Анализ для установления группы крови

Метод определения
Фильтрация проб крови сквозь гель, импрегнированный моноклональными реагентами — агглютинация + гель-фильтрация (карточки, перекрёстный метод).

При необходимости (обнаружение А2-подтипа) проводится дополнительное тестирование с использованием специфических реактивов.

Исследуемый материал
Цельная кровь (с ЭДТА)

Определяет принадлежность к определённой группе крови по системе АВО.

Группы крови — это генетически наследуемые признаки, не изменяющиеся в течение жизни при естественных условиях. Группа крови представляет собой определённое сочетание поверхностных антигенов эритроцитов (агглютиногенов) системы АВО.

Определение групповой принадлежности широко используется в клинической практике при переливании крови и её компонентов, в гинекологии и акушерстве при планировании и ведении беременности.

Система групп крови AB0 является основной системой, определяющей совместимость и несовместимость переливаемой крови, т. к. составляющие её антигены наиболее иммуногенны. Особенностью системы АВ0 является то, что в плазме у неиммунных людей имеются естественные антитела к отсутствующему на эритроцитах антигену. Систему группы крови АВ0 составляют два групповых эритроцитарных агглютиногена (А и В) и два соответствующих антитела — агглютинины плазмы альфа (анти-А) и бета (анти-В).

Различные сочетания антигенов и антител образуют 4 группы крови:

Группа 0 (I) — на эритроцитах отсутствуют групповые агглютиногены, в плазме присутствуют агглютинины альфа и бета;
Группа А (II) — эритроциты содержат только агглютиноген А, в плазме присутствует агглютинин бета;
Группа В (III) — эритроциты содержат только агглютиноген В, в плазме содержится агглютинин альфа;
Группа АВ (IV) — на эритроцитах присутствуют антигены А и В, плазма агглютининов не содержит.

Определение групп крови проводят путём идентификации специфических антигенов и антител (двойной метод или перекрёстная реакция).

Несовместимость крови наблюдается, если эритроциты одной крови несут агглютиногены (А или В), а в плазме другой крови содержатся соответствующие агглютинины (альфа- или бета), при этом происходит реакция агглютинации. Переливать эритроциты, плазму и особенно цельную кровь от донора к реципиенту нужно строго соблюдая групповую совместимость. Чтобы избежать несовместимости крови донора и реципиента, необходимо лабораторными методами точно определить их группы крови. Лучше всего переливать кровь, эритроциты и плазму той же группы, которая определена у реципиента. В экстренных случаях эритроциты группы 0, но не цельную кровь!, можно переливать реципиентам с другими группами крови; эритроциты группы А можно переливать реципиентам с группой крови А и АВ, а эритроциты от донора группы В — реципиентам группы В и АВ.

Карты совместимости групп крови (агглютинация обозначена знаком «+»)

Кровь донора	Кровь реципиента
Кровь донора	0 (I)	A (II)	B (III)	AB (IV)
0 (I)	—	+	+	+
A (II)	+	—	+	+
B (III)	+	+	—	+
AB (IV)	+	+	+	—

Эритроциты донора	Кровь реципиента
Эритроциты донора	0 (I)	A (II)	B (III)	AB (IV)
0 (I)	—	—	—	—
A (II)	+	—	+	—
B (III)	+	+	—	—
AB (IV)	+	+	+	—

Групповые агглютиногены находятся в строме и оболочке эритроцитов. Антигены системы АВО выявляются не только на эритроцитах, но и на клетках других тканей или даже могут быть растворёнными в слюне и других жидкостях организма. Развиваются они на ранних стадиях внутриутробного развития, у новорожденного уже находятся в существенном количестве. Кровь новорожденных детей имеет возрастные особенности — в плазме могут ещё не присутствовать характерные групповые агглютинины, которые начинают вырабатываться позже (постоянно обнаруживаются после 10 месяцев) и определение группы крови у новорождённых в этом случае проводится только по наличию антигенов системы АВО.

Помимо ситуаций, связанных с необходимостью переливания крови, определение группы крови, резус-фактора, а также наличия аллоиммунных антиэритроцитарных антител должно проводиться при планировании или во время беременности для выявления вероятности иммунологического конфликта матери и ребёнка, который может приводить к гемолитической болезни новорожденных.

