Анализ крови герпес 1 2
Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме реального времени».
Исследуемый материал
Кровь (ЭДТА)
Раздельное определение ДНК-вируса простого герпеса 1 типа (губного или лабиального) и 2 типа (генитального) в крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени.
Термин «герпес» (от древнегреч. – ползти, ползучий) возник ещё в древнем Риме. Но именно сейчас скорость распространения этого заболевания опережает темпы прироста населения Земли. Частота инфицирования вирусом простого герпеса второго типа в Европе достигает 44%. Герпес занимает второе место по распространенности среди заболеваний, передающихся половым путем, после трихомониаза и второе место после гриппа по смертности от вирусных инфекций.
Вирусы простого герпеса первого (ВПГ-1) и второго (ВПГ-2) типа относят к семейству герпес-вирусов (Herpesviridae), общим свойством которых является постоянное персистирование в организме после инфицирования. Эти вирусы попадают в организм через слизистые (обычно «входные ворота» для ВПГ-1 – слизистые ротовой полости и носоглотки, для ВПГ-2 – слизистые половых органов). Клинические проявления герпетической инфекции в любой форме (высыпания на коже и слизистых оболочках, симптомы поражения нервных клеток и др.), как правило, свидетельствуют о снижении иммунитета. Первичная герпетическая инфекция и реактивация инфекции (в гораздо меньшей степени) в период беременности могут вызывать патологию беременности, внутриутробное инфицирование плода или инфицирование ребенка во время родов.
Возможность определения типа вируса простого герпеса − достижение лабораторной диагностики последних лет. Это позволяет уточнить особенности патогенеза заболевания, разработать методы профилактики, программы терапии и предупреждения рецидивов. Хотя оба типа ВПГ могут вызывать аналогичные клинические проявления, всё большее значение приобретает их дифференциальная диагностика. Так ВПГ-1 в настоящее время представляется как один из факторов риска возникновения болезни Альцгеймера. Аногенитальная герпетическая инфекция, обусловленная ВПГ-2, по сравнению с ВПГ-1 характеризуется большей частотой развития рецидивов. Вирус простого герпеса второго типа, по-видимому, связан с раком шейки матки и раком влагалища и повышает восприимчивость к ВИЧ-инфекции. Для терапии вируса простого герпеса второго типа разработан и применяется специфический иммуноглобулин (IMMUNOGLOBULINUM CONTRA HERPES VIRUS SIMPLEX TYPUS 2 HUMANUM).
Аналитические показатели:
- определяемый фрагмент − специфичные участки ДНК герпесвирусов 1 и 2 типов;
- специфичность определения − 100%;
- чувствительность определения − 100 копий ДНК герпесвирусов 1 и 2 типов в образце.
Литература
- Халдин А.А., Баскакова Д.В. Эпидемиологические аспекты заболеваний, вызываемых вирусом простого герпеса (обзор литературы). Consilium Medicum. Дерматология, 2007
- https://www.consilium-medicum.com/article/15019
- Инфекционные болезни у детей. Ред. Д. Марри. М: Практика, 2006 г., 928 c.
- Шульженко А.Е., Викулов Г.Х., Тутушкина Т.В. Герпетические инфекции — настоящее и будущее// Трудный пациент. 2003. № 4. Т. 1. С. 6–15.
Источник
Герпес — это одно из наиболее распространенных вирусных заболеваний на планете. По данным статистики, не менее 90% населения является носителями этого вируса. Клинические признаки отличаются при разных типах герпеса, болезнь может проявляться на коже и слизистых оболочках. Анализ крови на герпес 1 и 2 типа и расшифровка данных — это способ выявить возбудителя, определить его тип и выбрать подходящую схему лечения.
Что представляет собой возбудитель?
Возбудитель герпеса — это ДНК-содержащий вирус. Чаще всего он поражает кожу лица, слизистые оболочки глаз, половых органов, реже — ткани нервной системы и внутренние органы.
