Анализ крови белок на электрофорез
Одним из видов анализа крови является электрофорез ее белков. Такое исследование направлено на выявление парапротеинов. Оно проводится по медицинским показаниям. Данный анализ относится к лабораторным методам. Он позволяет с высокой эффективностью выявлять изменения, которые происходят при воспалениях, протекающих остро или хронически инфекционной и не инфекционной природы, и состояниях связанных с развитием онкологических заболеваниях. Применяется анализ и для контроля эффективности лечения.
Что такое электрофорез белков: суть метода
Метод разделения белков на фракции — электрофорез
Этот анализ является исследованием, которое позволяет определить их количественные и качественные показатели по тому, как белки распределяются в электрическом поле. Исследование основано на том, что белковые молекулы несут заряды, положительные или отрицательные в зависимости от того, какой кислотностью будет обладать среда, в которой будет проводиться непосредственно электрофорез. Молекулы, которые окажутся положительно заряженными, будут адсорбироваться лучше, нежели чем те, которые несут отрицательный заряд.
Носителями, которые будут применяться для электрофореза, могут быть хроматографическая бумага, агаровый гель, полиакриловой гель, ацетатцеллюлозная бумага или акриловый гель. Значительно реже применяется капиллярный электрофорез.
Какие фракции белков существуют
Во время анализа белки разделяют на 5 или 6 фракций, в зависимости от применяемого метода. Это будут гамма-глобулины, которые делятся на бета-1 и бета-2, альбумины — альфа-1 и альфа-2, а также бета-глобулины.
Норма белковых фракций
Метод помогает фиксировать отклонения белков по фракциям
Имеются установленные нормы белковых фракций, которые должны присутствовать в крови. Отклонение их от показателей является признаком нарушения в организме, что требует проведения обследования для выявления причины.
Фракция | Норма в г/л |
---|---|
Альбумин | 35-44 |
Глобулин альфа-1 | 1-3 |
Глобулин альфа-2 | 5-8 |
Бета-глобулин | 4-10 |
Гамма-глобулин | 5-12 |
Значения показателей, в зависимости от того какие реактивы применяются в конкретной лаборатории, могут несколько изменяться. Поэтому в бланке результатов исследования в каждом медицинском учреждении обязательно указываются значения нормы, которые приняты в нем. На них будет ориентироваться врач при расшифровке анализа.
Показания и подготовка к тесту
Аутоиммунная патология почек — показание к анализу
Электрофорез белков крови назначают не очень часто, так как сегодня современные лабораторные исследования позволяют провести анализ на определенный белок, что ускоряет процесс диагностики. Абсолютным показанием к электрофорезу является наличие монолокальной гаммапатии. Также иногда анализ может быть показан в таких случаях:
- чрезмерно высокая скорость оседания эритроцитов, когда она превышает 50 мм/ч;
- значительно повышенный уровень гамма-глобулинов;
- скрининговое обследование для контроля эффективности лечения миеломной болезни;
- чрезмерно высокий общий белок в крови;
- ряд аутоиммунных заболеваний, поражающих печень и почки;
- слабость, для которой нет выраженной причины;
- развитие патологических переломов костей и постоянные боли в костях;
- частые рецидивы инфекционных заболеваний;
- нарушения, обнаруженные в прочих анализах, указывающие на то, что у человека могут развиваться анемии, лейкемии, гиперкальциемия или гипоальбуминемия.
Подготовка к тесту повышает достоверность теста
При общей диспансеризации и получении медицинских справок для трудоустройства данное исследование крови не осуществляется. Не требуется оно и в процессе подготовки человека к хирургическому вмешательству.
Для получения наиболее точных результатов рекомендуется соблюдение правил подготовки к анализу. Они включают в себя голодную диету в течение 15 часов до того как будет взята кровь, когда пациент может употреблять только чистую не газированную воду. За 90 минут до проведения исследования необходимо полностью исключить нагрузки как эмоциональные, так и физические, и курение в активной или пассивной форме. Чтобы не допустить искажение данных, забор материала не проводят сразу после того, как был осуществлен гемодиализ или проведена процедура, при которой использовались радиоконтрастные составы. Важно также, чтобы за несколько дней до исследования полностью было исключено лечение пенициллином, так как он вызывает расщепление амбулина, что исказит результат.
