Анализ днк по сухой крови
Материалом для проведения ДНК-анализа может быть любая ткань человека, содержащая ДНК. Удобно брать образцы жидкой венозной или артериальной крови, образцы сухой крови на фильтре или марле, плодный материал. Каждый образец должен быть разборчиво подписан с указанием ФИО человека, у которого взят образец, дата рождения, его статуса и степени родства (Сидоров Петр Иванович, 4 окт.1984г, пробанд; Сидорова Анна Алексеевна, 20 мая 1963г, мать пробанда). Пробирки подписывают на специальной клейкой ленте; образец сухой крови на фильтре — на предмете носителя, в области, где не будет пятна крови; образец сухой крови на марле — на конверте, в котором этот образец будет храниться, либо на листе бумаги, который прикрепляют к марле. К каждому образцу должно прилагаться направление с описанием диагноза и родословной.
Для правильного осуществления забора биологического материала, отличного от крови и плодного материала можно (или необходимо) проконсультироваться со специалистами Центра Молекулярной Генетики.
Получение образцов жидкой крови:
Для исследования должна быть предоставлена венозная кровь в объеме 1 — 5 мл. Забор крови должен осуществляться в специальные пробирки, содержащие раствор антикоагулянта (0,5М раствор ЭДТА, рН 8,0, цитрат натрия и др., кроме гепарина). Соотношение объема ЭДТА к объему крови не должно превышать 1:10. После забора крови пробирка должна быть закрыта пробкой и плавно несколько раз перевернута вверх дном, чтобы кровь в пробирке тщательно перемешалась с антикоагулянтом. Если образец будет предоставлен в лабораторию в течение 2-3 дней, то хранить его следует при температуре +4oС (например в холодильнике). Для более длительного хранения образец следует заморозить и транспортировать на ледяной бане (например в термосе со льдом).
Получение образцов сухой крови на фильтре или марле:
Стерильную марлю, сложенную в несколько слоев (4 и больше), или фильтровальную бумагу (участок, которого не касались руками) пропитывают кровью из пальца насквозь, чтобы получилось пятно диаметром не менее 2 см. Для увеличения достоверности исследования лучше получать 2-3 пятна крови. Затем образец должен быть высушен на воздухе в течение не менее 2 часов в условиях отсутствия прямых солнечных лучей и контакта с какой бы то ни было поверхностью. Недопустимо также никому, кроме исследуемого пациента, прикасаться к пятну крови или предмету, на который нанесен образец крови, в том месте, где будет пятно крови до его получения во избежании кантаминации и получения неверных результатов. После высыхания образец должен быть упакован в индивидуальный бумажный конверт. Образец хранится при комнатной температуре, избегать попадания влаги.
Источник
Если обратиться к данным статистики, то на сегодняшний день практически 10% отцов воспитывают чужих детей, и это мы сейчас не говорим о тех случаях, когда отчим заведомо усыновил ребенка. И даже если отец и догадывается об отсутствии родства с ребенком, он не всегда набирается смелости опровергнуть факт отцовства. Хотя способов определения кровных связей на сегодня предостаточно. Одним из таких является метод определения отцовства по группе крови. Нередко к нему прибегают и сами матери, которые не состоят в брачных отношениях с отцом ребенка и хотят привлечь его к родительским обязанностям. Мы расскажем вам об эффективности и способах проведения разных экспертиз.
Факторы определяющие группу крови
Исходя из данных населения всего мира около 80% приходится на людей с 1 и 2 группой крови, второе место занимает 3 группа и всего несколько процентов отводится людям с 4 группой. Каждая группа крови отличается своим биологическим составом – содержание белков, эритроцитов, тромбоцитов и уникальных антиген. Согласно классификации, выделяют следующие факторы, определяющие группу крови:
- Первая (I) – 0 или антиген отсутствует;
- Вторая (II) – антиген А;
- Третья (IIl) – антиген В;
- Четвертая (IV) – АВ, в наличии оба антигена А и В.