Заражение может происходить одним из следующих способов:
- контактным (в том числе при использовании общих предметов быта и личной гигиены);
- воздушно-капельным;
- половым;
- вертикальным (от матери к ребенку при беременности и в процессе родов).
После проникновения в организм вирус может не проявляться клинически в течение длительного времени. Иммунная система человека держит популяцию возбудителя под контролем, и он не способен размножаться. Первые симптомы возникают при снижении уровня иммунной защиты, в том числе при сезонных иммунодефицитах. Поэтому герпес часто сопровождает другие вирусные и бактериальные заболевания, грибковые инфекции.
Больной может не знать, что является вирусоносителем, но при этом заражать окружающих.
Герпесвирус 1 типа
Вирус простого герпеса первого типа — это самый распространенный возбудитель. Он проникает в организм человека еще в детском возрасте и дает периодические рецидивы.
Чаще всего болезнь локализуется на коже лица и тела и проявляется следующими симптомами:
- покраснение кожи в месте активизации вируса;
- появление мелкой сыпи (пузырьки вскрываются самостоятельно, а на их месте образуются язвы);
- зуд и отечность.
Заболевание проявляется локально, но некоторые пациенты жалуются также на повышение температуры, озноб, слабость и мышечную боль. В период рецидива герпеса больной максимально опасен для окружающих, так как возбудитель находится в содержимом пузырьков.
Герпесвирус 2 типа
Герпес второго типа относят к заболеваниям, передающимся половым путем. Кроме того, существуют еще контактный, бытовой и вертикальный пути передачи. Клинически болезнь проявляется сыпью на половых органах и коже бедер. Исследования на герпесвирус обязательны при беременности. Вирус опасен для плода: существует риск развития патологий, а также инфицирования младенца во время родов.
В каких случаях нужно обращаться в лабораторию?
Во время рецидива болезни вирус герпеса 1 и 2 типа можно определить путем простого осмотра. Характерная зудящая сыпь, которая имеет определенную локализацию, — это единственный признак, который будет являться основанием для постановки диагноза. Кроме того, пузырьки часто появляются на одном и том же месте, с одинаковой стороны.
Сдавать кровь в лабораторию для анализа нужно только в нескольких случаях:
- если герпес проявляется нестандартно, в стертой форме или с осложнениями;
- во время планирования беременности;
- если нужно выяснить срок заражения (например, при беременности для оценки потенциального риска для плода).
Сыпь может служить признаком большого количества заболеваний инфекционного и незаразного происхождения. По данным анализа крови можно определить тип вируса, убедиться в диагнозе и назначить лечение по необходимости.
Методы определения вируса герпеса в крови
Существует несколько методик обнаружения герпесвируса в крови. Они эффективны при спорных ситуациях, а также в тех случаях, если болезнь протекает бессимптомно. Во время рецидива можно также исследовать содержимое пузырьков, соскобы кожи или мазки слизистых оболочек. Лечащий врач определит, какие анализы нужно сдать, исходя из возможностей лаборатории и финансового положения пациента.
Существует несколько стандартных правил, которые позволят получить наиболее точный результат. Анализы сдают на голодный желудок. Чаще всего кровь собирают утром, с 8 до 10 часов. Накануне не стоит употреблять жирную пищу и алкоголь. Также на результат анализов могут повлиять стрессы или любое другое эмоциональное перенапряжение.
Анализ на герпес 1 и 2 типа чаще всего проводят двумя методами — ПЦР (полимеразная цепная реакция) и ИФА (иммуноферментный анализ). Также могут использоваться другие способы, в зависимости от оснащения лаборатории и ее технических возможностей.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
ПЦР — это чувствительная реакция, которая позволяет обнаружить в исследуемом материале ДНК вирусных клеток. Суть метода сводится к тому, что определенный ген многократно копируют, в результате чего можно выявить наличие и тип возбудителя. Важно, что реакция не произойдет, если исследуемой ДНК в материале нет.