Гемолитическая болезнь новорождённых — гемолитическая желтуха новорожденных, обусловленная иммунологическим конфликтом между матерью и плодом из-за несовместимости по эритроцитарным антигенам. Болезнь обусловлена несовместимостью плода и матери по D-резус- или АВО-антигенам, реже имеет место несовместимость по другим резус- (С, Е, с, d, e) или М-, М-, Kell-, Duffy-, Kidd-антигенам. Любой из указанных антигенов (чаще D-резус-антиген), проникая в кровь резус-отрицательной матери, вызывает образование в её организме специфических антител. Последние через плаценту поступают в кровь плода, где разрушают соответствующие антигенсодержащие эритроциты.

Предрасполагают к развитию гемолитической болезни новорожденных нарушение проницаемости плаценты, повторные беременности и переливания крови женщине без учёта резус-фактора и др. При раннем проявлении заболевания иммунологический конфликт может быть причиной преждевременных родов или выкидышей. Существуют разновидности (слабые варианты) антигена А (в большей степени) и реже антигена В. Что касается антигена А, имеются варианты: сильный А1 (более 80%), слабый А2 (менее 20%), и еще более слабые (А3, А4, Ах — редко). Это теоретическое понятие имеет значение для переливания крови и может вызвать несчастные случаи при отнесении донора А2 (II) к группе 0 (I) или донора А2В (IV) — к группе В (III), поскольку слабая форма антигена А иногда обуславливает ошибки при определении группы крови системы АВO. Правильное определение слабых вариантов антигена А может требовать повторных исследований со специфическими реагентами.

Снижение или полное отсутствие естественных агглютининов альфа и бета иногда отмечается при иммунодефицитных состояниях:

новообразования и болезни крови — болезнь Ходжкина, множественная миелома, хроническая лимфатическая лейкемия;
врождённые гипо- и агаммаглобулинемия;
у детей раннего возраста и у пожилых;
иммуносупрессивная терапия;
тяжёлые инфекции.

Трудности при определении группы крови вследствие подавления реакции гемагглютинации возникают также после введения плазмозаменителей, переливания крови, трансплатации, септицемии и пр.

Наследование групп крови. В основе закономерностей наследования групп крови лежат следующие понятия. В локусе гена АВО возможны три варианта (аллеля) — 0, A и B, которые экспрессируются по аутосомно-кодоминантному типу. Это означает, что у лиц, унаследовавших гены А и В, экспрессируются продукты обоих этих генов, что приводит к образованию фенотипа АВ (IV). Фенотип А (II) может быть у человека, унаследовавшего от родителей два гена А или гены А и 0. Соответственно фенотип В (III) — при наследовании двух генов В или В и 0. Фенотип 0 (I) проявляется при наследовании двух генов 0. Таким образом, если оба родителя имеют II группу крови (генотипы AА или А0), кто-то из их детей может иметь первую группу (генотип 00). Если у одного из родителей группа крови A (II) с возможным генотипом АА и А0, а у другого B (III) с возможным генотипом BB или В0 — дети могут иметь группы крови 0 (I), А (II), B (III) или АВ (IV).

Источник

Резе Андрей Геннадьевич - Гематолог

Автор

Заместитель генерального директора по науке и образованию

Ведущий врач

Кандидат медицинских наук

Гематолог

Определение группы крови – это анализ, с помощью которого выявляется принадлежность человека группе людей с определенными иммуногенетическими характеристиками крови, что позволяет установить их совместимость между собой по этому признаку. Группа крови формируется у ребенка еще в период внутриутробного развития и сохраняется неизменной всю жизнь.

Почему важно знать группу крови

Определение совместимости по группе крови необходимо, прежде всего, для трансфузии (переливания крови). Большая потеря крови смертельно опасна. С давних времен предпринимались попытки возместить кровопотерю за счет вливания крови другого человека. Но первую попавшуюся кровь использовать нельзя. При смешивании крови «вслепую» примерно в половине случаев происходит агглютинация: красные кровяные тельца (эритроциты) начинают склеиваться между собой, образуя скопления. Хлопья, возникающие при агглютинации, видны в пробирке невооруженным глазом; понятно, что если этот процесс случится внутри кровеносной системы, ничего хорошего для человека ждать нельзя.

В начале XX века было установлено, почему происходит агглютинация. На поверхности мембраны эритроцита (красной кровяной клетки) находятся особые белки-антигены (их назвали агглютиногенами). Антигенами они называются потому, что могут связываться с другими веществами – антителами. Связь эта специфична, то есть данный антиген может быть связан только конкретным антителом. Когда мы говорим о группах крови, мы пользуемся системой, которую интересует только два антигена (на самом деле их «ездит» на эритроцитах гораздо больше). Для удобства эти антигены (агглютиногены) обозначены первыми буквами латинского алфавита – A и B. Соответствующие им антитела (их называют агглютининами) обозначены первыми буквами греческого алфавита – α (альфа) и β (бета).