Расшифровка результатов: повышенное и пониженное значение
Фракция | Повышение | Понижение |
---|---|---|
Амбулин | Злоупотребление алкоголем, период вынашивания ребёнка, дегидрация | Холецистит в острой форме, лейкоз, миелома, саркоидоз, пневмония, остеомиелит, системная красная волчанка, лимфома |
Глобулин альфа-1 | Цирроз печени, стрессовые состояния, лимфогранулематоз, период вынашивания ребёнка, язва желудка, острое или хроническое воспаление | Гепатит вирусной природы в острой форме |
Глобулин альфа-2 | Сахарный диабет, остеомиелит, гломерулонефрит в острой форме, стрессовые состояния, системная красная волчанка, узловатый полиартрит, цирроз | Гипертиреоз, гепатит вирусной природы в острой форме, гемолиз интраваскулярный |
Бета-глобулин | Сахарный диабет, саркоидоз, ревматоидный артрит, беременность, гломерулонефрит, желтуха подпеченочная, нефротический синдром | Лейкоз, цирроз, склеродермия имеющая системный характер, лимфома, системная красная волчанка |
Гамма-глобулин | Цирроз, склеродермия системного характера, ревматоидный артрит, лимфолейкоз в хронической форме, муковисцидоз, синдром Шегрена | Лейкоз, склеродермия, гепатит вирусной природы в острой форме, лимфома, гломерулонефрит |
Что может повлиять на результат
На результаты теста играет соблюдение техники забора крови
Исказить показатели, кроме неправильной подготовки к проведению анализа, могут 2 фактора: недавно проведенная процедура гемодиализа, из-за которой произошло разрушение эритроцитов в крови, и повышенный уровень билирубина в организме. В любом из этих случаев потребуется пересдача анализа через некоторое время, которое определит врач.
Источник
Метод определения
Капиллярный электрофорез.
Исследуемый материал
Сыворотка крови
Количественное соотношение фракций общего белка крови, отражающее физиологические и патологические изменения состояния организма.
Общий белок сыворотки состоит из смеси белков с разной структурой и функциями. Разделение на фракции основано на разной подвижности белков в разделяющей среде под действием электрического поля.
Обычно методом электрофореза выделяют 5 — 6 стандартных фракций: 1 — альбумины и 4 — 5 фракций глобулинов (альфа1-, альфа2-, бета- и гамма-глобулины, иногда отдельно выделяют фракции бета-1 и бета-2 глобулинов). Глобулиновые фракции более разнородны.
Фракция альфа1-глобулина включает в себя острофазные белки: альфа1-антитрипсин (основной компонент этой фракции) — ингибитор многих протеолитических ферментов — трипсина, химотрипсина, плазмина и т. д., а также альфа1-кислый гликопротеин (орозомукоид). Он обладает широким спектром функций, в зоне воспаления способствует фибриллогенезу. К глобулинам относятся транспортные белки: тироксинсвязывающий глобулин, транкортин (функции — связывание и транспорт кортизола и тироксина соответственно), альфа1-липопротеин (функция — участие в транспорте липидов).
Фракция альфа2-глобулинов преимущественно включает острофазные белки — альфа2-макроглобулин, гаптоглобин, церулоплазмин. Альфа2-макроглобулин (основной компонент фракции) участвует в развитии инфекционных и воспалительных реакций. Гаптоглобин — это гликопротеин, который образует комплекс с гемоглобином, высвобождающимся из эритроцитов при внутрисосудистом гемолизе, утилизирующийся затем клетками ретикулоэндотелиальной системы. Церулоплазмин — специфически связывает ионы меди, а также является оксидазой аскорбиновой кислоты, адреналина, диоксифенилаланина (ДОФА), способен инактивировать свободные радикалы. Фракция бета-глобулинов содержит трансферрин (белок-переносчик железа), гемопексин (связывает гем, что предотвращает его выведение почками и потерю железа), компоненты комплемента (участвующие в реакциях иммунитета) и часть иммуноглобулинов. Фракция гамма-глобулинов состоит из иммуноглобулинов, (в порядке количественного убывания — IgG, IgA, IgM, IgE), функционально представляющих собой антитела, обеспечивающие гуморальную иммунную защиту организма от инфекций и чужеродных веществ.
При многих заболеваниях встречается нарушение соотношения фракций белков плазмы (диспротеинемия). Диспротеинемии наблюдаются чаще, чем изменение общего количества белка и при наблюдении в динамике могут характеризовать стадию заболевания, его длительность, эффективность проводимых лечебных мероприятий.