Группа крови у каждого человека закладывается на генетическом уровне, еще в момент зачатия в утробе матери, путем передачи антигенов родителей своему ребенку. Группа крови остается неизменной у человека на протяжении всей его жизни. На ее состав не может повлиять даже химиотерапия, переливание крови или пересадка костного мозга.
Определение группы крови ребенка
Итак, медицина предлагает нам несколько способов определения отцовства. Мы расскажем вам об их методике определения и точности полученных результатов.
Использование резус-фактора
Самым простым методом определения крови является проведение анализа на совпадение резус-фактора. Несмотря на несложность и доступность способа, назвать его универсальным нельзя. Именно поэтому, если процесс установления отцовства происходит в суде, то результаты анализа крови по резус-фактору не принимаются за стопроцентное доказательство. В единичных случаях можно получить однозначный неоспоримый ответ по данному способу, когда оба родителя имеют отрицательный резус-фактор. Ведь согласно биологическим особенностям человека, ребенок 100% наследует отрицательный резус от родителей, если они оба обладают таковым.
А вот что касаемо положительного резус-фактора, то здесь ситуация иная. Если у обоих родителей показатель крови положительный, то вероятность родства ребенка составляет 50%. Что уже говорить о тех случаях, когда резус-факторы у отца и матери абсолютно разные. Здесь вероятность родства с ребенком определить невозможно, поэтому в таких ситуациях применение данного метода практически не используется.
Если у отца с матерью одинаковые положительные резус-факторы, а у ребенка отрицательный, это еще не говорит о том, что он приходится не родным.
Анализ ДНК
Во время зачатия плод получает от родителей генетический материал, который является уникальным и неповторимым. Для забора на анализ ДНК берутся различные биологические материалы человека, в которых содержится его генетическая информация – кровь, слюна, волос, кожа, естественные выделения. На основе тщательного исследования проводится их сравнение и наличие совпадений генетических цепей. Ошибок быть не может, экспертиза ДНК находится под строгим контролем ученых, тем более что полученные результаты перепроверяются – они должны либо дважды подтверждаться, либо опровергаться. Такой подход дает невероятную точность, с которой пока не могут сравниться любые другие методики на проведение родства.
Экспертиза ДНК является наиболее точным, практически стопроцентным подтверждение родства. Именно благодаря высокой эффективности и достоверным данным данный метод является главным доказательством в суде, когда идет процедура оспаривания отцовства. Ведь тест ДНК показывает совпадение генов двух людей на 99,9 % либо отрицает факт кровных связей. Главным минусом такого исследования является его дороговизна, около 15 000 рублей с одного исследуемого материала. Соответственно при установлении отцовства придется заплатить минимум 30 000 рублей. Кроме того, если вы хотите получить результаты в ближайшее время – через 3 дня, а не как положено через 10 дней, то придется еще немало доплатить. Но, несмотря на дороговизну анализа ДНК, он проводится только в проверенных высокопрофессиональных медицинских учреждениях при помощи дорогостоящего лабораторного оборудования.
Система ABO
Еще одним способом установления отцовства является система АВ0. Суть ее заключается в сравнении состава крови на антигены. Как мы уже ранее писали, в зависимости от группы крови можно распознать наличие того или иного антигена:
- для первой группы – 00;
- для второй – А0, АА;
- для третей – В0,ВВ;
- для четвертой АВ.
Такая комбинация набора антигенов объясняется тем, что у каждого человека двойной набор хромосом, поэтому мы и видим такие результаты. Расчет вероятности кровной связи определяется сопоставлением этих показателей обоих родителей. И как результат, если ребенок является биологическим этому отцу, то у него должна совпадать комбинация набора антигенов. Такая методика больше подходит для тех родителей, у которых одинаковая группа крови. И то, даже если результат будет правильным в зависимости от набора хромосом, то он не является достоверным, это может быть банальное совпадение.
Данная методика определения родства не является стопроцентным доказательством кровной связи между отцом и ребенком, однако может использоваться в качестве предварительного скринингового исследования.