Полимеразная цепная реакция позволяет обнаружить вирус непосредственно после заражения, задолго до того, как болезнь начнет проявляться клинически. Также ее назначают в тех случаях, когда нужно определить конкретный тип вируса, а не просто его наличие.
Лаборатория предоставляет бланки с показателями, которые легко расшифровать самостоятельно. Положительный результат свидетельствует о присутствии вируса в крови, отрицательный — об отсутствии. Это наиболее достоверный и чувствительный анализ, который выявляет даже самую малую концентрацию возбудителя. Полимеразная цепная реакция дает один из наиболее достоверных результатов, поэтому считается дорогостоящей. Также в бланках содержится информация о типе герпеса.
Иммуноферментный анализ (ИФА)
ИФА — это реакция, которая основана на выделении комплекса антиген—антитело. Вирус герпеса 1 или 2 типа— это антиген для организма (чужеродное вещество), в ответ на который иммунная система выделяет специальные белки — антитела (иммуноглобулины или Ig).
Антитела переносятся в током крови по организму в очаг заболевания и там начинают бороться с инфекцией. Существует несколько основных классов иммуноглобулинов, которые можно обнаружить по время анализа на герпес:
- IgM — это первые антитела, которые формируются в организме больного. В крови пациента их можно найти в течение 2-х недель с момента инфицирования. Кроме того, эти белки появляются в период пробуждения вируса при хроническом герпесе.
- IgG — это антитела, на основании которых можно говорить о хронической инфекции, которая находится в организме больного уже в течение длительного времени. Количество иммуноглобулинов этого класса резко возрастает при очередном рецидиве герпеса.
- IgG к предранним белкам вируса герпеса — это белки-антитела, которые возникают в крови вслед за IgM и также указывают на наличие заболевания в острой или хронической форме.
- Оценивают и такой показатель, как авидность IgG. Он характеризует способность этого иммуноглобулина связываться с вирусом и образовывать комплекс антиген—антитело. В начале болезни этот показатель слабо выражен, но в активную фазу заболевания резко возрастает.
Расшифровку результатов проводит врач. В каждой лаборатории существуют собственные показатели нормы. Больной получает бланк, в котором указаны его значения антител, а также те, от которых необходимо отталкиваться. Если количество иммуноглобулинов ниже нормы — результат отрицательный, если выше — положительный.
Далее необходимо сопоставить концентрацию разных классов антител в крови и расшифровать данные по таблице:
IgM | IgG к предранним белкам | Поздние IgG | Результат |
— | + | + | Если ранее пациент не болел герпесом, такой результат говорит о первичной острой инфекции. При беременности в таком случае существует угроза для плода. Если человек — носитель вируса (болезнь ранее проявлялась клинически или обнаруживалась лабораторным способом), речь идет о рецидиве герпеса. Иммунная система матери при беременности обеспечивает защиту плоду, но может быть необходимо ее лечение. |
— | — | + | Пациент является носителем вируса простого герпеса, и в его организме выработан иммунитет, который не позволяет болезни проявляться клинически. Такой результат обнаруживают в периоды ремиссии герпеса. |
+ | + | — | Такие данные говорят о первой стадии развития герпесной инфекции. В эту фазу существует угроза для жизни плода. |
+ | + | + | |
— | — | — | Человек никогда не сталкивался с вирусом герпеса, и его иммунная система не предоставляет защиту от него. Если этот анализ проводится во время беременности, врачи беспокоятся о занесении инфекции и развития острого герпеса. В таком случае состояние плода будет находиться под угрозой. |
Отдельно проводится расшифровка анализов на авидность IgG. Возможные результаты представлены в таблице:
Индекс авидности, % | Результат |
50—60% | Этот показатель является пороговой зоной и не может говорить о каком-либо результате. Исследования необходимо повторить через 14 дней. |
Ниже 50% | Результат говорит о наличии низкоавидных иммуноглобулинов. Они обнаруживаются при первичной инфекции. |
Выше 60 % | Выявлены высокоавидные иммуноглобулины. Такой результат может появляться при хроническом герпесе или у носителей вируса. |
Отрицательно | Организм пациента никогда не контактировал с вирусом. При беременности необходимо следить за показателями, поскольку иммунная защита как матери, так и плода, отсутствует. |
Результаты анализов могут отличаться в разных лабораториях. Они зависят от оборудования и других факторов, но, в основном, бывают достоверными.
Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)
РИФ — это еще один способ обнаружить вирус в исследуемом материале, в том числе в крови. Эта реакция показывает наиболее точный результат, если концентрация возбудителя высока. Суть метода сводится к добавлению в субстрат (кровь) специальных красителей с антителами и его последующей микроскопии. Если вирус присутствует, он вступает в химические реакции с антителами и светится под микроскопом.
Расшифровка анализа крови на герпес путем РИФ — это результаты микроскопии. Характерное свечение говорит о наличии возбудителя. На точность данных повлияет не только количество вируса герпеса, но и наличие другой инфекции в крови. Если она там находится в высокой концентрации, можно получить ложноположительный результат.
Культуральный метод
Этот метод заключается в выделении вируса из исследуемого материала и заражении биологических объектов (культуры клеток, куриных эмбрионов) в лабораторных условиях. Способ требует больших затрат времени и не используется в обычных ситуациях. Чаще всего его применяют для научных исследований. Для его выполнения необходима специально оборудованная вирусологическая лаборатория для изоляции возбудителя в помещении и предотвращения его распространения.
Заключение
Герпес — это одно из наиболее распространенных заболеваний в мире. Его характерная особенность заключается в том, что возбудитель остается в крови пациента в течение многих лет и только иногда вызывает клинические проявления болезни. Он не представляет опасности для взрослого человека, но может спровоцировать патологии беременности и передаваться от матери к ребенку при родах. Лучший способ профилактики герпеса — поддержка собственной иммунной системы, которая будет контролировать популяцию вируса и предотвратит появление симптомов болезни.
Источник
Метод определения
Иммуноферментный анализ (ИФА).
Исследуемый материал
Сыворотка крови
Внимание. При положительных и сомнительных реакциях, срок выдачи результата может быть увеличен до 2-х рабочих дней.
Антитела класса М к вирусу простого герпеса 1 и 2 типов (ВПГ, HSV). Маркёр первичного инфицирования вирусом простого герпеса.
Антитела к вирусу герпеса класса М — первые антитела, формирующиеся после инфицирования вирусом герпеса, появляющиеся в крови в течение 1 — 2 недель от начала инфекции. Антитела IgM к вирусу герпеса — преимущественно маркёр первичной инфекции. У 10 — 30% людей с реактивацией старой инфекции также могут быть обнаружены антитела класса IgM. Особенности инфекции.