Парапротеинемия – появление на электрофореграмме дополнительной дискретной полосы, свидетельствующей о присутствии в большом количестве однородного (моноклонального) белка, обычно иммуноглобулинов или отдельных компонентов их молекул, синтезирующихся в В-лимфоцитах. Большие концентрации М-белка (больше 15 г/л) с большой вероятностью указывают на миелому.
Исследование белковых фракций при подозрении на миелому имеет особую диагностическую ценность. Лёгкие цепи иммуноглобулинов (белок Бенс-Джонса) свободно проходят через сывороточный фильтр и на электрофореграмме сыворотки могут не определяться. Малые М-белки иногда могут наблюдаться при хронических гепатитах, доброкачественно — у пациентов престарелого возраста. Имитировать малую парапротеинемию могут большие концентрации С-реактивного белка и некоторых других острофазных белков, присутствие в сыворотке фибриногена, иногда – лекарственные препараты на основе моноклональных антител в пиковой концентрации (используются в качестве противоопухолевых препаратов, иммунодепрессантов и др.).
Внимание! Данное исследование отдельно не выполняется, только в комплексе с тестами:
№28 Общий белок (в крови) (Protein total)
.
Источник
[06-011]
Белковые фракции в сыворотке
500 руб.
Определение количественных и качественных изменений основных фракций белка крови, используемое для диагностики и контроля лечения острых и хронических воспалений инфекционного и неинфекционного генеза, а также онкологических (моноклональных гаммапатий) и некоторых других заболеваний.
Синонимы русские
Протеинограмма.
Синонимы английские
Serum Protein Electrophoresis (SPE, SPEP).
Метод исследования
Электрофорез на пластинках с агарозным гелем.
Единицы измерения
Г/л (грамм на литр), % (процент).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования.
- Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение и не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Общий белок сыворотки крови включает в себя альбумин и глобулины, которые в норме находятся в определенном качественном и количественном соотношении. Оно может быть оценено с помощью нескольких лабораторных методов. Электрофорез белков в агарозном геле – это метод разделения белковых молекул, основанный на различной скорости их движения в электрическом поле в зависимости от размера, заряда и формы. При разделении общего белка сыворотки крови удается выявить 5 основных фракций. При проведении электрофореза белковые фракции определяются в виде полос различной ширины с характерным, специфичным для каждого типа белка местоположением в геле. Для определения доли каждой фракции в общем количестве белка оценивают интенсивность полос. Так, например, основная белковая фракция сыворотки – это альбумин. На его долю приходится около 2/3 всего белка крови. Альбумин соответствует самой интенсивной полосе, полученной при электрофорезе белков сыворотки крови здорового человека. К другим фракциям сыворотки, выявляемым с помощью метода электрофореза, относят: альфа-1 (преимущественно альфа-1-антитрипсин), альфа-2 (альфа-2-макроглобулин и гаптоглобин), бета (трансферрин и С3-компонент комплемента) и гамма-глобулины (иммуноглобулины). Различные острые и хронические воспалительные процессы и опухолевые заболевания сопровождаются изменением нормального соотношения белковых фракций. Отсутствие какой-либо полосы может указывать на дефицит белка, что наблюдается при иммунодефицитах или недостаточности альфа-1-антитрипсина. Избыток какого-либо белка сопровождается увеличением интенсивности соответствующей полосы, что наиболее часто наблюдается при различных гаммапатиях. Результат электрофоретического разделения белков может быть представлен графически, при этом каждая фракция характеризуется определенной высотой, отражающей ее долю в общем белке сыворотки. Патологическое увеличение доли какой-либо фракции носит название «пик», например «М-пик» при множественной миеломе.
Исследование белковых фракций играет особую роль при диагностике моноклональных гаммапатий. В эту группу заболеваний входят множественная миелома, моноклональная гаммапатия неясного генеза, макроглобулинемия Вальденстрема и некоторые другие состояния. Эти заболевания характеризуются клональной пролиферацией В-лимфоцитов или плазматических клеток, при которой происходит бесконтрольная выработка одного вида (одного идиотипа) иммуноглобулинов. При разделении сывороточного белка пациентов с моноклональной гаммапатией с помощью электрофореза наблюдаются характерные изменения – появление узкой интенсивной полосы в зоне гамма-глобулинов, которая называется М-пик, или М-белок. М-пик может отражать гиперпродукцию любого иммуноглобулина (как IgG при множественной миеломе, так и IgM при макроглобулинемии Вальденстрема и IgA при моноклональной гаммапатии неясного генеза). Важно отметить, что метод электрофореза в агарозном геле не позволяет дифференцировать различные классы иммуноглобулинов между собой. Для этой цели используют иммуноэлектрофорез. Кроме того, данное исследование позволяет дать приблизительную оценку количества патологического иммуноглобулина. В связи с этим исследование не показано для дифференциальной диагностики множественной миеломы и моноклональной гаммапатии неясного генеза, так как она требует более точного измерения количества М-белка. С другой стороны, если диагноз «множественная миелома» был верифицирован, метод электрофореза в агарозном геле может быть использован для оценки динамики М-белка при контроле лечения. Следует отметить, что у 10 % пациентов с множественной миеломой нет никаких отклонений в протеинограмме. Таким образом, нормальная протеинограмма, полученная с помощью электрофореза в агарозном геле, не позволяет полностью исключить это заболевание.