Таким образом, наиболее точным методом установления родства между двумя людьми на сегодняшний день пока остается экспертиза ДНК. Два остальных способа хоть и могут показать достоверную информацию, однако подтвердить ее никак нельзя. Поэтому если вы решаете вопрос установления отцовства через суд, то данные согласно определения совпадений резус-фактора и антигенов АВ0, могут выступать второстепенными доказательствами.
Какую группу крови унаследует ребенок
Не менее часто мать или отец интересуется вопросом, как можно определить группу крови у ребенка, если имеются данные по обоим родителям. Мы привели вам обобщенную таблицу, которая путем сопоставления данных отца и матери приводит к нужному ответу. Однако вы должны понимать, что чем больше антигенов содержит группа крови каждого из родителей, тем больше вариантов вы получаете.
В таблице имеется достаточно значений со 100%. Однако, даже если согласно приведенной таблице при наличии информации о группе крови матери и отца, нельзя однозначно утверждать, что именно он является его биологическим родителем. Что уже говорить о тех результатах, где выбивает сразу несколько значений. Поэтому полностью доверять такому способу не стоит, он может иметь погрешности.
Сдать анализы в домашних условиях
Правильно – это проводить экспертизу в специализированных лабораториях, с соблюдением всех строгих норм забора анализов. Однако сегодня все чаще можно услышать информацию, о том, что можно сдать анализы дома. Сразу хочется сказать, что сдавать анализы вы дома не будете – это строгое нарушение. А вот произвести забор материала для предстоящего исследования в домашних условиях, такое на практике встречается.
Делаете вы это не по собственному усмотрению, а только после уведомления об этом в медицинское учреждение. Они в ответ могут прислать сотрудника, который приедет и сделает забор крови для будущего анализа и доставит его в специальном оборудовании в лабораторию. Если вы проводите экспертизу ДНК, где биологическим материалом может выступать слюна, волосы, засохшие пятна выделений, зубная щетка, то вы можете сами произвести забор, однако организация, которая будет проводить экспертизу, пришлет вам по адресу специальные конверты, контейнеры, пинцет и перчатки, а после доставит в лабораторию.
Перед тем как согласиться на проведение забора анализов в домашних условиях, вы должны понимать, что полученные результаты нельзя будет предоставить в суде в качестве основных доказательств.
Недостатки определения отцовства по группе крови
Мы уже рассказали о минусах каждого метода определения отцовства путем анализа по забору крови. Однако в качестве итога еще раз о них напомним, чтобы вы понимали ответственность своих действий:
- Ни система АВ0, ни определение резус-фактора не дает никакой гарантии, что проведенное сравнение группы крови отца и ребенка является достоверным, даже при их полном совпадении, или наоборот.
- Узнать результаты можно только после рождения ребенка, в отличие от ДНК экспертизы, где процедуру установления родства можно проводить уже после 5 месяцев.
Несмотря на дешевизну и доступность проведения процедуры установления отцовства по группе крови, данный способ не дает никаких гарантий о достоверности результатов, только в исключительных случаях.
Если вы решили установить отцовство, то доверяйте проверенной методике – экспертизе ДНК, которая позволяет с высокой точностью установить кровную связь между ребенком и предполагаемым отцом. Дороговизна процедуры полностью оправдывает полученные результаты и исход судебного разбирательства. Прочие способы на основе анализов крови, могут служить лишь в качестве предварительного результата или дополнительного доказательства.
Источник
Мы предоставляем возможность провести тест ДНК на отцовство и родство из нестандартных образцов, таких как волосы, ногти, пятна крови и носовые платки, а также другие предметы, на которых остаются следы ДНК. Это позволит развеять сомнения, не прибегая к более явной процедуре.
Когда использовать. Нестандартные образцы следует использовать, если нет возможности взять мазок из полости рта. В одном анализе, от одного участника может быть нестандартный материал (например, ногти), а от второго — стандартный (мазки изо рта).
Точность. В случае успешности выделения ДНК из нестандартного материала, точность так же высока, как и при использовании стандартного.