Очевидно, что антиген и соответствующее ему антитело одновременно в крови находиться не могут, иначе пошла бы реакция (агглютинация). А вот другие комбинации возможны. Именно они и определяют, к какой группе принадлежит наша кровь.

Группы крови и их совместимость

В отечественной медицине группы обозначаются цифрой и называются соответственно: первая, вторая, третья, четвертая. За рубежом эту систему называют АВ0 и используют соответствующие обозначения.

Группа I (группа 0) – первая (или нулевая). У людей с кровью этой группы на мембране эритроцитов нет обоих агглютиногенов (A и B), а вот агглютинины α и β в плазме присутствуют.

Группа II (А) – вторая группа. Кровь этой группы содержит агглютиноген A и агглютинин β.

Группа III (B) – третья группа. В крови на эритроцитах присутствует агглютиноген B, в плазме – агглютинин α.

Группа IV (AB) – четвертая группа. На эритроцитах присутствуют оба антигена, а антител в плазме нет.

Переливать цельную кровь можно только тогда, когда кровь и донора и реципиента относится к одной группе. Для переливания также могут использоваться эритроциты (они отделяются от плазмы), в этом случае значение имеют лишь агглютиногены. Эритроциты человека первой группы крови можно переливать всем, так как они не могут привнести антиген и спровоцировать агглютинацию. Поэтому человек с первой группой крови является универсальным донором.

Эритроциты второй группы можно переливать людям, у которых и так уже есть в крови агглютиноген А – то есть со второй и четвертой группой. Соответственно, эритроциты третье й группы можно переливать тем, у кого в крови есть агглютиноген B, это — третья и четвертая группа.

Человек с четвертой группой крови является универсальным реципиентом: ему можно переливать эритроциты от людей с любой группой крови, тогда как его кровь можно использовать для переливания только людям с такой же группой крови.

Когда проводится определение группы крови

Показаниями для определения группы крови являются:

необходимость переливания крови;
подготовка к операциям. Любая операция – это риск; при определенных обстоятельствах может возникнуть необходимость возместить кровопотерю, и тогда врачи должны знать, какую кровь для этого можно использовать;
ведение беременности. В некоторых случаях возможна несовместимость групп крови матери и ребенка. При конфликте по группе крови ребенок может родиться с гемолитической болезнью новорожденных (гемолитической желтухой). Для определения группы крови ребенка сразу после рождения берут на анализ пуповинную кровь. Но о конфликте по группе крови можно судить и в процессе вынашивания – по уровню антител в крови матери. Риск несовместимости по группе крови между матерью и ребенком высчитывается исходя из вероятной группы крови ребенка, которая, в свою очередь, зависит от того, какая группа крови у матери и у отца. Вот для оценки этого риска и необходимо сдавать анализ на определение группы крови при беременности.

Изображение 2: Определение группы крови - клиника Семейный доктор

Когда у врачей возникает необходимость узнать группу крови, анализ, как правило, делается заново. Так поступают, чтобы полностью исключить возможность ошибки в результате использования неверных данных. Врач не будет спрашивать группу крови у пациента, поскольку отвечает за его жизнь и должен иметь стопроцентную уверенность, что группа крови определена правильно.

Но знать свою группу крови (и группу крови своих детей) всё равно полезно. Во-первых, никто не может быть застрахован от чрезвычайных ситуаций. А во-вторых, есть определенная зависимость между группой крови и предрасположенностью к различным заболеваниям.

Как сдают анализ на определение группы крови

Кровь на анализ для определения группы крови могут брать как из пальца, так и из вены (сейчас предпочитают брать кровь из вены). Специальной подготовки к анализу не требуется. Желательно, чтобы последний прием пищи был не позднее, чем за 4 часа до анализа, но это требование не жесткое.

Где сдать анализ на определение группы крови в Москве

Вы можете сдать анализ на определение группы крови в любой из поликлиник «Семейного доктора». Одновременно можно сдать анализ на определение резус-фактора.

Записаться на диагностику

Не занимайтесь самолечением. Обратитесь к нашим специалистам, которые правильно поставят диагноз и назначат лечение.