Генитальный герпес вызывают две разные, но родственные формы вируса Herpes simplex (простой герпес), известные как вирус герпеса типа 1 (ВПГ-1) — он чаще вызывает «лихорадку» на губах — и вирус герпеса типа 2 (ВПГ-2). Чаще причиной поражения гениталий является второй тип. Но и заболевание губ, вызванное вирусом I типа, постепенно может перейти и на другие слизистые, в том числе, и на половые органы. Заражение может произойти в результате непосредственного контакта с инфицированными половыми органами при половом сношении, при трении половых органов друг о друга, при орально-генитальном контакте, анальном половом акте или орально-анальном контакте. И даже от больного полового партнёра, у которого внешние признаки болезни пока отсутствуют. Общим свойством перечисленных вирусов является постоянное присутствие в организме человека, с момента инфицирования. Вирус может находиться в «спящем» или активном состоянии и не покидает организм даже под воздействием лекарственных препаратов. Манифестное проявление любой герпетической инфекции свидетельствует о снижении иммунитета. Вирус простого герпеса (Herpes simplex) первого типа чрезвычайно распространён. Первичное инфицирование происходит, в большинстве случаев, в дошкольном возрасте. В дальнейшем вероятность заражения резко падает. Типичное проявление инфекции — «простуда» на губах. Однако при оральных контактах возможно поражение гениталий. Внутренние органы поражаются только при значительном снижении иммунитета. Для генитального герпеса характерно появление на половых органах скоплений мелких болезненных пузырьков. Вскоре они лопаются, оставляя мелкие язвочки. У мужчин пузыри образуются чаще всего на половом члене, иногда в мочеиспускательном канале и прямой кишке. У женщин — обычно на половых губах, реже в шейке матки или в анальной области. Через 1 — 3 недели заболевание как бы проходит. Но вирус проникает в нервные волокна и продолжает существовать, затаившись в крестцовом отделе спинного мозга. У многих больных генитальный герпес даёт рецидивы болезни. Они возникают с различной частотой — от одного раза в месяц до одного раза в несколько лет. Их провоцируют другие болезни, неприятности, и даже просто перегревание на солнце. Вирус генитального герпеса Herpes simplex 2 типа поражает, преимущественно, покровные ткани (эпителий) шейки матки у женщин и полового члена у мужчин, вызывая боль, зуд, появление прозрачных пузырьков (везикул) на месте которых образуются эрозии/язвочки. Однако при оральных контактах возможно поражение покровной ткани губ и ротовой полости. У беременных: вирус может проникнуть через плаценту в плод и вызвать у него врождённые дефекты. Герпес может вызвать также самопроизвольный аборт или преждевременные роды. Но особенно вероятна опасность заражения плода в процессе родов, при прохождении через шейку матки и влагалище при первичной или рецидивирующей генитальной инфекции у матери. Такое заражение на 50% повышает смертность новорожденных или развитие у них тяжёлых повреждений головного мозга или глаз. При этом определённый риск инфицирования плода существует даже в тех случаях, когда у матери ко времени родов отсутствуют какие-либо симптомы генитального герпеса. Ребенок может заразиться и после рождения, если у матери или у отца имеются поражения, во рту, или получить вирус с материнским молоком. Вирус простого герпеса типа II, по-видимому, связан с раком шейки матки и раком влагалища и повышает восприимчивость к ВИЧ-инфекции, вызывающей СПИД! В ответ на внедрение ВПГ в организме начинается продукция специфических иммуноглобулинов класса М (IgM). В крови их можно определить на 4 — 6 день после инфицирования. Они достигают максимального значения на 15 — 20 сутки. С 10 — 14 дня начинается продукция специфических IgG, несколько позднее — IgA. IgM и IgA сохраняются в организме человека недолго (1 — 2 месяца), IgG — в течение всей жизни (серопозитивность). Диагностическое значение при первичной инфекции вирусом герпеса имеет выявление IgM и/или четырехкратное увеличение титров специфических иммуноглобулинов G (IgG) в парных сыворотках крови, полученных от больной с интервалом в 10 — 12 дней. Рецидивирующий герпес обычно протекает на фоне высоких показателей IgG, свидетельствующих о постоянной антигенной стимуляции организма. Появление IgM у таких пациентов является признаком обострения болезни.
Важно! HSV-инфекция входит в группу TORCH-инфекций (название образовано начальными буквами в латинских наименованиях — Toxoplasma, Rubella, Cytomegalovirus, Herpes), считающихся потенциально опасными для развития ребёнка. В идеальном случае проконсультироваться с врачом и пройти лабораторное обследование на TORCH-инфекции женщине нужно за 2 — 3 месяца до планируемой беременности, поскольку в этом случае будет возможность предпринять соответствующие лечебные или профилактические меры, а также при необходимости в будущем сравнить полученные результаты исследований до беременности с результатами обследований во время беременности.
Источник