Сроки. Срок выполнения анализа с использованием нестандартных материалов — дополнительно 2 рабочих дня для 1-й группы сложности, 5 рабочих дней для 2-й группы сложности, к сроку выполнения анализа ДНК.
Гарантии. Мы не можем гарантировать успешность выделения профиля ДНК из этих образцов, но в подавляющем большинстве случаев (98% от всех тестов) нам это удается. Предварительно, мы можем провести оценку нестандартного образца, для понимания шансов выделения ДНК, чтобы снизить риск тестирования некачественного образца.
Оплата. До начала анализа оплачивается: 1) доплата за тестирование нестандартных образцов (например, ногти от отца — 4 900 руб; 2) часть или вся стоимость анализа. Если только один участник с нестандартным образцом — то половина, например, 4 400 руб, если больше одного — то вся сумма.
По готовности анализа оплачивается оставшаяся сумма 4 400 руб. В случае неуспешного выделения ДНК, что бывает редко, первоначальная оплата (стоимость нестандартного образца и половины стоимости анализа), не возвращается.
Для каких анализов используются нестандартные материалы
- для теста на отцовство и родство
- для теста на измену, также смотрите анализ биологического пятна
- для идентификации — принадлежат ли образцы (например, спермы, крови) определенному человеку. Для этого понадобится контрольный образец человека, с которым сравнивать (мазки)
Как повысить шансы на успешность
Направьте нам несколько образцов, лаборатория выберет наиболее качественный образец.
Это поможет, если профиль ДНК смешанный, то есть на образце могут быть биологические следы нескольких человек (это особенно касается домашней утвари и расчески). Также наличие нескольких образцов поможет при низком качестве образца, когда выделился неполным профиль, и приходится составлять консолидированный профиль из двух образцов.
Какие нестандартные образцы можно использовать
Материалы 1-й группы сложности | |
Жидкая кровь | Шансы 95-100% |
---|---|
Жидкую кровь вылить на чистую марлю, свернутую в 4-5 раз, чтобы получилось пятно размером 2-3 см в диаметре. Высушить марлю в течении 1-2 ч и поместить в чистый бумажный конверт. | |
Пятна крови диаметром от 1 см | Шансы 95-100% |
Пятно крови на бинте, марле, ткани, бумажной салфетке — поместить в чистый бумажный конверт. Чтобы узнать, содержит ли пятно кровь, можно провести анализ биологического пятна. | |
Ногти (рук, ног) | Шансы 95-100% |
Состриженные ногти в количестве 5-7 штук, поместить в чистый бумажный конверт | |
Сперма, пятна от 1 см | Шансы 95-100% |
Жидкую сперму собрать на ватные палочки (если палочка двухсторонняя, обрезать второй ватный наконечник), подсушить 30 мин. при комнатной температуре, поместить в бумажный конверт. Возможно использование сухой спермы на ткани, ватном тампоне. Чтобы узнать, содержит ли пятно именно сперму, можно провести анализ биологического пятна. | |
Диабетические тест-полоски | Шансы 90-100% |
5-6 штук поместить в чистый бумажный конверт | |
Жевательная резинка | Шансы 90-100% |
Подсушить жевательную резинку при комнатной температуре 30-60 мин на чистой бумажной салфетке (или фольге), завернуть подсушенную жевательную резинку в эту салфетку и поместить в чистый бумажный конверт. | |
Ушная сера | Шансы 80-100% |
Взять чистую ушную палочку, противоположным концом тщательно прочистить ушной канал (10-20 раз) и поместить в чистый бумажный конверт. Необходимо 2-3 палочки (по одной палочке на ушной канал). Если палочки имеют ватный наконечник с обоих концов, необходимо отрезать тот конец, за который держались | |
Окурки от сигарет | Шансы 80-100% |
3-5 сигаретных окурков поместить в чистый бумажный конверт | |