Другим примером гаммапатии, выявляемой с помощью электрофореза, является ее поликлональная разновидность. Она характеризуется гиперпродукцией различных видов (различных идиотипов) иммуноглобулинов, что определяется как однородное увеличение интенсивности полосы гамма-глобулинов при отсутствии каких-либо пиков. Поликлональная гаммапатия наблюдается при многих хронических воспалительных заболеваниях (инфекционных и аутоиммунных), а также при патологии печени (вирусных гепатитах).
Исследование белковых фракций сыворотки крови используют для диагностики различных синдромов иммунодефицита. Примером может послужить агаммаглобулинемия Брутона, при которой снижается концентрация всех классов иммуноглобулинов. Электрофорез белков сыворотки пациента с болезнью Брутона характеризуется отсутствием или крайне низкой интенсивностью полосы гамма-глобулинов. Низкая интенсивность альфа-1-полосы – характерный диагностический признак недостаточности альфа-1-антитрипсина.
Широкий спектр состояний, при которых наблюдаются качественные и количественные изменения протеинограммы, включает самые разные заболевания (от хронической сердечной недостаточности до вирусных гепатитов). Несмотря на наличие некоторых типичных отклонений протеинограммы, позволяющих в ряде случаев с определенной уверенностью диагностировать заболевание, обычно результат электрофореза белков сыворотки не может служить однозначным критерием постановки диагноза. Поэтому интерпретацию исследования белковых фракций крови проводят с учетом дополнительных клинических, лабораторных и инструментальных данных.
Для чего используется исследование?
- Для оценки качественного и количественного соотношения основных белковых фракций у пациентов с острыми и хроническими инфекционными заболеваниями, аутоиммунными состояниями и некоторыми болезнями печени (хронические вирусные гепатиты) и почек (нефротический синдром).
- Для диагностики и контроля лечения моноклональных гаммапатий (множественной миеломы и моноклональной гаммапатии неясного генеза).
- Для диагностики синдромов иммунодефицита (агаммаглобулинемии Брутона).
Когда назначается исследование?
- При обследовании пациента с острыми или хроническими инфекционными заболеваниями, аутоиммунными состояниями и некоторыми болезнями печени (хронические вирусные гепатиты) и почек (нефротический синдром).
- При симптомах множественной миеломы: патологических переломах или болях в костях, немотивированной слабости, персистирующей лихорадки, рецидивирующих инфекционных заболеваниях.
- При отклонениях в других лабораторных анализах, позволяющих заподозрить множественную миелому: гиперкальциемии, гипоальбуминемии, лейкопении и анемии.
- При подозрении на недостаточность альфа-1-антитрипсина, болезнь Брутона и другие иммунодефициты.
Что означают результаты?
Референсные значения
- Общий белок
Возраст | Референсные значения |
0-7 месяцев | 44 — 76 г/л |
7-12 месяцев | 51 — 73 г/л |
1-3 года | 56 — 75 г/л |
3-18 лет | 60 — 80 г/л |
Больше 18 лет | 64 — 83 г/л |
Компонент | Референсные значения |
Альбумин, % | 55,8 — 66,1 % |
Альфа-1-глобулин, % | 2,9 — 4,9 % |
Альфа-2-глобулин, % | 7,1 — 11,8 % |
Бета-1-глобулин, % | 4,7 — 7,2 % |
Бета-2-глобулин, % | 3,2 — 6,5 % |
Гамма-глобулин, % | 11,1 — 18,8 % |
Причины повышения фракции альбумина:
- беременность;
- дегидратация;
- алкоголизм.
