаще всего такая ситуация возникает в случаях, когда пациент решил сдать анализ слишком рано. Если тест ИФА на сифилис показывает отрицательно, то нельзя исключать раннюю первичную или позднюю третичную форму заболевания.
Ложные результаты возможны, если будут допущены технические ошибки при проведении исследования или у больного состояние иммунодефицита.
Заключение
Тест ИФА на сифилис предназначен для того, чтобы выявить заболевание на любой из стадий. Недостоверным он будет, если сдать кровь в первые 1-2 недели после подозрительного полового контакта. В этот период в организме еще не успеют выработаться антигены. При отсутствии клинических проявлений болезни для подтверждения диагноза необходимы результаты 2 разных тестов, при выявлении твердого шанкра или других симптомов инфекции достаточно 1 анализа.
Источник