Оцените, насколько был полезен материал

Источник

Содержание

Показания
Подготовка и забор крови
Результаты
Значение исследования

Анализ на группу крови и резус-фактор – комплексное лабораторное исследование, направленное на определение индивидуальных антигенных характеристик эритроцитов и наличие или отсутствие на их поверхности Rh-антигена. Диагностическая процедура назначается для оценки совместимости крови донора и реципиента перед ее переливанием, операцией, трансплантацией органов и тканей, а также для определения наличия резус-конфликта или риска его развития при планировании и ведении беременности. Материалом является венозная кровь. Метод исследования – реакция агглютинации. По результатам анализа определяется принадлежность крови к одной и четырех групп (0, A, B, AB) и наличие или отсутствие резус-фактора (Rh+, Rh-). Подготовка результатов занимает не более 1 рабочего дня.

Анализы на группу крови и резус-фактор определяют наличие или отсутствие на эритроцитах антигенов определенного вида, что позволяет установить совместимость крови между донором и реципиентом, матерью и плодом. История этих исследований начинается с 1899 года, когда бельгийский иммунолог и бактериолог Ж. Борде впервые определил, что в пробирке антитела к эритроцитам в присутствии комплемента вызывают агглютинацию красных кровяных клеток и/или гемолиз. С 1901 года американские врачи К. Ландштейнер и Ф. Левин исследовали особенности эритроцитов, в том числе выделенных из крови животных, и открыли существование групп крови. В 1928-1929 годах их исследования были оформлены, гигиенической Лигой Наций было утверждено принятое сейчас разделение групп крови – 0 (I), А (II), В (III) и АВ (IV). Данное открытие привело к распространению процедуры переливания крови в клинической практике, так как она стала более безопасной. В 1940 году К. Ландштейнер и А. Винер открыли существование резус-фактора, определили его роль в развитии эритробластоза плода и осложнений после переливаний крови.

На сегодняшний день тесты на группу крови и резус-фактор являются базовыми изосерологическими исследованиями. Они находят применение в хирургии, трансплантологии, реаниматологии, гематологии, акушерстве и гинекологии. В ходе выполнения анализов определяется набор антигенов, присутствующих на поверхности эритроцитов. Эти антигены разнообразны по своей химической структуре, в настоящее время их выделено несколько десятков. Наиболее изучены и значимы в клинической практике антигены A и B, которые определяют группу крови, а также антиген D, определяющий резус-фактор. Группа крови и резус-фактор являются наследуемыми признаками, они не изменяются в течение жизни.

Исследование группы крови и резус-фактора актуально в ситуациях, когда необходимо переливание крови, а также при беременности, когда существует вероятность попадания эритроцитов плода в кровоток матери. Это связано с тем, что при отсутствии какого-либо антигена в крови реципиента (или матери) введение этого антигена с эритроцитами донора (или плода) приводит к выработке антител. Они разрушают чужеродные красные кровяные тельца, провоцируют развитие иммунологического конфликта по системе ABO или по системе резус-фактора. При переливаниях крови это осложнение проявляется гемолитическими реакциями разной степени тяжести. Если иммунологический конфликт развился при беременности, то повышается риск ее самопроизвольного прерывания, развития гемолитической болезни плода (новорожденного).

Показания

Одно из самых распространенных показаний к анализу на группу крови и резус-фактор – переливание крови. Исследование проводится при подготовке к этой процедуре с целью установления совместимости крови реципиентов и доноров. Часто анализ выполняется в ситуациях, когда высока вероятность того, что потребуется гемотрансфузия – при операциях и инвазивных диагностических вмешательствах, при прохождении службы в вооруженных силах и других структурах, где возможны травмы, ранения. Информация о группе крови и резус-факторе заносится в медицинскую и иную документацию, в критической ситуации позволяет оперативно подобрать кровь донора.

Определение группы крови и резус-фактора показано беременным. Исследование назначается при планировании и мониторинге беременности для предупреждения развития конфликта по системе ABO и по системе резус. Групповой конфликт чаще всего возникает у женщин с I группой крови в парах, где будущий отец имеет II, III или IV группу. Он проявляется гемолитической болезнью новорожденного, которая имеет признаки желтухи и протекает сравнительно легко. Резус-конфликт может развиться у женщин с отрицательным резус-фактором в том случае, если будущий отец имеет резус-положительную кровь. Это осложнение более опасно, чем групповой иммунологический конфликт, может привести к самопроизвольному прерыванию беременности, повреждению некоторых органов плода, гемолитической болезни плода и новорожденного. В группу риска по развитию иммунологических конфликтов обоих типов попадают женщины, имеющие осложнения с увеличением проницаемости плаценты – с отслойкой плаценты, перенесшие серьезные инфекции, травмы живота, инвазивные диагностические процедуры на матке. Во всех этих случаях существует высокий риск проникновения эритроцитов плода в кровоток матери с последующей выработкой антител.