Волосы с луковицами | Шансы 80-100% |
Волосы с луковицами, желательно 8-10 волосинок, поместить в маленький пластиковый конверт, который затем поместить в бумажный конверт. | |
Женская прокладка или тампон | Шансы 80-100% |
Положить в бумажный конверт, высушить не менее 8 часов | |
Носовой платок, салфетка с носовой слизью — пятно от 1 см | Шансы 80-100% |
Носовая слизь. Положите носовой платок или салфетку с носовой слизью в бумажный конверт. Если слизь влажная, подсушить в течение 4 часов. | |
Сбритая щетина | Шансы 60-90% |
Щетина с фрагментами кожи. Щетина с электробритвы дает лучшие результаты. | |
Зубная щетка | Шансы 60-100% |
Поместить зубную щетку в бумажный конверт. Если щетка влажная, то подсушить конверт 2-3 ч. | |
Расческа | Шансы 60-100% |
Поместить расческу в чистый бумажный конверт | |
Стакан | Шансы 40-60% |
Аккуратно завернуть стакан в чистую бумажную салфетку. | |
Соска | Шансы 30-60% |
Поместите в бумажный конверт | |
Питьевая трубочка | Шансы 60-100% |
Поместить трубочку в чистый бумажный конверт | |
Столовая утварь | Шансы 30-60% |
Вилки, ложки. Аккуратно завернуть столовую утварь в чистую бумажную салфетку. | |
Лезвие бритвы | Шансы 50-80% |
Бритву целиком поместить в чистый бумажный конверт. Если бритва мокрая – то подсушить конверт. | |
Молочные зубы | Шансы 60-70% |
Недавно выпавший зуб, не мыть, салфеткой аккуратно положить в бумажный конверт, анализируются смывы | |
Материалы 2-й группы сложности | |
Пятна до 1 см | Шансы 90% |
Пятна крови, носовой слизи или спермы, указать материал | |
Пуповина | Шансы 60-90% |
Высушенная, возможно понадобится также образец матери | |
Образец тканей | Шансы 80-100% |
Поместить фрагмент ткани (желательно 4-10 грамм) в 50мл пробирку, залить 70% спиртом и направить КУРЬЕРСКОЙ службой в лабораторию. До отправления хранить препарат при -20 градусов в морозильнике. Если есть возможность, то направлять препарат на льду, с использованием замороженных при -20 – 30 градусов хладоэлементах в термоконтейнере | |
Абортивный материал | Шансы 80-100% |
Поместить весь имеющийся абортивный материал в пробирку 50 мл, залить физраствором и направить нам. Хранить в холодильнике, не замораживая. Если есть возможность, то направлять препарат на льду. Так как абортивный материал всегда загрязнен биологической тканью материнского происхождения, необходимо ОБЯЗАТЕЛЬНО предоставлять образец ДНК матери | |
Мумифицированная ткань | Шансы 50-100% |
Поместить фрагмент ткани (желательно 4-10 грамм) в чистый бумажный конверт. | |
Ткань в парафиновых блоках | Шансы 50-100% |
Поместить фрагмент блока (желательно не менее 1 см3 ) в чистый бумажный конверт. | |
Ремешок от часов | Шансы 70-100% |
Поместить ремешок в чистый прозрачный пластиковый пакет, или же в чистый бумажный пакет. | |
Одежда | Шансы 60-90% |
Рубашка с засаленным воротничком, майка, нижнее белье | |
Забальзамированная ткань | Шансы 10-50% |
Поместить фрагмент ткани (желательно 4-10 грамм) в чистый бумажный конверт. Подсушить конверт до исчезновения следов влаги (обычно 1-2 ч при комнатной температуре) | |
Ткань в формалине | Шансы 0-30% |
Поместить фрагмент ткани (желательно 4-10 грамм) в 50мл пробирку, залить 70% спиртом. Направлять не замораживая, при температуре окружающей среды | |
Гистологические препараты на стеклах | Шансы 0-20% |
Поместить стекло в чистый бумажный конверт. Следует учитывать, что количество биоматериала на стекле крайне незначительное. Это, и то, что гистологические препараты, как правило фиксируются при помощи веществ, разрушающих структуру ДНК приводит к тому, что вероятность выделения ДНК из этих образцов мала. |
Источник