Причины понижения фракции альбумина:
- острая ревматическая лихорадка;
- острый холецистит;
- сахарный диабет;
- воспалительные и опухолевые заболевания ЖКТ;
- нефротический синдром;
- нефритический синдром;
- лейкоз;
- лимфома;
- хроническая сердечная недостаточность;
- макроглобулинемия;
- множественная миелома;
- остеомиелит;
- язвенная болезнь;
- пневмония;
- саркоидоз;
- системная красная волчанка;
- неспецифический язвенный колит;
- прием глюкокортикоидов.
Причины повышения фракции альфа-1-глобулина:
- острые или хронические воспалительные заболевания;
- лимфогранулематоз;
- цирроз печени;
- язвенная болезнь;
- беременность;
- стресс;
- прием пероральных контрацептивов.
Причины понижения фракции альфа-1-глобулина:
- недостаточность альфа-1-антитрипсина;
- острый вирусный гепатит.
Причины повышения фракции альфа-2-глобулина:
- острая ревматическая лихорадка;
- хронический гломерулонефрит;
- цирроз печени;
- сахарный диабет;
- диспротеинемия;
- лимфогранулематоз;
- пожилой и младенческий возраст;
- нефротический синдром;
- остеомиелит;
- язвенная болезнь;
- пневмония;
- узловатый полиартериит;
- ревматоидный артрит;
- саркоидоз;
- стресс;
- системная красная волчанка;
- мальабсорбция;
- неспецифический язвенный колит.
Причины понижения фракции альфа-2-глобулина:
- острый вирусный гепатит;
- гипогаптоглобинемия;
- интраваскулярный гемолиз;
- гипертиреоз;
- мальабсорбция.
Причины повышения фракции бета-глобулина:
- острые воспалительные заболевания;
- сахарный диабет;
- диспротеинемия;
- гломерулонефрит;
- гиперхолестеринемия;
- железодефицитная анемия;
- подпеченочная желтуха;
- макроглобулинемия;
- нефротический синдром;
- беременность;
- ревматоидный артрит;
- саркоидоз;
- прием пероральных контрацептивов.
Причины понижения фракции бета-глобулина:
- аутоиммунные заболевания;
- лейкоз;
- лимфома;
- нефротический синдром;
- системная склеродермия;
- стеаторея;
- системная красная волчанка;
- цирроз печени;
- неспецифический язвенный колит.
Причины повышения фракции гамма-глобулина:
- амилоидоз;
- цирроз печени;
- хронический лимфолейкоз;
- криоглобулинемия;
- муковисцидоз;
- тиреоидит Хашимото;
- ювенильный ревматоидный артрит;
- множественная миелома;
- моноклональная гаммапатия неясного генеза;
- ревматоидный артрит;
- саркоидоз;
- системная склеродермия;
- синдром Шегрена;
- системная красная волчанка;
- макроглобулинемия Вальденстрема.
Причины понижения фракции гамма-глобулина:
- острый вирусный гепатит;
- агаммаглобулинемия;
- гломерулонефрит;
- лейкоз;
- лимфома;
- нефротический синдром;
- мальабсорбция;
- склеродермия;
- стеаторея;
- неспецифический язвенный колит.
Что может влиять на результат?
- Применение пенициллина может приводить к расщеплению полосы альбумина.
- Использование радиоконтрастных веществ, а также недавняя процедура гемодиализа препятствует интерпретации результата исследования.
Важные замечания
- Исследование не позволяет дифференцировать различные классы иммуноглобулинов (IgA, IgM, IgG) между собой и не предназначено для дифференциальной диагностики множественной миеломы и моноклональной гаммапатии неясного генеза.
- У 10 % пациентов с множественной миеломой протеинограмма в норме.
Также рекомендуется
- Альбумин в сыворотке
- Альфа-1-антитрипсин
- Белок общий в сыворотке
- Белок общий в моче
- Кальций ионизированный
- Суммарные иммуноглобулины G (IgG) в сыворотке
- Суммарные иммуноглобулины M (IgM) в сыворотке
Кто назначает исследование?
Врач общей практики, онколог, гематолог.
Литература
- Chernecky C. C. Laboratory Tests and Diagnostic Procedures / С.С. Chernecky, В.J. Berger; 5th ed. – Saunder Elsevier, 2008.
- DeVita V.T. Principles and practice of Oncology / V.T. DeVita, Lawrence T.S., Rosenberg S.A; 8th ed. – Lippincott Williams & Wilkins, 2008.
- Fauci et al. Harrison’s Principles of Internal Medicine/A. Fauci, D. Kasper, D. Longo, E. Braunwald, S. Hauser, J. L. Jameson, J. Loscalzo; 17 ed. – The McGraw-Hill Companies, 2008.
Источник