Подготовка и забор крови

Кровь для определения группы и резус-фактора берут из вены. Процедура забора в большинстве лабораторий выполняется с утра. Строгих требований к подготовке нет. Рекомендуется воздержаться от употребления жирной пищи за сутки до анализа, сдавать кровь не менее чем через 4 часа после приема пищи. Некоторые лекарственные средства усиливают реакцию агглютинации и поэтому могут привести к ложноположительным результатам при определении резус-фактора. Необходимость отмены препаратов нужно обсудить с врачом за несколько дней до исследования. За полчаса стоит воздержаться от курения, физических и эмоциональных нагрузок. Кровь берут из локтевой вены методом пункции.

В лаборатории исследования выполняются с помощью методов, основанных на реакции агглютинации. Определение группы крови выполняется тремя основными способами: с использованием изогемагглютиновых сывороток, с использованием изогемагглютиновых сывороток и стандартных клеток крови, а также методом с цоликлонами анти-A и анти-B. Наиболее распространенным является первый вариант. На специальную пластину двумя сериями наносятся стандартные изогемагглютиновые сыворотки I, II и III группы – всего 6 капель. В каждую добавляется исследуемая кровь (или эритроциты) и осторожно перемешивается. Через 5 минут по наличию реакции агглютинации в каплях, то есть по образованию хлопьев, оценивается результат. Если агглютинации нет – первая группа крови, свертывание во всех образцах кроме II в обеих сериях – вторая, свертывание во всех образцах кроме III в обеих сериях – третья, агглютинация во всех образцах – четвертая.

В клинико-лабораторных условиях определение резус-фактора выполняется методом агглютинации в солевой среде, методом конглютинации с использованием желатина, с помощью непрямой пробы Кумбса, реакции с aнти-D-моноклональными антителами. Агглютинация в солевой среде является распространенным диагностическим тестом. Эритроциты пациента вводятся в изотонический раствор хлорида натрия, перемешиваются и помещаются в пробирку с антирезусной сывороткой. В течение одного часа биоматериал инкубируется, после этого исследуется образовавшийся осадок. Если он имеет нитевидный и зернистый рисунок, то резус-фактор положительный, если осадок равномерно распределен по дну пробирки – отрицательный. Определение резус-фактора и группы крови выполняется в течение 1 рабочего дня.

Результаты

В результатах исследования содержится информация о группе крови и резус-факторе. Принадлежность к определенной группе крови устанавливается согласно общепринятой системе ABO:

если агглютиногены A и B на мембране эритроцитов не обнаружены, то группа 0 (I);
если обнаружен агглютиноген A, то группа А (II);
если обнаружен агглютиноген B, то группа B (III);
если обнаружены агглютиногены A и B, то группа AB (IV).

В зависимости от того, присутствует ли на внешней стороне мембран эритроцитов агглютиноген D, делается вывод о резус-факторе. Варианта может быть два: антиген выявлен – резус-положительная кровь (Rh+), не выявлен – резус-отрицательная (Rh-).

Результаты данных исследований учитываются при переливаниях крови и при определении риска иммунологического конфликта между беременной и плодом. Универсальными донорами считаются лица, имеющие первую группу крови и отрицательный резус-фактор – 0 (I) Rh-, так как у них отсутствуют все три вида антигенов и, следовательно, выработка антител у донора не произойдет. Универсальные реципиенты – лица, имеющие четвертую группу крови и положительный резус-фактор – AB (IV) Rh+. На эритроцитах их крови имеются все три вида антигенов, значит, при попадании любого из них вместе с эритроцитами донора производство антител не будет запущено.

Значение исследования

Анализы на группу крови и резус-фактор являются базовыми изосерологическими исследованиями. Они находят применение при подготовке пациентов к переливаниям крови, к хирургическим операциям, при планировании и контроле беременности. Типирование крови необходимо лицам, поступающим на военную службу и в другие силовые структуры. Учет группы крови и резус-фактора при гемотрансфузиях и мониторинге беременности позволяет предупредить развитие иммунологических конфликтов по системе ABO и по системе резус-фактора, избежать возникновения тяжелых осложнений, таких как острая гемолитическая реакция, гемолитическая болезнь новорожденного, выкидыш. При выполнении анализов в плановом режиме с результатами необходимо обратиться к лечащему врачу – терапевту, акушеру-гинекологу – для того чтобы данные были занесены в медицинские документы и могли быть использованы в дальнейшем.

Источник